МУК 4.1.3211-14
Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3211—14

Издание официальное

Москва • 2015

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3211—14

ББК51.23

062

062 Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гиг иены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.— 19 с.

ISBN 978- -5—7508—1430—5

1.    Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В. А. Калинин, Т. С. Калинина).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 июня 2014 г. № 1).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 30 июля 2014 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

ISBN 978—5—7508—1430—5

© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Росно1ребнадзора, 2015

МУК 4.1.3211—14

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

30 июля 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3211—14

Свидетельство о метрологической аттестации №01.00282-2008/ 0191.19.12.13 от 19.12.2013.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке в диапазоне 0,25—2,5 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: тетраконазол.

Название действующего вещества по ИЮПАК: (Я5)-2-(2,4-дихлор-фснил)-3-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пропил-1,1,2,2-те графгорэгиловый эфир.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C13H11CI2F4N3O. Молекулярная масса: 372,1. ¹

Агрегатное состояние: вязкая жидкость.

Цвет, запах: бесцветная жидкость без запаха.

Плотность (при 20 °С): 1,432 г/см¹.

Давление паров: 0,18 мПа.

Температура плавления: 6 °С.

Температура кипения: 240 °С (с разложением).

Коэффициент распределения октанол-вода (при 20 °С): K_ow log P_ow= = 3,56.

Растворимость в воде (мг/дм¹, при pH 7 и 20 °С): 156.

Растворимость в органических растворителях (г/дм¹, при 20 °С): метанол - более 52; этиловый спирт - 46,7; этилацетат - 42,2; 1,2-дихлорэтан - 41,7; ацетон - 40,3; ксилол 29,9; гексан - 2,4.

Тетраконазол разлагается в разбавленных водных растворах при pH 4—9. Стабилен на солнечном свету в водных растворах.

Краткая токсикологическая характеристика. Тетраконазол относится к веществам мало опасным по острой оральной (ЛД50 для крыс от

1    031 до 1 248 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс более

2    000 мг/кг) и к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 (4 ч) для крыс 3 660 мг/м¹ воздуха).

Область применения. Тетраконазол - системный фунгицид широкого спектра действия с защитным, куративным и искореняющим действием. Абсорбируется корнями, листьями и стеблем, переносится акропс-тально во все части растения.

Применяется для борьбы с мучнистой росой, с бурой ржавчиной и различными пятнистостями листьев зерновых, с мучнистой росой и паршой яблонь, с мучнистой росой и пятнистостью листьев сахарной свеклы, с мучнистой росой виноградников и огурцов, с мучнистой росой и ржавчиной на овощных и декоративных культурах.

В России установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,003 мг/кг массы человека; ПДК в воде водоемов - 0,01 мг/ дм¹; ОДК в почве - 0,4 мг/кг; ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,6 мг/м¹, в атмосферном воздухе - 0,003 мг/м¹; МДУ в продукции (мг/кг): зерно хлебных злаков - 0,2, сахарная свекла - 0,05.

1. Погрешностьнзчерснии

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций. ²

МУК 4.1.3211—14

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 1

Метрологические параметры для тетракопазола

Анализируемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности) ± S, % Р=0,95 Стандартное отклонение повторяемости, <тп % Предел повторяемости, г, % Предел воспро изводи мости, Я, % I Ягоды винограда 0,2—2,5 вкл. 25 5,71 15,87 22,22 Виноградный сок 0,25—2,5 вкл. 25 7,05 19,60 27,44

Таблица 2

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для тетракопазола

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п - 20 11рсдсл обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Полнота извлечения вещества % Стандартное отклонение S, % Доверительный интервал среднего результата 4% Ягоды вино-1рада 0,25 0,25—2,5 83,80 3,56 1,40 Виноградный сок 0,25 0,25—2,5 85,14 4,60 1,83

2. Метод измерений

Метод основан на определении тетраконазола методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с использованием капиллярной колонки с детектором но захвату электронов после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами и на колонках с флоризилом.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором колонки и условий программирования. ³

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений Весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228-08 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г Весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228-08 - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и

1 000 см³    ГОСТ 1770-74

Микрошприц объемом 10 мм³ со шкалой деления 0,1 мм³ и погрешностью измерения вытесняемого объема ± 1 %

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см³    ГОСТ 29227-91

Хроматографическая система, включающая:

-    хроматограф газовый с детектором посюянной скорости рекомбинации ионов ^Ni с пределом детектирования по Линдану 4 * 10*¹⁴ г/см³ и приспособлениями для капиллярной колонки;

-    компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хромато-]рамм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см³    ГОСТ 1770-74

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогии ными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы Тетраконазол, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 96,5 %    С AS 112281-77-3

Азот, осч    ГОСТ 9293-74

Ацетон, осч    ТУ 6-09-3513—86

МУК 4.1.3211—14

Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вола дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) Гелий, очищенный n-Гексан, хч

Калий марганцово-кислый, чда Метилен хлористый, хч Натрий серно-кислый, безводный, хч Натрий хлористый, хч

Флоризил (магния силикат, 99 %, CAS 1343-88-0) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш.

Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Аппарат для встряхивания проб с возвратно-нос гу нательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту

Нанки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см³ Вата медицинская гигроскопическая

хлопковая нестерильная    ГОСТ 5556-81

Воронки делительные на 250 см³    ГОСТ 25336-82

Воронки лабораторные, стеклянные    I ОСТ 25336—82

Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см³, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм³ и с диапазоном темперагур от 20 до 100°С

Колбы конические плоскодонные на 100,250 и 1 000 см³    ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100,250 и 4 000 см³ ТС    ТУ 92-891.029—91 ⁴

Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла, с внутренний диаметром 0,25 мм, длиной 30 м и толщиной пленки 0,25 мкм

Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм³/мин

Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100—2 000 см³    ГОСТ    25336—82

Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см³ и приемной конической колбой объемом 1 000 см³ Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г    ТУ    6-09-1678    —86

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования элсктробезопасности при работе с электроустановками но ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 90 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004—90.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метол анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.

МУК 4.1.3211—14

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

-    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С, относительной влажности не более 80 % и нормальном атмосферном давлении;

-    выполнение измерений на жидкостном хромакирафе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с флоризилом, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка органических растворителей

7. /. /. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5—6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ аппарата для перегонки растворителей.

Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.

7.1.2. Очистка ацетона

Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 г/дм³.

Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.

7.1.3. Приготовление бидистиллированной воды

Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 г/дм³ и кипятят в течение 6 ч.

Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают. ⁵

1

2

3

4

5