ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ПРИРОДОПОЛЬЗОВАНИЯ

УТВЕРЖДАЮ

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВОД

МЕТОДИКА ИЗМЕРЕНИЙ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ АЛЬДЕГИДОВ В ПИТЬЕВЫХ И ПРИРОДНЫХ ВОДАХ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

ЦНДФ 14.2:4.227-2006

Методика допущена для целей государственного экологического контроля

МОСКВА (издание 2011 г.)

Методика рассмотрена и одобрена федеральным бюджетным учреждением «Федеральный центр анализа и оценки техногенного воздействия (ФБУ «ФЦАО»).

Настоящее издание методики действует до выхода нового издания.

Главный инженер ФБУ «ФЦАО», к.х.н.

Регистрационный код МВИ в Федеральном реестре: ФР. 1.31.2013.13910

Разработчик:

Аналитический центр ЗАО «РОСА»

Адрес: 119297, г. Москва, ул. Родниковая, д. 7, стр 35. Телефон: (495) 502-44-22 Телефон/факс: (495) 439-52-13 Электронный адрес: quality@rossalab.ru Адрес сайта: www.rossalab.ru

9. ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ

При измерении массовых концентраций формальдегида и ацетальдег ида выполняют следующие операции.

9.1.    Подготовка реактивов

9.1.1.    Приготовление раствора натрия гидроокиси с молярной концентрацией 0.1 моль/дм . В мерную колбу вместимостью 500 см³, содержащую 200-300 см³ деионизированной воды, помещают 2,0 г гидроксида натрия, перемешивая стеклянной палочкой до полного растворения. После остывания доводят объем раствора до 500 см³ деионизированной водой. Раствор хранят не более 6 месяцев.

9.1.2.    Проверка чистоты метилена хлористого. Проверку чистоты метилена хлористого осуществляют хроматографическим методом. Для этого 10 см³ метилена хлористого помещают в колбу ротационного испарителя вместимостью 100-150 см³ и упаривают досуха при 50-60 °С. По окончании упаривания к сухому остатку добавляют 1 см³ ацетонитрила и оставляют на 5-10 мин в колбе для растворения остатка. Затем раствор переливают во флакон вместимостью 2 см³, герметично закрывают и анализируют в условиях хроматографирования пробы. На хроматограмме не должны присутствовать пики, мешающие определению формальдегида и ацетальдегида. При необходимости дополнительной очистки метилена хлористого в лаборатории его перегоняют с помощью установки (см. п. 3.2.9). отбрасывая первую и последнюю порцию отгона.

Примечание: Рекомендуется проводить проверку чистоты каждой парши хлористого метилена. Допускается осуществлять контроль нс каждой парши растворителя, а периодически, в случае поступления хлористого метилена от проверенного надежною поставщика.

9.1.3.    Приготовление раствора 2.4-динитрофенилгидршина с массовой концентрацией Змг/см³. В колбу вместимостью 500 см³, содержащую 200-300 см³ ацетонитрила, вносят 2,25 г 2,4-динитрофенилгидразина гидрата, растворяют и доводят объем раствора до метки ацетонитрилом. Раствор хранят не более 6 месяцев в холодильнике при температуре 2-10 °С.

9.1.4.    Приготовление раствора калия фталевокислого с молярной концентрацией 0.1 моль/дм³. Вскрывают ампулу со стандарт-титром и переносят ее содержимое в колбу вместимостью 500 см³, в которую предварительно наливают 200-300 см³ деионизированной воды. После растворения фталевокислого калия доводят объем раствора до метки деионизированной водой. Раствор хранят не более 3 месяцев в холодильнике при температуре 2-10 °С.

9.1.5 Приготовление фталатного буфера. В колбу вместимостью 1000 см³ помещают 500 см³ раствора калия фтал с во кислого (0,1 моль/дм³), добавляют 180 см³ раствора натрия гидроокиси (см. п. 9.1.1) и после перемешивания доводят объем раствора до метки деионизированной водой (см. п. 3.4.2.). Далее содержимое колбы переливают в стакан, кладут в стакан магнитную мешалку и при перемешивании проводят измерения pH, которое должно быть равно (5,0±0,5) ед. pH. Если значение pH менее 4,5 ед. pH, то в стакан но каплям добавляют раствор гидроксида натрия с концентрацией 0,1 моль/дм³ и доводят pH буфера до нужного значения. Раствор хранят не более 3 месяцев в холодильнике при температуре (2-10) °С.

9.2.    Подготовка аппаратуры

Хроматографическую систему выводят на режим в соответствии с условиями, указанными в п. 8.1. На компьютере в программе управления активируют метод анализа.

9.3.    Подготовка пробы

Отмеряют мензуркой 0,5 дм³ пробы воды и пипеткой добавляют 20 см³ фталатного буфера. С помощью индикаторной бумаги проверяют значение pH и при необходимости к пробе добавляют дополнительное количество фталатного буфера до тех пор, пока pH пробы не достигнет нужного значения (5,0±0,5) ед. pH.

Содержимое мензурки переносят в круглодонную колбу вместимостью 1 дм³, пипеткой добавляют 5 см³ раствора 2,4-динитрофенил гидразина и помещают колбу в водяную баню ротационного испарителя (термостат ротационного испарителя предварительно должен быть нагрет до 50 - 55 °С). Включают перемешивающее устройство ротационного испарителя (10-30 оборотов в минуту) и проводят реакцию с 2,4-динитрофенилгидразином при 50 - 55 °С в течение 1 часа. (Вакуумный насос ротационного испарителя на этой стадии не используют).

Затем содержимое круглодонной колбы переносят в делительную воронку вместимостью 1 дм³, после охлаждения до комнатной температуры добавляют цилиндром 60 см³ метилена хлористого и 30-40 г хлористого натрия, закрывают воронку притертой пробкой, несколько раз интенсивно встряхивают, открывая периодически кран воронки, чтобы выпустить пары метилена хлористого. Делительную воронку устанавливают в кольцо шюттель-аппарата, закрепляют держателем и включают шюттель-аипарат на 20 мин со скоростью 60-80 встряхиваний в минуту. После остановки шюттель-ап парата делительную воронку оставляют в покое до полного разделения слоев (10-15 мин). Экстракт пропускают через коническую воронку заполненную на 1,5 - 2 см безводным сульфатом натрия. Экстракт собирают в грушевидную колбу 10

вместимостью 100 см³. Сульфат натрия промывают 5-10 см³ метилена хлористого, смыв добавляют в экстракт.

Упаривание экстракта проводят на ротационном испарителе при температуре 50 - 55 °С под вакуумом, создаваемым водоструйным насосом. (Скорость вращения ротационного испарителя 10-30 оборотов в минуту). Экстракт упаривают досуха. По окончании упаривания к сухому остатку добавляют 1 см³ ацетонитрила и оставляют на 5 - 10 мин в колбе для растворения продуктов реакции. Затем экстракт переливают во флакон вместимостью 2 см³ и герметично закрывают.

9.4. Проведение измерений

Полученные экстракты хроматографируют в тот же день. В случае невозможности немедленного проведения анализа экстракты хранят в герметично закрытой посуде в морозильной камере при температуре минус (12-24) °С не более месяца. Экстракты, хранившиеся в морозильной камере, перед анализом выдерживают при комнатной температуре не менее 20 минут.

Продукты взаимодействия формальдегида и ацетальдегида с 2,4-дин итрофен ил гидразином идентифицируют по абсолютным временам удерживания в соответствии с градуировкой (см. п. 8.3). В случае, когда массовая концентрация определяемого соединения в пробе выше, чем максимальная массовая концентрация в градуировочном растворе, экстракт следует разбавить ацетонитрилом и провести хроматографический анализ разбавленного экстракта. При вычислении результатов измерений необходимо учесть степень разбавления.

При наличии детектора с диодной матрицей правильность определения обнаруженного соединения подтверждают идентификацией пиков по УФ-спектрам (см. Приложение 3).

При смене реактивов проводят анализ холостой пробы. Для этого 500 см³ деионизированной воды (см. н. 3.4.2.) подвергают процедуре подготовки пробы по п. 9.3. и выполняют измерение по п. 9.4. Содержание формальдегида или ацетальдегида в холостой пробе не должно превышать нижний предел измерения соответствующего соединения.

10. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

Обработку результатов измерений массовых концентраций формальдегида и ацетальдегида выполняют с помощью управляющей программы компьютера в соответствии с градуировочной характеристикой по формуле:

(S-b)

X =_ .

А

где X содержание определяемого соединения в пробе, мг/дм³:

S - площадь пика определяемого соединения в анализируемом экстракте, мВ*с;

А - относительный градуировочный коэффициент, мВ*с*дм³/мг (см. п. 8.3);

b - площадь пика определяемого соединения в холостой пробе, мВ*с.

11. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

11.1.    Результаты количественного анализа в протоколе представляют в виде:

X ± Д, ,

где Д - значение показателя точности, мг/дм³, Р = 0,95.

Значение Д рассчитывают по формуле Д = 5 * 0,01 * X,

где б - относительная погрешность измерения (см. табл. 1).

11.2.    Результаты измерений при занесении в протокол анализа округляют с точностью до:

при массовой концентрации от 0,002 мг/дм’ до 0,01 мг/дм¹ -0,0001 мг/дм³;

свыше 0,01 мг/дм³ до 0,1 мг/дм³ -0,001 мг/дм³; свыше 0,1 мг/дм³ до 1,0 мг/дм³ -0,01 мг/дм³.

12. ОЦЕНКА ПРИЕМЛЕМОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

12.1 При получении двух результатов измерений (Х_ь Х₂) в условиях повторяемости (сходимости) осуществляют проверку приемлемости результатов в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725 (часть 6, раздел 5.2.).

Результат измерений считают приемлемым при выполнении условия:

х, + х,

Значения г приведены в таблице 4.

12.2 При получении результатов измерений в двух лабораториях (Хд»! Х_ла62) проводят проверку приемлемости результатов измерении в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725 (часть 6, раздел 5.3).

Результат измерений считают приемлемым при выполнении условия:

< R

Значения R приведены в таблице 4.

13.КОНТРОЛЬ ТОЧНОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

13.1. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

- Контроль стабильности результатов измерений путем контроля стабильности среднеквадратического отклонения повторяемости, среднеквадратнческого отклонения промежуточной прецизионности и погрешности в соответствии с рекомендациями ГОСТ Р ИСО 5725 (часть 6) (образец для контроля готовят с использованием ГСО или соединений гарантированной чистоты). Периодичность контроля регламентируют во внутренних документах лаборатории.

-Оперативный контроль процедуры измерения путем оценки погрешности (при необходимости), например, с использованием образцов для контроля (см. и. 13.2).

13.2 Оперативный контроль процедуры измерений с применением образцов для контроля

В качестве образцов для контроля используют образец, приготовленный с использованием ГСО или вещества гарантированной чистоты.

Оперативный контроль процедуры измерений проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры Кк с нормативом контроля К

Результат контрольной процеду ры Кк рассчитывают по формуле:

к„=7х-с|,

где X - результат контрольного измерения массовой концентрации

вещества в образце для контроля;

С - аттестованное значение определяемого компонента в образце для контроля.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К “ Д_л,

где Д_л - характеристика погрешности аттестованного значения вещества в образце для контроля, установленная в лаборатории при реализации методики

Примечание: На первом )тапе проведения контроля после внедрения методики допускается считать Д, - 0,84 Д . где А приписанная характеристика погрешности методики, которую рассчитывают по формуле

А = 0.01 хС хд

Значения д приведены в таблице I.

Качество контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении условия:

К* <К

При невыполнении условия контроль повторяют. При повторном невыполнении условия выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам.

Таблица*! - Пределы повторяемости и воспроизводимости результатов измерений

Диапазон измерений, мг/дм3 Предел повторяемое!н (для двух результатов измерений при Р=0,95), г,% Предел воспроизводимости (для двух результатов измерений при Р=0,95), R, % Формальдегид От 0,002 до 0,005 вкл. 34 50 Св 0,005 до 0,025 вкл. 28 42 Св 0,025 до 0,1 вкл. 20 31 Ацетальдегид От 0,005 до 0,01 вкл. 48 63 Св 0,01 до 0,1 вкл. 34 56 Св 0,1 до 0,25 вкл 31 38

ПРИЛОЖЕНИЕ 2

Пример типичной хроматограммы продуктов взаимодействии формальдегида (1) и ацетальдегида (2) с 2,4-диннтрофенилгидразином*

'Массовая концентрация формальдегида и ацетальдегида составляла 0,005 мг/дм³. Раствор приготовлен с использованием минеральной воды «Evian».

ПРИЛОЖЕНИЕ 3

Спектры поглощения продуктов взаимодействии формальдегида (1) и ацетальдегида (2) с 2,4-динитро фенил гидразином

Настоящий документ устанавливает методику измерений массовых концентраций формальдегида в диапазоне 0,002-0,1 мг/дм³ и ацетальдегида в диапазоне 0,005-0,25 мг/дм³ в питьевых водах (в том числе расфасованных в емкости) и природных водах (в том числе в поверхностных и подземных источниках питьевого водоснабжения).

Продолжительность анализа одной пробы не менее 3-х часов.

Блок-схема анализа приведена в Приложении 1.

1. ПРИПИСАННЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ТОЧНОСТИ ИЗМЕРЕНИЙ

Настоящая методика обеспечивает получение результатов анализа с погрешностями, не превышающими значений, приведенных в таблице 1.

Таблица!- Диапазоны измерений, значения показателей точности, правильности, повторяемости и воспроизводимости методики при доверительной вероятности Р=0,95

Диапазоны измерений, мг/дм* Показатель повторяемости (стандартное отклонение повторяемости), а,,% Показатель воспроизво димоегк, (стандартное отклонение военном(видимо стн) aR,% Показатель правильное ти (границы относительной сиоематмнеско й погрешности при Р>*.95), ± 5о % Показатель точности (< раиииы оти ос нт ел ьмо 6 нос реши ости при Pc«.9S). ±$,% Формальдегид от 0,002 до 0,005 вкл. 12 18 11 37 св. 0,005 до 0,025 вкл. 10 15 8 30 св. 0,025 до 0,1 вкл. 7 11 7 23 Ацетальдегид от 0,005 до 0,01 вкл. 17 22.5 8 45 св. 0.01 до 0.1 вкл. 12 20 7 40 св. 0.1 до 0,25 вкл. 11 __ 5 27

2. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ

Метод измерения массовых концентраций формальдегида и ацетальдегида основан на взаимодействии этих соединений с 2,4-динитрофенилгидразином, экстракции полученных продуктов реакции хлористым метиленом, упаривании экстракта на ротационном испарителе и анализе экстракта методом ВЭЖХ с УФ-детектором.

Массовую концентрацию вещества в пробе рассчитывают с использованием градуировочной характеристики, описывающей зависимость площади хроматографического пика от содержания вещества в градуировочном растворе.

3. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ. ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА. РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы:

3.1.    Средства измерений

3.1.1.    Хроматографическая система, например, «Series 200» фирмы «Perkin Elmer» (США) или хроматографическая система «Agilent 1100» фирмы «Agilent Technologies» (США) в комплекте:

-    Насос высокого давления на 2 или 4 элюента.

-    Детектор на диодной матрице или УФ-детектор.

Устройство для автоматического отбора и ввода проб (автосэмплер), позволяющее вводить 10-30 мм³ пробы.

-    Колонка хроматографическая металлическая с фазой на основе силикагеля с привитыми группами С18 размером 150x4,6 мм, зернением 5 мкм, например, «Hypersil Green РАН» фирмы «Shandon HPLC» (США).

Допускается использовать хроматограф любой другой марки, позволяющий проводить хроматографический анализ в условиях, приведенных в п. 8.1, с необходимой чувствительностью.

3.1.2. Весы лабораторные с максимальной нагрузкой 200 г 2 класса точности по ГОСТ Р 53228.

3.1.3.    Колбы мерные вместимостью 10, 500 и 1000 см³ по ГОСТ 1770, класс точности 2.

3.1.4.    Мензурки вместимостью 250 и 500 см³ по ГОСТ 1770, класс точности 2.

3.1.5.    Микрошприцы вместимостью 0,010, 0,025, 0,050, 0,25, 0,50 и 1 см³, например, фирмы «Hamilton».

3.1.6.    Пипетки градуированные вместимостью 2, 5 и 20 см³ по ГОСТ 29227, класс точности 2.

3.1.7.    pH-метр с магнитной мешалкой, например, pH 673М.

3.1.8.    Цилиндр мерный вместимостью 100 см³ по ГОСТ 1770.

3.1.9.    Стандартный образец формальдегида (ГСО) в виде раствора в воде с массовой концентрацией 1 мг/см³ с относительной погрешностью аттестованного значения не более 4 %.

3.1.10.    Ацетальдегид гарантированной чистоты с содержанием основного вещества не менее 98 %, например, фирмы «Dr.Ehrenstorfer» или любой другой.

Допускается использовать другие средства измерения, метрологические характеристики которых не хуже, чем у вышеуказанных.

3.2. Вспомогательные устройства

3.2.1. Воронки для фильтрования В-75-110 ХС по ГОСТ 25336.

3.2.2.    Установка для получения деионизированной воды 2 степени чистоты по ГОСТ Р 52501, например, «Millipore Elix 3».

Примечание: Для получения деионизированной воды необходимого качества рекомендуется использовать устройство для дополнительной очистки воды.

3.2.3.    Воронки делительные ВД-3 1000 29/32 по ГОСТ 8613.

3.2.4.    Колбы грушевидные со шлифом вместимостью 100 см* по ГОСТ 25336.

3.2.5.    Колбы круглодонные с притертыми пробками вместимостью I дм⁵ по ГОСТ 25336.

3.2.6.    Компьютер персональный, позволяющий работать с программным обеспечением для управления хроматографом, сбора информации и обработки результатов.

3.2.7.    Принтер любой марки.

3.2.8. Ротационный испаритель, позволяющий регулировать температуру водяной бани (от 30 до 100 °С) и скорость вращения колбы для упаривания, снабженный водоструйным насосом для создания умеренного вакуума, например, «Rotavapor 114» фирмы «Buchi» (Германия) или любой другой.

3.2.9. Установка для перегонки органических растворителей (хлористого метилена), состоящая из круглодонной колбы, дефлегматора, прямого холодильника, приемной колбы, алонжа и водяной бани или колбонагрсвателя с температурой нагрева от 40 до 80 °С, снабженных регулятором температуры.

3.2.10.    Устройство для встряхивания емкостей с жидкостью любого типа, например, шюттель-аппарат на 5 мест для делительных воронок вместимостью 1 дм¹ фирмы «Agitelcc», каталог «Fisher Lab».

3.2.11.    Флаконы стеклянные, герметично закрывающиеся с завинчивающимися крышками вместимостью 1,5-2 см³ и 5-7 см³, снабженные прокладками с тефлоновым покрытием.

3.2.12.    Форколонка с картриджем размером 15x3,2 мм с сорбентом на основе силикагеля с привитыми группами С18, зернением 7 мкм, например, фирмы «Perkin Elmer».

3.2.13.    Холодильник двухкамерный бытовой, обеспечивающий температуру холодильной камеры (2-10) °С и морозильной камеры минус (12-24) °С.

3.2.14.    Стакан вместимостью 1 дм* по ГОСТ 25336.

3.2.15.    Вакуумный дегазатор для дегазирования элюентов.

Допускается использовать вспомогательные устройства любой другой марки, имеющие технические характеристики не хуже, чем у вышеуказанных.

3.3. Материалы

3.3.1.    Бумага индикаторная универсальная, позволяющая измерять pi 1 в диапазоне от 4 до 6 ед. pH с шагом 0,5 ед. pH.

3.3.2.    Вата медицинская хирургическая хлопковая по ГОСТ 5556.

3.4. Реактивы

3.4.1.    Ацетонитрил для градиентной хроматографии, например, фирмы «Мегск» или «Acros».

3.4.2.    Вода деионизированная (по ГОСТ Р 52501 2 степени чистоты) с содержанием формальдегида не более 1,5 мкг/дм³ и ацетальдегида не более 4 мкг/дм³.

Примечание: Для приготовления растворов допускается использовать воду питьевую расфасованную в емкости из подземных источников, не содержащую формальдегид и ацетальдегид, например, минеральную воду «Evian» (Франция).

3.4.3.    2,4-динитрофенилгидразин гидрат, с содержанием основного вещества не менее 98%, например, фирмы «Merck» или «Acros».

3.4.4.    Калий фталевокислый (КС₈Н₅0₄), стандарт-ттр 0,05 моль/дм³ (pH-4,01) по ГОСТ 8.135.

3.4.5.    Метилен хлористый, х.ч. по ТУ 6-09-2662.

3.4.6.    Натрий гидроокись, ч. по ГОСТ 4328.

3.4.7.    Натрий серноватистокислый (натрия тиосульфат), ч.д.а. по ГОСТ 27086.

3.4.8.    Натрий сернокислый (натрия сульфат, Na₂S0₄) безводный,

ч.д.а. по ГОСТ 4166.

3.4.9.    Натрий хлористый (натрия хлорид), х.ч. по ГОСТ 4233.

3.4.10.    Метанол для жидкостной хроматографии по ТУ 6-09-14-2192 или для спектроскопии, например, фирмы «Merck» (Германия).

Допускается использовать реактивы других производителей при условии, что их квазификация не хуже, чем у вышеуказанных.

4. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ, ОХРАНЫ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

4.1.    При выполнении анализов необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

4.2.    При работе с оборудованием необходимо соблюдать правила электробезопасности по ГОСТ Р 12.1.019.

4.3.    Обучение работающих безопасности труда должно быть организовано в соответствии с ГОСТ 12.0.004.

4.4.    Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

5. ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРА

К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц, имеющих квазификацию инженера или техника-химика, владеющих методом хроматографического анализа, знающих конструкцию, принцип действия и правила эксплуатации данного оборудования.

К выполнению работ по пробоподготовке допускают лиц, имеющих квалификацию техника-химика или лаборанта-химика, обученных методике подготовки пробы для хроматографического анализа.

6. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

температура воздуха    (20 - 28)°С

относительная влажность воздуха    не более 80 % при 25°С

частота переменного тока    (50±1) Гц

напряжение в сети    (220±22) В

7. ОТБОР И ХРАНЕНИЕ ПРОБ ВОДЫ

7.1.    Отбор проб воды осуществляют в соответствии с ГОСТ Р 51592 «Вода. Общие требования к отбору проб» и ГОСТ Р 51593 «Вода питьевая. Отбор проб» в стеклянные герметично закупоривающиеся флаконы из темного стекла с притертыми пробками или с крышками из полипропилена (недопустимо использовать крышки, изготовленные из феноло-формальдегидных смол). Флаконы заполняют пробой воды до пробки. Объем отбираемой пробы должен быть нс менее 0,5 дм³.

7.2.    Отобранную пробу анализируют в течение суток, если такой возможности нет, то пробу хранят в холодильнике при температуре от 2 до 10 °С не более 3-х суток. Пробу питьевой воды, содержащую остаточный хлор, консервируют на месте отбора, добавляя тиосульфат натрия из расчета 100 мг на 1 дм³ пробы.

7.3.    При отборе проб составляется сопроводительный документ по утвержденной форме, в котором указывается:

-    место, время и дата отбора;

-    определяемый показатель;

-    шифр пробы;

-    должность, фамилия отбирающего пробу.

8. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ

8.1. Подготовка аппаратуры

Подготовку хроматографической системы и компьютера к работе проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации. На компьютере в программе управления создают метод анализа с использованием абсолютной градуировки согласно руководству по эксплуатации программного обеспечения. В качестве элюентов используют элюент А и элюент В, которые представляют собой, соответственно, деионизированную воду и ацетонитрил.

Для удаления растворенных газов (кислорода и др.) из растворителей применяют вакуумный дегазатор.

Ввод пробы в колонку осуществляют с помощью автоматического пробоотборника.

Хроматографическую систему включают в соответствии с инструкцией по эксплуатации и выводят на режим при следующих условиях.

Рекомендуемые параметры работы хромато1рафической системы: Объем вводимой пробы    10 мм³

Скорость элюирования    1,1 см³/мин

Регистрация поглощения производится на длине волны 356 нм при ширине спектральной полосы 4 нм.

Хроматографирование проводится в градиентном режиме по программе, описанной в табл. 2.

Т а б л и ц а 2 - Программа работы градиентного насоса

Время от начала измерения, мин А (вода), % В (ацетонитрил), % 0 50 50 7 40-30 CS 0 1 о 9 0 100 11 0 100

8.2. Приготовление градуировочных растворов В качестве основного градуировочного раствора формальдегида используют ГСО с массовой концентрацией 1 г/дм³ формальдегида в воде (п. 3.1.9).

Промежуточный градуировочный раствор формальдегида в воде с массовой концентрацией 100 мкг/см³ готовят из ГСО. Для этого 1 см³ ГСО помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³ и доводят объем раствора до метки деионизированной водой (см. п. 3.4.2.).

ГСО состава раствора формальдегида после вскрытия ампулы хранят нс более 3 месяцев в холодильнике при температуре 2-10 °С в герметично закрытом флаконе.

Промежуточный градуировочный раствор формальдегида хранят нс более 3 месяцев в холодильнике при температуре 2-10 °С в герметично закрытой колбе. Перед использованием раствор выдерживают при комнатной темперазуре не менее 20 минут.

Основной градуировочный раствор ацетальдегида в метаноле с массовой концентрацией 1 мг/см³ готовят из чистого вещества. Для этого 10 мг ацетальдегида помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³ и доводят объем раствора до метки метанолом.

Промежуточный градуировочный раствор ацетальдегида в метаноле с массовой концентрацией 100 мкг/см³ готовят из основного градуировочного раствора с массовой концентрацией 1 мг/см³. Для этого 1 см³ основного градуировочного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 см³ и доводят объем раствора до метки метанолом.

Основной и промежуточный градуировочные растворы ацетальдегида хранят не более 3 месяцев в морозильной камере холодильника при температуре минус (12-24) °С в герметично закрытой колбе. Перед использованием раствор выдерживают при комнатной температуре нс менее 20 минут.

Градуировку хроматографа проводят по шести градуировочным растворам: Со, Ci, С2, Cj, С₄ и С₅. В качестве Q> используют холостую пробу, представляющую собой деионизированную воду (см. п. 3.4.2).

Градуировочные растворы формальдегида и ацетальдегида С|, С?, Су, С₄ и С5 (табл. 3) готовят непосредственно перед использованием из промежуточных градуировочных растворов. Для этого в мерные колбы вместимостью 500 см³, содержащие по 300^00 см³ деионизированной воды (см. п. 3.4.2.), помещают последовательно необходимые количества промежуточных растворов формальдегида и ацетальдегида (см. табл. 3) и доводят объемы растворов в колбах до метки деионизированной водой.

ТаблицаЗ - Приготовление градуировочных растворов формальдегида и ацетальдегида в мерных колбах вместимостью 500 см³

| Наименование соединении 1	Объем промежуточного градуировочного раствора. мм3					Массовая концентрация градуировочного раствора. мг/дм3
	V,	v2	v3	v4	Vs	с,		с>	С.	С,
; Формальдегид	10	25	50	250	500	0.0020	0.0050	0.010	0.050	0.10 !
! Ацетальдегид	25	50	250	500	1250	0.0050	0.010	0.050	0,10	0.25

Примечание: Допускается н качестве градуировочных растворов использовать растворы с другой массовой концентрацией с корректировкой схемы приготовления градуировочных растворов.

8.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировку хроматографа проводят в условиях выполнения измерений. При этом для каждого градуировочного раствора (см. табл. 3) и холостой пробы    (в    качестве    холостой пробы используется

деионизированная вода) проводят пробоподготовку (см п. 9.3.). Полученный экстракт хроматографируют в тот же день, если такой возможности нет, то экстракт (раствор, содержащий продукты взаимодействия формальдегида и ацетальдегида с 2,4-динитрофенилгидразином в ацетонитриле) хранят в морозильной камере при температуре минус (12-24) °С не более месяца. Перед измерением экстракт тщательно перемешивают. Экстракты, хранившиеся в морозильной камере, перед анализом необходимо выдержать при комнатной температуре не менее 20 минут.

В программе управления выбирают режим измерения факторов отклика по методу абсолютной градуировки.

Каждый экстракт градуировочного раствора и экстракт холостой пробы хроматографируют дважды при условиях, указанных в п. 8.1, рассчитывая среднее значение площади пика определяемого соединения (S.) для каждого из растворов. Затем с помощью программного модуля градуировки управляющей программы для каждого соединения устанавливают градуировочную характеристику (А,) с учетом площади пика определяемого соединения в холостой пробе. Полученное значение А, используют для расчета результата измерения.

Установление градуировочных характеристик проводят не реже одного раза в 6 месяцев, а также при смене хроматографической колонки или после ремонта оборудования, повлекшего за собой изменение условий хроматографирования.

Проверку стабильности градуировочных характеристик проводят для каждой серии проб по результатам анализа экстракта одного из градуировочных растворов. Градуировочную характеристику считают стабильной в случае, если измеренное значение отличается от аттестованного значения не более чем на 25 %, а время удерживания в градуировочном растворе отклоняется от установленною при градуировке времени удерживания не более чем на 0,2 мин.

Компоненты идентифицируют по абсолютным временам удерживания и, при наличии детектора с диодной матрицей, по спектрам поглощения (см. Приложение 3).

Пример типичной хроматограммы продуктов взаимодействия формальдегида и ацетальдегида с 2,4-динитрофенилгндразином представлен в Приложении 2.