Федеральная служба но напору в сфере защиты нрав потребите, и благополучии человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в сельскохозяйственном сырье и пищевых продуктах

Сборник методических указаний по методам контроля МУК 4.1.2917—4.1.2919—11;

4.1.2926—11; 4.1.2936—11

ББК 51.21+51.23 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в сельскохозяйственном сырье и пищевых продуктах: Сборник методических указаний по методам контроля.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2011.—91 с.

1.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 2.06.2011 № 1).

2.    Утверждены Руководителем Федеральны! службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 12 июля 2011 г.

3.    Введены в действие с момента утверждения.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21+51.23

<    Росно ipeoiia.uop, 2011

<    Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2011

Градуировочный раствор № 1 хранят в мороаильной камере при температуре -18 °С в течение 6 месяцев.

Этот раствор используют для приготовления проб яблок и яблочного сока с внесением эмамектина при оценке полноты извлечения вещества методом «внсссно-найдено». а также контроле качества результатов измерений методом добавок.

7.5.3.    Рабочие растворы Ns 2—5 эмамектина для градуировки (концентрация 0,01—0,1 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 0.5; 1.0; 2.5 и 5.0 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией 2 мкг/см³ (п. 7.5.2), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2—5 с концентрацией эмамектина 0,01; 0.02; 0.05 и 0.1 мкг/см³. соответственно.

Рабочие растворы сразу после приготовления помещают в морозильную камеру, где хранят при температуре -18 °С в течение 6 месяцев.

7.5.4.    Рабочие растворы №2а—5а флуорогенного производного эмамектина для градуировки (соответствуют концентрации эмамектина

0.01—0,1 мкг/см³). В 4 градуированные пробирки вместимостью 10 см³ вносят по 1 см³ каждого из 4 рабочих растворов эмамектина № 2—5 (п. 7.5.3). прибавляют по 0,1см³ l-N-мстилимидазола. перемешивают. Смесь охлаждают до 0—5 °С. помещая пробирки на ледяную баню, добавляют по каплям 0.3 см³ реактива для дериватнзации (приготовленного по п. 7.4). перемешивают и выдерживают час при комнатной температуре. Затем в каждую пробирку вносят по 0.6 см³ бидистиллированной воды и 3 см³ ацетонитрила, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2а—5а флуорогенного производного с концентрацией эмамектина 0.01; 0.02; 0.05 и 0.1 мкг/см³. соответственно.

Рабочие растворы сразу после приготовления помещают в морозильную камеру, где хранят при температуре -18 °С в течение месяца.

7.6. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (ЕЛ • с) от концентрации эмамектина в растворе (мкг/см³). устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам флуорогенного производного эмамектина № 2а—5а для градуировки.

В инжектор хроматографа вводят по 10 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют нс менее 3 параллельных измерений.

Устанавливают площади пиков (ЕЛ • с) флуорогенного производного основного компонента действующего вещества - эмамектина бензоата В и.

86

МУК 4.1.2936—11

Градуировочную характеристик) проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значение площадей отличается более чем на 11% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

7.7. Подготовка концентрирующих патронов Oazis* И LB

Патрон устанавливают на аллонж с прямым отводом хзя вакуума и промывают с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом. Используют 1 см³ метанола, затем 2 см³ бидистиллированной воды со скоростью прохождения растворителей через патрон 1—2 капли в секунду. Патроны готовят непосредственно перед анализом.

8.    Отбор и хранение проб

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами: 16270—70 «Яблоки свежие ранних сортов созревания». ТУ»: 21122—75 «Яблоки свежие поздних сортов созревания. ТУ»: 27572-87 «Яблоки свежие для промышленной переработки»: 26313—84 «Продукты переработки плодов и овощей». «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051—79 от 21.08.79).

Пробы яблок хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 5 дней, яблочный сок анализируют в день приготовления.

Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.

Перед анализом яблоки измельчают.

9.    Выполнение измерений

9.1. Экстракции

Образец измельченных яблок массой 10 г (ш) помещают в коническую колбу вместимостью 250 см³. добавляют порцию ацетонитрила объемом 47 см³, помещают на 3 мин в ультразвуковую баню, затем 15 мин встряхивают на механическом встряхиватслс. Пробе дают отстояться. переносят в центрифужный стакан и центрифугируют 5 мин при 3 500 об./мин. Аликвот) надосадочной жидкости объемом 10 см³ (^г/₅ часть экстракта) с помощью пипетки переносят в плоскодонную колбу вместимостью 50 см³, добавляют порцию бидистиллированной воды объемом 18 см³, помещают на 2 мин в ультразвуковую баню, подвергают очистке по п. 9.2. затем дериватизации по п. 9.3.

МУК 4.1.2936—11

9.2. Очистка экстракта на концентрирующем патроне Oazis HLB

Пробу, полученную по п. 9.1 или 9.4. вносят с помощью разряжс-ния. создаваемого водоструйным насосом на концентрирующий патрон Oazis HLB Зсс (60 mg), подготовленный по п. 7.7. со скоростью пропускания раствора 2—3 кап./с, нс дотекая пересыхания патрона. После нанесения пробы патрон промывают 2 см³ смеси вода-ацетонитрил (7 : 3, по объему), пропуская растворитель до нижнего края сорбента, элюаты отбрасывают. Вещество элюируют с патрона 2 см³ ацетонитрила. собирая элюат непосредственно в круглодоннную колбу для упаривания вместимостью 20—25 см³ (при сборе элюата в пробирку и последующем переносе раствора в колбу для упаривания, пробирку необходимо обмыть дважды порциями ацетонитрила по 2—3 см³). Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С досуха. Для полного удаления следов влаги в колбу вносят 3—5 см³ ацетонитрила и вновь упаривают. Остаток в колбе растворяют в 1 см³ ацетонитрила (V). помещая в ультразвуковую баню на 2 мин. и подвергают дериватизации по п. 9.3.

9.3. Дериватишция

К ацетонитрильному раствору, полученному по п. 9.2. прибавляют 0.1 см³ l-N-метилимцдазола. перемешивают. Смесь охлаждают до 0— 5 °С. помещая пробирки с ледяную баню, добавляют по каплям 0.3 см³ реактива хля дери ватизаци и (приготовленного по п. 7.3). перемешивают и выдерживают час при комнатной температуре. По окончании процесса в пробирку вносят 0.6 см³ бидистиллированной воды и 3 см³ ацетонитрила. тщательно перемешивают и анализируют в условиях хроматографирования. указанных в п. 9.5.

9.4. Яблочный сок

Образец сока массой 10 г (ш) помещают в коническую колбу вместимостью 250 см³, добавляют 40 см³ ацетонитри.ла. помещают на 5 мин в ультразвуковую баню, затем 15 мин встряхивают на механическом встряхнватслс. Пробу переносят в центрифужный стакан и центрифугируют 5 мин при 3 500 об./мин. Аликвоту надосадочной жидкости объемом 10 см³ ('/> часть экстракта) с помощью пипетки переносят в плоскодонную колбу вместимостью 50 см³. добавляют 15 см³ бнднетиллнро-ванной воды, помещают на 2 мин в ультразвуковую баню, подвергают очистке по п. 9.2. затем дериватизации по п. 9.3.

МУК 4.1.2936—11

9.5. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Жидкостный хроматограф с флуоресцентным детектором с переменной длиной волны.

Хроматографическая колонка стальная, длиной 150 мм. внутренним диаметром 4.6 мм. содержащая Eclipse XDB С18. зернение 5 мкм.

Температу ра колонки: 35 °С.

Длина волны: возбуждение 365 нм.

эмиссия 470 нм.

Объем вводимой пробы: 10 мм³.

Подвижная фаза: ацетонитрил-0.1 %-я орто<|юсфорная кислота (95 : 5. по объему).

Скорость потока элюента: 1.3 см/мин

Ориентировочное время выхода:

эмамектин бензоат Вц>.: 9.940—10.310 мин

эмамектин бензоат В_1а- 12.358—13.153 мин (основной пик)

Линейный диапазон детектирования: 0.1—1.0 нг.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика (ЕЛ • с) флуэрогенного производного эмамск-тина бензоата В_1с1 (основной пик), находят среднее значение, с помощью градуировочной характеристики определяют концентрацию эмамектнна в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор флуорогенного производного эмамектнна с концентрацией 0.1 мкг/см³, разбавляют ацетонитрилом (не более чем в 10 раз).

10. Обработка результатов анализа

Содержание эмамектнна в пробе рассчитывают по форму ле:

AVK

. где

т

А - концентрация эмамектина в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с усредненной величиной площади хроматографического пика флуорогенного производного эмамектина бензоата B_)a. мкг/см³;

V— объем экстракта, подготовленного для дериватизации. см³: т - масса анализируемого образца, г.

К - 5. с учетом объема экстракта, взятого для анализа.

89

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

Л'/.    -    результаты    параллельных    определений,    мг/кг;

г - значение предела повторяемости (табл. 1). при этом г = 2.8<т_г. При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± Л) мг/кг при вероятности I* = 0.95. где Л'- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

Д - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

л ^их

Д =-.    где

100

U - граница расширенной неопределенности (табл. 1). %.

Если содержание эмамсктина менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание эмамектина в пробе, яблок и яблочного сока - менее 0,005 мг/кг»*

* - 0,005 мг/кг предел обнаружения в яблоках и яблочном соке.

13. Контроль качества результатов измерении

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)—2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрнлабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки С_д должна удовлетворять условию:

МУК 4.1.2936—11

±Д_#а(±Д_#0.) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/кг. при этом:

А_л = ± 0.84 А. где

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

U - граница расширенной неопределенности (табл. 1). %. Контрольный параметр процедуры (/Q рассчитывают по формуле:

/С = Л" -X - С» где

Л", X, С_д - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки. соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию (2).

\К_у\йК.

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разнос время, разные операторы, разные лаборатории). нс должно превышать предела воспроизводимости (R)

(3)

91

МУК 4.1.2917—1.1.2919—11:4.1.2926—11:4.1.2936— 11

Содержание

Определение остаточных количеств Три i икоиазола в семенах и масле сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2917—11..................................................................................................4

Определение остаточных количеств Хлорпирифоса в зерне и соломе пшеницы, яблоках и яблочном соке, семенах и масле рапса, клубнях картофеля методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2918—1!................................................................................................21

Определение остаточных количеств Дминоииралида в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, семенах и масле рапса методом капиллярной

газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2919—11........................................41

Определение остаточных количеств Хлорпирифос-метила в зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы, семенах и масле рапса методом

капиллярной газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2926—11.................63

Определение остаточных количеств эмамектина (эмамектииа бензоата) в яблоках и яблочном соке методом высокоэффекзивной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2936—11....................................................................79

3

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|)срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

12 июля 2011 г.

Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств эмамектина (эмамектина бензоата) в яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2936—11

Свидетельство о метрологической аттестации №0082.20.04.11 от 25.04.2011.

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации эмамектина бензоата (далее эмамектина) в яблоках и яблочном соке в диапазоне 0.005—0.05 мг/кг.

Эмамектнн бензоат - смесь эмамектина бензоата Bi_a и эмамектина бензоата В|_Ь. Содержание компонента В_)а нс менее 90 %.

Эмамектнн бензоат Bi_a - (10E,14E,16E,22Z)-(lR,4S,5'S_t6S,6'S, SR, 12S, 13S, 2OR, 21R, 24S) -6 '-l(S)-empo-6yrwi]-2\,24-дипщрокси-5\ 11.13, 22-тетраметил-2-оксо-(3,7,19-триоксатстрацикло[ 15.6.1.1о^20,24] пента-коза-10.14.16.22-тстраен)-6-спиро-2 '-(5 .6 '-дигидро-2 'Н-пиран)-12-ил 2,6-дидеокси-3-0-метил-4-0-(2,4,6-тридсокси-3-0-мстил-4-метиламино-а-Ь-ликсо-гсксопиранозил)-а-Ьч7/7ябм//^-гексопиранозид

Эмамектнн бензоат B_lb - (10E,14E,16E,22Z)-(1R,4S,5'S, 6S,6'S, SR, 12S, 13S,20R,2IR,24S)-21.24-дигидрокси 6'-изопропил-5', 11.13.22-тет-рамстил-2-оксо-(3.7.19-триоксатетрацикло-| 15.6.1.1^4,8.0^20,24]    пентакоза-

10.14.16.22-тетраен)-6-спнро-2 '-(5 .6 -дигид-ро-2 Н-пиран)- 12-ил2.6-дидсоксн-3-0-мстнл-4-0-(2.4.6-тр1исокси-3-0-метнл-4-метил-амино-а-Ь-ликсо-гексопиранозил)-а-Ь-ярдбш/о-гексопиранозид

Эмпирическая Компонент:    R: эмамектин бензоат Bja СН2-СН3 эмамектин бензоат В1Ь СН3 формула: CjeHeiNOu C56H79NO15

Молекулярная масса: 1008.3 994.2

---

Эмамектин бензоат - кристаллический порошок, с органическим запахом, цвет от белого до грязно-белого. Температу ра плавления 141— 146 °С (с термальным разложением при нагревании до 300 °С). Плотность от 1.2 г/см³ (23 °С). Давление паров: 4 х Ю^Па (25 °С). Растворимость в воде (при 25 °С): 0.31 г/дм³ (дистиллированная вода. pH 6.5). 0.32 г/дм³ (буферный раствор. pH 5), 0.024 г/дм³ (буферный раствор. pH 7). 0.0001 г/дм³ (буферный раствор. pH 9). Растворимость в органических растворителях (г/дм³, при 25 °С): октанол - 48. ацетон - 140. ди-хлормстан - > 500. этилацетат - 81. метанол - 270. толуол - 26. гсксан-0.077. циклогексан - 0.23. Коэффициент распределения н-октанол/вода logP_ow 3,0 ±0.1 (pH 5). 5.0 ±0,2 (pH 7), 5.9 ±0.3 (pH 9). Гидролитически стабилен при pH 5—8 (25 °С). Через 6 недель при pH 9 (25 °С) отмечена деградация. DT_5l) 19.5 недель. Подвержен быстрой фотодеградацнн. DT₅„ (в исследовании квантового выхода фотолиза) - 0.89 дней.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс (самки) -53 мг/кг. мышей (самки) - 120—165 мг/кг: острая дермальная токсичность (LDso) для крыс > 2 000 мг/кг: острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс > 2.12—+.44 мг/дм³ (4 ч).

Область применения:

Эмамектин - несистемный инсектицид кишечно-контактного действия для зашиты томатов, виноградной лозы, капусты и других культур от широкого спектра личинок лспидоптсры.

МУК 4.1.2936—11

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и сё составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0.95 нс превышает значений, приведенных в табл. 1. лля соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анализи- руемый объект Диапазон онределяе-мых кон-цешраций, мг/дм3 (мг/кг) Показатель точности Ораница ошосителыюй понятности), %Р = 0,95 Стандартное огклоне-ние повторяемости, (Тп % Предел повто ряемос ти, Гу % Предел воспро изводи мости, /?,% по методу' внссено-найдено граница расширенной неопределенности*, и Яблоки от 0,005 до 0,05 вкл. 21,1 50 4,1 11 15 Яблочный сок от 0,(Х)5 до 0,05 вкл. 15,8 50 3,9 11 15

* U - граница расширенной неопределенное ш при колффициеше охвата 2, в соответствии с доку ментом SANCO/10684/2009_

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (п = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 2

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, // = 20 11редел обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг 11олнота извлечения вещества, % Стандартное отклонение, S, % Доверительный интервал средаего результата, % Яблоки 0,005 0,005—0,05 83,11 3,83 ±2,04 Яблочный сок 0,005 0,005—0,05 88,89 3,77 ±2,01

2. Метод измерений

Методика основана на определении эмамсктина методом высоко-э<|н|)сктивной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с флуоресцентным детектором после экстракции эмамсктина из проб яблок и яблочного сока - ацетонитрилом, очистки аликвоты экстракта

81

МУК 4.1.2936—11

на концентрирующих патронах Oazis® HLB. превращения вещества во флуорогенное (N-трифторацетилированное) производное.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реакгтивы и материалы

3.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с флуоресцентным Номер Госресстра детектором, фирмы «Agilent» (США)

Весы аналитические ВЛА-200 Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности ± 0.038 г Колбы мерные 2-100-2 и 2-1 000-2 Меры массы

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 0,1; 1.0; 2.0; 5.0 и 10,0 см³ Пробирки градуированные 2-го класса точности вместимостью 10 см³ Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2.

цена деления 1 °С. пределы измерения 0—55 °С ТУ 25-2021.003—88 Цилиндры мерные 2-го класса точности

вместимостью 50. 500. 1 ООО см³    ГОСТ 1770-74

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Эмамектин бензоат (МК244). аналитический стандарт с содержанием действующего вещества (98.1 ± 0.3) % (В 1а 94,4 %,'В1Ь 3.7 %), СА Reg. № 155569-912-8 (фирма «Syngenta») Ацетонитрил для хроматографии, хч Вода для лабораторного анализа (деионизованная. бидистнлированная)

Калий углекислый (карбонат, поташ), хч. прокаленный

Кислота орто(|юс(|юрная. хч, 85 % l-N-метилимидазол. фирма «Пика»

(СAS № 616-47-7, BRN 105197)

82

МУК 4.1.2936—П

Трифгоруксусный ангидрид. фирма «Fluka»

(CAS №407-25-0. BRN 746197)

Метиловый спирт (метанол), хч    ГОСТ 6995-77

Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид.

пснтоксид фосфора)    ТУ 6-09-4173—85

Допускается использование реактивов иных производителей с более высокой квалификацией, нс требующих выполнения п. 7.1 (очистка ацетонитрила).

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Аллонж прямой с отводом для вакуума (для работы с концентрирующими патронами)

Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс    ТУ 64-1-2851—78

Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария)

Воронки конусные диаметром 30—35 мм    ГОСТ 25336-82

Г омогенизатор

Груша резиновая    ТУ 9398-005-0576-9082—2003

Колбы грушевидные (круглодонные) на шлифе

вместимостью 20—25 см³    ГОСТ 9737-93

Колбы плоскодонные (конические) с пришли-

фованной пробкой вместимостью 50 и 250 см³ ГОСТ 23932-90

Лсд

Мембранные фильтры микропористые, марки ММК. капроновые, диаметром 50 мм. размер

пор 0.45 мкм    ТУ 9471 -002-10471723—2003

Набор для фильтрации растворителей через

мембрану

Насос водоструйный вакуумный    ГОСТ 25336-82

Патроны для твердофазной экстракции Oazis*

HLB Зсс (60 mg). WAT094226.

Lot № 077В37297С (Waters. США)

Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buclii. Швейцария Стеклянные палочки Установка дтя перегонки растворителей Хроматографическая колонка стальная, дзиной 150 мм. внутренним диаметром 4.6 мм. содержащая Eclipse XDB С18. зернение 5 мкм Центрифуга роторная, скорость вращения до 3 500 об./мнн. с центрифужными стаканами объемом 100 см³

83

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76. требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79. а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение до.тжно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожароту шения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе на должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308— 07. Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004—90.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя. с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %:

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерении

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетонитрила (при необходимости), приготовление реактива для дериватизацни. подвижной фазы для ВЭЖХ. кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка концентрирующих патронов Oa/isK HLB.

МУК 4.1.2936—11

7. /. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пснтоксида фосфора) не менее 1 ч. после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом кадия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.2. Подготовка подвижной фалы для ВЭЖХ

7.2.1.    Приготовление раствора ортофосфорной кислоты с массовой долей 0,1 % (0,1 %-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помещают 250—300 см³ бидистиллированной воды, вносят 1 см³ ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.

7.2.2.    Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 950 см³ ацетонитрила, вносят 50 см³ 0.1 %-го раствора орто(|юс(|юрной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 1,3 см³/.мин до установления стабильной базовой линии.

7.7. Приготовление реактива для дери ваши ищи и

Смешивают трифторуксусный ангидрид и свсжспсрсгнанный ацетонитрил в объемном соотношении 1 : 2. Реактив годен в течение рабочего дня.

7.5. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

7.5.1.    Исходный раствор эмамектина для градуировки (концентрация 200мкг/елг). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,0200 г эмамектина. растворяют в 50—60 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18 °С в течение 6 месяцев.

Растворы № 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.5.2.    Раствор № 1 эмамектина для градуировки и внесения (концентрация 2 мкгУслс). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ исходного раствора эмамектина с концентрацией 200 мкг/см³ (п. 7.5.1). разбавляют ацетонитрилом до метки.

85