Балалар га» амина жэне ересектерге арналган косиалар

СУЙЫКТЫК ХРОМАТОГРАФИЯСЫ ЖОПЕ ИМПУЛЬСПК АМПЕРОМЕТРИЯ АРКЫЛЫ МИОИНОЗИТ МОЛШЕРШ АНЫКТАУ

Смеси для детского питания и вфослмх

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МИО-ИНОЗИТОЛА С ПОМОЩЬЮ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И ИМПУЛЬСНОЙ АМПЕРОМЕТРИИ

КРСТ ISO 20637-2016

(ISO 20637:2015 Infant formula and adult nutritional.s Determination of myo-inositol by liquid chromatography and pulsed amperometry, IDT)

Ресми басылым

Кязакстан Республнкасы Пнвестнциялар жопе даму мииистрлпi Техникалык репсу жопе метрология комитет! (Мемстандарт)

Балаляр гаг ямина жопе ересектерге арналган коспалар

СУЙЫКТЫК ХРОМАТОГРАФИЯСЫ ЖЭНЕ ИМПУЛЬС ПК АМПЕРОМЕТРИЯ АРКЫЛЫ МИОИНОЗИТ МОЛШКРШ АНЫКТАУ

КРСТ ISO 20637-2016

(ISO 20637:2015 Infant formula and adult nutritionalx Determination of myo-inositol by liquid chromatography and pulsed am/>erome try. IDT)

PecMii басм imm

Кязакстан Республнкасы Ннвестициялар жопе даму ммннстрлнт Техникалык реттеу жопе метрология комитет! (Мемстандарт)

0,00 с	0,10 В
0,20 с	0,10 В
0,40 с	0,10 В
0,41 с	минус 2,00 В
0,42 с	минус 2.00 В
0,43 с	0,60 В
0,44 с	минус 0,10 В
0,50 с	минус 0,10 В

BipiKTipy уакыты: 0,20 бастап 0,40 с дешн

Эдеттеп стандаргты хроматограмма улпа А косымшасында келпршген.

6.3.3    Аспаптармен жумыс icrcy бастамасы

Козгалмалы фазаларды дайындайды. Кажет жагдайда козгалмалы фазаларды гели и мен буркнш жэне / немесе козгалмалы фазага арналган ыдысты герметнкаланды. Кажет жагдайда жумыстык алтын электродты тазартады жэне тепстейдг Детектор косады жэне жуйеш тепе-тешйкке келпру ушш 30 мин барысында 0,40 мл/мин агын жылдамдыгында багана астындагы козгалмалы фазаны уйпп тастайды Дстектордын талдау алдында туракты екендтне коз жетюзьтедг 20 мкл ей коп шогырланган стандаргты ер1т1нд)н1 5 рет енпзед1 жэне 6niicriк немесе пик ауданын корсетедг Егер жуйе тепе-тещнкте болса, сонгы уш снпзшген стандаргты сртндшердщ (RSD) бшктш немесе пик ауданындагы салыстырмалы стандартты ауытку 2,0 % болады

6.3.4    Стандартты epmtui мен улпт талдау

Жуйеш тепе-тещйкке келпргеннен кешн эр шогырлануда (4 2 4 жэне 4 2.5 Kapay)6ip стандартты ер1Т1нл1Н1 енпзед!. Стандартты ертндмердш жинагын енпзгеннен кейпн улплер мен корытынды улп стандартты ертндыердщ баска жинагын енпзу алдында енпзшедг

6.3.5    Жуйемен жумысты аяктау

Барлы улплер мен стандартты ертндшерд1 талдаудан кешн автоматты сынама сурыптагыш пен туп tain инес1н тазарту ушш 20 мкл су косады. Талдамалы багандарды козгалмалы фазада сактайды [0,12 % (30 ммоль/л) натрий гидроксид!]. Электрохимиялык уяшыкты сенд!редг Соргылык саптаманы натрий гидроксид!н жою ушш сумей шаяды

7 Есептеу

7,1 Жадны ережелер

Улплердеп мио-инозитол шогырлануын есептеу алдында стандартты мио-инозитол ертндшершш пипн мио-инозитол улллершш пипмен салыстыру жэне кандай да 6ip кедерпл! байланыстардын жоктыгын жэне мио-инозитол улпсшш пик ауданы немесе бшкпп стандартты мио-инозитол ертндюнщ бшктт немесе пик ауданы дпапазонында орналасканын растау кажет. Мио-инозитол шогырлануы осал ажыратымдылык немесе кедерпл! байланыстарда есептелмейд!. Мио-инозитол устау уакыты жеке талдамалы баганга байланысты 11 бастап 13 мин дешн диапазонда болады

^ь Сатылымдагы лаймкты ошм мысалы. Осы акпарат осы стандаргты пайлаланушылардыц ытайлылыгы yuiiii Kc.nipLiicii жэне осы ошмнщ ISO макулданганы тирады растима балып табылмайды. Калама ошмдср олар сол нэтнжеге алып кслепндш корсеты ген жагдайда колданыла алады

C_dx50 m_s *

мундагы C_b - ешм улпандеп байланган мио-инозитол шогырлануы, мг/кг;

С_а - дайын улпдеп бос мио-инозитол шогырлануы, мг/л;

50 - ертлген ертши келеми мл; m_s - улп массасы, г.

7.4.3 Бос плюс байланган мио-инозитол есептеу

Дайын улНдеп бос плюс байланган мио-инозтч)л шогырлануы (4) формула бойынша есептеледг

C_T = C_f + С_ь,    (4)

мундагы С_т - ен1м улпандеп бос плюс байланган мио-инозитол шогырлануы, мг/кг.

В косыmiiiасы

(спукцхиптыц)

Деректер дэлд1п

В I - В 3 кестелерде бермген деректер зертхана аралык зерттеулерде алынган жэне ISO 5725-2 [5] стандартына жэне талдау эдклнщ снпаттамасынын дэлдтн багалау ушш б1рлескен зерттеу процедуралары ушш AOAC-1UPAC б1регейленген хатгамасына сэйкес [6] 2015 жылы жарияланды [4]. Зерттеу бершген талагггар непзжде багаланды [8].

Эдш балалар тагамы мен ересектерге арналган коспадагы фосфатндилннозитолдан алынган мно-инозитол мен бос мио-инозитолды сандык аныктау yuiin бектлдг Жангыртушылык &рнеше кун орындалатын уксас талдаудан аныкталды. Дэлдш шыгару денгеш бойынша эксперименттен аныкталды (фосфатндилннозитолдан алынган мно-инозитол мен бос мно-инозитол). Аспаптарды табу шеН мен саны стандаргты томен денгешн ертнднп енпзуден жэне бос мио-инозитолдын томен денгеш бар шын тандамасынан статнстнкалык аныкталды Зерттеу [7] бертген талаптар непзшде журпзшдс

Од1ст1 тексеру туралы толыгырак аппарат мына сайгга бершген: http://standards iso.org/iso/20637

B.I Kecreci — Ьанланыспаган (бос) мно-ннозитол

Улпган Tiuii	1 lerbri cMccri сссикс алмаганда, зсртханалар дыц жадны саны	1 1спзп смсс зертхана лар саны	Рукеат елллген каПталаулард ыц жадны саны	Орташа мэн (мг/100 г RTF)	Sr	Sr	С,у	Cv*	Хорнитц К1Г>Ф1»И-ЦИСНП *
NISI SRM 1849а	К)	0	22	412.00ь	11.3000	11,400	2.75	2.77	0.43
Соя нспзшдсп oa.ia.iap тагамына арналган унтак Tapixii косна	10	0	22	4,22	0,1270	0,3050	3,03	7,26	0,80
Суг нспзшдсп балалар тагамына apiia.iiан унгак lapi vii косна	10	0	20	4.26	0.1680	0.2320	3.95	5.43	0.60
Суг нспзшдсп ТД балалар тагамына арналган косна	9	0	20	7,17	0,0950	0.2070	1.33	2.89	0.34
Суг нспзшдсп балалар тагамына арналган iuiinapa 1 ндролнгчснгсн унта к rapiioi косна	10	0	22	3.65	0.0350	0.4120	0.97	11.4	1.22
Соя нстшлсп балалар гагамына арна.п ап шннара 1 нлролигченген унтах Topii,ii косна	10	0	22	3.11	0.0899	0.3890	2.92	12.61	1.32

KPCT1SO 20637-2016 И. I кеапестщ жашгсы_

Улгппн riiui Hcinri смссп ссснкс aiMaraiua, эертханалар дын жалим саны 1 lernri смсс чергхана лар саны Руксат СИЛ ГСП кайташуларл ын жаты саны Орташа МЭН (мг/100 г RTF) •Sr с.> ('гл Хорвигц КО ч|м|ш- ниенп * Baiaiap тагаммна арна.пам утггак тэргзд косна 10 0 22 5.10 0.1850 0.2460 3.61 4.81 0.54 Вачачар тагамына арнанан караиайым укгак rapi ui косна 10 0 22 5.10 0.2270 0.3180 4.45 6.24 0.71 Baiaiap тагамына арнанан нкгаминлслмсгсн. сут iicrriiiucri ТД косна 9 0 20 3.17 0.0582 0.0910 1.84 2.87 0.30 * Дсреккочге сэйксс Хорннтц котффиниснншн Maui [8|. ь Нэтижелор унтакгын мг/ю -мен бершген. ГУ - тутытга лаймн.

В.2 Kccieci- Фосфл nuii.imiouiтол туршдеп банланмскан мио-пжни юл

Улгнпн Tinii 1 Icrisri смссп ссснкс атмаганла, зертхалалар дын жаты саны 1 lernri смсс чергхана лар саны |»уксат стчлгсн кайтачаулард ын жалны саны Орташа МЭН (мг/100 г RTF) Sr Sr Су, Cyjt Хорнинг коэффи-ниенп * NIST SRM 1849а 9 0 20 9.510*’ 1.8200 2.62(H) 18.7000 26.80 2.36 Соя ncmiiucn Гкиалар тагамына арнан ан у итак чэрКн косна 9 0 20 2.100 0.15(H) 0.5010 6.9400 23.20 2.30 Сут НСП ИНЛСП Гкиалар тагамына арнан ан у итак lopi ui косна 9 0 18 0.667 0.026 1 0.1720 3.9200 25.90 2.15 Сут nciniiucri ТД бал агар тагамына арнанан косна 8 0 18 0.348 0,0301 0,0909 8.36 25,20 1,91 Соя негЫндеп Гкиалар тагамына арнанан iiniHapa пглролнэденгсн унтак тэргчдг косна 9 0 20 0,214 0,0103 0,0576 4,72 26.40 1,86

Н.2 Kecmeciiiiif жачгасы

YariiiiH nmi 1 Icmri смесп ссснкс атмаганда. тсртханатар ДЫН жат п ы саны Нет п смсс тергхана лар саны Руксат етшген каГнатаулард ын жадны саны Орга ша мам (mi/100 г RTF) Sr Sr С »> С УМ Хорвнт II КО^ффи-НИСНТТ * Соя Hcrniiucri балалар тагамына аркам an iuiinapa гидрат нзденген уитак lopivii кос па 9 0 20 1,640 0,0936 0,3580 5,53 21,10 2,02 Вататар гагамыпа арнатган уктак торп;н косна 9 0 20 0,328 0,0234 0,0878 6,89 25,80 1,94 Вататар тагамына арнатган караиайым уктак iopiui кос па 9 0 20 0.000 0.0000 O.(XXK) 0,00 0,00 0.00 Вататар тагамына арнатган Н1памш1лслмс1сн. сут нспиндеп ТД косна 8 0 18 0.305 0,0244 0.0850 7.71 26 .90 2.00 * Дсрсккотгс сойксс Хорвнтн коэффициснтппн маш |8| *’ 1 (этижелер утпакт ыц мг/кг-мсн бери ген 1'У - туты ну га дайын.

В.З кестесь- Фосфатид ил инозита! туршдеп банланыскан мио-ннознтол плюс байланыспаган (бос) мно-ннозитол

Улгмнн THiii	1 lernri смесп ссснкс атмаганда. тсртханатар дын жадны саны	1 lernri смсс тергхана лар саны	Руксат CTUIVH кайтатаулард ын жадны саны	Орташа МОН (мг/100 г RTF)	Sr	Sr	Сг,	('гм	Хорвктц КОчффи-ЦИС1ГП 4
NIST SRM 1849а	9	0	20	422,ООь	11,9000	11,900	2,83	2,83	0,44
Соя Hciriiiucn баталар тагамына арнатган уктак ТЭГ»1ХТ1 косна	9	0	20	6,27	0.1470	0.446	2.32	7.05	0.82
Суг непнндоп баталар тагамына арнатган уктак mpi ui KiH.ua	9	0	18	4.92	0.1840	0.314	3.74	6.38	0.72
Суг нсп нндсп ТД баталар тагамына арнатган косна	8	0	18	7.50	0.1060	0.218	1.41	2.90	0.35

И.З кестесппц жалгасы

Y;iriiiii( Tiini Нспзп смеет i ссспке алмагапда. тертханалар лын жалпы саны 1 lerbri емсс tcprxaiiai ар саны Руксат cri.Ticii кайтатауларл ыц жашы саны Органы мпн (мг/100 г RTF) Sr Sr CY, CY.* Хорвитц ko'kJxJiii-циснп * Сут Hcmiiucii балалар тагамыиа арналган iiniiiapa 1 нлролшденген унта к rnpi t.ii коспа 9 0 20 3.84 0.0350 0.426 0.91 11.20 1.21 Соя iicrniiuen 6a.ia.iap тагаммна арна.пап iiniiiapa гнлролкиснген унтак гпрплг коспа 9 0 20 4.71 0,1520 0.357 3.22 7.55 0.84 Вататар тагам ына арпалгап VHT8к rnpi t.ii косна 9 0 20 5.42 0.2030 0.307 3.73 5.63 0.64 Ьалалар raiavihiiia apita.ilан карапайым унтак rnpi t.u Ki>ciia 9 0 20 5.08 0,2370 0.324 4,67 6.40 0,72 Ьалалар гагамыиа арналган В1ггаминлслмсгин. сут itcmiiucii ТД коспа 8 0 18 3.46 0.0659 0.128 1.90 3.70 0.39 * Дсрсккоагс спйксс Хорвитц котффициснтшш мши |Н|. ь Нпгижолср уптакгыц мг/кг-мен бёршген. ГУ - туты нуга лайын.

Библиография

[1]    Codex Standard 72-1981 Standard for Infant Formula and Formulas for Special Medical Purposes Intended for Infants (72-1981 кодексшш стандарты. Балаларга арналган арнайы меднциналык максатты балалар жэне сут коспасы).

[2] J. АОАС Int 2012, 95 р 937 J АОАС Int 2012, 95 937-бег

[3] J АОАС Int 2012, 95 р. 295 J АОАС Int 2012, 95 295-бег

[4]    2011.18, Determination of Myo-Inositol in Infant, Pediatric, and Adult Formulas by IC-PAD and Column Switching: Collaborative Study 2011.18, Ионды хроматография, импульсл амперометрлж акаутапкы жэне багандарды ауыстырып-косу кемепмен балалар тагамына жэне ересектерге арналган коспадагы мио-инозитол мелшерж аныктау. Б1рлескен зертгеу).

[5]    ISO 5725-2:1994, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results — Part 2: Basic method for the determination of repeatability and reproducibility of a standard measurement method (Олшеу anicrepi мен нэтижелерипн дэлдт (дурыстыгы мен прецизиондыгы). 2-oo.iiM Олшеудш стандартты 9nicinin каиталанушылыгы мен жацгыртушылыгын аныктаудын непзп d.oici).

[6]    АОАС International. АОАС Official Methods Program, Associate Referee's Manual on development. Study, Review, and Approval Process Part IV AOAC Guidelines for Collaborative Studies, 1995. pp. 23-51. (AOAC INTERNATIONAL. АОАС ресми э/истершш багдарламасы, Оз1рлеу, зерделеу, карау жэне бек1ту npoueci бойынша кауымдаскан соттар нускалыгы. IV бел1м, Б1рлескен зерттеулергс арналган нускаулык АОАС, 1995 ж., 23-51-бет).

[7]    АОАС SMPR 2011.005, Standard Method Performance Requirements for Vitamin В12 in infant formula and Adult/Pediatric Nutritional formula (AOAC SMPR 2011.005, AOAC SMPR 2011.005, Балалардын тамактануына жэне ересектерге арналган коспадагы В12 витамижне арналган стандартты эд4стерд1н снпатгамасына койылатын талаптар).

[8]    Thompson М. Recent Trends in Inter-Laboratory Precision at ppb and sub-ppb Concentrations in Relation to Fitness for Purpose Criteria in Proficiency Testing Analyst (Lond ). 2000, 125 pp 385-386 (M. ТОМПСОН Багалау сынактарынла алга коиылган максатты орындау yuiin кабылдауга лапыктылык критерпмлер1не катысты миллиардка oip бел1ктен томен жэне миллиардка белшектер шогырлануы кез1 нде зертханааралык дэлд1ктеп сонгы даму каркыны Аналитик (Лонд ). 2000 ж., 125-бет. 385-386).

ЭОЖ 637.1:543.544.5:006:354    МСЖ    67.050

ТуГии создер: балалар тагамына арналган коспа, ересектерге арналган коспа, мио-инозитол, суйыктык хроматография, импульстп амперометрия

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

Смеси для детского питания и взрослых

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ МИО-ИНОЗИТОЛА С ПОМОЩЬЮ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И ИМПУЛЬСНОЙ АМПЕРОМЕТРИИ

СТ РК ISO 20637-2016

(ISO 2063 7:2015 Infant formula and adult nutritionals Determination of myo-inositol by liquid chromatography and pulsed amperometry, IDT)

Издание официальное

Комитет технического регулирования и метрологии Миннстерсгва по инвестициям и развитию Республики Казахстан (Госстандарт)

Астана

Алгысез

1    «Kazakhstan Business Solution» жауапкершшп шектеул1 cepikiecTiri (TK 91 «Химия» стандарттау женждеп техникалык комитет!) Э31РЛЕП ЕНГ13Д1

2    Ката кета и Республ икаем Инвестпциялар жоме даму министрлтнщ Техникалык реттеу жэне метрология комитет! Терагасынын 2016 жылгы 23 карашадагы № 296-од буйрыгымен БЕК1Т1Л1П КОЛДАНЫСКА ЕНГШЛД1

3    Осы стандарт ISO 20637:2015 Infant formula and adult nutritionals - Determination of myo-inositol by liquid chromatography and pulsed amperometry (Балалар тагамына жэне ересектерге арналган коспалар. Суйыктык хроматография жэне импульсп амперометрия кемепмен мио-инозитол мелшерж аныктау) халыкаралык стандартына сэйкес келедт

Халыкаралмк стандартты АОАС INTERNATIONAL кауымдастыгымен 6ip;ieciri ISO/TC 34 «Тамак ошмдерЬ> техникалык комитет! эз1рледг

Агылшын тшнен ауларылган (еп).

Осы улттык стандарт халыкаралык стандарттын ресми нускасы непз!нде эз!рлснд! жэне осында бер!лген алтемелср Норматнвттк техникалык кужаттардын б1рыкгай мемлекегпк корында бар.

Ресми пуска дегешм1з мемлекегпк жэне орыс плдерждеп мэтж болып табылады

Сэйкеспк денге Гп - б!рдей (IDT).

4    Осы стандартга Казакстан Республнкасынын «Техникалык реттеу туралы» 2004 жылгы 9 карашадагы № 603-11, «Казакстан Республ и касындагы ил дер туралы» 1997 жылгы 11 инлделеп № 151 Зандарынын нормалары шке асырылды

5    Б1Р1НШ1 ТЕКСЕРУ MEP3IMI ТЕКСЕ РУД Щ КЕЗЕНД1Л1Г1

6    АЛГАШ РЕТ ЕНГП1ЛД1

Осы стандартна енггзиген озгер/стер туралы анпа/xim «Стандарттау бонынша норматнипик нужаттар» сттеместде, ал о зге pic M.wnni «Мелиекетпик стандарттар» ап санынгы анпараттын алтеместде жариязанады. Осы стандарт наита щхпган (жонылгап) немесе ауыстырылган жагданда mnicmi аппарат «Мелиекептик стандарттар» ацпа/хиптык ептемеечнде жарняшнады.

Осы стандарт Казакстан Республикасы Инвестпциялар жэне даму министрлт Техникалык реттеу жэне метрология комитетжж руксатынсыз ресми басылым ретжде Казакстан Республикасы аумагында толыктан немесе белшектелж басылып шыгарыла, кебейттле жэне таратыла алмайды

Прелнс.ювие

1    ПОДГОТОВЛЕН И ВНЕСЕН Товариществом с ограниченной ответственностью «Kazakhstan Business Solution» (Технический комитет по стандартизации ТК 91 «Химия»)

2    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Председателя Комитета технического регулирования и метрологии Министерства по инвестициям и развитию Республики Казахстан от № 296-од от 23 ноября 2016 года

3    Настоящий    стандарт    идентичен международному стандарту

ISO 20637:2015 Infant formula and adult nutritionals Determination of myo-inositol by liquid chromatography and pulsed amperometry (Смеси для детского питания и взрослых. Определение содержания мио-пнозитола с помощью жидкостной хроматографии и испульсной амперометрин)

Международный стандарт разработан Техническим комитетом 1SO/TC 34 «Пищевые продукты» совместно с ассоциацией АОАС INTERNATIONAL

Перевод с английского языка (еп).

Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий национальный стандарт и на которые даны ссылки, имеется в Едином государственном фонде нормативных технических документов

Официальной версией является текст на государственном и русском языке

Степень соответствия - идентичная (IDT).

4    В настоящем стандарте реализованы нормы законов Республики Казахстан «О техническом регулировании» от 9 ноября 2004 года № 603-II, «О языках в Республике Казахстан» от 11 июля 1997 года № 151-1

5    СРОК ПЕРВОЙ ПРОВЕРКИ ПЕРИОДИЧНОСТЬ ПРОВЕРКИ

6    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Нормативные документы по стандартизации», а текст изменении и поправок в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». И случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты»

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен без разрешения Комитета технического регулирования и метрологии Министерства по инвестициям и развитию Республики Казахстан

KA JAKCTAH РЕСПУБЛИКАСЫНЫЦ У'ЛТТЫК СТАНДАРТЫ

Балалар тагамына жэне ересектерге а риал i ан коспалар

СУЙЫКТЫК ХРОМАТОГРАФПЯСЫ ЖОПЕ ИМПУЛЬСТНС AMПЕРОМЕТРИЯ АРКЫЛЫ МНОИНОЗИТ МОЛШЕРШ АНЫКТАУ

Еш iii ncii кут 2018-01-01

1    Кол ла ныл у саласы

Осы стандарт ауыстыратын баганалы импульспк амперометрня мен суйыктык хроматография кемепмен улкендер мен балалар тагамына арналган коспалардагы мио-инозитол (фосфатидилинозитол туршде байланыскан бос немесе бос плюс) мелшерж аныктау ушш колданылатын эд1сп белплейдг

2    Термнклер мен аныктамалар

Осы стандартта тшсп аныктамаларымен oipre мынадай терминдер колданылады:

2.1    Улкендерге арналган косна (adult nutritional): езгерллмеген акуыз коспасы жэне коспасысыз, амин кышкылы мен крахмал, гидролиз акуыз, сут ipKiii, Kypim, соя, сут косындысынан лаиындалган жалгыз коректенд1ру K03i болып табылатын суйык формада колданылатын арнайы эз1рленген коректеншрпш заттар бойынша балансталган коректенд1ру етмдерг

2.2    Алапталган немесе жартылай алапталган бастапкы немесе сонгы сут коспалары (infant formula): OMipimH oipiumi айынан бастап Tiiicri тамакты колдану куш не деГнн (72-1981 [1] Стандарт Кодексше сэйкес) тамактануда сэбилердщ кажетшнпн канагаттандыру ушш арнайы дайындалган смшсктеп сутпн жасанды алмастыргышы.

3    Ojicriii Maui

Бос мио-инозитол мен фосфатид илмен байланысты мио-инозитол у л rim дайындаудын eKi турл1 процедура кемепмен алынады Бос мио-инозитол су мен ертлген туз кышкылы улплершен алынады. Фосфатидилннозитол хлороформ улплершен алынады жэне кремний оксидл картридж майынан бе;пнед1 (катты фазалы экстракцияга арналган картридж) Мио-инозитол 120 °С температурада шогырланган алтш жэне туз кышкылы аркылы глицерин курылымынан босатылалы Ионды хроматографиялык aaic импульсп амперометрлш акаутагжы (PAD) жэне багандарды ауыстыру аркылы exi турл1 ионмен алмасатын багандар комбинациясын колданады. Мио-инозитол мелшерш Mamuepi белгЫ сырткы стандарттармен салыстыру аркылы есептейдг

Ресмн басы. Iим

4 Реагенттер мен заттар

Зертгеу барысында баскасы корсеплмеген жагдайда тазальпстын балам алы дэрежеа не не су немесе тазартылган немесе .мннералданган су жэне тазалыкгын талдамалы дэрежеа мен белгш реагенттерд! колдану кажет.

4.1    Химиялык заттар мен epiTKiurrep

4.1.1    ACS стандартна сэйкес келетш музды алтш кышкыл

4.1.2    Хлороформ, тазалыктын жогары дэрежесше не, HPLC дэрежеа.

4.1.3    Диэтил эфир, сусыз, HPLC дэрежеа.

4.1    4 Драйерит, десикант, сусыз кальций сульфаты, 8 меш

4.1.5    Гелий. нелд1к топ немесе балама

4.1.6    Гексан, HPLC дэрежеа.

4.1.7    Туз кышкылы, шогырланган (36 % бастап 38 % дейш), ACS стандартна сзйкес келедг

4 I 8 Метафосфор кышкылы. ACS стандартна сэйкес келедг

4.1.9    Метанол, HPLC дэрежеа.

4.1.10    Мио-инозитол, алгашкы стандартты улп, ресмн топтама, кургатылган куйде сактау кажет. Стандартты улпаздштанбасына карау

4 111 Натрий хлорид!, ACS стандартна сэйкес келедг

4.1.12 Натрий гидроксиду 50 % (масс./масс), кем1ркышкылды туздын аз молшерше не форма.

4.2    Реагенттер мен стандартты ертндтерд1 дайындау

4.2.1    Жалпы ережелер

Мнгайлылык уилн барлык ертндшер зертханалык тэжэрибе ережелер1 устанган жагдайда улкен немесе шамалы мелшерде пайдалану уш1н саналады. Epiri ндмер суытылган турде немесе баскасы корсеплмеген жагдайда инергп заттармен толтырылган герметикалык контейнерлерде коршаган орта температурасында сакталады.

4.2.2    Мио-инозитолдын бастапкы стандартты ертнд1а (2000 мг/л шамасында). Мио-инозитолдын 0,100 г дэл елшенд1с1 алынады жэне оны 50 мл сыйымдылыктагы елшепш жумыр шыныга мелшерлеп ауыстырады. Кажетп колемге дей1н сумей ерпедг Жаксы араластырады. Тоназьггкышта сактайды. Жарамдылык мерз1м1: 3 ай.

4.2.3    Мио-инозитолдын аралык стандартты epiTinjici (200 мг/л шамасында). 10,0 мл бастапкы стандартты ертншш (5.2.2 карау) 100 мл деГнн сумей ер1тед1 жэне жаксы араластырады. Колданганнан кейин пайдаланылады.

4.2.4    Калибрлейтж стандартты epiTiHAiHi дайындау

4.2.4.1    Мио-инозитолдын калнбрлеГтн жогаргы денгейл! ертндмеру (4,0; 2,0; 1,0; 0,5 мг/л шамасында).

Жеке олшепш жумыр шыныларда мио-инозитолдын 2,0; 1,0 жэне 0,5 мл аралык стандартты epiiiHAiciH (5.2.3 карау) 100 мл дсшн сумей ерггедг Мио-инозитолдын 0,5 мл аралык стандартты ертшнсш (4.2.3 карау) 200 мл дейш сумей ер1тед1 Жарамдылык мер31мг 2 апта.

4.2.4.2    Мио-инозитолдын калнбрлеГтн теменН денгейл1 ер1т!нд1лср1 (0,20; 0,05 мг/л шамасында).

Жеке олшеНш жумыр шыныларда 0,5 мг/л шогырланган мио-инозитолдын 4 мл жэне 1 мл калнбрлеГтн стандартты ертндюн 10 мл дешн сумей ер1тедг Жарамдылык мер31мГ 2 апта.

4.2.5    Туз кышкылы, 0.5 %. 1,25 мл шогырланган туз кышкылын 200 мл шамасындагы сумей 250 мл сыйымдылыктагы олшепш жумыр шыныга салады. Сумей кажетп колемге дейш ер1тед1 жэне жаксы араластырады. Жарамдылык мерз1му 6 ай.

4.2.6    Натрии хлорид!, I моль/л. 5,8 г натрии хлоринн epiTeni жэне сумей 100 мл дешн ер!тедг Жарамдылык мерз! Mi: 1 ай.

4.2.7    Натрий гидроксид!, 0,12 % немесе 30 ммоль (1 соргы). 50 % натрий гидроксид! ертндюшн (4,8 ± 0,1) г дал елшендю 1900 мл шамасында Судан туратын 2000 мл елшепш жумыр шыныга алады. Натрий гидроксид! ауадагы кем!ркышкылды газды жутпауы манызды. Араластыру уинн жаксылап шайкайды. Сумей кажетп колемге дешн epiTefli жэне жаксы араластырады. Жарамдылык мерз!Mi: 1 ай.

4.2.8    Натрий гидроксид!, 4,0 % немесе 1 моль/л (2 соргы). 50 % натрий гидроксид! epiTtH^iciHiK (160 ± 3) г дал елшендю 1900 мл шамасында Судан туратын 2000 мл елшепш жумыр шыныга алады. Натрий гидроксид! ауадагы кем!ркышкылды газды жутпауы манызды Араластыру уинн жаксылап шайкайды Сумей кажетп келемге дешн epiTefli жэне жаксы араластырады. Жарамдылык Mep3iMi: 1 ай.

4.2.9    Метафосфорлы кышкыл, 6 %. Метафосфорлы кышкылдын 6,0 г дал елшенд!с!н 100 мл сыйымдылыктагы елшеНш жумыр шыныга алады. Ер!тед1 жэне сумей кажет денгейге дешн epiTefli Жаксы араластырады Тоназыткышта сактайды Жарамдылык мерз! Mi: 1 апта.

4.2.10    Фосфатиднлинозитол сыгынды ертндшерг Колданатын кунде жанадан дайындайды.

4.2.10.1    Хлороформ: метанол (2:1). 60 мл хлороформ мен 30 мл метанол араластырады

4.2.10.2    Гексан: диэтил эфир (80:20). 80 мл гексан мен 20 мл диэтил эфирд! араластырады.

4.2.10.3    Гексан: диэтил эфир (50:50). 50 мл гексан мен 50 мл диэтил эфир араластырады.

4.2.10.4    Метанол: хлороформ су (75:15:10). 75 мл метанол, 15 мл хлороформ мен 10 мл суды араластырады.

5 Жаблык

Стандартты зертханалык ыдыс пен кондыргы, сонын iunuae, мыналар.

5.1    Талла малы таразылар, мннимал жук кетерНигпк 0,0001 г кем емес.

5.2    Центрифуга.

5.3    ГОСТ 25336-82 бойынша эксикатор.

5.4    Суйык азотгы булагыш, су моншасы немесе онын баламасы бар.

5.5    120 °С температураны сактауга каб!летт! пеш

5.6    pH-метр, pH 4 жэне 7 буферлер! бар.

5.7    Кеп позициялы магнитп булгауыш.

5.8    Вакуумды коллектор.

5.9    Сокпа булгауыш.

5.10    Тутзкпн iuiKi диаметр! 0,18 бастап 0,25 мм (0,007 бастап 0,01 дюйм дешн) дешнп пол»ггетрафторэтилен (PTFE) немесе полиэфирэфиркетон (РЕЕК) жэне алтын электродты импульспк ампеторметрия детекторы, 6 армады ауыстырмалы какпак. ею изократикалык соргы. автоматты сынама сурыптагышты коскандагы, зен басуга туракты курауыш бел!ктерге не HPLC жуйесг Автоматты сынама сурыптагыш, 20 мкл енпзуге каб!лстп.

5.11    Багандар. Dionex CarboPac¹* MAI (4 мм * 250 мм) P/N, 44066, MAI (4 мм x 50 mm) P/N 44067, жэне PA I (4 * 50 мм) P/N 43006, немесе балама.

5.12    Мвлшерлеу1штер, турл1 елшемге не.

5.13    Центрифуга тупктер, политетрафторэтиленмен (PTFE) жабылган тыгынмен 6ipre 50 мл.

5.14    LLInpiiuTi сузплер, полиамид, 0,45 мкм жэне 0,20 мкм

5.15    Сузпш кагаз, ватман кагаз 2V¹' немесе балама.

5.16    Конустык жумыр шынылар, 50 мл немесе 125 мл немесе балама.

5.17    Олшс>тш жумыр шынылар, турл1 елшемге ие.

5.18    Сузпш кагазбен колдануга ынгайлы куйгыштар

5.19    Тамызгыштар, дэйектелген, турл1 олшемге ие.

5.20    SPE картридж, кремний оксидн, 1 г²⁾.

5.21    100 мм (4 дюйм) узындыктагы тот бастиайтын болагган жасалган туймел1 25 мл газ етмзбейтж шыны сыйымдылык пен 1 мл oip ретпк сыйымдылыкка не шприцтер.

Есксртпс. Ширин KuicMi 1 бастап 500 мкл дейшп автомата сынама сурынтагышгар Шприцтт тасымалдау унпн косммша кондыргы мен 250 жэне 500 мкл eiti шприцтт oip уакыгга колдануга болады (мысалы. Аджилент 7693А).

7Сынак откпу

6.1    Бос мио-инозитол

6.1.1    Улплсрд! дайындау

6.1.1.1    Жалпы ережелер

Жабык контейнерлерде 1 °С бастап 8 °С дейшп температурада туракты сакталатын дайындалган улплер 5 кун 1ш1нде туракты болады. 5 кун откеннен кейш улплерд1 кайтадан дайындау кажет. Б1ркелк1л1кт1 камтамасыз ету yiuin суйык улплерд1 жаксылап араластыру кажет. Егер унтак тэр1здес улпнш йркелмлт белпаз болса. унтак 61ркелю емес екендт болжанады жэне 6.1.1.3 тармакта керсеплген бойынша б1ркелм емес унтак тэр1здсс улплер / кургак коспалардан унтак тэр1здес улплсрд1 дайындау басталады.

6.1.1.2    Суйык улНлер

Пайдалануга дайын эр суйык улпешен 0.0001 г дейшп дэлдшке ие ошмнш (0,50 ± 0,05) бастап (5,0 ± 0.5) г дейшп дэл елшенш алынады. Жэне 100 мл сыйымдылыктагы олшеутш жумыр шыныга ауыстырады.

6.1.1.3    Кургак коспалардан унтак тэр1здес улплер

Кургак коспалардан / (мркелм емес унтак тэр1здес улплерден унтак тэр1здес улплер yiuin колдану жоншдеп нускаулыкта керсеплген шараларды устану кажет. 0,0001 г дейшп дэлдшке ие калпы келлршген ежмнш 0,5 бастап 5,0 г дейшп дэл елшешм алынады. Жэне 100 мл сыйымдылыктагы елшеутш жумыр шыныга ауыстырады.

6.1.1.4    Сулы коспалардан унтак тэр1здсс улплер

Сатылымдагы лайыкгы ошм мысалы. Осы акпараг осы стандарта пайдаланушылардыц ыцгайлылыиа упин келпрпген жэне осы ohimhih ISO макулдангвны ту рал ы растама болын табылмайлы. Балама етмдер олар сол нэтижеге алии кслстииип корссплген жаглайда катланыла алады

*’ J.T. Baker P/N 7086-07 (w\v\v.avantormatcrials.com) сагылымлагы лайык OHiMiiiu мысалы белый табылалы. Осы акнарат осы станлартты пайлаланушылардыц ыцгайлылыгы унпн Kc.mpi.nvn жэне осы oiiiMiiiii ISO макулдашаны туралы растима болын табылмайды. Валама отмлер шар сол нэтижае алып келетшднт корсет 1л ген жаглайда колданыла алады.

Сулы коспаларлан / 61ркелю у итак тэр1здес улплерден у итак Tapi злее улплер уипн 0,0001 г дешнп дэлджке не унтактын 0,25 бастап 1,50 г дешнп дэл елшеши алынады. Жэне 100 мл сыйымдылыктагы елшеу1ш жумыр шыныга ауыстырады 6лшеу1ш жумыр шыныга 10 бастап 15 мл дейт су косылады жэне унтак толык epireHre дешн араластырылады.

6.1.2    Алу

УлпнщpH денгешн (4,5 ± 0,2) дешн жетмзу ymin эр улпге 0,5 % туз кышкылынын (4.2.5 карау) кажетп мелшерж косады жэне араластыру ymin былгайды.

Улплердщ 0,5 % хлор-сутелтмен 2 мин реакцпяга ту су in камтамасыз етеди кеГнн кажетп келемге дешн сумей таратады. Жаксылап араластырады Улплерд1 сузпш кагаз аркылы (6.15 карау) сэйкес шыны ьшыс немесе 125 мл сыйымдылыктагы конустык жумыр шыныга сузед1.

Ескертпе - Ксйбф улплер суп лен кейш булыцшр болиды. сузпген ертидыср.ц колдануга бодали.

¥сак TeciK влшем1 0,45 мкм (6.14 карау) шприцп сузп аркылы сузмген улп аликвотасын автоматты сынап сурыптагыш кутысына сузедг

6.2    Фосфатиднлинознтол туршдеп банланыекан мно-ннозитол

6.2.1    Улплерш дайындау

6.2.1.1    Жалпы ережелер

Жабык контейнерлерде 1 °С бастап 8 °С дешнп температурада туракты сакталатын дайындалган улплер 5 кун шпнде туракты болады. 5 кун еткеннсн кеГпн улплерд1 кайтадан дайындау кажет. Мукият араластырады жэне ешмдерш сынама сурыпталганга дешн шайкайды Б1ркелкшкл камтамасыз ету ymin суйык улплерд1 жаксылап араластыру кажет. Егер унтак тэр1здес улпшн б1ркелкшп белпаз болса, у итак б|ркелм емес екендт болжанады жэне 7.1.1.3 тармакта керссплген бойынша б1ркслм емес унтак гэр1здсс улплер / кургак коспалардан унтак тэр1здес улплерд1 дайындау басталады.

6.2.1.2    Суйык улплер

Пайдалануга дайын эр суйык улпешен ошмшн (4,0 ± 0,4) г дэл влшенд1а 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупкке алынады жэне 0,0001 г дешнп дэлджке не массасы жазылады.

6.2.1.3    Кургак коспалардан унтак тэр1здес улплер

Кургак коспалардан / б1ркелкл емес унтак тэр1здес улплерден унтак тэр1здес улплер ymin колдану жошндеп нускаулыкта корсеплген шараларды устану кажет. Калпына келпришен ешмнщ (4,0 ± 0,4) г дэл eлшcндici 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупкке алынады. 0,0001 г дешнп дэлд1кке не массасы жазылады.

6.2.1    4 Сулы коспалардан унтак тэр1здес улплер

Сулы коспалардан / б1ркелкч унтак тэр1здес улплерден унтак тэр1здес улплер ушш унтактын (1,0 ± 0,1) г дэл елшенд1а 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупкке алынады жэне 0,0001 г дешнп дэлджке ие массасы жазылады. Центрифуга тупкке 4 мл су косылады жэне жаксы араластырылады

6.2.2    Алу

Соргыш шкафта эр улпге 10 мл метанол косылады жэне 20 мин араластырылады немесе 1 мин шайкалады жэне 20 мин улплердщ meryi камтамасыз епледг 20 мл хлороформ косылады жэне 5 мин араластырылады немесе 1 мин шайкалады жэне 5 мин улплердщ meryi камтамасыз епледг Егер хлороформды коскан кезде улкен уйыскан тузшее, тутжп жабады жэне улпш араластыру ymin I мин жаксылап шайкайды. 5 мл 6% метафосфорлы кышкыл (4.2.9 карау) мен 1 моль/л шогырланган 1 мл NaCI (4.2.6 карау) косылады жэне жаксы араластырылады. Кабаггары белтгенге дешн центрифугалайды. Тот баспайын ннел1 25 мл сыйымдылыктагы газ етклзбейтж шыны шприц кемепмен (6.21 карау) хлороформный теменп кабатын 50 мл сыйымдылыктагы таза центрифуга тупкке

ауыстырады жэне хлороформды 60 °С температурада су моншасында азотпен буга айналдырады.

6.2.3    Тазарту

Соргыш шкафта 6 мл гсксаннын 1 г оксидп SPE картридж кремний (6.20 карау) онделедг Центрифуга тупкпн тубждегт шопндпп 1 мл хлороформ мен метанол коспасында (2:1) ерНедг Ертлген калдыкты енделген кремний окешгп SPE картриджге мелшерл1 ауыстырады. 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупкп 3 мл гексан мен днэтнл эфир (80:20) коспасымен жуады жэне SPE картриджге ауыстырады. Аластаушыны пайдага асырады. 50 мл сыйымдылы(аагы центрифуга тупкп 3 мл гексан мен диэтил эфир (50:50) коспасымен жуады жэне SPE картриджге ауыстырады. Аластаушыны 50 мл сыйымдылыктагы таза центрифуга тупкке жинайды. 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупктт 4 мл метанол мен жуады жэне SPE картриджге ауыстырады. Аластаушыны сол 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупкке жинайды. 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупктт 4 мл метанол мен хлороформ, су (75:15:10) коспасымен жуады жэне SPE картриджге ауыстырады. Аластаушыны сол 50 мл сыйымдылыктагы центрифуга тупкке жинайды. SPE картриджде жиналган аластаушыны азотпен 60 °С температурада су моншасында буга айналдырады

6.2.4    Гидролиз

Соргы шкафта 40 мкл суык алтш кышкыл (4.1.1 карау) мен 2 мл шогырланган туз кышкылын (4.1.7 карау) центрифуга тупкгеп тазарту сатысындагы улпден калган калдыкка косады. Тупкп тыгыз жабады. Пешп 120 °С температурада 2 сагат 1ш1нде кыздырады. Суытады. 10 мл шамасында су косады жэне араластыру уиин шайкайды. 1,25 мл 50 % (масс./масс.) натрий гидроксидш (4.1.12 карау) косады. Улпж 50 мл сыйымдылыктагы елшеу1ш жумыр шыныга салады жэне сумей кажетп колемге дежи ерггедг Суз1лген улпнщ алнквотасын 0,45 мкм бос аралы шприцтт сузп аркылы автоматты сынама сурыптагыш туппне сузедг

6.3 HPLC ’талдау

7.3.1 Аспаптарды пайдалану шарттары 1 соргы шект1 кысым 1 соргы козгалмалы фаза

1    соргы агын жылдамдыгы

2    соргы шекп кысым

2 соргы козгалмалы фаза 2 соргы агын жылдамдыгы Енпзтепн колем Мно-инозитол устау уакыты 11 бастап 13 мин дейш Жумыс уакыты    25    мин

Ауыстырмалы какпактын конфигурациялау уакыты: 0,00 мин 1 конфигурация (1-cyperri карау)

1.50    мин 2 конфигурация (2-суретп карау)

13.50    мин 1 конфигурация (1-суретп карау)

Шартты белплеулер:

1    - 1 соргы;

2    - корганыс баганы PAI;

3-2 соргы;

4    - калдык;

5    - корганыс жэне талдамалы багандар МАI;

6    - электрохимнялык детектор.

1-сурет. I ауыстмрчалм какпак конфнгурацнясы

Шартгы белплеулер:

1    - 1 соргы

2    - корганыс баганы РА1 3-2 соргы

4    - калдык

5    - корганыс жэне талдамалы багандар МА1

6    - электрохимнялык детектор

2-сурет. 2 ауыстырмалм какпак конфнгурацнясы

6.3.2 алтын электродты PAD параметрлер1