Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств ципроконазола и эпоксиконазола в зерне и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указании МУК 4.1.3134—13

Издание официальное

Москва ♦ 2014

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств ципроконазола и эпоксиконазола в зерне и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3134—13

ББК 51.23 060

060 Определение остаточных количеств ципроконазола и эпоксиконазола в зерне и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014.—15 с.

ISBN 978—5—7508—1338—4

1.    Разработаны сотрудниками ГНУ «Всероссийский НИИ защиты растений» (В. И. Долженко, И. А. Цибульская, О. К. Остроухова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 29 октября 2013 г. № 3).

3.    Утверждены врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А. Ю. Поповой 12 ноября 2013 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

ISBN 978-5-7508—1338—4

О Роспотребнадзор, 2014 О Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014

МУК 4.1.3134—13

УТВЕРЖДАЮ Врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

А. Ю. Попова

12 ноября 2013 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств ципроконазола и зпоксиконазола в зерне и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3134—13

Свидетельство о метрологической аттестации №01.5.04.144/01. 00043/2013.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации ципроконазола в зерне сои в диапазоне 0,025—0,25 мг/кг, масле сои - в диапазоне 0,05—0,5 мг/кг и эпоксикона-зола в зерне и масле сои в диапазоне концентраций 0,05—0,5 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: ципроконазол.

Название действующего вещества по ИЮПАК: 1-(1Н-1,2,4-триа-зол-1 -ил)-2-(4-хлорфенил)-3-циклопропилбутан-2-ол.

Эмпирическая формула: С^НцСЖзО. Молекулярная масса: 291,8.

3

Ципроконазол представляет собой смесь двух диастереоизомеров (в соотношении 1:1).

Бесцветная жидкость.

Температура плавления: 106,2—106,9 °С; давление пара при 25 °С: 2,6 х 10~² мПа.

Коэффициент распределения н-октанол-вода: K^logP -3,1.

Растворимость: в воде - 93 мг/дм³ (22 °С); в гексане - 1,3, метаноле -410, этаноле - 230, толуоле - 100, октаноле - 100, ксилоле - 120, ацетоне - 360, этилацетате - 240, дихлорметане - 430, диметилсульфоксиде - 180 (все в г/дм³,25 °С).

Вещество разлагается: 5 % при хранении в течение 2 лет. Вещество стабильно в водном растворе при pH 1—9 в течение 35 дней при 50 °С, 14 дней при 80 °С; медленно гидролизуется в IN НС1 и NaOH.

В почвах ципроконазол не аккумулируется и умеренно быстро разлагается, DT50 около 3 месяцев.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD₅₀ для крыс 1 020—1 333, мышей 200—218 мг/кг, острая дермальная токсичность LD50 для крыс и кроликов > 2 000 мг/кг; не оказывает раздражающего действия на кожу и глаза кролика.

Область применения. Системный фунгицид, действует на грибной патоген внутри растения за счет нарушения процесса биосинтеза стеро-лов в клеточной мембране.

Гигиенические нормативы для ципроконазола в России. МДУ для сои не установлен.

Название действующего вещества по ИСО: эпоксиконазол.

Название действующего вещества по ИЮПАК: 1-{2-(4-фторфе-нил)-[3-(2-хлорфенил)оксиран-2-ил]метил} -1 //-1,2,4-триазол.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C17H13CIFN3O. Молекулярная масса: 329,8.

4

МУК 4.1.3134—13

Эпоксиконазол представляет собой 2R,3S - 2S,3R энантиомерную пару.

Бесцветные кристаллы без запаха.

Температура плавления: 136,2 °С; давление пара при 20 °С: 0,01 мПа.

Коэффициент распределения н-октанол-вода: K_owlogP = 3,44 (pH 7).

Растворимость: в воде - 6,63 х 10^-4 г/100 см³ (20 °С); в гептане 0,04; ацетоне -14,4; дихлорметане - 29,1 (г/100 см³).

Вещество не гидролизуется при pH 5—7 в течение 12 дней.

В биологически активных почвах эпоксиконазол разлагается почвенными микроорганизмами - DT₅₀ около 2—3 месяцев, в растениях экстенсивно де1радирует.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LDso для крыс > 5 000 мг/кг, острая дермальная токсичность LDjo для крыс > 2 000 мг/кг; не оказывает раздражающего действия на кожу и глаза кролика.

Область применения. Системный фунгицид широкого спектра действия, обладает профилактическим и лечебным свойствами, эффективен против возбудителей ржавчины, мучнистой росы и пятнистости на зерновых и сое.

Гигиенические нормативы для эпоксиконазола в России. МДУ для сои не установлен.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее сос гавляющис) результатов измерений при доверительной вероятности /^{> =} 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Объект анализа Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель повторяемости (относительное средне-квадратическое отклонение повторяемости), % Показатель внутрила- бораторной прецизи онности, % Показатель воспроизводимости, 0*. % Показатель точности* (границы относительной погрешности), ± S, % иипроконазол Зерно сои 0,025-0,25 7 9 12 25 Масло сои 0,05—0,5 7 8 11 24 эпоксиконазол Зерно сои 0,05—0,5 7 9 12 25 Масло сои 0,05—0,5 7 8 11 24 * Соответсгвуег расширенной неопределенности при коэффицие»ггс охвата А: - 2

5

Таблица 2 Полнота извлечения ципроконазола и эпоксиконазола, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для п » 20, Р - 0,95

Анализи руемый объект, мг/кг Предел обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение полноты извлечения, % Стандартное отклонение, 5, % Доверительный интервал среднего результата, ±% ципроконазол Зерно сои 0,025 0,025—0,25 90 6,6 3,3 Масло сои 0,05 0,05—0,5 82 7,8 3,9 эпоксиконазол Зерно сои 0,05 0,05—0,5 80 9,2 4,6 Масло сои 0,05 0,05—0,5 76 7,9 3,9

2. Метод измерений

Методика основана на определении ципроконазола и эпоксиконазола в одной пробе методом капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора после их извлечения из образцов зерна сои водным ацетоном, из масла после его растворения в гексане ацетонитрилом и очистки экстракта в системе двух несмеши-вающихся растворителей.

Идентификация ципроконазола и эпоксиконазола проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений Газовый хроматограф с термоионным детектором и кварцевой капиллярной колонкой длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм с толщиной слоя полярной неподвижной фазы 0,25 мкм Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг

6

МУК 4.1.3134—13

Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г Колбы мерные на 10, 50, 100 и 1 000 см³ Микрошприц объемом 10 мм³ Пипетки градуированные объёмом 1,2,5 и 10 см³ Цилиндры мерные на 50 и 100 см³

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы Цигтроконазол, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,9 %

Эпоксиконазол, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,9 %

Азот осч, в баллонах с редуктором    Г ОСТ 9293—74

Ацетонитрил хч    ТУ 6-09-3534—82

Вода для лабораторного анализа (бидистиллят, деионизованный)    ГОСТ Р 52501-05

н-Гексан, хч    ТУ 6-09-3375—78

Дихлорметан, хч    ТУ 6-09-3716—80

Натрий хлористый, хч    ГОСТ 4233-77

Натрий серно-кислый безводный, чда,

свежепрокаленны й    ГОСТ 4166-76

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Воронки делительные объемом 250 и 500 см³ ГОСТ 8613-75 Воронки химические конусные    ГОСТ 25336-82

Колбы плоскодонные конические вместимостью 250 см³

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 50,100 и 250 см³

Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар

Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 35 кГц Фильтры бумажные быстрой фильтрации

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

7

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по элсктробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленные ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -поГОСТ 12.0.004-90.

4.3.    При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 мПа (150 кгс/см²) необходимо соблюдать «Правила устройства и безопасной эксплуатации стационарных компрессорных установок, воздуховодов и газопроводов под давлением» ПБ-ОЗ-576—03. Запрещается открывать вентиль баллона, не установив на нем понижающий редуктор.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом капиллярной газожидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.7. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа капиллярную колонку кондиционируют в токе азота при температуре термостата колонок 250 °С до стабилизации нулевой линии.

8

МУК 4.1.3134—13

7.2. Подготовка растворителей

Растворители, используемые для анализа, специальной подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых растворителей. Для этого 100 см³ растворителя испаряют при помощи вакуумного ротационного испарителя при температуре 40 °С до объема 1 см³ и хроматографируют. При обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают общепринятыми методами.

7.2. Приготовление основного и градуировочных растворов

7.3.1.    7.3.2. Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/см³: точную навеску ципроконазола или эпоксиконазола (50 i 0,1) мг помещают в мерную колбу на 100 см³, растворяют в ацетоне и доводят объем до метки тем же растворителем.

Градуировочные растворы ципроконазола с концентрациями 0,5; 1,0; 2,0 и 5,0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления основного раствора по объему, используя гексан.

7.3.1.1.    Раствор № 1 с концентрацией ципроконазола 5 мкг/см³: в мерную колбу на 100 см³ вносят 1 см³ основного раствора и доводят объем до метки гексаном.

7.3.1.2.    Раствор Ля 2 с концентрацией ципроконазола 2,0 мкг/см³: в мерную пробирку вместимостью 10 см³ вносят 4 см³ раствора № I и доводят объем до метки гексаном.

7.3.1.3.    Раствор Ля 3 с концентрацией ципроконазола 1,0 мкг/см³: в мерную пробирку вместимостью 10 см³ помещают 2 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки гексаном.

7.3.1.4.    Раствор ЛЬ 4 с концентрацией ципроконазола 0,5 мкг/см³: в мерную пробирку вместимостью 10 см³ вносят 1 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки гексаном.

Градуировочные растворы эпоксиконазола с концентрациями 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления основного раствора по объему, используя гексан.

7.3.2.1.    Раствор Ля 1 с концентрацией эпоксиконазола 10 мкг/см³: в мерную колбу на 100 см³ вносят 2 см³ основного раствора и доводят объем до метки гексаном.

7.3.2.2.    Раствор Ля 2 с концентрацией эпоксиконазола 5,0мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 1 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки гексаном.

7.3.2.3.    Раствор Ля 3 с концентрацией эпоксиконазола 2,0 мкг/см³: в мерную пробирку вместимостью 10 см³ помещают 4 см³ раствора Ня 1 и доводят объем до метки гексаном.

9