Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской Федерации_
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение массовых концентраций фталатов (диметилфталата, диэтилфталата, дибутилфталата, бензилбутилфталата, ди(2-этилгексил)фталата) в молоке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3160—14
Издание официальное
Москва • 2015
Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение массовых концентраций фталатов (диметилфталата, диэтилфталата, дибутилфталата, бензилбутилфталата, ди(2-этилгексил)фталата) в молоке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3160—14
ББК 51.23 ИЗ 7
И37 Измерение массовых концентраций фталатов (диметилфта-лата, диэтилфталата, дибутилфталата, бензилбутилфталата, ди(2-этилгексил)фталата) в молоке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—20 с.
ISBN 978—5—7508—1311—7
1. Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения»
(Т. С. Уланова, Н. В. Зайцева, Т. Д. Карнажицкая, Е. О. Пшеничникова).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 декабря 2013 г. № 4).
3. Утверждены Врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А. Ю. Поповой 24 февраля 2014 г.
4. Введены впервые.
ББК 51.23
Редактор Н. В. Кожока Технический редактор Е. В. Ломанова
Подписано в печать 02.04.15 Формат 60x84/16 Уел. печ. л. 1,16
Т ираж 150 экз. Заказ 31
Федеральная служба по надоору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д 18, стр. 5,7
Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гшиены и эпидемиолшии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавсхое ш., 19а
Отделение реализации, тел./факс 8(495)952-50-89
© Роспотребнадзор, 2015 О Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015
МУК 4.1.3160—14
Содержание
1. Назначение и область применения.......................................................................4
2. Физико-химические и токсикологические свойства...........................................5
3. Метрологические характеристики методики выполнения измерений..............6
4. Метод измерения....................................................................................................б
5. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы.... 7
6. Требования безопасности и охраны окружающей среды...................................8
7. Требования к квалификации оператора...............................................................9
8. Условия измерений................................................................................................9
9. Подготовка к выполнению измерений.................................................................9
10. Выполнение измерений.......................................................................................14
11. Обработка результатов измерений.....................................................................16
12. Оформление результатов измерений..................................................................18
13. Контроль качества результатов измерений........................................................18 1
МУК 4.1.3160—14
УТВЕРЖДАЮ Врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главного государственного санитарного врача Российской Федерации
А. Ю. Попова
24 февраля 2014 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение массовых концентраций фталатов (диметилфталата, диэтилфталата, дибутилфталата, бензилбутилфталата, ди(2-этилгексил)фтала га) в молоке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3160—14
Свидетельство об аттестации №88-16374-243-01.00076-2012 от 26.11.2012.
1. Назначение и область применения
1.1. Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для измерения массовых концентраций фталатов (диметилфталата, диэтилфталата, дибутилфталата, бензилбутилфталата, ди(2-этилгексил)фта-лата) в молоке (молоко сырое, пастеризованное, ультрапастеризованное, стерилизованное, топленое, молоко цельное, обезжиренное, питьевое) в диапазоне концентраций 0,1—4,0 мг/дм1 для диметилфталата и ди(2-этил-гексил)фталата, ОД—4,0 мг/дм1 для диэтилфталата, дибутилфталата, бензилбутилфталата.
1.2. Методические указания по измерению массовых концентраций фталатов в молоке предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополу-
МУК 4.1.3160—14
чия человека и других служб, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, а также других лабораторий, аккредитованных в установленном порядке.
1.3. Методические указания носят рекомендательный характер.
2. Физико-химические и токсикологические свойства
Фталаты - диэфиры 1,2-бензолдикарбоновой кислоты (о-фталевой кислоты). Общая формула C8H404R1R2, где R - спиртовый остаток. Фталаты добавляют в качестве пластификаторов для придания эластичности в полимерные материалы при изготовлении предметов промышленного, бытового, пищевого и медицинского назначения. Гигиенические нормативы в Российской Федерации не установлены.
Диметилфталат (ДМФ), диэтилфталат (ДЭФ), дибутилфталат (ДБФ), бензилбутилфталат (ББФ) - бесцветные маслянистые жидкости без запаха или со слабым запахом, ди(2-этилгексил)фталат (ДЭГФ) - прозрачная бесцветная жидкость со слабым запахом.
|
ДМФ |
ДЭФ |
ДБФ |
ББФ |
ДЭГФ |
CAS |
131-11-3 |
93952-12-6 |
93952-11-5 |
93951-88-3 |
117-81-7 |
Формула |
С10Н10О4 |
С12Н14О4 |
С16Н22О4 |
С19Н20О4 |
С24Н38О4 |
Молекулярная масса |
194,19 |
222,24 |
278,35 |
312,4 |
390,57 |
т№вС |
2 |
-40 |
-35 |
-35 |
-46 (5 мм рг. сг.) |
Г
о
о |
282 |
296,1 |
340 |
370 |
231 |
Плотность,
г/см3 |
1,189 |
1,118 |
1,047 |
1,111 |
0,986 |
Растворимость в воде, г/100 см3 |
0,5 |
0,15 |
0,1 |
0,00037 |
0,01 |
Давление насыщенных паров, кПа |
1,67 (при 150 °С) |
|
|
<0,1 (при 110°С) |
|
|
ПДК, мг/дм3 отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует |
Краткая токсикологическая характеристика Фталаты проявляют мутагенный, эмбриотоксический и репроток-сический эффекты, снижают активность гормонов печени. Ди(2-этилгек-сил)фталат является эндокринным дизраптором, нарушающим гормональный метаболизм, обладает канцерогенными свойствами [4]. 2
МУК 4.1.3160—14
3. Метрологические характеристики методики выполнения измерений
При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значения погрешности (и еб составляющих) результатов измерений не превышают значений, приведенных в табл. 1.
Таблица 1
Диапазон измерений, значения точности (правильности и прецизионности) методики |
Объект
измере
ния |
Диапазон измерений массовой концентрации фталатов, мг/дм3 |
Показатель точности (границы относительной погрешности), ±5, % при Р “ 0,95 |
Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), Оо% |
Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение вос-роизводимо-СТИ), Or, % |
Предел повторяемости, г, % (при />*0,95
я-2) |
|
Диметил фталат |
|
0,1—4 вкл. |
39 |
16 |
19,5 |
45 |
|
Диэтилфталат |
|
0,2—4 вкл. |
35 |
14 |
17,5 |
39 |
Молоко |
Дибутил фталат |
0,2—4 вкл. |
36 |
.5 |
18 |
42 |
|
Бензилбутилфталат |
|
0,2—4 вкл. |
36 |
и |
18 |
31 |
|
Ди(2-этилгексил)фталат |
|
0,1—4 вкл. |
31 |
_1_ |
15,5 |
25 |
|
4. Метод измерения
4.1. Измерение массовых концентраций диметилфталата, диэтил-фталата, дибутил фталата, бепзилбутилфталата, ди(2-этилгексил)фталата основано на двойной экстракции фталатов из молока смесью растворителей (метанола, гексана, изопропанола), очистке экстракта и последующем анализе экстракта на жидкостном хроматографе с использованием диодно-матричного детектора.
4.2. Определению не мешают о-фталевая кислота и ее изомеры.
МУК 4.1.3160—14
5. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
5.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором и градиентным насосом, смешивающим два компонента Весы лабораторные равноплечные второго класса точности; наибольший предел взвешивания 200 г, диапазон взвешивания по шкале мг от 0 до 100 мг, цена деления делительного устройства - 0,05 мг, погрешность взвешивания по шкале мг± 0,15 мг Гири Г2-210
Колбы мерные с пробкой 2-25-2,2-100-2 Пипетки мерные градуированные 1-2-1-2,
1-2-1-5, 1-2-1-10
Микрошприцы серии МШ-10, диапазон дозируемого объема, мкл 1-10 с ценой деления 0,2 мкл, погрешность 1 %
Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
5.2. Реактивы
Ди(2-этилгексил)фталат, аналитический стандарт с массовой долей основного вещества не менее 99,5 %
Диметилфталат, аналитический стандарт с массовой долей основного вещества не менее 99,5 %
Диэтилфталат, аналитический стандарт с массовой долей основного вещества не менее 99,5 %
Дибутилфталат, аналитический стандарт с массовой долей основного вещества не менее 99,5 %
Бензилбутилфталат, аналитический стандарт с массовой долей основного вещества не менее 98 %
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, осч ТУ 6-09-14-2167—84 Гексан для хроматографии, хч ТУ 6-09-4521—11 3
МУК 4.1.3160—14
Метанол (метиловый спирт), хч Изопропанол (изопропиловый спирт), хч Вода дистиллированная Кислота серная, осч Калий двухромовокислый, хч
Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.
5.3. Вспомогательные устройства и материалы
Колонка металлическая длиной 150 мм и
внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная
обращенно-фазным сорбентом с привитыми
полярными группами С18, зернение 5 мкм
Иредколонка длиной 12,5 мм, внутренним
диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-
фазным сорбентом с привитыми полярными
группами С18, зернение 5 мкм
Пробирка вакуумная стеклянная без
наполнителя вместимостью 6 см3
Шкаф сушильный электрический с диапазоном
рабочих температур от 50 до 200 °С ТУ 16.531.743—83
Центрифуга лабораторная с частотой вращения
ротора от 500 до 2 700 об./мин
Стакан В-1-2000-ТС вместимостью 2 дм3 ГОСТ 25336-82
Стеклянные виалы объемом 1,5 см3 с крышкой Шприц медицинский одноразовый типа
«Луер» вместимостью 1 см3 ГОСТ Р ИСО 7886-11
Фильтры капроновые с диаметром пор не более 5 мкм
Примечание. Допускается использование других вспомогательных устройств аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным, а также материалов, обеспечивающих нормативы точности при проведении измерений.
6. Требования безопасности и охраны окружающей среды
6.1. При выполнении измерений следует соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, требования элеюробезопасноста при работе
МУК 4.1.3160—14
с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на эксплуатацию жидкостного хроматографа.
6.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией и соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83.
6.3. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07.
7. Требования к квалификации оператора
К выполнению измерений и обработке их результатов допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже инженера-химика с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших метод измерений и получивших удовлетворительные результаты оперативного контроля процедуры измерений.
8. Условия измерений
8.1. При подготовке к проведению измерений и приготовлении растворов соблюдают следующие условия:
- температура воздуха (20 ± 5) °С;
- атмосферное давление (630—800) мм рт. ст.;
- влажность воздуха не более 80 %.
8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией прибора.
9. Подготовка к выполнению измерений
При подготовке к выполнению измерений проводят следующие работы: подготовка посуды, приготовление растворов, подготовка хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.
9.1. Подготовка посуды
Используемую посуду вымыть с поверхностно-активным моющим средством, замочить на 1 ч в хромовой смеси, промыть проточной водой, ополоснуть дистиллированной водой, высушить в сушильном шкафу при температуре 105 °С. Перед использованием сухую посуду обработать ацетонитрилом, высушить при комнатной температуре. 4
1
Термины и определения приведены в соответствии с ГОСТ Р 52738-2007.
2
3
4