Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пирафлуфен-этила в воде, почве, зерне и соломе хлебных злаков методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3266—15

Издание официальное

Москва • 2015

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пирафлуфен-этила в воде, почве, зерне и соломе хлебных злаков методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3266—15

ББК51.23

062

062 Определение остаточных количеств пирафлуфен-этила в воде, почве, зерне и соломе хлебных злаков методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—15 с.

ISBN 978—5—7508—1413—8

1.    Разработаны сотрудниками ФГБНУ Всероссийский НИИ защиты растений и ООО «Инновационный центр защиты растений» (В. И. Дол-женко, И. Л. Цибульская, А. С. Комарова, Т. Д. Чермснская, В. В. Чсловсч-кова, А. А. Далииова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 мая 2015 г. №» 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 9 июня 2015 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

ISBN 978—5—7508—1413—8

© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3266—15

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

9 июня 2015 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пирафлуфен-этила в воде, почве, зерне и соломе хлебных злаков методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3266—15

Свидетельство о метрологической аттестации № 01.5.04.190/ 01.00043/2015 от 12.02.2015.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения остаточных количеств пирафлуфен-этила в диапазоне: в воде - 0,001—0,01 мг/дм\ в почве и зерне - 0,01—0,1 мг/кг, в соломе - 0,05— 0,5 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Пирафл у фен-этил

Ethyl 2-chloro-5-(4-chloro-5-difluoromethoxy-1 -methylpyrazol-3-yl)-4-fluorophenoxyacetate (ИЮПАК).

Структурная формула: ¹

МУК 4.1.3266—15

Брутто формула: Q3H9CI2F3N2O4.

Молекулярная масса: 413,2.

Химически чистое вещество представляет собой белые кристаллы.

Температура плавления: 126,8 °С.

Давление пара при 25 °С: 4,3 х 10"* МПа.

Растворимость в воде: 0,082 мг/дм¹ (при 20 °С).

Растворимость в органических растворителях (г/дм¹, при 20 °С): ацетон - 175, метанол - 7,39, этилацетат - 108, ксилол - 43.

Стабильность к гидролизу: стабилен при pH 4, неустойчив при pH 7, DT50 = 13 дней, при pH 9 быстро разрушается.

Период полураспада в почве: DT₅₀ = от 0,5 до 4 дней.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD50 для млекопитающих для крыс > 5 000 мг/кг, острая дермальная токсичность LD₅₀ для млекопитающих превышает 2 000 мг/кг. Ингаляционная ЬС₅₀ для крыс более 5,03 мг/м¹. Оказывает раздражающее действие на кожу и слизистую глаз. Умеренно токсичен для пчел и почвенных червей.

Область применения препарата. Контактный гербицид; при попадании на растение легко проникает в ткани растения и в присутствии света вызывает быстрый некроз или высушивание стеблей и листьев.

Механизм действия. Ингибитор протопорфириноген-IX оксидазы.

Гигиенические нормативы для пирафлуфен-этила в России не установлены.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций. ²

МУК 4.2.3266—15

Таблица 1 Метрологические параметры

Объ ект анали за Диапазон опреде ляемых концен траций, мг/кг (мг/м3 мг/дм3) Показатель точности*’ (границы относительной погрешности (Р = 0,95), ±6,% Показатель повторяемости (относительное средне-квадратическое отклонение повторяемости), аг, % Показатель воспроизводимости (относительное средне-квадратическое отклонение воспроизводимости), Or, % Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), г, % Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), Я, % (Р = 0,95) Вода 0,001 — 0,01 23 7 11 20 31 Почва 0,01—0,1 24 9 12 25 34 Зерно 0,01—0,1 24 9 12 25 34 Солома 0,05—0,5 23 7 11 20 31

Таблица 2 Полнота извлечения иирафлуфен-этила, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, л = 20 предел количественного определения, мг/кг (мг/м3, мг/дм3) диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/м3, мг/дм3) полнота извлечения вещества, % стан дартное откло нение, % доверительный интервал среднего результата, ±, % Вода 0,001 0,001—0,01 88,8 3,65 5,12 Почва 0,01 0,01-0,1 87,0 3,39 4,75 Зерно 0,01 0,01—0,1 86,2 3,68 5,15 Солома 0,05 0,05—0,5 87,4 2,26 3,16

2. Метод измерений

Метод основан на определении пирафлуфен-этила методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора после его экстракции из образцов ацетонитрилом и очистки на патронах для твердофазной экстракции.

Идентификация иирафлуфен-этила проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

5

МУК 4.1.3266—15

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

5.7. Средства измерений Жидкостный хроматограф с быстроскани-рующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допускаемой погрешности 0,1 мг    ГОСТ

Весы технические с пределом взвешивания до 150 г и пределом допускаемой погрешности 0,1 г ГОСТ Колбы мерные на 10, 100 см³    ГОСТ

Микро дозаторы одноканальные переменного объема от 100 до 1 000 мм³ и от 1 до 5 см³ Цилиндры мерные на 50 и 100 см³    ГОСТ

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Ацетонитрил для ВЭЖХ

Вода для лабораторного анализа (бидистилли-

рованная. деионизованная)

Кислота ортофосфорная, хч Кислота уксусная, ледяная Натрий серно-кислый безводный, хч Натрий уксусно-кислый, ч Натрий хлористый, чда н-Гексан, хч

Пирафлуфен-этил с содержанием основного вещества 99,3 %

Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М Н3РО4 в соотношении 50 : 50 Смесь № 1: ацетонитрил-вода в соотношении

1    : 2 по объему

Смесь № 2: ацетонитрил-вода в соотношении

2    : 1 по объему

Смесь № 3: гексан-этилацетат в соотношении 4 : 1 по объему ³

МУК 4.2.3266—15

Смесь № 4: гсксан-этнпацетат в соотношении 2 : 1 по объему

Этилацетат, хч    ГОСТ 22300-76

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, полностью закрытыми и связанными этилен гибридными мостиками, (100 х 2,1) мм, 1,7 мкм Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 25 см³    ГОСТ    9737—93

Матроны для твердофазной экстракции: .Незаполненные гидрофильным слабокислотным сорбентом на основе силикагеля и № 2 - гидрофобным сорбентом с привитыми гексаде-

цильными группами, по 0,4 г    ТУ 4215-002-0545-931—94

Пробирки полипропиленовые центрифужные с

крышками объемом 50 см³

Ротационный вакуумный испаритель с

мембранным насосом, с пределом вакуума

до 10 мбар

Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 ООО об./мин Устройство перемешивающее (50—200 колебаний в минуту)    ТУ 4389-007-44330709—11

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по элсктробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф. ⁴

МУК 4.1.3266—15

4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по 1'ОСТ 12.1.004—91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать Г1ДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07.

Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

-    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

-    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.1. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1—0,2 см³/мин) до стабилизации нулевой линии.

7.2. Кондиционирование патронов

7.2.1. Кондиционирование патрона Ms 1 с гидрофобным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью

Патрон последовательно промывают 3 см³ смеси № 4, затем 3 см³ гексана.

7.2.2. Кондиционирование патрона № 2 с гидрофобным сорбентом с привитыми гексадецильными группами

Патрон промывают 3 см³ ацетонитрила, затем 3 см³ воды.

МУК 4.2.3266—15

7.3. Приготовление растворов

7.3.1.    0.005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 ±0,01) г 98 %-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.3.2.    Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 50 : 50 по объёму, используя мерные цилиндры.

7.4. Приготовление основного и градуировочных растворов

7.4.1.    Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/см³: точную навеску пирафлуфен-этила (50 ± 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

7.4.2.    Приготовление градуировочных растворов.

Градуировочные растворы с концентрациями пирафлуфен-этила

0,05; 0,1; ОД; 0,5 и 1,0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 43 : 57).

7.4.2.1.    Раствор № 1 с концентрацией 1,0 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,2 см³ основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.

7.4.2.2.    Раствор № 2 с концентрацией 0,5 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 5,0 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.4.2.3.    Раствор № 3 с концентрацией 0,2 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 2 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.4.2.4.    Раствор № 4 с концентрацией 0,1 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 1 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.4.2.5.    Раствор Ns 5 с концентрацией 0,05 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,5 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0—4 °С в течение 7 дней, градуировочные растворы использовать в день приготовления.

При изучении полноты определения пирафлуфен-этила используют ацетонитрильные растворы вещества, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом. ⁵

1

2

3

4

5