МУК 4.1.2679-10
Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты (малеинового гидразида) в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Федеральная сдужба по напору к сфере защиты нрав но ■ребнгедей и бдагонодучия чедовека

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Методические указания МУК 4Л .2668—10,4.1.2675—4Л .2679—10,

4.1.2683—4.1.2684— 10,4.1.2687—10, 4.1.2690— 10, 4.1.2706—4.1.2709—10,4.1.2768—10

жен быть 2—2,2. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 cm Vmhh в течение 5 мин. после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

7.2.2. Приготовление градуировочных растворов

7.2.2.1.    Стандартный раствор ЛЬ 1 с концентрацией Малеинового гидразида 1,0 мг/см*. Взвешивают 50 мг Малеинового гидразида в мерной колбе объемом 50 см³. Навеску растворяют в подвижной фазе и доводят объем до метки подвижной фазой. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и построения калибровочной кривой.

7.2.2.2.    Стандартный раствор № 2 с концентрацией Малеинового гидразида 100,0мкгем³. Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 10 см³, помещают в мерную колбу объемом 100 см³ и доводят объем до метки подвижной фазой. Стандартный раствор № 2 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.3.    Стандартный раствор ЛЬ 3 с концентрацией Мачеинового гидразида 20,0мкг ем³. Из стандартного раствора №2 отбирают пипеткой 10 см³. помещают в мерную колбу объемом 50 см³ и доводят объем до метки подвижной фазой. Стандартный раствор № 3 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.4.    Стандартный раствор ЛЬ 4 с концентрацией Малеинового гидразида 10,0 мкг ем³. Из стандартного раствора №2 отбирают пипеткой К) см³, помещают в мерную колбу объемом 100 см³ и доводят объем до метки подвижной фазой. Стандартный раствор № 4 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.5.    Стандартный раствор ЛЬ 5 с концентрацией Мачеинового гидразида 5,0мкг ем³. Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 5 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 ем³ и доводят объем до метки подвижной фазой. Стандартный раствор № 5 используется для построения калибровочной кривой.

7.2.2.6.    Стандартные растворы с концентрацией Мачеинового гидразида 400, 200, 80 и 40 мкг ем³ для внесения в образцы. Методом последовательного разведения подвижной фазой стандартных растворов № 1 и № 2 готовят растворы, содержащие по 400. 200. 80. 40 мкг/см³ и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы почвы.

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Малеинового гидразида в растворе

МУК 4.1.2679—10

(мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с концентрацией 100.0: 20,0: 10.0 и 5.0 мкг/см³. В инжектор хроматографа вводят по 5 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.2. Осуществляют нс менее 5-ти параллельных измерений.

7.4. Подготовка концентрирующих патронов Диапак С16 для очистки экстрактов

7.4.1. Подготовка концентрирующих патронов Диапак С16 для очистки экстракта Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон нс должна превышать 5 см³/мин.

Патрон Диапак С16 устанавливают на алонж с отводом для вакуума. сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом нс менее 10 см³ (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 см³ подвижной фазы. Элюаты отбрасывают. Нельзя дотекать высыхания поверхности патрона.

7.4.2. Проверка хроматографического поведения Малеинового гидразида на концентрирующих патронах Диапак С16 Из стандартного раствора Малеинового гидразида в подвижной фазе, содержащего 40 мкг/см³, отбирают 1 см³, помещают в цилиндр объемом 10 см³, прибавляют 6 см³ подвижной фазы, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы и хроматографируют. Исходный цилиндр обмывают 10 см³ подвижной фазы и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см³, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температу ре не выше 30 °С. сухой остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Малеиновый гидразид и полноту смывания с колонки.

7.5. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколон-кой Zoibax Eclipse устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 30 °С и скорости потока подвижной фазы 1 см /мин 3—4 часа.

97

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов». №2051-79 от 21.08.79. а также в соответствии с ГОСТ 1743.01—83 «Почвы. Общие требования к отбору проб». ГОСТ 26950— 89 «Почвы. Отбор проб».

Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температу ре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могу т храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

9. Проведение определений

9.1. Почва

9.1.1. Экстракция

Пробу почвы массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см³. прибавляют к ней 10 см³ воды и выдерживают 10 мин при комнатной температу ре. Малеиновый гидразид экстрагируют 30 см³ метанола, добавляя каждый раз при экстракции по 1 см³ 0.1 н соляной кислоты. Экстагируюг в течение 5 минут в ультразвуковой ванне и 30 мин на шейкере. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин на скорости 4 000 оборотов в мину ту . Супернатант фильтруют в коническую колбу объемом 250 см³ через ватный тампон. Экстракцию повторяют еще два раза, использу я по 30 см³ метанола и по 1 ем³ 0,1 н соляной кислоты и помещая каждый раз на 5 мин в ультразвуковую ванну и на 30 мин на шейкер. Пробы центрифугируют, фильтру ют, экстракты объединяют в конической колбе объемом 250 см³. Объединенный экстракт фильтруют через фильтр «красная лента» в концентратор объемом 250 см³ и у паривают на роторном ваку умном испарителе до водного остатка (2—2.5 мл).

К водному остатку добавляют 6 мл подвижной фазы и фильтруют через плотный ватный тампон в цилиндр на 10 см³.

9.1.2. Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С16.

Полу ченный в п. 9.1.1 раствор наносят на подготовленный патрон Диапак С16. элюат собирают в концентратор объемом 100 см³. Патрон промывают 10 см³ подвижной фазы, элюаты объединяют в концентраторе объемом 100 см³.

МУК 4.1.2679—10

После очистки элюат выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы, фильтруют от механических примесей на фильтр-патроне для шприцев Cromafil-PET 20/25 с размером пор 0.20 мкм и 5 мм³ пробы вводят в хроматограф.

9.2. Уаовия хроматографирования

Хроматограф жидкостной Agilent 1200 LCMS с диодно-матричным детектором G1315B с изменяемой длиной волны.

Колонка стальная Symmetry Shield RP18. 250 мм х 4.6 мм, зернение 5 мкм, фирма «Waters».

Прсдколонка стальная Zorbax Eclipse XDB-C8. 12.5 мм х 2.1 мм. зернение 5 мкм. фирма «Agilent».

Температу ра колонки: 30 °С.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-муравьиная кислота в соотношении 1 : 99 : 0.4.

Длина волны: 300 нм.

Время удерживания Малеинового гидразида: 4.9 мин ± 3 %.

Чувствительность нс менее 100 mAU (миллисдиниц абсорбции) на шкалу.

Объем вводимой пробы: 5 мм³.

Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2—20 нг

10. Обработка результатов

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Agilent Technologies ChcmStation for LC 3D.

Альтернативная обработка результатов.

Содержание Малеинового гидразида рассчитывают по формуле:

100 • S_m т

А' - содержание Малеинового гидразида в пробе, мг/кг;

.S’_tW - высота (площадь) пика стандарта, мм;

S_np - высота (площадь) пика образца, мм;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/см³;

V - объем экстракта, подгото азе н но го для хроматографирования, см³; т - масса анализируемого образца, г (см³);

Р - содержание Малеиновою гидразида в аналитическом стандарте. %.

99

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

Л'/.    -    результаты    параллельных    определении,    мг/кг;

г - значение предела повторяемости (табл. 1). при этом г = 2.8 о_г. При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± А) мг/кг при вероятности Р = 0.95. где

X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

100

3 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1). %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе менее 4,0 мг/кг»*

* - 4,0 мг/кг предел обнаружения.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

МУК 4.1.2679—10

Величина добавки С₀ должна удовлетворять условию:

й* =    •    ^рД^с

±    . (± Д_А0.) -характеристика погрешности (абсолютная погреш

ность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг. при этом:

Д, = ± 0.84 Л, где

Д - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д =

. где

д - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1). %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

E, = D'-D-N_a. где

"7Р, 3, Q- среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11). содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки. соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (/Q с нормативом контроля (К).

Если резу льтат контроля процедуры удовлетворяет у словию:

VQSK    (2)

процедуру анализа признают у довлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полу ченных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, нс должно превышать предела воспроизводимости (R):

101

МУК 4.1.2668—10,4.1.2675—4.1.2679—10, 4.1.2683—10, 4.1.2684—10, 4.1.2687—10, 4.1.2690—10, 4.1.2706—4.1.2709—10,4.1.2768—10 Содержание

Определение остаточных кол и мест кж>1ианилина в воде, почве, зеленой массе, семенах и масле рапса, ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2668    10.....................4

Методика выполнения измерений остаточного содержания грифлоксистро-бина и его метаболита в ягодах и соке винограда методом высокоэффективной

жидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2675—10......................................................20

Методика выполнения измерений остаточного содержания тиаклоприда в зеленой массе, семенах и масле рапса, ягодах и соке винограда методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2676—10...................37

Методика выполнения измерений остаточного содержания протиоконазола по метаболиту протиоконазол-дестио в семенах, масле и зеленой массе рапса

методом капиллярной газожидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2677—10.........53

Определение остаточных количеств Псноксулама в воде, почве, зерне и соломе риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2678—10.......................................................................................................70

Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты

(малеинового гидразида) в почве методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК4.1.2679—10 ........................................................................... 89

Методика выполнения измерений остаточного содержания гриадимснола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2683—10.........................................................................103

Методика выполнения измерений остаточного содержания тебуконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2684    10.........................................................................117

Методика выполнения измерений остаточного содержания мезосульфурон-метила в воде, почве, зеленой массе, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хрома юг рафии:

МУК'4.1.2687—10.....................................................................................................131

Методика выполнения измерений остаточного содержания спироксамина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2690—10.........................................................................149

Определение остаточных количеств эмамектина (эмамектина бензоата) в воде, почве, капусте, томатах, ягодах винограда и виноградном соке методом

высоко эф<|)ек1 и иной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2706— 10.................163

Измерение концентраций пикокеистробина в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК4.1.2707—10.........................................................................180

Определение остаточных количеств шрама в растительном масле методом

газохроматографического парофазного анализа: МУК 4.1.2708- 10....................192

Измерение концентраций квинмерака в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операюров методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2709—10.................204

Определение остаточных количеств имидаклоприда в соке яблок и черной смородины, в масле кукурузы высокоэффективной жидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2768—10.........................................................................216

3

МУК 4.1.2679—10

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|)срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

2 августа 2010 г.

Дата введения: 1 октября 2010 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты (малеинового гидразида) в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2679—10

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств Малеинового гидразида в почве в диапазоне 4.0— 40,0 мг/кг.

Название действующего вещества по ИЮПАК: 6-гидрокси-2Н-пнрадизин-3-он.

Структу рная формула:

Молекулярная масса: 112.1.

Эмпирическая формула: C₄H.,N:0:

Цвет, запах: химически чистый Малеиновый гидразид представляет собой твердый белый порошок без запаха.

Температу ра плавления: 298—300 °С.

Давление паров: < 1 х 10 ²Ра (при 25 °С).

89

Коэффициент распределения октанол-вода: Ko_WlogP= 1,97 (pH 7) -0.56 (неионизированный при 25 °С).

Плотность: 1.61 г/мл.

Растворимость в воде: 4.417 г/л (pH 4.3; 25 °С). 144 г/л (pH 7; 20 °С). 145.8 г/л (pH 9; 20 °С).

Растворимость в органических растворителях: метанол - 4.179 г/л. толуол - менее 1 мг/л. гексан - менее 1 мг/л. ацетон - 188 мг/л. этилаце-тат- 35,9 мг/л. 1,2-дихлорэтан - менее 4 мг/л.

Устойчив к гидролизу при pH 3.6 и 9 (при 45 °С).

Разлагается светом ДТчо = 58 дней (pH 5.7; 25 °С).

Разлагается окислителями и сильными кислотами, при хранении в упаковке при комнатной температуре стабилен более 1 года.

Слабая кислота: рКа - 5.62 (при 20 °С).Краткая токсикологическая характеристика

Малеиновый гидразид относится к мало опасным по острой пероральной (ЛДч) для крыс более 5 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД„ для кроликов более 5 000 мг/кг). но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛС^.для крыс (4 ч) 4 мг/м³).

Область применения

Малеиновый гидразид - регулятор роста растений, проникает в растения через листья и корни, переходя в ксилему и флоэму. Эффскти-вен как ингибитор деления клеток в мсристсматичсски.х тканях, но нс препятствует росту клеток. Также обладает небольшой гербицидной активностью.

Малеиновый гидразид используется для подаатения роста травы по краям дорог, на набережных, местах отдыха, а также для замедления роста ку старников и деревьев. Ингибирует прорастание картофеля, лука, свеклы, брюквы и моркови при хранении. Используется как гербицид в смеси с 2.4-D. Норма расхода 1.2—5.4 кг/га.

В России для гидразида малеиновой кислоты установлены следующие гигиенические нормативы: ПДК в почве - 4.0 мг/кг; МДУ в клубнях картофеля, корнеплодах моркови, свеклы сахарной и столовой, лу-кс-рспке. чесноке, томатах, арбузах, табаке - 8.0 мг/кг.

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0.95 нс превышает значений, приведенных в табл. 1 хтя соответствующих диапазонов концентраций.

МУК 4.1.2679—10

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2. Таблица 1 Метрологические параметры ;ыя Малеинового пира гида

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точносги (ipa-ница относительной погрешности), % Р = 0,95 Стандартное отклонение повторяемости, <тг, % Предел повторя емости, г,% Предел воспроиз водимости, Я,% 11очва | 4,0—40,0 вкл 25 3,7 10,4 12,4

Таблица 2

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для Малеинового гидразида

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20 предел обнаружения, мг/кг диапазон определяемых концентраций, мг/кг полнота извлечения вещества, % стандартное отклонение, S,% доверительный интервал среднего результата, ±, % 11очва 4,0 4,0—40,0 75,92 3,6 ±0,66

2. Метод измерений

Метод основан на определении Малеинового гидразида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием диодно-матричного детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем и очистки экстракта на концентрирующих патронах Диапак С16.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы, использованием специфической длины волны спектра поглощения и выбором колонок различной полярности.

91

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства и змерении Весы аналитические «OHAUS». ЕР 114 с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0.0001 г. класс точности по ГОСТ 24104-1 - специальный (I)

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ± 0.038 г «ACCULAB» V600. соответствуют классу точности по ГОСТ 24104-1 - средний (III)

Колбы мерные на 25, 50 и ИХ) см³ Пипетки мерные на 1.0; 2.0; 5.0 см³ Хроматограф жидкостной Agilent 1200 LCMS с диодно-матричным детектором G1315В

Цилиндры мерные на 10. 25 и 50 см³

Допускается использование средств измерений с аналогичными или лу ч ш и м и характеристикам и.

3.2. Реактивы Малеиновый гидразид. CAS 123-33-1. аналитический стандарт чистотой нс менее 98.0 %

Ацетонитрил, осч. УФ-200 нм Вода бидистиллированная (бидистиллят), деионизированная или перегнанная над КМпО,

Гслий марки «А»

Калий марганцовокислый, хч Калий углекислый, чда Кальций хлористый, ч Кислота соляная, хч Кислота муравьиная, чда Натрия гидрокарбонат, хч Патроны концентрирующие Диапак-С 16 (0.6 г)

Спирт метиловый (метанол), хч

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.

МУК 4.1.2679—10

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Алонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23) для работы с концентрирующими патронами Диапак С 16 Аппарат для встряхивания проб «SKLO UNION TYPLT1»

Банки с крышками для экстракции на 250 см³, полипропилен, кат. № 3120-0250. NALGENE Ванна ультразвуковая «UNITRA» UNIMA OLSZTYN UMU

Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная Воронки делительные на 250 см³ Воронки лабораторные, стеклянные Испаритель ротационный Roia vapor R110 Buclii с водяной баней

Колбы конические плоскодонные на 100. 250 и 1 000 см³

Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 см³, и 4 000 сх^ТС Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм. внутренним диаметром 4.6 мм. Symmetry Shield RP18. зернение 5 мкм. фирма «Waters»

Насос диафрагменный FT. 19 фирмы KNF Ncu Laboport

Предколонка хроматографическая стальная.

Zoibax Eclipse XDB-C8. длиной 12.5 мм, внутренним диаметром 2.1 мм. зернение 5 мкм. фирма «Agilent»

Сито лабораторное с полотном из латуни или

нержавеющей стали с размером ячеек 1 мм    ГОСТ 3826-82 и

ГОСТ 6613-86

Стаканы стеклянные, термостойкие объемом

100—500 см³    ГОСТ 25336-82

Установка для перегонки растворителей с

круглодонной колбой объемом 4 000 см³ и

приемной конической колбой объемом 1 (XX) см³

Фильтры бумажные, «красная лента»    ТУ -64)9-1678—86

93

Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм. фирма «Waters»

Фильтр-патроны для шприцев Cromafil-PET 20/25 с размером пор 0.20 мкм Центрифуга MPW-350C с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см³

Шприц инъекционный однократного    ГОСТ 24861-91

применения объемом 10 см³    (ИС0 7886—84)

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожароту шения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГЫ 2.2.5.1313—03 «Предельно- допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя. с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности нс более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

МУК 4.1.2679—10

7. Подготовка к выполнению определении

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на патронах, построение калибровочной кривой.

7.1. Подготовка органических растворителей

7.1.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5—6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ аппарата для перегонки растворителей.

Ацетонитрил перегоняют при температу ре 81.5 °С. а фракции, отогнанные при температу ре ниже и выше 81.5 °С отбрасывают.

7. /. 2. Очистка метанола

Метанол, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный углекислый калий из расчета нс менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осу шителем в течение 5—6 часов. Затем метанол фильтруют через фильтр «красная лснта»в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см³ от аппарата для перегонки растворителей.

Метанол перегоняют при температуре 65 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 64.7 °С отбрасывают.

7.1.3. Приготовление бидистиллированной в(Х)ы

Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см³ от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм³ и кипятят в течение 6 часов.

Собирают фракции, отогнанные при температуре 100.0 °С. а фракции. отогнанные при температу ре ниже и выше 100.0 °С отбрасывают.

7.2. Приготовление растворов для проведения анализа

7.2.1. Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ

Для приготовления подвижной фазы используют свсжепсрсгнанный ацетонитрил, очищенную воду и муравьиную кислоту.

В плоскодонную колбу объемом 1 000 см³ помещают 990 см³ ацетонитрила. 10 см³ очищенной воды и 4 см³ муравьиной кислоты. pH дол-