Федеральная сдужба по напору к сфере защиты нрав потреби!еден и G.iaiонодучня чедовека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методические указания по методам контроля

Сборник

МУК 4.1.2593—10; 4.1.2595—10; 4.1.2673—10; 4.1.2674—10; 4.1.2680—2682—10; 4.1.2685—10; 4.1.2686—10; 4.1.2688—10; 4.1.2689—10; 4.1.2691—10

1

ББК51.21

M54

M54 Методические указания по методам контроля: Сборник.— М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2010.—179 с.

ББК 51.21

© Росно ipeona.i юр, 2010 © Федеральный цен ip гигиены н

эпидемиологии Росно ipeon ад юра, 2010

2

МУК 4.1.2674—10

2.5.6. Проверка хроматографического поведения бифентрина на колонке с силикагелем В подготовленную колонку вносят 1 см³ стандартного раствора бифентрина с концентрацией 0.1 мкг/см³, раствору дают впитаться, после чего через колонку' пропускают 20 см³ гексана, элюат отбрасывают. Затем пропускают 80 см³ смеси гексан: этилацетат (95 :5). отбирая фракции по 10 см³ каждая, упаривают досуха, остаток растворяют в 1 см³ гексана и анализируют на содержание бифентрина по п. 2.6.8. Фракции, содержащие бифентрин, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 1 см³ гексана и анализируют по п. 2.6.8. Рассчитывают содержание бифентрина в элюатс. определяя полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для этого объем элюента.

Примечание: профиль вымывания бифентрина может меняться при использовании новой партии сорбента.

2.5.7. Подготовка приборов и средств измерения Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями технической доку ментации.

2.6. Проведение определения

2.6.1. Экстракция бифентрина из семян рапса Берут навеску семян рапса 10 г. измельчают их в фарфогювой ступке и количественно переносят в коническую колбу на 300 см³, добавляют 100 см³ 80 %-ного водного ацетонитрила и экстрагиру ют бифентрин на ультразвуковой бане в течение 5 минут. Экстракцию повторяют дважды порциями по 50 см³. Объединенный экстракт фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» в чисту ю колбу на 250 см³. фильтр обмывают дважды 20 см³ водного ацетонитрила. Фильтрат переносят в делительную воронку на 500 см³, добавляют 30 см³ гексана и встряхивают воронку в течение 2—3 мин. После разделения фаз гексан отбрасывают, ацетонитрильный слой возвращают в делительную воронку и повторяют промывку гексаном дважды порциями по 30 см³. Водно-ацетонитрильный экстракт переносят в колбу-концентратор объемом 250 мл и упаривают на роторном испарителе при температуре 50—60 °С до водного остатка. Водный остаток переноса в делительную воронку объемом 250 см³, колбу обмывают 30 см³ 10 %-ного хлористого натрия и смыв добавляют к водному остатку. Затем в делительную воронку добавляют 50 см³ дихлормстана. встряхивают 2—3 мин и оставляют до полного разделения фаз. Органическую фазу фильтру ют в колбу-концентратор через фильтр «красная лента» со слоем безводного сернокислого натрия. Экстракцию бифентрина из

МУК 4.1.2674—10

водной фазы повторяют дважды порциями дихлорметана по 30 см³. Объединенный экстракт упаривают на роторном испарителе при температу ре нс выше 40 °С до сухого остатка. Сухой остаток растворяют в 1 см³ гексана и 1 мм³ вводят в испаритель хроматографа. При наличии на хроматограмме пиков коэкстрактивных веществ, мешающих определению бифен-трина. проводят очистку по пункту 2.6.3.

2.6.2. Экстракция бифентрина измает рапса Навеску масла 10 г растворяют в 1(H) см³ гексана в плоскодонной колбе объемом 250 см³ в ультразвуковой ванне в течение 5 мин и оставляют на час. Затем экстракт количественно переносят в делительную воронку объемом 250 см³, добавляют 100 см³ ацетонитрила и встряхивают воронку в течение 2—3 мин. После разделения фаз ацетонитрильный слой собирают, протекая через фильтр «красная лента» со слоем безводного сульфата натрия в мерный цилиндр на 250 см³. Экстракцию ацетонитрилом повторяют дважды порциями по 50 см³. Объединенный экстракт переносят в чистую делительную воронку на 250 см³ и ацетонитрильный слой трижды промывают гексаном порциями по 15—20 см³. Гексановый слой отбрасывают. а промытый ацетонитрильный экстракт упаривают до сухого остатка на роторном испарителе при температу ре нс выше 50—60 °С.

Сухой остаток растворяют в 1 см³ гексана и хроматографируют. При наличии мешающих примесей дополнительную очистку проводят на колонке с силикагелем по п. 2.6.3.

2.6.3. Очистка экстрактов на колонке с силикагелем 1 см³ полученного по п.п. 2.6.1—2.6.2 экстракта количественно переносят в кондиционированную хроматографическую колонку (п. 2.5.5), дают впитаться, после чего через колонку пропускают 20 см³ гексана, элюат отбрасывают. Затем колонку промывают 30 см³ смеси гексан : этила-цстат (95 :5). Первые 20 см³ элюата отбрасывают, следующие 10 см³ собирают в колбу-концентратор на 50 см³, выпаривают досуха на роторном испарителе, растворяют в 1 см³ гексана и хроматографируют.

2.6.4. Условия хроматографирования Хроматограф газовый «Кристалл 2000М» с ДЭЗ.

Колонка капиллярная кварцевая длиной 20 м. внутренним диаметром 0.53 мм с неподвижной фазой НР-1. толщина слоя 1.25 мкм.

Температура колонки программируется от 200 °С (10 сек) до 250 °С со скоростью 10 °С/мин. температу ра испарителя 250 °С. детектора 300 °С.

Скорость газа-носителя (азот) через колонку Г \ - 10.4 см³/мин (давление на входе 40 кПа) Г_: - 30 см ³/мин, Г₃ - 25 см³/мин.

55

МУК 4.1.2674—10

Объем вводимой пробы 1 мкл. Время удерживания бифентрина

4 мин 50 с ± 5 с.

2.7. Обработка результатов атиш ш Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. содержание бифентрина в пробе (X. мг/кг) вычисляют по формуле:

Н\ * Р

Н\- высота (площадь) пика бифентрина в стандартном растворе, мм;

Н₂ - высота (площадь) пика бифентрина в анализируемой пробе, мм;

V— объем экстракта, подготовленного дтя хроматографирования, см³;

Р - навеска анализируемого образца, г;

С - концентрация бифентрина в стандартном растворе, мкг/см³.

Содержание остаточных количеств бифентрина в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2-х параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор бифентрина 1 мкг/см³. разбавляют.

3. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторясмости( 1):

2\х, -л^-юо

(*, +Х₂)

Х\_УХ₂ - результаты параллельных определений, мг/кг; г - значение предела повторяемости (г = 2.8о_г).

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

4. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± А) мг/кг при вероятности Р = 0.95. где

X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

А = о • X /100,

56

МУК 4.1.2674—10

о - граница относительной погрешности методики (показатель томности в соответствии с диапазоном концентраций). %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе «менее нижней границы определения» (например: менее 0.01*. где *-0.01 мг/кг - предел обнаружения в семенах и масле рапса).

5. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

5.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

5.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки С г должна удовлетворять условию:

С_д = А_гх + А_гх'. Где

± Д_л-х (± А.гх ) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испыту емом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг. при этом:

Д_л = ± 0.84 А. где

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

А = 6 • X /100.

6 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций). %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к. = X’ - X - Q. где

X', X. Сд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 4) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К =V^a1.v+A²„.x

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

|К_к|<К.    '    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

57

МУК 4.1.2674—10

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

5.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерении, выполненных в двух разных лабораториях, нс должно превышать предела воспроизводимости (R):

Ль Л’: - результаты измерении в двух разных лабораториях, мг/кг:

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций). %.

6. Требования техники безопасности

При проведении работы необходимо соблюдать требования безопасности. установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществе!ми (ГОСТ 12.1005-88).

При выполнении измерений с использованием газового хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

7. Требования к квалификации оператора

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом газожидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 5.

8. Разработчики

Долженко В. И.. Цибульская И. А.. Карпова Л. М.

ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений. Санкт-Петербург.

МУК 4.1.2593—10; 4.1.2595—10; 4.1.2673—10; 4.1.2674—10, 4.1.2680—2682—10; 4.1.2685—10; 4.1.2686—10; 4.1.2688—10; 4.1.2689—10; 4.1.2691—10

Содержание

Определение остаточных количеств Флурохлоридона в почве, семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2593—10........................................................4

Определение остаточных количеств имидаклоприда в томатном соке методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2595—10.......................................................21

Определение остаточных количеств дитнанона в ботве и клубнях карто(|юля методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2673—10.......................................................35

Определение остаточных количеств бифентрнна в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2674—К).......................................................47

Определение остаточных количеств метаза хлора в капусте методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2680—10...................................................................................59

Определение остаточных количеств пиклорама в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2681—10.......................................................71

Определение остаточных количеств тстраконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2682—10.......................................................87

Измерение концентраций топрамезона в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2685—10.................................................................................101

Определение остаточных количеств Бста-цифлутрина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной

газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2686—10.........................115

Определение остаточных количеств азоксистробина в зеленой массе, семенах и масле рапса методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2688—10................................135

Определение остаточных количеств димстоморфа в ягодах винограда и виноградном соке методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2689—10................................149

Определение остаточных количеств ацетамиприда в семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2691—10.....................................................163

3

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств бифентрина в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии

МУК 4.1.2674—10

ББК 51.21 060

060 Определение остаточных количеств бифентрина в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010.—12 с.

1.    Разработаны Всероссийским НИИ защиты растений (В. И. Должен-ко. И. А. Цибульская. Л. М. Карпова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией но государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 10.06.2010 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты нрав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 2 августа 2010 г.

4.    Введены в действие с 1 октября 2010 г.

5.    Введены впервые.

МУК 4.1.2674—10

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

02 августа 2010 г.

Дата введения: 1 октября 2010 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств бифентрина в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии Методические указания МУК 4.1.2674—10

Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения в семенах и масле рапса массовой концентрации бифентрина в диапазоне концентраций 0.01—0.1 мг/кг.

Бифсн I pun (ISO).

Структу рная формула:

Брутто формула: C23H22CIF3O: Мол. масса: 422.9

СА: (2-метил(1.Г-дифенил]-3-ил)метил 3-(2-хлор-3,3.3-трифтор-1-про-пснил)-2.2-димстилциклопропанкарбоксилат.

Химически чистый препарат - очень вязкая маслообразная жидкость. имеющая тенденцию к затвердеванию.

Температу ра плавления: 68—70.6 °С Давление паров при 25 °С 0.024 тРа Коэффициент распределения н-октанол/вода: К<™ log Р > 6

МУК 4.1.2674—10

Растворимость в воде < 1 рг/л;

хорошо растворим в ацетоне (125 г/100мл), хлороформе, дихлормс-танс. днэтиловом эфире и толуоле: слабо растворим в гептане и метаноле.

Устойчив в водном растворе при pH 5—9 (21 °С) в течение 21 дня.

Стабилен в течение 2 лет при температуре от 25 до 50 °С. В почве период полураспада DTso65—125 дней. Термостабилен до 250 °С; <|юто-стабильность: естественный свет - DT5o= 255, искусственная лампа -DTso= 11.9 дн.

Класс токсичности по ВОЗ - II. Оральная токсичность (LD50) для крыс 54.5 мг/кг.

Гигиенические нормативы. МДУ бнфентрнна в семенах и масле рапса нс установлены.

Область применения: инсектицид широкого спектра действия для борьбы с тлями, клещом, щитовкой, бслокрылкой и др. на фруктовых, овощных, бахчевых, бобовых и черновых культурах.

2. Методика определения бнфентрнна в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод определения бнфентрнна в растительных объектах основан на экстракции пестицида органическим растворителем и очистке перераспределением между двумя нсс.мсшнвающимися растворителями и. при необходимости, на колонке с силикагелем. Количественное определение проводят методом газожидкостной хроматографии с использованием элсктронозахватного детектора (ДПР).

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1 и 2.

Таблица 1

Метрологическая характеристика метода

Объекг анализа Диапазон определяемых концентраций, мг/кг I Указатель точности (граница относительной погрешности), ±б,% Стандартное отклонение повторяемости, ог, % Предел повторяе мости, г,% Предел воспроиз- воднмости, R, % семена 0,01—0,1 50 5,4 15,1 16,6 масло 0,01—0,1 50 5,9 16,5 18,2

МУК 4.1.2674—10

Таблица 2 По. I no I а извлечения бпфси грина, стандартное отклонение, .ювсрн I с. 1Ы1ЫЙ пнтсрва.1 среднею результата (Р = 0,95)

Анализи руемый объект 11редел обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения % Стандартное отклонение, S,% Доверительный шггериал средне о результата. ±,% семена 0,01 0,01—0,1 82,4 4,9 5,1 масло 0,01 0,01—0,1 81,5 5,2 5,4

2.1.3. Избирательность метода

Избирательность метода обеспечивается очисткой экстрактов анализируемых проб и сочетанием условий хроматографирования.

Аналитический стандарт бифентрина с содержанием д.в. 97.8 %

Ацетонитрил для ВЭЖХ. «В-230НМ» или хч Ацетон, осч

Азот газообразный в баллонах с редуктором Бумажные фильтры «красная лента»

Вода дистиллированная Гексан, хч Дихлормстан. хч

Натрий сернокислый безводный, с веже про каленный ч Натрия хлорид, хч Стекловата

Силикагель для колоночной хроматографии 60 (0.040—0.063мм) (Merck. Германия)

Этила цетат. хч

2.3. Приборы и посуда Хроматограф газовый «Кристалл 2000М» с ДЭЗ Колонка капиллярная кварцевая хзиной 20 м. внутренним диаметром 0.53 мм с неподвижной фазой HP-1. толщина слоя 1.25 мкм

Весы аналитические типа В Л А-200    ГОСТ 24104-2001

Весы технические В Л КТ-500    ГОСТ 24104-2001

Ванна ультразвуковая УЗВ/100 ТН

Воронки делительные емкостью 250 и 500 см³ ГОСТ 25336-82 Воронки химические конусные    ГОСТ    25336—82

Колбы-концентраторы емкостью 100 и 250 см³ ГОСТ 25336-82

51

МУК 4.1.2674—10

Колбы плоскодонные емкостью 300 см³ Колбы мерные со шлифом емкостью 25. 50. 100 см³

Мельница электрическая лабораторная Микрошприц M11I-10 Насос водоструйный Ротационный вакуумный испаритель ВйсЫ R-200/205 (Швейцария) Цилиндры мерные на 250см³ Колбы мерные на 25. 50. 100 см³. Пипетки на 1,2. 5. 10 см³ Стаканы химические

Колонка стеклянная хроматографическая длиной 25 см. диаметром 10 мм.

Допускается использование приборов и посуды с метрологическими характеристиками нс ниже указанных.

2.4. Отбор и хранение проб

Отбор проб семян рапса для анализа проводят в соответствии с ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб».

Пробы семян просушивают до стандартной влажности и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой rape. Перед анализом пробы семян рапса рассыпают на бумаге или кальке и пинцетом удаляют включения. Семена измельчают на лабораторной мельнице и после перемешивания измельченной массы отбирают усредненную аналитическую пробу.

Пробы растительного масла хранят в холодильнике при температуре + 4—6 °С в закрытой стеклянной таре не более 2 месяцев.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 см³ растворителя упаривают в ротационном вакуумном испарителе при температуре + 40 °С до объема 1.0 см³ и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.

2.5.2. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа капиллярную колонку, не присоединяя к детектору, кондиционируют в токе инертного газа (азот) при температуре 250 °С до установления нулевой линии.

МУК 4.1.2674—10

2.5.3. Приготовление стандартного и градуировочных растворов Основной раствор готовят, количественно перенося 10 мг бифен-трина в мерную колбу на 100 см³, растворяют навеску в 1 см³ ацетона, содержимое колбы тщательно перемешивают до полного растворения препарата. Объем в колбе доводят до метки гексаном. Из полученного раствора бифентрина с концентрацией 100 мкг/см³ готовят рабочие растворы с концентрациями 1 мкг/см³. 0.5 мкг/см³. 0.25 мкг/см³. 0.05 мкг/см³ методом последовательного разбавления.

Для внесения в образец при определении полноты извлечения используют стандартный раствор бифентрина 0.01 мг/см³. разбавленный гексаном до соответствующей концентрации.

2.5.4. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация бифентрина в растворе) в хроматограф вводят по 1 мм³ градуировочных растворов (нс менее З-х параллельных измерений для каждой концентрации, нс менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций). измеряют высоты или площади пиков и строят график зависимости среднего значения высоты (площади) пика от концентрации бифентрина в градуировочном растворе (мкг/см³).

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

100 < л

С - аттестованное значение массовой концентрации бифентрина в градуировочном растворе:

С_к - результат контрольного измерения массовой концентрации бифентрина в градуировочном растворе;

Кот? ~ норматив контроля градуировочного коэффициента. %. (Кот? = 10 % при Р = 0.95).

2.5.5. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1 см помешают тампон из стекловаты, вносят суспензию 8 г силикагеля в 40 см³ гексана и насыпают 2.5 г безводного сернокислого натрия, дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонку промывают 40 см³ гексана со скоростью 1—2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

53