Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской Федерации_
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств глюфосината аммония и его метаболита в клубнях картофеля методом капиллярной газожидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3205—14
Издание официальное
Москва • 2015
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств глюфосината аммония и его метаболита в клубнях картофеля методом капиллярной газожидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3205—14
ББК 51.23 060
060 Определение остаточных количеств глюфосината аммония и его метаболита в клубнях картофеля методом капиллярной газожидкостной хроматографии: Методические указания.
—М: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—26 с.
ISBN 978—5—7508—1394—О
1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В. А. Калинин, Т. С. Калинина).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 июня 2014 г. Ха 1).
3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 30 июля 2014 г.
4. Введены впервые.
ББК 51.23
ISBN 978—5—7508—1394—0
© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015
МУК 4.1.3205—14
УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
А. Ю. Попова
30 июля 2014 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств глюфосината аммония и его метаболита в клубнях картофеля методом капиллярной газожидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3205—14
Свидетельство о метрологической аттестации №01.00282-2008/ 0167.27.05.13 от27.05.2013.
Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств глюфосината аммония и его метаболита, 3-мстилфосфино-пропионовой кислоты, в клубнях картофеля в диапазоне 0,25—2,5 мг/кг.
Методические указания носят рекомендательный характер.
Название действующего вещества по ИСО: глюфосинат аммония (I).
Название действующего вещества по ИЮПАК: Аммония DL-гомо-аланин-4-ил(метил)фосфинат (I).
Структурная формула:
?, +сн3-р-сн2-сн2-сн nh4О ЧС02Н (!)
Эмпирическая формула: C5H15N2O4P.
Молекулярная масса: 198,2.
Агрегатное состояние: бесцветный кристаллический порошок со слабым специфическим запахом.
3
МУК 4.1.3205—14
Температура плавления: 215 °С.
Давление паров (при 20 °С): более 0,1 мПа.
Коэффициент распределения октанол/вода: Kow log Р < 0,1.
Растворимость в воде (г/дм3, при 22 °С): 1 370.
Растворимость (г/дм3, при 20 °С): ацетон - 0,16, этанол - 0,65, этил-ацетат, толуол - 0,14, н-гексан - 0,2.
Вещество стабильно при нормальных условиях хранения, не гидролизуется в умеренно кислых и щелочных средах.
Достаточно быстро разрушается в воде и почве: DT50 в воде и почве - 3—20 дней.
Краткая токсикологическая характеристика. Глюфосинат аммония относится к мало опасным веществам по острой пероральной (ЛД50 для крыс - от 1 620 до 2 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 Для крыс более 4 000 мг/кг), но к опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 ч) от 1 260 до 2 600 мг/м3).
Глюфосинат аммония не обладает тератогенным, канцерогенным и мутагенным действием. Малотоксичен для рыб, водорослей, дафний, дождевых червей, пчел, птиц и диких животных.
Область применения. Глюфосинат аммония (I) - десикант и неселективный контактный гербицид с ограниченной системностью, передвигающийся только внутри обработанных листьев. В процессе поступления в растение вещество диссоциирует и в клетках присутствует только глюфосинат свободная кислота (II). Гербицид используется для уничтожения однолетних и многолетних широколистных и злаковых сорняков в парах, посадках плодовых и цитрусовых культур, ягодных кустарниках и виноградниках путем направленного опрыскивания в период активного роста сорных растений, а также на овощных культурах при довсходовом применении препарата.
Глюфосинат аммония применяется для десикации ботвы картофеля, подсолнечника, клещевины, люцерны и сеникации яровой пшеницы. Используется в России в качестве десиканта на посевах подсолнечника, рапса, клещевины, льна-долгунца, люцерны и клевера лугового (семенные посевы) при норме расхода от 0,225 до 0,45 кг/га (по д.в).
Глюфосинат аммония в воде и растениях превращается в глюфосинат свободную кислоту (II), которая подвергается разрушению, результатом чего является образование токсикологически значимого метаболита - 3-метил фосфино-пропионовой кислоты (III).
4
Глюфосинат свободная кислота (II)
ОЬ-гомоаланин-4-ил-(метил)-фосфиновая кислота. Структурная формула:
О
но—Р СН2 СН2 СН СООН
СН,
Эмпирическая формула: C5H12N04P. Молекулярная масса: 181,1.
Метаболит глюфоснната аммония (III)
3-мстил фосфин о-пропионовая кислота. Структурная формула:
О
но — Р — сн2— сн2— сн2— соон
Эмпирическая формула: С4Н9О4Р.
Молекулярная масса: 152,1.
В России установлены следующие гигиенические нормативы для глюфоснната аммония: ДСД - 0,02 мг/кг массы человека; МДУ в продукции (мг/кг): плодовые семечковые и косточковые, ягоды и другие мелкие фрукты (кроме смородины), цитрусовые, виноград, морковь -0,2; картофель - 0,5; подсолнечник (семена), рапс (зерно) - 5,0; гречиха, просо, зерно хлебных злаков - 0,4; растительные масла (кроме нерафинированных рапсового и подсолнечного масла) - 0,4; горох - 3,0; соя (бобы), фасоль - 2,0.
1. Метрологические характеристики
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее
МУК 4.1.3205—14
составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р - 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2.
Таблица 1
Метрологические параметры для глюфосината аммония и его метаболита
Анализи
руемый
объект |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Показатель точности (граница относительной погрешности) ±Ьу°/оР- 0,95 |
Стандартное отклонение повторяемости, а г, % |
Предел
повто
ряемости,
г.% |
Предел
воспроиз
водимости,
Ry% |
|
Дериват глюфосината аммония (IV) |
Картофель |
0,25—2,5 | 25 |
3,75 |
10,43 |
14,60 |
Дериват метаболита глюфосината аммония (V) |
|
0,25—2,5 |
25 |
3.11 |
8.65 |
12,10 |
Таблица 2
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для глюфосината аммония и его метаболита |
|
|
Метрологические параметры, Р = 0,95, |
и = 20 |
Анализи
руемый
объект |
Предел
обнару
жения,
мг/кг |
Диапазон
определяемых
концентраций,
мг/кг |
Среднее значение определения, % |
Стандартное отклонение, S,
% |
Доверительный интервал среднего результата, ±,% |
|
Дериват глюфосината аммония (IV) |
Картофель |
0,25 |
0,25—2,5 |
83,37 |
4.47 |
1,81 |
Дериват метаболита глюфосината аммония (V) |
|
0,25 |
0,25—2,5 |
82,48 |
5.15 |
2,12 |
|
2. Метод измерения
Метод основан на определении глюфосината аммония и его метаболита 3-метилфосфино-пропионовой кислоты по их дериватам (IV и V соответственно) методом капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора после экстракции веществ из образцов водой, очистки экстрактов на концентрирующих патронах
МУК 4.1.3205—14
№ 2, дериватизации веществ с помощью триметилортоацетата в кислой среде и последующей очистки полученных дериватов на концентрирующих патронах № 1.
Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность метода достигается за счет подбора условий дериватизации анализируемых веществ, подбора капиллярной колонки и условий программирования ее температуры.
3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
3.1. Средства измерений Весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228—08 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г
Весы лабораторные общего назначения класса
точности по ГОСТ Р 53228-08 - средний (Ш)
с наибольшим пределом взвешивания до 600 г
и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г
Колбы мерные на 10,25,50, 100,500 и 1 000 см3 ГОСТ 1770-74
Микрошприц объемом 10 мм3 со шкалой
деления 0,1 мм3 и погрешностью измерения
вытесняемого объема ± 1 %
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3 ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные на 10 и 25 см3 ГОСТ 1770-74
Хроматографическая система, включающая:
- хроматограф газовый с термоионным детектором (ТИД) с пределом детектирования по фосфору в Паратион-метиле 3 х 10“14 г/см3 и снабженный приспособлениями для капиллярной колонки;
- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения
7
хроматографического анализа, обеспечивающее
обработку результатов измерений, вывод и
расчет хроматограмм и количественный анализ
Цилиндры мерные на 10,25 и 50 см3 ГОСТ 1770-74
Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.
Глюфосинат аммония (I), аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,2 %
Глюфосинат свободная кислота (П), аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 98,5 %
3-метил фосфино-пропионовая кислота (III), аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 97,9 %
Метил-4-(метоксиметил )-фосфино-2-ацетамидобутират (IV), аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 97,0 %
Метил-3-(метоксиметил)фосфино-пропионат (V), аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 98,8 %
Азот, осч
Аммиак водный (28—30 % NH3), чда Ацетон, осч
Вода дистиллированная и (или)
бидистиллированная (вода дистиллированная,
перегнанная повторно в стеклянной емкости)
Гелий, очищенный
Калий марганцово-кислый, чда
Кальций хлористый, ч
Кислота муравьиная, чда
Кислота уксусная, ледяная
Концентрирующие патроны для твердофазной
экстракции с гидрофильным слабокислым
МУК 4.1.3205—14
сорбентом с постоянной активностью с размером частиц 63—-200 мкм (С) (объем - 1 см3,
масса сорбента - 0,6 г) (патрон № 1) ТУ 4215-002-05451931—94
Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с сильноосновным сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с привитыми четвертичными аммониевыми группами (объем-1 см3, масса сорбента - 0,6 г) (патрон № 2) ТУ 4215-002-05451931—94 Метилацетат, ч ТУ 6-09-300—87
Метилен хлористый, хч ТУ 6-09-2662—77
Натрия гидроокись, хч ГОСТ 4328-77
Натрий серно-кислый, безводный, хч ГОСТ 4166-76
Спирт метиловый (метанол), хч ГОСТ 6995—11
Толуол, химически чистый ГОСТ 5789-78
Триметилортоацетат CAS 1445-45-0
Этил ацетат, чда ГОСТ 22300-76
Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.3. Вспомогательные устройства, материалы
Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Аппарат для встряхивания проб с возвратнопоступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту
Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3 Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная В налы (пузырьки) с тефлоновыми прокладками емкостью 40 см3 Воронки делительные на 250 и 500 см3 Воронки лабораторные, стеклянные Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до
9