Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование ___Российской Федерации_
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств тиснкарбазон-мстила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические ука ниши МУК 4.1.3210—14
Иэдание официальное
Москва • 2015
Федеральная служба но надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств тиенкарбазон-метила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3210—14
ББК 51.23 062
062 Определение остаточных количеств тиенкарбазон-метила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—23 с.
ISBN 978—5—7508—1375—9
1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХЛ им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов», Минсельхоза России (В. А. Калинин, В. В. Допгилевич, А. В. Довгилсвич, В. Н. Тестова)
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 1 от 26 июня 2014 г.).
3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 30 июля 2014 г.
4. Введены впервые.
ЬБК 51.23
ISBN 978—5—7508—1375—9
© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015
МУК 4.1.3210—14
УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
А. К). Попова
30 июля 2014 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств тиснкарбазон-мстила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указании МУК 4.1.3210—14
Свидетельство о метрологической аттестации №01.00282-2008/ 0192.19.12.13 от 19.12.2013.
Настоящие методические указания устанавливают порядок применения могола высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств гиенкарбазон-метила в зерне зерновых колосовых культур в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг и в соломе зерновых колосовых культур в диапазоне 0,05—0,5 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.
Название действующего вещества по ИСО: тиенкарбазон-метил.
Название действующего вещества по ИЮПАК: 3-тиофенкарбоно-вая кислота, 4-[[[(4,5-дигидро-3-метокси-4-метил-5-оксо-1 Н-1,2,4-триа-зол-1 -ил)карбонил]амино]сульфонил]-5-метил, метиловый эфир.
Структурная формула: 1
Эмпирическая формула: C12H14N4O7S2.
Молекулярная масса: 390,4.
Цвет, запах: химически чистый тиенкарбазон-метил представляет собой белый порошок с легким характерным запахом.
Температура плавления: > 401 °С.
Температура кипения и замерзания: не определена, т. к. разрушается при 140 °С.
Температура вспышки и воспламенения: более 386 °С.
Плотность: 1,51 г/см1 при 20 °С.
Давление паров в мм. рт. ст.:
8,8 х 10 14 Па при 20 °С (экстраполирований);
3,7 х КГ13 Па при 25 °С (экстраполированный);
2,3 х ю 10 Па при 50 °С (экстраполированный).
|
Ро« |
Log Pow |
pH 4 |
0,738 |
-0,13 |
pH 7 |
0,010 |
-1,98 |
pH 9 |
0,0073 |
-2,14 |
Коэффициент распределения октанол-вода:
Растворимость в воде: 72 мг/л (при 20 °С, pH 3,9).
Растворимость в органических растворителях (г/дм1 при 20 °С): ди-хлорметан - 100—120, ацетон - 9,54, этилацетат - 2,19, толуен - 0,91, этанол 0,23, п-гексан-0,15 х 10 .
Краткая токсикологическая характеристика. Тиенкарбазон-метил относится к мало опасным по острой оральной (ЛД50 для крыс более 2 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛДзд для крыс более
2 000 мг/кг), но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 ч) более 2 018 мг/м1 воздуха). Тиенкарбазон-метил нсфро- и нейротоксичен.
В организме животных тиенкарбазон-метил мстаболизирустся слабо, в растениях разлагается быстро и полностью. Главными метаболитами в растениях являются BYH 18636-ММТ-глюкозид и BYH 18636-N-дссмстил. В полевых условиях ДТ5о тиенкарбазон-метила составляет от
3 до 44,6 дня, ДТ90 - от 9,9 до 148 дней. Тиенкарбазон-метил фотолити-чески стабилен. ДТ50 в воде составляет от 130 до 148 дней.
Область применения. Тиенкарбазон-метил - гербицид системного действия, быстро поглощается листьями и корневой системой сорняков, свободно перемещается по всему растению с нисходящими и восходящими токами питательных веществ. Благодаря системному действию препарат проникает во все части растения, включая «спящие» почки. На 2
МУК 4.1.3210—14
биохимическом уровне гербицид воздействует на фермент ацетолактат-синтазу (ALS), участвующий в цепи биосинтеза аминокислот, и нарушает процессы синтеза белков, что вызывает прекращение деления клеток в меристемных тканях сорных растений.
Рекомендуется как довсходовый и послевсходовый гербицид для контроля однолетних и многолетних злаковых и двудольных сорняков на посевах кукурузы. Рекомендуемая норма расхода препарата 0,4— 0,5 л/га. Способ применения - наземное опрыскивание почвы до всходов культуры (без заделки) или в фазу 2—3 листьев культуры.
В России установлены следующие гигиенические нормативы:
ДСД - 0,2 мг/кг массы человека;
ОДК в почве - 0,9 мг/кг;
ПДК в воде водоемов - 0,05 мг/дм3;
ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м3;
ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,02 мг/м3;
МДУ в продукции (мг/кг): кукуруза (зерно, масло) - 0,5.
1. Погрешность измерений
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Д-0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Таблица 1
Метрологические параметры лля тиенкарбазон-метила |
Анали
зируе
мый
объект |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Показатель точности (граница относительной погрешности), ±6, %Р = 0,95 |
Стандартное отклонение повторяемости, Or, % |
Предел повторяемости, г, % |
Предел воспроизводимости, R, % |
Зерно
пшеницы |
0,01—0,1 вкл. |
50 |
1,53 |
4,25 |
5,96 |
Солома
пшеницы |
0,05—0,1 вкл. |
50 |
1,74 |
4,84 |
6,77 |
0,2—0,5 вкл. |
25 |
1,72 |
4,78 |
6,69 |
|
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2.
Таблица 2 |
Анализи
руемый
объект |
Метрологические параметры, Р = 0,95, п- 20 |
Предел
обнару
жения,
мг/кг |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Полнота извлечения вещества, % |
Стандартное отклонение, 5, % |
Доверительный интервал среднего результата, ±, % |
Зерно
пшеницы |
0,01 |
0,01—0,1 |
72,81 |
2,11 |
0,72 |
Солома
пшеницы |
0,05 |
0,05—0,5 |
7238 |
1,57 |
0,53 |
|
2. Метод измерений
Метод основан на определении тиенкарбазон-метила методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием диодно-матричного детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на концентрирующих патронах № 1 и на колонках с окисью алюминия.
Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.
3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
3.1. Средства измерений Весы аналитические класса точности по I'OCT Р 53228—08 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г Весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228-08 - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1 000 см3
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3
6
МУК 4.1.3210—14
рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0... 14 pH; ± 1 999 мВ Хроматографическая система, включающая:
- хроматограф жидкостный с диодно-матричным детектором, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до
80 °С и стандартным автосамплером с дозирующим объемом от 0,1 до 100 мм3 для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;
- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хрома-тографичсского анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ
Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см3 ГОСТ 1770—74
Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
CAS 317815-83-1 ТУ 6 09-3916—75 ТУ 6-09-3513—86 ТУ 6-09-2167 -84 ГОСТ 6709-72
Тиенкарбазон-метил, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,6 %
Алюминия окись для хроматографии, ч Ацетон, осч
Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) Гелий, очищенный n-Гсксан, хч
Калий марганцово-кислый, чда
Кальций хлористый, ч
Калий фосфорнокислый дву замещённый,
3-водный, чда
Кислота соляная, хч
Кислота муравьиная, чда
Кислота уксусная, ледяная
7
Концентрирующие патроны для твердофазной
экстракции с гидрофильным нейтральным
сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с
привитыми диольными группами (объем -
1 см3, масса сорбента - 0,6 г), (патрон № 1)
Метилен хлористый, хч
Натрий серно-кислый, безводный, хч
Натрий хлористый, хч
Натрий углекислый, кислый, хч
Натрия гидроокись, хч
Этилацетат, чда
Примечание. Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.3. Вспомогательные устройства и материалы
Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Аппарат для встряхивания проб с возвратнопоступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту
Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3 Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3
Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная Воронки делительные на 250 см3 Воронки лабораторные, стеклянные Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./'мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от
8
МУК 4.1.3210—14
Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1 ООО см3 ГОСТ 25336—82
Колбы круглодонные со шлифом (концентра-торы) на 100,250 и 4 000 см3 ТС ТУ 92-891.029- 91
Колонка хроматографическая стальная, длиной 150 мм, с внутренним диамегром 3,9 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С18 Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин
Предколонка хроматографическая стальная, длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С8 Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100—500 см3 ГОСТ 25336—82
Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см3 и приемной конической колбой объемом 1 000 см3 Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г ТУ-6-09-1678—86
Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм Шприц инъекционный многократного
применения объемом 10 см3 ГОСТ 22967-90
Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по
9
1
2