Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение фосфатов в пищевых продуктах и продовольственном сырье

Методические указания МУК 4.1.3217—14

Издание официальное

Москва • 2014

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение фосфатов в пищевых продуктах и продовольственном сырье

Методические указания МУК 4.1.3217—14

ББК 51.23 060

060 Определение фосфатов в пищевых продуктах и продовольственном сырье: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014.— Нс.

ISBN 978—5—7508—1356—8

1.    Разработаны: ФГ'ЬУН «НИИ питания» (В. А. Тутельян, Л. В. Ше-вякова); ФБУЗ ФЦГиЭ Роспотребнадзора (В. Г. Сенникова, В. В. Мордвинова, Е. С. Шальнова, А. А. Гарбузова, В. Н. Малхожева); ГБОУ ДНО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздрава России (М. С. Орлов).

2.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 22 августа 2014 г.

3.    Аттестованы ФБУЗ ФЦГиЭ Роспотребнадзора в соогнстствии с ГОСТ Р 8.563-2009, свидетельство об аттестации № РОСС RU.0001.

310430/0203.14.07.14 от 14.07.2014.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

ISBN 978—5—7508—1356—8

О Роспотребнадзор, 2014 О Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014

МУК 4.1.3217—14

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

22 августа 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение фосфатов в пищевых продуктах и продовольственном сырье

Методические указания МУК 4.1.3217—14

Настоящие методические указания распространяются на сырье и продукты пищевые и устанавливают метод определения фосфора с последующим пересчетом на фосфаты (Р₂0₅).

Методические указания носят рекомендательный характер.

1. Метод измерений

Метод заключается в сухой минерализации пробы, растворении золы, проведении цветной реакции с молибден-ванадиевым реактивом и измерении интенсивности желтого окрашивания раствора на спектрофотометре в кюветах с расстоянием между рабочими гранями 10 мм при длине волны 2_та* = 436 нм или с помощью фотоэлектроколориметра в кюветах с расстоянием между рабочими гранями 20 мм со светофильтром Хпах = 440,5 нм.

Присутствие макро- и микроэлементов не мешает определению.

2. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

2.1. Средства измерений Весы лабораторные общего назначения второго класса точности с наибольшим

пределом взвешивания 200 г    ГОСТ    Р 53228—08

Колориметр фотоэлектрический с устройством для отсчитывания оптической плотности и

3

светофильтром с А**» = 440,5 нм или спектрофотометр для измерения в видимой области спектра

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

2.2. Реактивы

Вода дистиллированная    ГОСТ    6709

Кислота азотная, хч, концентрированная    ГОСТ 4461

Кислота соляная, хч, раствор (1 : 1) и раствор конценграции 25 г/дм³    ГОСТ    3118

Кислота серная, хч, концентрированная раствор (1:9)    ГОСТ    4204

Калий фосфорно-кислый однозамещенный, хч ГОСТ 4198 Аммоний ванадиево-кислый мета, хч    ГОСТ    9336

Аммоний молибденово-кислый, чда    ГОСТ    3765

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, нс требующих дополнительной очистки растворителей.

2.3. Вспомогательные устройства, материалы Шкаф сушильный, обеспечивающий поддержание заданного температурного режима до 150 °С с погрешностью ± 5 °С

Электроплитка бытовая    ГОСТ 14919

Баня водяная

Эксикатор исполнения 2    ГОСТ 25336

Колбы мерные исполнения 1 вместимостью

50, 100, 1 000 см³ 2 класса точности    ГОСТ 1770

Пипетки номинальной вместимостью 2, 5, 10 см³ ГОСТ 29169

Стаканы типа В или Н исполнения 1 или 2

номинальной вместимостью 50, 1 000 см³ ГОСТ 25336

Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

3. Требования техники безопасности

3.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками но ГОСТ Р 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на фотоэлектроколориметр и спектрофотометр.

4

МУК 4.1.3217—14

3.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -по ГОСТ 12.0.004-90.

4. Требовании к квалификации персонала

К выполнению измерений допускают специалиста, прошедшего обучение, освоившего методику, владеющего техникой, имеющего опыт работы на фотоколориметре, спектрофотометре.

5. Условии измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на фотоколориметре, спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к приборам.

6. Метод отбора и подготовки проб

6.1.    Отбор проб 1гроводят в соответствии с ГОСТ 26313.

6.2.    Подготовка проб проводится способом сухой минерализации в соответствии с ГОСТ 26929-94.

Рекомендуемые величины массы навески указаны в табл. 1.

Таблица 1 Масса навески продукта

Пищевые продукты и продовольственное сырье Масса навески, г Зерно и продукты его переработки 3—5 Мясо, птица, продукты из них 5 Рыба, рыбные консервы 5 Яйцепродукты жидкие 5 Яйпепродукты сухие 1—2 Молоко 10 Творог, сухие молочные продукты, сыры 1—2 Овощи, фрукты, фруктовые и овощные консервы 25 Кондитерские изделия 2—10 Жиры и масла 1—2

МУК 4.1.3217—14

7. Подготовка к испытанию

7. /. Приготовление раствора соляной кислоты массовой концентрации 25 г/дм³ В мерную колбу вместимостью 1 дм³ вносят 67,4 см³ концентрированной соляной кислоты и доводят объем до метки дистиллированной водой.

7,2. Приготовление основного стандартного раствора фосфора массовой концентрации 1 г/дм Раствор готовят из фосфорно-кислого однозамещенного калия, предварительно высушенного до постоянной массы в сушильном шкафу при 104°С или в эксикаторе над концентрированной серной кислотой. Навеску 4,3930 г КН₂Р0₄, взвешенную с погрешностью не более 0,0001 г, растворяют в 1 дм³ дистиллированной воды.

7.3. Приготовление раствора аммония ванадиево-кислого массовой концентрации 2,5 г/дм³ (раствор А)

В 500 см³ кипяшей воды растворяют 2,5 г ванадиево-кислого аммония. После охлаждения раствора в него вносят 20 см³ концентрированной азотной кислоты. Объем раствора доводят до 1 дм³ дистиллированной водой, перемешивают.

7.4. Приготовление раствора аммония молибденово-кислого массовой концентрации 100 г/дм³ (раствор И)

В 500 см³ воды, подогретой до 50 °С, растворяют 100 г молибденово-кислого аммония. Раствор охлаждают до комнатной темперагуры, затем осторожно при перемешивании стеклянной палочкой вносят 100 см³ концентрированной серной кислоты. Перемешивание продолжают до достижения раствором комнатной температуры, доводят его объем до 1 дм³ дистиллированной водой, перемешивают.

7.5. Приготовление молибден-ванадиевого раствора Реактив готовят смешиванием равных объемов растворов А и Б. Полученный реактив годен в течение месяца.

7.6. Приготовление контрольного раствора и построение градуировочного графика

7.6.1. В мерную колбу вместимостью 50 см³ вносят 5 см³ основного стандартного раствора фосфора массовой концентрации 1 г/дм³, доводят объем раствора до метки дистиллированной водой, тщательно переме-

6

МУК 4.1.3217—14

шивают. Рабочий раствор готовят в день построения градуировочного графика.

7.6.2.    При проведении испытаний на спектрофотометре в мерные колбы вместимостью 50 см³ вносят 1, 2, 3, 4, 5, 6 см' рабочего стандартного раствора фосфора, приготовленного по п. 7.6.1, что соответствует 100, 200, 300, 400, 500, 600 мкг фосфора, добавляют воду до 10 см³. В каждую колбу вносят по 10 см³ молибден-ванадиевого раствора, доводят объем раствора до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают.

При проведении изменений на фотоэлектроколориметре в мерные колбы вместимостью 50 см³ вносят 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0 см³ рабочего стандартного раствора фосфора, приготовленного по п. 7.6.1, что соответствует 50, 100, 150, 200, 250, 300 мкг фосфора, и далее проводят испытания по п. 7.6.2.

Растворы выдерживают 30 мин при температуре 20—30 °С и измеряют оптическую плотность по отношению к контрольному раствору, который готовят по п. 7.6.2, но без добавления раствора фосфора.

Измерения проводят на спектрофотометре в кюветах с расстоянием между рабочими гранями 10 мм при А^ =436 нм или на фотоэлектроколориметре в кюветах с расстоянием между рабочими гранями 20 мм со светофильтром с А_тах ~ 440,5 нм.

7.6.3.    Построение градуировочного графика.

Градуировочный график строят, откладывая по оси абсцисс значения концентрации фосфора в мкг, по оси ординат - соответствующее им значение оптической плотности.

8. Проведение испытания

8.1. Золу, полученную по п. 6.2, растворяют в 5 см³ раствора соляной кислоты (1:1) при нагревании на кипящей водяной бане и раствор упаривают до влажных солей, к осадку в чашке добавляют 20 см³ раствора соляной кислоты массовой концентрации 25 г/дм³ и нагревают на кипящей водяной бане в течение 5—10 мин. После охлаждения содержимое чашки количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ и доводят до метки раствором соляной кислоты массовой концентрации 25 г/дм³.

Аналогично готовят контрольную пробу, используя те же объемы растворов и последовательность их добавления, что и при растворении золы.

Раствор перемешивают.

7

8.2.    В мерную колбу вместимостью 50 см³ помещают точное количество (от 1 до 4 см³) раствора, приготовленного по п. 8.1, добавляют воду до 10 см³, 10 см³ молибден-ванадиевого реактива, доводят объем до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают.

Оптическую плотность раствора измеряют по п. 7.6.2 по сравнению с контрольным раствором.

8.3.    По полученному значению оптической плотности по градуировочному графику находят массу фосфора в мкг.

9. Обработка результатов

9.1. Массовую долю фосфора С, мг/100 г продукта вычисляют по формуле:

т - масса фосфора, найденная по градуировочному графику, мкг; К- общий объем минерализата, см³;

V,- аликвотный объем минерализата, взятый для испытания, см³;

10 - коэффициент пересчета в мг/100 г;

М - навеска образца, г.

9.2. Массовую долю фосфатов (Р₂0₅) С/, мг/100 г продукта вычисляют по формуле:

С, = 2,29 • С, где    (2)

С - массовая доля фосфора, найденная по п. 9.1;

2,29 - коэффициент пересчета фосфора на фосфаты (Р2О5).

10. Оформление результатов измерений

Результаты количественного анализа в протоколах анализов представляют в виде:

С/ ± А; мг/100 г (Р = 0,95), где

А = 6 • 0,01 С/ значение показателя точности по табл. 2.

Окончательный результат округляют до первого десятичного знака.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми нс должны превышать Р = 0,95.

8

МУК 4.1.3217—14

11. Приписанные характеристики погрешности измерений и ее составляющих

11.1. Настоящая методика обеспечивает получение результатов анализа с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в табл. 2.

Таблица 2

Значения характеристик погрешности и ее составляющих при доверительной вероятности Р= 0,95

Опреде ляемый показатель Диапазон измерений, мг/100 г Показатель повторяемости (среднеквадра-тичсскос отклонение повторяемости), Ф),% Показатель воспроизводимости (срсд-неквадратическое отклонение воспроизводимости), **(6), % Показатель точности (ipa-нипм, в которых находится Н01рСШНОСТЬ методики), 5,% Фосфаты Менее 50 15 21 42 От 50 до 300 10 14 28 Свыше 300 5 7 14

12. Контроль точности результатов измерений

12.1.    Обеспечение достоверности измерений в пределах лаборатории организуют и проводят путем проведения проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях повторяемости, внутри-лабораторной прецизионности, воспроизводимости, оперативного контроля процедуры измерений и контроля стабильности результатов измерений в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-6.

12.2.    Проверка приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях внутрилабораторной прецизионности.

Проверку приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях внутрилабораторной прецизионности (в пределах одной лаборатории, разными операторами, в разное время), проводят но результатам измерений массовой концентрации определяемого элемента в образцах с одинаковым содержанием элемента.

Результаты измерений признают приемлемыми при выполнении условия:

(!)

9