Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств циклоксидима в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, клубнях картофеля, горохе, семенах подсолнечника, рапса, бобах сои и растительном масле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1-3236—14

Издание официальное

Москва • 2015

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств циклоксидима в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, клубнях картофеля, горохе, семенах подсолнечника, рапса, бобах сои и растительном масле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3236—14

ББК 51.23 062

062 Определение остаточных количеств циклоксидима в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, клубнях картофеля, горохе, семенах подсолнечника, рапса, бобах сои и растительном масле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—16 с.

ISBN 978—5—7508—1399—5

1.    Разрабоганы сотрудниками ГНУ Всероссийского НИИ защиты растений Росссльхозакадемии (В. И. Должснко, И. А. Цибульская, С. К. Маслаков, В. Ф. Павлова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией но i-осударсгвснному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы но надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 6 ноября 2014 г. № 2).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 22 декабря 2014 г.

4.    Введены впервые.

ЬБК 51.23

Ответственный за выпуск Н. В. Митрохина

Редактор Н. В. Кожока Компьютерная вСрстка Е. В. Ломановой

Подписано в печать 15.12.15 Формат 60x88/16    Печ.    л.    1,0

Тираж 125 экз.    Заказ    79

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Банковский пер., д 18. стр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделением издательского обеспечения отдела научно-методического обеспечения Федерального центра !игиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Реализация печатных изданий, тел./факс: 8 (495) 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3236—14

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

22 декабря 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств цнклоксидима в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, клубнях картофеля, горохе, семенах подсолнечника, рапса, бобах сои и растительном масле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.3236—14_

Свидетельство о метрологической атгсстации №01.5.04.182/ 01.00043/2014.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации циклоксидима в диапазоне концентраций в воде - 0,005—0,05 мг/дм¹, почве - 0,1—1,0 мг/кг, бобах сои и ботве сахарной свеклы - 0,5—5,0 мг/кг, семенах подсолнечника, рапса и корнеплодах сахарной свеклы - 0,2—2,0 мг/кг, растительном масле -0,2—2,0 мг/дм¹.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Циклоксидим

2-[1-(этоксиимино)бутил]-3-гидрокси-5-(тетрагидро-2//-тиопропан-3-ил)-2-циклогексен-1 -он.

Сфуктурная формула:

Эмпирическая формула: C17H27NO3S.

Молекулярная масса: 325,46.

Белый кристаллический порошок без запаха.

Температура плавления: 37,1 °С.

Разлагается до кипения.

Температура разложения 200 °С.

Давление пара при 25 °С: 0,01 мПа.

Коэффициент распределения н-октанол-вода:    logP    = 1,36

Растворимость (в г/дм³ при 20 °С): вода - 0,053, гексан 29, ацетон

-    250, этанол - 810, этилацетат - 250.

Вещество неустойчиво. Период распада в почве ДТ50 - 4—15 дней, полевой ДТ₅₀- 1—5 дней.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD50 для крыс 3 940 мг/кг, острая дермальная токсичность LD50 для млекопитающих > 2 000 мг/кг, ингаляционная LD₅₀ для млекопитающих > 5 мг/кг. СК50 для рыб > 220 мг/л (96 ч), для пчел (LD50 > 100 мкг/особь).

Область применения препарата. 11ослевсходовый гербицид для применения на широколистных культурах (свекле, картофеле, масличных кулыурах, бобовых и других) для борьбы с одно- и многолетними травами.

Гигиенические нормативы для циклоксидима в России: ПДК в воздухе рабочей зоны 0,002 мг/м³ (среднесуточная), в воде 0,01 мг/л, почве

-    0,4 мг/кг. МДУ (мг/кг) - зернобобовые (в том числе горох и фасоль) -2,0; соя (бобы, масло) - 5,0; кукуруза (зерно, масло) - 0,2; подсолнечник (семена, масло) - 1,0; капуста (кочанная, цветная) - 2,0; морковь - 0,5; виноград - 0,5; салат кочанный и листовой - 0,2; картофель - 2,0; рапс (семена) - 2,0; клубника - 0,5; свекла сахарная - 0,5.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой пофешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций. ²

МУК 4.1.3236—14

Таблица 1 Метрологические параметры

Объект анализа Диапазон опреде ляемых концен траций, мг/кг Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), ап % Показатель внут-рилабора-торной прецизионности, °Ra. % Показа тель воспро изводи мости, (Гд, % Показатель точности* (границы относительной погрешности), ± <5, % Вода 0,005- 0,05 8 9 11 22 Почва 0,1—1,0 9 10 12 23 Картофель (клубни) 0,2—2,0 6 7 10 21 Сахарная свекла (корнеплоды, ботва) 0,2—2,0 0,5—5,0 6 6 7 7 10 10 21 21 Подсолнечник (семена) 0,2—2,0 6 7 10 21 Соя(бобы) 0,5— 5,0 6 7 10 21 Рапс (семена) 0,2—2,0 6 7 10 21 Растительное масло 0,2—2,0 6 7 10 21 Горох (семена) 0,22,0 6 7 10 21 * Соответствует расширенной неопределенности при коэффициенте охвата к = 2

Таблица 2 Полнота извлечения циклоксидима, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для п — 20, Р= 0,95

Анализируемый объект Г1редел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг 1 (олнота извлечения^ Стандартное отклонение, S, % Доверительный интервал среднего результата, ± % Вода 0,005 0,005—0,05 76,8 5,2 2,3 Почва 0,1 0,1—1,0 78,1 4,5 2,0 Картофель (клубни) 0,2 0,2—2,0 76,2 6,3 5,0 Сахарная свекла (корнеплоды, ботва) 0,2 0,5 0,2—2,0 0,5-5,0 75,3 72,0 5.7 8.8 4,6 7,0 Подсолнечник (семена) 0,2 0,2—2,0 81,1 5,5 4,4 Соя (бобы) 0,5 0,5—5,0 79,3 6,1 4,9 Рапс (семена) 0,2 0,2—2,0 77,4 6,7 5,4 Растительное масло 0,2 0,2—2,0 80,4 5,5 4,4 Горох (семена) 0,2 0,2—2,0 74,5 7,2 5,8

5

МУК 4.1.3236—14

2. Метод измерений

Методика основана на определении циклоксидима методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового (УФ) детектора после извлечения из образцов воды, почвы, клубней картофеля, семян и масла сои, подсолнечника и рапса, ботвы и корнеплодов сахарной свеклы органическими растворителями, концентрирования и последующих очистках на патронах для твердофазной экстракции (ТФЭ) с привитыми монофункциональными полярными группами С16 и при необходимости дополнительно с гидрофильным слабокислотным сорбентом на основе силикагеля.

Идентификация циклоксидима проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства и мереный

Жидкостный хроматограф с УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг

Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г Колбы мерные на 10, 50, 100 и 1 000 см³ Пипетки градуированные объемом 1,2,5 и 10 см³ Пробирки мерные со шлифом объемом 5,10 см³ Цилиндры мерные на 50 и 100 см³

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Циклоксидим, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,0 % Ацетон, осч

Ацетонитрил для ВЭЖХ

Вода бидистиллированная, деионизированная

Гексан, хч

Дихлорметан, хч

Изопропиловый спирт, хч

Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 ООО об./мин

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно

вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009    83.    Содержание    вредных    веществ в воздухе не должно

превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07.

Организация обучения работников безопасности груда - по ГОСТ 12.0.004 -- -90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам конгроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

-    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

-    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.1. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа аналитическую колонку (150 х 3,9) мм кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,5—1,0 см³/мин) до стабилизации нулевой линии. ³

МУК 4.1.3236—14

7.2. Кондиционирование патронов для твердофазной экстракции

7.2.1.    Патрон № 1 на основе силикагеля с привитыми монофункциональными полярными группами С16 промывают 5 см³ ацетонитрила.

7.2.2.    Патрон № 2 с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью промывают 2 см³ раствора №1, затем 3 см³ гексана.

7.3. Подготовка растворителей и приготовление растворов

7.3.1.    Подготовка растворителей. Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.

7.3.2.    0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 ±0,01) г 98 %-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.3.3.    Раствор Ns 1 (гексан-этилацетат в соотношении 2: 1). В колбу на 500 см³ помещают 200 см³ гексана и добавляют 100 см³ этил-ацетата.

7.3.4.    Раствор Ns 2 (гексан-этилацетат в соотношении 1: 1). В колбу на 500 см³ помещают 200 см³ гексана и добавляют 200 см³ этил-ацетата.

7.4. Приготовление основного и градуировочных растворов

7.4.1.    Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/см ³. Точную навеску циклоксидима (50 ± 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в метаноле и доводят объем до метки метанолом.

Градуировочные растворы с концентрациями циклоксидима 0,2, 0,5, 1,0, 2,0, 5,0 и 10,0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему.

7.4.2.    Раствор Ns 1 с концентрацией 10,0 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 2 см³ основного раствора и доводят до метки ацетонитрилом.

7.4.3.    Раствор Ns 2 с концентрацией 5 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 5,0 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки ацетонитрилом.

7.4.4.    Раствор Ns 3 с концентрацией 2 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помешают 2 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки ацетонитрилом.

7.4.5.    Раствор Ns 4 с концентрацией 1 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 1,0 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки ацетонитрилом. ⁴

1

2

3

4