Форма № 1

Продолжение титульного листа ТУ

Начальник сектора стандартизации

*?&&&> Т.Н.Лобко " ^    1988    г.

№20

20 мин или перемешивают 20 мин на магнитной мешалке.

Далее содержимое колб доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают , помещают в центрифужные стаканы и центрифугируют в течение 10-15 мин (кол-во оборотов центрифуги 3000 мин”*).

4.4*4. Проведение испытания

0,03-0,05 см³ полученного раствора наносят пипеткой или лабораторным дозатором на бумагу для электрофореза. Той же пипеткой или лабораторным дозатором наносят 0,03-0,05 см³ стандартных растворов лизина ^ХЛ

^Х// Перед нанесением стандартные растворы / -лизина должны быть выдержаны при комнатной температуре не менее I час.

Для одной навески должно быть нанесено не менее 3-х точек пробы и не менее 2-х точек каждого стандартного раствора. Поредок нанесения проб и стандартных растворов следующий :

- проба - С§ - проба -    - проба - Cg

Электрофорез проводят в ацетатном буфере или в растворе буры в течение 45-60 мин при градиенте напряжения 144-19 В/см, причем плотность тока устанавливается сама в пределах 0,4-0,9 мА/см в зависимости от сорта бумаги и состава буфера.

По окончании электрофореза бумагу высушивают сначала в вытяжном шкафу, а затем в сушильном шкафу при температуре /Ю5*£/°С в течение 10 мин. Далее электрофореграмму опрыскивают нингидриновым реактивом, подсушивают в вытяжном шкафу до появления красных пятен, а затем в сушильном шкафу при температуре 60°С в течение 20 мин или при температуре 80°С в течение 10 мин.

					ТУ 64-13-14-88	Лист
						XI
Изм.	Лист	№ докум.	Подп.	Дата

№ 20

Пятна, соответствующие лизину , вырезают и экстрагируют 5 см³ элюирующего раствора в течение 15 мин в темноте, замеряют интенсивность окраски раствора на фотоэлектрокалориметре при светофильтре №5 с длиной волны 510 нм в кювете с толщиной поглощающего свет пути 10 мм против контрольного раствора, для получения которого вырезают с края электрофореграммы участок в два раза больший, чем площадь вырезанного пятна лизина; экстрагируют 10см³ элюирующего раствора в течение 30-45 мин в темноте и замеряют интенсивность окраски раствора на фотоэлектрокалориметре.

4.4.5. Обработка результатов

Массовую долю лизина /х/ в пересчете на с.в. в процентах вычисляют по формуле :

_х .    •    ¹⁰⁰    •    ¹⁰⁰    /    Дб+Дпр-^5/ _{f д/}

а * / 100 - W/    Дб    -

где ,w- массовая доля влаги,% ;

Cg 5 - концентрация стандартного раствора /_ -лизина, равная 2,5 г/дм³ ;

а - масса навески, г ;

До б и Дс- среднеарифметические величины оптических плотностей ’    стандартных    растворов    концентраций 2,5 и 5,0 г/дм

соответственно ;

Д__п - среднеарифметическая величина оптической плотности * анализируемого раствора ;

0,1 - объем мерной колбы, дм³ ;

100 - перевод в проценты.

За окончательной результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не должно превышать 10% относительных.

					ТУ 64-13-14-88	Лист
						12
Изм.	Лист	№ докум.	Подп.	Дата

Форма № 2

Ж20

4.5. Определение крупности гранулированного лизина

4.5.1.    Определение размера гранул

4.5.1.1.    Оборудование

микрометр или

штангенциркуль по ГОСТ 166-80

4.5Л.2. Проведение испытания

Размер гранул определяют с помощью штангенциркуля или микрометра, замеряя диаметр и длину каждой из десяти гранул, взятых подряд. По полученным данным рассчитывают среднюю арифметическую величину десяти определений диаметра и длины гранул.

4.5.2. Определение прохода через сито

4.5.2Л. Оборудование

сита с сеткой #2 по ГОСТ 3306-70 или по другой действующей нормативно-технической документации,

анализатор ситовой механический марки МГ-М,

весы лабораторные с погрешностью взвешивания не более 0,0Хг по ГОСТ 24104-80

4.5.2.2.    Проведение испытания

Навеску гранулированного лизина массой 100 г просеивают через сито . Просеивание производят в течение 5 мин. Допускается просеивание ручным способом при П0-120 движениях в минуту и размахе колебаний сита около 10 см.

Проход через сито взвешивают на технических весах с погрешностью не более 0,1 г.

4.5.2.3.    Обработка результатов

Проход через сито (М) в процентах к навеске , взятой для испытания , вычисляют по формуле

И = “X . 100 ,    /2/

М

где м - масса навески до просеивания , г ;

Mj - масса навески, прошедшей через сито,г.

Лист ТУ 64-13-14-88 13 Изм. Лист № докум. Подл. Дата

Форма № 2

-------- №20

4.6.    Определение массовой доли металломагнитной примеси -по ГОСТ I3496-.9-73. Допускается использование среднего образце препарата массой 0,5 кг и использование мельницы лабораторной электрической производительностью 0,5 кг для измельчения гранул.

4.7.    Определение безвредности

4.7.1.    Аппаратура, материалы и реактивы :

ступка фарфоровая по ГОСТ 9147-80,

шприц медицинский инъекционный по ГОСТ 22967-82 или

зовд резиновый,

цилиндр I—100 по ГОСТ 1770-74,

вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

4.7.2.    Проведение испытания

Для проведения испытания 2,0 г препарата, взвешенного с точностью до первого десятичного знака, тщательно растирают в ступке при непрерывном добавлении 98 см³ дистиллированной воды с таким расчетом, чтобы получился 2 %-ный раствор лизина.

Отбирают пять мышей массой по 18-20 г. Раствор препарата с массовой долей лизина 2 % ежедневно вводят перорально в течение пяти суток белым мышам - по 0,5 см³ с помощью шприца с инъекционной иглой, имеющей на конце наплавленную оливу, диаметром не более I мм.

Наблюдение продолжают в течение двух последующих суток после прекращения введения препарата. Препарат считают безвредным, если все мыши остаются клинически здоровыми. При гибели части животных проверку повторяют на удвоенном количестве животных в той же дозе. При гибели хоть одной мыши при повторном опыте препарат бракуют.

Каждую мышь используют в опыте один раз.

1					Лист
				ТУ 64-13-14-88	14
Изм. I Лист	№ докум.	Подп.	Дата

Форма № 2 *&20

5. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

5.1.    Транспортирование - по ОСТ 59.04.070.24-63.

5.2.    Хранение - по ОСТ 59.04.070.24-83 в хорошо проветриваемых складах, защищенных от прямых солнечных лучей и атмосферных осадков.

6.    УКАЗАНИЙ. ПО ПШЕНЕНИ»

6.1 Препарат применяют в соответствии с Наставлением о применении, которое прилагается к каждой упаковке.

7.    ГАРАНТИИ ШГОГОЩТШ

7.1.    Изготовитель гарантирует соответствие препарата требованиям настоящих технических условий при соблюдении условий применения, хранения и транспортирования, установленных техническими условиями.

7.2.    Гарантийный срок хранения - 6 месяцев со дня изготовлена препарата. По истечении гарантийного срока хранения препарат проверяется на соответствие требованиям настоящих технических условий. В случае полного соответствия препарата указанным требованши срок годности продлевается еще на 6 месяцев.

					ТУ 64-13-14-88
Иэм.	Лист	№ докум.	Подп.	Дата

Настоящие технические условия распространяются на лизин кормовой гранулированный* используемый при производстве комбикормов, премиксов, а также в качестве добавки в кормовые рационы сельскохозяйственных животных, птицы и пушных зверей для балансирования аминокислотного состава кормов.

Лизин кормовой гранулированный получают путем микробиологического синтеза с использованием культур

г/лг/ &t£6L-£2.<L-&££u/??    /р-    миг/

В товарном продукте /_ -лизин содержится в форме монохлоргид-

рата.

Эмпирическая формула :    * НМ

Форма № Ъ

лв. Ni дубл. I Подп. н дата | Взам. инр. №1, Инв. № подл, | Подп. и дата

№ 20 1.3. По органолептическим и физико-химическим свойствам лизин корковой гранулированный должен соответствовать требованиям, указанным в таблице Наименование показателя Характеристика и нормы Методы испытаний X. Внешний вед гранулы или крупка по п.4.2. 2. Цвет от светло-желтого до коричневого по п.4.2. 3. Запах без запаха или со слабым специфическим запахом по п.4.2. 4. Массовая доля влаги,%, не более 6,0 по п. 4.3. 5. Массовая доля ^-лизина -монохлоргедрата в пересчете на с.в., %, не менее 50,0 по п.4.4. 6. Крупность : по п.4.5. Диаметр гранул,мм, не более 7,5 Длина гранул,мм, не более двух диаметров Проход через сито диаметром 2 мм, не более 10,0 7. Массовая доля металломагнитных примесей с размером частиц до 2 мм включительно, мг/кг, не более 30,0 по п.4.6. 8. Безвредность в тест-дозе на I мышь, см х/ 0,5 по п. 4.7. Примечание. х/ Определение безвредности проводят для каждой 10 партии препарата.

№20

1.4.    Упаковка - по 0GT 59.04,070.24-83 по п.1.1., п.1.3. илй п. 1.4. таблицы.

Препарат фасуют по 15 или 20 кг. Максимальная погрешность 10 единиц продукции не должна превышать ^2,5%.

1.5.    Маркировка по ОСТ 59.04.070.24-83.

2. ТРЕБОВШН БЕЗОПАСНОСТИ

2.1.    Для предупрезрения опасного и вредного воздействия микроорганизмов следует соблюдать требования биологической безопасности по ГОСТ 12.1.008-76.

2.2.    Для предотвращения образования взрывоопасной смеси

не допускается пылевыделение при фасовке и транспортировке препарате.

2.3.    При реботе с препаратом необходимо пользоваться индивидуальными средствами защиты: для защиты органов дыхания - респиратором ШБ-I "Лепесток” - по ГОСТ 12.4. 028-76, для защиты глаз -очками защитными - по ГОСТ 12.4.0X3-85 ,

для защиты рук - перчатками - по ГОСТ 12.4.103-83 или перчатками трикотажными.

2.4.    Все работы в помещениях с препаратом должны проводиться при работающей общей и местной приточно-вытяжной вентиляции.

2.5.    Все работники, контактирующие с препаратом, подвергаются периодическим медицинским осмотрам (приказ Минздрава СССР IF700

от 19.06.84 г.).

После работы с препаратом необходимо вымыть лицо и руки.

					ТУ 64-13-14-88	Лист
						б
Изм.	Лист	№ докум.	Подп.	Дата

Форма № 2 №20

3. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ

3.1.    Правила приемки - по ОСТ 59.04.070.23-83.

3.2.    Контроль препарата по требованию потребителя проводят ОТК рредприятия-изготовителя или ВГНКИветпрепаратов Госагропрома СССР.

4. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

4.1.    Отбор проб - по ОСТ 59.04.070.23-83.

Заводу-изготовителю разрешается производить отбор проб через автоматический пробоотборник.

Допускается объединенную пробу помещать в полиэтиленовые мешки.

Масса объединенной пробы должна составлять не более 2-х кг.

4.2.    Определение внешнего вида, цвета и запаха.

4.2. Х, Определение внешнего вида и цвета проводят визуально по каждой единице фасовки в момент отбора пробы.

4.2.2.    Определение запаха проводят органолептически.

4.3.    Определение массовой доли влаги проводят - по ГОСТ 13496.3-80 методом высушивания до постоянной массы при температуре 100-Х05°С.

4.4.    Определение массовой доли / - лизина монохлоргидрата.

Метод основан на разделении / - лизина и других соединений в градиенте электрического поля с последующим окрашиванием при реакции с нингидрином, элюцией окрашенного комплекса и определением оптической плотности элюата.

					Лист
				ТУ 64- 13-14-88	д
Лист	№ докум.	Подп.	Дата		о

№ 20

4.4.1. Аппаратура, материалы и реактивы : прибор для горизонтального электрофореза по ХУ 5.375-4231-77,

дозатор автоматический поршневой медицинский А-2 по ТУ 64-1-28 28-81,

дозатор лабораторный АР-020 типа 3000, калориметр фотоэлектрический лабораторный (фотоэлектрокало-риметр) по ГОСТ 12083-78 любого типа, обеспечивающий измерения в интервале длин волн /480-500/ нм, с погрешностью не более 5% / по коэффициенту пропускания/ или не более 0,01Д / по оптической плотности/,

центрифуга лабораторная по ГОСТ 3585-79 любого типа, обеспечивающая 6000 мин"¹,

pH-метр или другой прибор для определения pH в диапазоне от 0 до 14 с погрешностью не более 0,05 pH,

шкаф сушильный любого типа, обеспечивающий температуру нагрева от 50 до 150°С с точностью терморегуляции - 2°С, весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104-80 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г или других аналогичных типов,

мешалка магнитная по ТУ 25-11-834-80, мельница или измельчитель,

бумага хроматографическая марок F^ -12, Ватман 3 мы или Ленинградская марок средняя или медленная, цилиндры 1-50, 1-100 по ГОСТ 1770-74, колбы 1-25-2, 1-50-2, I-100-2, 2-500-2, 2-1000-2, 2-2000-2 по ГОСТ 1770-74,

микропипетки автоматические фирмы ptcLStomeel АП 020

типа 3000 или

Лист ТУ 64-13-14-88 7 Изм. Лист № докуй. Подп. Дата

,№20

микрошприц типа МШ-1 или Ш-10,

пипетки 2-1-25, 8-2-0,1; 0,2 по ГОСФ 20292-74,

/ - лизин монохлоргидрат дигвдрат фирмы "Реанал" /ВНР/ или /, - лизин моно гидрохлорид для медицинских целей по ВФС 42-529-76,

кислота уксусная по ГОСТ 61-75, натрий уксуснокислый по ГОСТ 199-78 или натрий уксуснокислый по ТУ 6-09-246-76, нингидрин по ХУ 6-09-5043-86 ч.д.а. или нингидрин фирмы "    "    ,

иэопропанол по ТУ 6-09-402-81, натрий тетраборнокислый (бурц) по ГОСТ 8429-77, кадмий хлористый 2,5-водный по ГОСТ 4330-76, ацетон по ГОСТ 2603-79, ч.д.а.,

спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300-87,

кислота азотная по ГОСТ Ш25-84,

медь азотнокислая /-водная по ТУ 6-09-3757-74,

медь двухлористая по ГОСТ 4167-74,

вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

4.4.2. Приготовление рабочих растворов

4.4.2.I. Приготовление ацетатного буферного раствора с pH в интервале 3,0-3,1.

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ вносят 55см^э ледяной уксусной кислоты и 28 см³ раствора уксуснокислого натрия концентрации I моль/дм³. Содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Проверяют pH полученного буферного раствора на рН-метре.

				ТУ 64-13-14-88
Лист	Ns докум.	Поля.	Дата

№20

Для количественного определения / - лизина требуется приготовить 2 дм³ буферного раствора.

4.4.2.2.    Приготовление раствора натрия тетраборнокислого /буры/ с pH в интервале 9,1-9,2.

3,78 г натрия тетраборнокислого взвешивают с точностью до второго десятичного знака, помещают в мерную колбу вместимостью 1000 см^э, растворяют в дистиллированной воде, доводят .объем раствора до метки.

Для количественного определения / - лизина требуется приготовить 3 дм³ этого раствора.

4.4.2.3.    Приготовление нингидринового реактива.

В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,5 г нингидрина, взвешенного с точностью до первого десятичного знака, X см³ уксусной кислоты и 4 см³ дистиллированной воды, доливают до метки ацетоном и перемешивают содержимое колбы до полного растворения нингидрина.

4.4.2.4.    Приготовление элюирующего раствора

В колбу вместимостью 500 см³ вносят 200 см³ раствора этанола с массовой долей 75$, добавляют 0,1 см³ насыщенного раствора азотнокислой или двухлористой меди и 0,8 см³ раствора азотной кислоты'с массовой долей 10$. Элюирующий раствор, содержащий ионы меди, можно заменить элюирующим раствором, содержащим ионы кадмия, В этом случае раствор готовится следующим образом,

В колбу вместимостью 500 см³ вносят 2,5 г хлористого кадмия, взвешенного с точностью до первого десятичного знака и 230 см³ дистиллированной воды, перемешивают содержимое колбы до полного растворения кристаллов кадмия, приливают 250 см³ этилового спирта, раствор в колбе снова перемешивают и доводят до метки дистиллированной водой.

					ТУ 64- 13-14-88	Лист
						9
Изм.	Лист	№ докум.	Подп.	Дата

№20

4.4.2.5.    Приготовление стандартного раствора / - лизина -5 г/дм³ /С₅/.

Навеску 0,5000 г хлоргидрата /-лизина предварительно высушенного при температуре 105*2° до постоянной массы в течение 4-х часов, взвешивают с точностью до четвертого десятичного знака, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³. Добавляют 60-70 см³ 10% раствора пропанола и перемешивают до полного растворения / - лизина. Концентрация полученного раствора 5 г/дм³. Примечание: Навеска считается высушенной до постоянной массы,если разница мезду двумя последними взвешиваниями будет не более 1,0000м¹

4.4.2.6.    Приготовление стандартного раствора /- лизина 2,5 г/дм³ /С^₅/.

Пипеткой отбирают 25*0,1 см³ стандартного раствора /-лизина е концентрацией 5 г/дм³ в мерную колбу вместимостью 50 ем³. Содержимое колбы доводят до метки раствором изопропанола с массовой долей 10% и тщательно перемешивают. Концентрация полученного раствора 2,5 г/дм³.

Полученные стандартные растворы сохраняют в холодильнике при температуре 4°С в течение одного месяца.

4.4.3. Подготовка к испытанию.

При анализе каждой партии берут одновременно не менее двух параллельных навесок предварительно измельченного испытуемого образца. Навеску образца 0,5000 г взвешивают с точностью до четвертого десятичного знака.

Взятые навески без потерь переносят в мерные колбы вместимостью 100 см³, доливают в каждую из них по 80 см³ дистиллированной воды. Колбы закрывают пробками и оставляют на 45 мин при комнатной температуре для растворения / - лизина, перемешивая содержимое колб каждые ХО мин или помещают на встряхиватель на

					ТУ 64-13-14-88	Лист
						10
Изм.	Лист	№ докум.	Подп.	Дата