ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

Жиры и масла животные и растительные ЭКВИВАЛЕНТЫ КАКАО-МАСЛА В КАКАО-МАСЛЕ И ШОКОЛАДЕ

Часть 1

Определение наличия эквивалентов какао-масла

Тлушчы жывёльныя i раслшныя, маслы жывёльныя i алей

ЭКВ1ВАЛЕНТЫ КАКАВА-МАСЛА У КАКАВА-МАСЛЕ I ШАКАЛАДЗЕ

Частка 1

Вызначэнне наяунасщ экв1валентау какава-масла

(ISO 23275-1:2006, ЮТ)

Издание официальное

(Ж

УДК 665.355.97(083.74)(476)    МКС 67.190; 67.200.10 КП 02    ЮТ

Ключевые слова: жиры растительные, жиры животные, масла растительные, масла животные, какао-масло, эквиваленты какао-масла, шоколад, триацилглицериды, метод газовой хроматографии ОКП РБ 15.84.12.000

Предисловие

Цели, основные принципы, положения по государственному регулированию и управлению в области технического нормирования и стандартизации установлены Законом Республики Беларусь «О техническом нормировании и стандартизации».

1    ПОДГОТОВЛЕН республиканским унитарным предприятием «Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по продовольствию»

ВНЕСЕН Белорусским государственным концерном пищевой промышленности «Белгоспищепром»

2    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ постановлением Госстандарта Республики Беларусь от 24 апреля 2009 г. № 19

3    Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 23275-1:2006 Animal and vegetable fats and oils - Cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate - Part 1: Determination of the presence of cocoa butter equivalents (Жиры и масла животные и растительные. Эквиваленты какао-масла в какао-масле и шоколаде. Часть 1. Определение наличия эквивалентов какао-масла)

Международный стандарт разработан подкомитетом SC 11 «Животные и растительные жиры и масла» технического комитета ISO/TC 34 «Пищевые продукты» Международной организации по стандартизации (ISO).

Перевод с английского языка (еп).

Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий государственный стандарт, имеется в Национальном фонде ТИПА.

Степень соответствия - идентичная (ЮТ)

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

© Госстандарт, 2009

Настоящий стандарт не может быть воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Госстандарта Республики Беларусь

Издан на русском языке

Окончание таблицы А.1

Возможный метод 6 7 8 9 10 11 Характеристики колонки: - неподвижная фаза RTX-65TG СВ-ТАР DB-17HT СВ-ТАР СВ-ТАР СВ-ТАР - длина,м 30 25 30 25 25 25 - внутренний диаметр, мм 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 -толщина пленки, мкм 0,1 0,1 0,15 0,1 0,1 0,1 Температурный режим (термостат): - начальная температура, °С/время поддержания, мин 200/0 100/0,1 50/2 200/2 100/1 200/2 - программируемая скорость 1, °С/мин 15 70 50 20 30 12 - температура 1, °С/время поддержа- ния, мин 360/0 - 300/1 320/0 300/2 - - программируемая скорость 2, °С/мин 1 - 10 1 30 - - температура 2, °С/время поддержа- ния, мин - - 340/2 - - - - программируемая скорость 3, °С/мин - - 0,5 - - - - конечная температура, °С/время поддержания, мин 370/0 350/21 345/26 360/10 340/35 350/10 - температура инжектора, °С 390 Термо- 50 65-220-370 100 - стат - температура детектора, °С 390 360 360 370 360 360 Режим введения С На На На На На делением колонку колонку колонку колонку колонку потока (горячий) Газ-носитель: - тип н2 н2 н2 Не н2 н2 - давление,кПа 150 - 120 90 150 - - скорость потока, мл/мин - 1 - - - 2,4 Проба: - концентрация, мг/мл 10 15 0,5 1 -2 0,5 0,65 - вводимый объем, мкл 0,5 0,5 0,5 0,1 0,4 0,3

7

СТБ ISO 23275-1-2009

Идентификация пиков: 1, РРР; 2, МОР; 3, PPS; 4, POP; 5, PLP; 6, не идентифицирован; 7, PSS; 8, POS; 9, РОО; 10, PLS; 11, PLO; 12, не идентифицирован; 13, SSS; 14, SOS; 15, SOO; 16, SLS + ООО; 17, SLO; 18, не идентифицирован; 19, не идентифицирован; 20, SOA; 21, АОО.

Экспериментальные условия

Газохроматографическая колонка Температура термостата колонки:

Ввод пробы:

Детектор (ПИД):

Газ-носитель:

Вводимое количество:

Сокращения

РРР - трипалмитин.

МОР - 1-маргароил-2-олеоил-3-палмитоилглицерид.

PPS - 1,2-дипалмитоил-З-стеароилглицерид.

POP -1,3-дипалмитоил-2-олеоилглицерид.

PLP - 1,3-дипалмитоил-2-линолеоилглицерид.

PSS - 1-палмитоил-2,3-дистеароилглицерид.

POS - 1-палмитоил-2-олеоил-3-стеароилглицерид.

РОО - 1-палмитоил-2,3-диолеоилглицерид.

PLS - 1-палмитоил-2-линолеоил-3-стеароилглицерид.

PLO - 1-палмитоил-2-линолеоил-3-олеоилглицерид.

SSS -тристеарин.

SOS - 1,3-дистеароил-2-олеоилглицерид.

SOO - 1-стеароил-2,3-диолеоилглицерид.

SLS - 1,3-дистеароил-2-линолеоилглицерид.

ООО -триолеин.

SLO - 1-стеароил-2-линолеоил-3-олеоилглицерид.

SOA- 1-стеароил-2-олеоил-3-арахидоилглицерид.

АОО - 1-арахидоил-2,3-диолеоилглицерид.

Рисунок А.1 - Профиль триацилглицеридов сертифицированного стандартного материала какао-масла

8

СТБ ISO 23275-1-2009

Таблица А.2 - Данные прецизионности для образцов чистого какао-масла

Чистое КМ а Чистое КМ b Чистое KM c POP POS SOS POP POS SOS POP POS SOS Количество лабораторий 13 13 13 13 13 13 13 13 13 Количество выбросов 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Количество приемлемых результатов 12 12 12 12 12 12 12 12 12 Среднее значение, г/100 г 20,396 47,731 31,873 19,491 47,421 33,089 18,991 47,210 33,799 Стандартное отклонение повторяемости sr, г/100 г 0,057 0,056 0,093 0,069 0,095 0,097 0,092 0,084 0,154 Относительное стандартное отклонение повторяемости, % 0,28 0,12 0,29 0,36 0,20 0,29 0,49 0,18 0,45 Предел повторяемости г Г= 2,83 х sr,l, г/100 г 0,160 0,157 0,261 0,194 0,265 0,271 0,258 0,236 0,430 Стандартное отклонение воспроизводимости Sr, Г/100 Г 0,142 0,108 0,169 0,081 0,148 0,166 0,120 0,090 0,168 Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, % 0,70 0,23 0,53 0,42 0,31 0,50 0,63 0,19 0,50 Предел воспроизводимости R [= 2,83 х SrI, г/100 г 0,397 0,302 0,473 0,227 0,413 0,464 0,337 0,253 0,471

а Страна происхождения Гренада. ь Страна происхождения Гана. с Страна происхождения Кот-д’Ивуар.

Таблица А.З - Данные прецизионности для реальных образцов шоколада

Шоколад с ЭКМ Шоколад без ЭКМ POP POS SOS POP POS SOS Количество лабораторий 13 13 13 13 13 13 Количество выбросов 2 2 2 1 1 1 Количество приемлемых результатов 11 11 11 12 12 12 Среднее значение, г/100 г 25,375 43,757 30,868 19,740 47,401 32,859 Стандартное отклонение повторяемости sr, г/100 г 0,128 0,101 0,180 0,089 0,070 0,074 Относительное стандартное отклонение повторяемости, % 0,50 0,23 0,58 0,45 0,15 0,23 Предел повторяемости г [= 2,83 х sr], г/100 г 0,358 0,282 0,503 0,250 0,195 0,208 Стандартное отклонение воспроизводимости Sr, г/1 00 г 0,265 0,210 0,198 0,120 0,106 0,111 Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, % 1,04 0,48 0,64 0,61 0,22 0,34 Предел воспроизводимости R [=2,83 х Sr1, г/100 г 0,741 0,588 0,553 0,335 0,298 0,310

9

Таблица А.4 - Данные прецизионности для какао-масла с 2 % примеси эквивалентов какао-масла

2,06 % ЭКМ/КМ а 1,98 % ЭКМ/КМ ь 2,04 % ЭКМ/КМ с 2,09 % ЭКМ/КМ d POP POS SOS POP POS SOS POP POS SOS POP POS SOS Количество лабораторий Количество выбросов Количество приемлемых результатов 13 0 13 13 0 13 13 0 13 13 1 12 13 1 12 13 1 12 13 2 11 13 2 11 13 2 11 13 1 12 13 1 12 13 1 12 Среднее значение, г/100 г 20,611 47,082 32,307 19,938 46,795 33,267 19,698 46,619 33,682 19,859 46,646 33,495 Стандартное отклонение повторяемости sr, г/100 г Относительное стандартное отклонение повторяемости, % Предел повторяемости г [= 2,83 х Sf,l, г/100 г 0,184 0,89 0,514 0,095 0,20 0,267 0,222 0,69 0,621 0,050 0,25 0,140 0,070 0,15 0,196 0,082 0,25 0,230 0,093 0,47 0,261 0,063 0,14 0,177 0,137 0,41 0,383 0,029 0,14 0,080 0,083 0,18 0,233 0,077 0,23 0,217 Стандартное отклонение ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ Sr, г/100 г Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, % Предел воспроизводимости R [= 2,83 х Sr], г/100 г 0,193 0,94 0,540 0,132 0,28 0,368 0,250 0,77 0,701 0,118 0,59 0,331 0,091 0,19 0,254 0,181 0,54 0,506 0,113 0,57 0,317 0,142 0,31 0,399 0,149 0,44 0,417 0,094 0,47 0,262 0,118 0,25 0,330 0,185 0,55 0,517

а КМ из Гренады смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/(ши + иллипе) [35/65]. ь КМ из Ганы смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/ши [50/50]. с КМ из Кот-д’Ивуар смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/сал/манго [50/25/25]. d КМ из Кот-д’Ивуар смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/ши/иллипе [50/25/25].

Таблица А.5 - Данные прецизионности для какао-масла с 4 % примеси эквивалентов какао-масла

4,0 % ЭКМ/КМ а 3,96 % ЭКМ/КМ b 4,04 % ЭКМ/КМ c 4,00 % ЭКМ/КМ d POP POS SOS POP POS SOS POP POS SOS POP POS SOS Количество лабораторий 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 Количество выбросов 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Количество приемлемых результатов 13 13 13 12 12 12 12 12 12 12 12 12 Среднее значение, г/100 г 20,747 46,341 32,912 20,348 46,176 33,475 20,421 46,075 33,504 20,765 46,100 33,135 Стандартное отклонение повторяемости sr, г/100 г 0,141 0,077 0,171 0,075 0,053 0,075 0,115 0,105 0,134 0,109 0,079 0,126 Относительное стандартное отклонение повторяемости, % 0,68 0,17 0,52 0,37 0,11 0,22 0,56 0,23 0,40 0,53 0,17 0,38 Предел повторяемости г [= 2,83 х Sf,l, г/100 г 0,395 0,215 0,478 0,209 0,148 0,209 0,322 0,293 0,377 0,306 0,221 0,354 Стандартное отклонение ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ Sr, 0,156 0,182 0,279 0,214 0,066 0,213 0,157 0,148 0,196 0,164 0,125 0,226 г/100 г Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, % 0,75 0,39 0,85 1,05 0,14 0,64 0,77 0,32 0,59 0,79 0,27 0,68 Предел воспроизводимости R [= 2,83 х sR], г/100 г 0,437 0,510 0,782 0,601 0,183 0,596 0,441 0,414 0,549 0,459 0,351 0,633

а КМ из Гренады смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/(ши + иллипе) [35/65]. ь КМ из Ганы смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/ши [50/50]. с КМ из Кот-д’Ивуар смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/сал/манго [50/25/25]. d КМ из Кот-д’Ивуар смешано с ЭКМ вида - средняя фракция пальмового масла/ши/иллипе [50/25/25].

СТБ ISO 23275-1-2009

Библиография

[1]    Directive 2000/36/ЕС of the European Parliament and of the Council of 23 June 2000 relating to cocoa and chocolate products intended for human consumption. Official Journal, L 197, 03/08/2003, 19-25

(Директива Европейского парламента и совета ЕС 2000/36 от 23 июня 2000 г., касающаяся продуктов из какао и шоколада, предназначенных для потребления в пищу)

[2]    KOEBER, R., BUCHGRABER, М., ULBERTH, F., BACAROLO, R-, BERNREUTHER, А., SCHIMMEL, Н., ANKLAM, Е. and Pauwels, J. The certification of the content of five triglycerides in cocoa butter, 2003, EUR 20781 EN, ISBN 92-894-6036-9

(Сертификация содержания пяти триацилглицеридов в какао-масле)

[3]    ISO 5555:2001 Animal and vegetable fats and oils - Sampling (Жиры и масла животные и растительные. Отбор проб)

[4]    BUCHGRABER, М., SENALDI, Ch., ULBERTH, F. and ANKLAM, E. Detection and quantification of cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate by gas liquid chromatography of triacylglycerols. J. AOAC Internat, 87, 2004, pp. 1153-1163

(Определение наличия и количественное определение эквивалентов какао-масла в какао-масле и шоколаде путем разделения триацилглицеридов газожидкостной хроматографией)

[5]    BUCHGRABER, М, ULBERTH, F. and ANKLAM, Е. Method validation for detection and quantification of cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate. J. AOAC Internat, 87, 2004, pp. 1164-1172

(Валидация метода определения наличия и количественного определения эквивалентов какао-масла в какао-масле и шоколаде)

[6]    BUCHGRABER, and ANKLAM, Е. Validation of a method for the detection of cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate, 2003, EUR 20685 EN, ISBN 92-894-5510-1 (Валидация метода определения наличия эквивалентов какао-масла в какао-масле и шоколаде)

11

Ответственный за выпуск В. Л. Гуревич

Сдано в набор 07.05.2009. Подписано в печать 19.06.2009. Формат бумаги 60x84/8. Бумага офсетная. Гарнитура Arial. Печать ризографическая. Уел. печ. л. 1,86 Уч,-изд. л. 0,88 Тираж экз. Заказ

Издатель и полиграфическое исполнение: Научно-производственное республиканское унитарное предприятие «Белорусский государственный институт стандартизации и сертификации» (БелГИСС) ЛИ № 02330/0549409 от 08.04.2009. ул. Мележа, 3, 220113, Минск.

СТБ ISO 23275-1-2009

Содержание

Введение................................................................................................................................................IV

1    Область применения............................................................................................................................1

2    Термины и определения......................................................................................................................1

3    Сущность метода..................................................................................................................................1

4    Реактивы и материалы........................................................................................................................1

5    Оборудование.......................................................................................................................................2

6    Отбор образцов....................................................................................................................................2

7    Приготовление анализируемой пробы...............................................................................................2

7.1    Приготовление сертифицированного стандартного материала какао-масла

для калибровки и проверки пригодности системы.....................................................................2

7.2    Приготовление образца шоколада...............................................................................................2

8    Методика определения........................................................................................................................3

8.1    Экстрагирование жиров.................................................................................................................3

8.2    Разделение триацилглицеридов методом газовой хроматографии высокого разрешения ...3

8.3    Идентификация..............................................................................................................................3

9    Вычисления...........................................................................................................................................3

9.1    Определение факторов отклика...................................................................................................3

9.2    Вычисление процентного содержания триацилглицеридов......................................................4

9.3    Заключение, является ли образец чистым какао-маслом.........................................................4

10    Процедурные требования....................................................................................................................4

10.1    Общие положения.......................................................................................................................4

10.2    Пригодность хроматографической системы.............................................................................4

11    Прецизионность....................................................................................................................................5

11.1    Межлабораторные испытания....................................................................................................5

11.2    Повторяемость.............................................................................................................................5

11.3    Воспроизводимость......................................................................................................................5

12    Протокол испытаний.............................................................................................................................5

Приложение А (справочное) Результаты межлабораторных испытаний.............................................6

Библиография..........................................................................................................................................11

СТБ ISO 23275-1-2009

Введение

«Эквиваленты какао-масла» - это общий термин для жиров, используемых для замены какао-масла в шоколаде. Они очень близко напоминают какао-масло по своему химическому составу и физическим свойствам, в результате чего их количественное определение (в некоторых случаях и качественное определение) является очень сложным. Эквиваленты какао-масла по определению должны быть жирами с низким содержанием лауриновой кислоты, высоким содержанием симметричных моно-ненасыщенных триацилглицеридов типа 1,3-дипалмитоил-2-олеоилглицерида, 1-палмитоил-2-олеоил-3-стеароилглицерида и 1,3-дистеароил-2-олеоилглицерида, способными смешиваться с какао-маслом и получаемыми только путем очистки и фракционирования.

В соответствии с [1] в Европейском союзе по отдельности или в смесях могут использоваться следующие растительные жиры, полученные из приведенных ниже растений:

-    масло мадуки длиннолистной (иллипе), борнейский жир или жир тенгкаванг (вид рода Shorea);

-    пальмовое масло (Elaeis guineensis, Elaeis olifera)]

-    сап (шорея кистевая) (Shorea robusta)\

-    масло плодов масляного дерева (ши) (Butyrospermum parkii)\

-    масло кокум (Garcinia indica)\

-    масло косточек манго (Mangifera indica).

В настоящем стандарте приведен метод качественного определения этих жиров (исключение делается только для образцов чистого иллипе) в какао-масле и шоколаде. В ISO 23275-2 приведен метод, позволяющий провести надежное количественное определение этих жиров при концентрации 5 %, соответствующей законодательно установленному пределу, утвержденному в [1].

Для более удобного пользования серией стандартов ISO 23275 был разработан набор инструментальных средств под названием СоСаИ. СоСаМ состоит из валидированных методов качественного и количественного определения эквивалентов какао-масла в шоколаде, сертифицированного стандартного материала какао-масла (IRMM-801) для калибровки аналитических инструментов и электронной оценочной таблицы в Microsoft Excel© для вычисления окончательного результата. При проведении качественного и количественного определения эквивалентов какао-масла требуется откалибровать газохроматографическую систему с использованием IRMM-801, разделить триацил-глицериды анализируемого образца и применить электронную оценочную таблицу для последующей обработки данных.

Информация относительно СоСаИ доступна на веб-сайте Института стандартных материалов и измерений: http://www.irmm.jrc.be.

IV

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

Жиры и масла животные и растительные ЭКВИВАЛЕНТЫ КАКАО-МАСЛА В КАКАО-МАСЛЕ И ШОКОЛАДЕ

Часть 1

Определение наличия эквивалентов какао-масла

Тлушчы жывёльныя i раслшныя, маслы жывёльныя i алей ЭКВ1ВАЛЕНТЫ КАКАВА-МАСЛА У КАКАВА-МАСЛЕ I ШАКАЛАДЗЕ

Частка 1

Вызначэнне наяунасщ экв1валентау какава-масла

Animal and vegetable fats and oils Cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate

Part 1

Determination of the presence of cocoa butter equivalents

Дата введения 2009-10-01

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод качественного определения эквивалентов какао-масла (ЭКМ) в какао-масле (КМ) и шоколаде путем разделения триацилглицеридов капиллярной газожидкостной хроматографией высокого разрешения с последующей оценкой данных при помощи регрессионного анализа.

Метод применим для детектирования 2 % ЭКМ в какао-масле, что соответствует около 0,6 % ЭКМ в шоколаде (при допущении, что содержание жиров в шоколаде составляет 30 %).

2    Термины и определения

В настоящем стандарте применяют следующий термин с соответствующим определением:

2.1    эквиваленты какао-масла (cocoa butter equivalents): Жиры, определяемые в какао-масле и шоколаде в соответствии с методом, описанным в настоящем стандарте.

Примечание - Результат представляется как качественный, т. е. ЭКМ присутствуют/ЭКМ не присутствуют

(ДА/НЕТ).

3    Сущность метода

Какао-масло или жир, выделенные путем экстракции растворителем из шоколада, разделяются при помощи газовой хроматографии высокого разрешения на триацилглицериды в соответствии с их молекулярной массой и степенью ненасыщенности. Наличие ЭКМ определяется при помощи линейного регрессионного анализа, применяемого к отдельным триацилглицеридам анализируемого жира.

4    Реактивы и материалы

Используются только реактивы признанного аналитического класса, если не указано иное.

Предупреждение - Необходимо уделять внимание пунктам, которые описывают процедуры обращения

с опасными веществами. Должны соблюдаться технические и организационные меры безопасности,

а также меры личной безопасности.

4.1    Сертифицированный стандартный материал какао-масла (ССМ) IRMM-801 [2] для калибровки и проверки пригодности системы.

4.2    Растворитель жиров, не содержащий хлора (например, диэтиловый эфир, н-гептан, изооктан).

Издание официальное

5    Оборудование

5.1    Аналитические весы с ценой деления 0,1 мг.

5.2    Сушильный шкаф, способный поддерживать температуру 55 °С. Может использоваться сухой нагревательный блок.

5.3    Пищевой измельчитель ^ (т. е. кухонный блендер с расположением двигателя выше принимающего контейнера для предотвращения плавления образцов).

5.4    Ротационный испаритель

Могут использоваться альтернативные методы упаривания.

5.5    Пипетки с емкостью 1 мл.

5.6    Мерные колбы с емкостью 20 мл.

5.7    Микрошприц с максимальным объемом 10 мкл, ценой деления 0,1 мкл или автоматический пробоотборник.

5.8    Газовый хроматограф (ГХ), оборудованный системой холодного ввода на колонку и пламенноионизационным детектором (ПИД).

Могут использоваться альтернативные системы ввода (например, инжектор с делением потока, температурно-программируемый испаритель (ТПИ) или инжектор с подвижной иглой) при условии, что получаемые результаты идентичны указанным в 10.2.

Удовлетворительные разделение и детектирование достигаются при соблюдении следующих экспериментальных условий:

-    кварцевая хроматографическая колонка: длина от 25 до 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки термостабильного 50%-ного фенилметилполисилоксана от 0,1 до 0,15 мкм;

-    температурная программа: начальная температура - 100 °С, скорость нагрева до 340 °С (конечная температура) - 30 °С/мин;

-    газ-носитель: гелий или водород (чистота > 99,999 %).

Примечание - Подходящие колонки и альтернативные экспериментальные условия, использованные в международном совместном исследовании, приведены в приложении А. Рабочие условия могут быть изменены

для получения оптимального разделения триацилглицеридов какао-масла.

5.9    Хроматографическая система сбора и обработки данных

6    Отбор образцов

Репрезентативная проба направляется в лабораторию. Она не должна быть повреждена или изменена в ходе транспортировки и хранения.

Отбор образцов не является частью метода, описанного в настоящем стандарте. Рекомендуемый метод отбора образцов приведен в [3].

7    Приготовление анализируемой пробы

7.1    Приготовление сертифицированного стандартного материала какао-масла для калибровки и проверки пригодности системы

До вскрытия и использования ССМ какао-масла (4.1) ампулу нагревают в сушильном шкафу (5.2) до плавления содержимого. После получения прозрачного раствора перемешивают содержимое путем переворачивания ампулы в течение не менее 20 с. Затем ампулу вскрывают и переносят содержимое в чистую виалу, которую плотно закрывают и хранят в прохладном месте для последующего использования.

7.2    Приготовление образца шоколада

Охлаждают около 200 г шоколада до затвердевания и натирают на мелкие гранулы при помощи механического устройства (5.3). Тщательно перемешивают и хранят в плотно закрытой емкости в холодильнике.

¹¹ Philips HR2833 - пример подходящего, имеющегося в продаже оборудования. Данная информация приведена для удобства пользователей и не подразумевает одобрения этого продукта со стороны ISO.

СТБ ISO 23275-1-2009

b) Определение факторов отклика детектора

Для проверки предположения, что факторы отклика пламенно-ионизационного детектора для триацилглицеридов незначительно отличаются от единицы, необходимо проанализировать ССМ какао-масла, применяя стандартные условия хроматографирования. Опыт показывает, что для нормально функционирующей системы факторы отклика пяти основных триацилглицеридов (POP, POS, POO, SOS, SOO) варьируют в диапазоне 0,80 - 1,20.

11    Прецизионность

11.1    Межлабораторные испытания

Результаты межлабораторных испытаний относительно прецизионности метода приведены в приложении А. Значения, полученные в ходе проведенных межлабораторных испытаний, не могут быть применимы к диапазонам концентраций и матрицам, отличным от указанных.

Примечание - В качестве вспомогательного средства для проверки надлежащего функционирования хроматографической системы в 11.2, 11.3 приведены данные о прецизионности для трех триацилглицеридов POP, POS, SOS (нормализованных к 100 %).

11.2    Повторяемость

Абсолютная разность между результатами двух независимых единичных испытаний, полученных при использовании одного метода и идентичного анализируемого материала в одной и той же лаборатории тем же оператором на одном и том же оборудовании в течение короткого промежутка времени, не более чем в 5 % случаев (при доверительной вероятности Р = 0,95) будет    больше чем:

г = 0,514 г/100    г-для значений    POP    в диапазоне от 18,99 г/100 г до 25,37    г/100 г;

г = 0,293 г/100    г - для значений    POS    в диапазоне от 43,76 г/100 г до 47,73    г/100 г;

г = 0,621 г/100    г - для значений    SOS    в диапазоне от 30,87 г/100 г до 33,80    г/100 г.

11.3    Воспроизводимость

Абсолютная разность между результатами двух независимых единичных испытаний, полученных при использовании одного метода и идентичного анализируемого материала в разных лабораториях разными операторами с использованием различного оборудования, не более чем в 5 % случаев будет больше чем:

R = 0,741 г/100 г - для значений POP в    диапазоне от    18,99    г/100 г до    25,37 г/100    г;

R = 0,588 г/100 г - для значений POS в    диапазоне от    43,76    г/100 г до    47,73 г/100    г;

R = 0,782 г/100 г - для значений SOS в    диапазоне от    30,87    г/100 г до    33,80 г/100    г.

Примечание - Пределы повторяемости и    воспроизводимости, полученные    в ходе межлабораторных испы

таний, являются индикативными и могут применяться для значений содержания триацилглицеридов за пределами указанных диапазонов (данные расширенных исследований [4]).

12    Протокол испытаний

В протоколе испытаний должны содержаться:

a)    вся информация, необходимая для полной идентификации образца;

b)    метод отбора образцов, если известен;

c)    использованный метод тестирования со ссылкой на настоящий стандарт;

d)    все подробности работы, не указанные в настоящем стандарте или считающиеся дополнительными, вместе с подробностями любых инцидентов, которые могут повлиять на результаты испытаний;

e)    полученные результаты испытаний или конечный полученный результат, если проверялась повторяемость. ¹

Приложение А

(справочное)

Результаты межпабораторных испытаний

Метод был валидирован в 2002 году в ходе европейских межлабораторных испытаний, в которых принимало участие 13 лабораторий [5], [6]. Результаты, полученные в ходе этих межлабораторных испытаний, указывают на то, что методика работает хорошо с пределом обнаружения не менее 2 % примеси ЭКМ в КМ, что соответствует 0,6 % ЭКМ в шоколаде (при допущении, что содержание жиров в шоколаде 30 %) без ошибочно-положительных или ошибочно-отрицательных результатов.

В таблице А.1 приведены приемлемые газохроматографические условия ². Пример профиля триацилглицеридов ЭКМ какао-масла приведен на рисунке А.1. Данные прецизионности приведены в таблицах А.2 - А.5.

Таблица А.1 - Приемлемые газохроматографические условия, используемые для анализа триацилглицеридов какао-масла, эквивалентов какао-масла, смесей какао-масла/ эквивалентов какао-масла и шоколада

Возможный метод 1 2 3 4 5 Характеристики колонки: - неподвижная фаза DB-17HT RTX-65TG СВ-ТАР RTX-65TG СВ-ТАР - длина, м 30 30 25 30 25 - внутренний диаметр, мм 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 -толщина пленки, мкм 0,15 0,1 0,1 0,1 0,1 Температурный режим (термостат): - начальная температура, °С/время поддер- жания, мин 80/2 340/1 280/0 100/0,5 340/0 - программируемая скорость 1, °С/мин 50 1 10 50 1 - температура 1, °С/время поддержания, мин 300/0 - 320/0 330/2 - - программируемая скорость 2, °С/мин 30 - 2 1 - - температура 2, °С/время поддержания, мин - - - - - - программируемая скорость 3, °С/мин - - - - - - конечная температура, °С/время поддер- жания, мин 350/30 360/3 360/6 350/5 360/10 - температура инжектора, °С Термо- 390 370 Термо- 360 стат стат - температура детектора, °С 360 370 370 355 360 Режим введения На С С На с колонку делением делением колонку делением потока потока потока Газ-носитель: - тип н2 н2 н2 Не Не - давление, кПа - 120 100 - 150 - скорость потока, мл/мин 0,8 - - 0,8 - Проба: - концентрация, мг/мл 0,3 50 12,5 0,3 - - вводимый объем, мкл 0,5 0,1 0,6 0,5 1

1

2

Эти типы колонок являются примерами подходящих, коммерчески доступных продуктов. Данная информация предоставлена для удобства пользователей настоящего стандарта и не подразумевает поддержки этих продуктов со стороны ISO.