Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методические указания но методам контроля

Сборник МУК 4.1.2662—4.1.2667—10; 4.1.2669—4.1.2672—10

Издание официальное

Москва • 2010

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методические указания по методам контроля

Сборник МУК 4.1.2662—4.1.2667—10; 4.1.2669—4.1.2672—10

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, фадуировочных растворов, растворов внесения, подвижных фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматофафической колонки, установление фадуировочной характеристики, подготовка концентрирующих патронов Sep Рак Silica и Cl8 Sep Рак.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетонитрил

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее I часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.1.2. Гексан

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

52

МУК 4.1.2665—10

7.1.3. Хлористый метилен и этилацетат Каждый растворитель промывают последовательно 5 %-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

7.2. Приготовление растворов соляной кислоты Для приготовления 1 N раствора в мерную колбу вместимостью 1000 см³, содержащую 300—400 см³ деионизованной воды, помещают 83 см³ концентрированной соляной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

Для приготовления 0,05, 0,025 и 0,01 N растворов в мерные колбы вместимостью 1000 см³ помещают соответственно 50, 25 и 10 см³ 1 N раствора соляной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.3. Приготовление 4 N раствора серной кислоты В мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 200—300 см³ деионизованной воды, вносят 56 см³ концентрированной серной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.4. Приготовление смеси для экстракции проб семян В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 600 см³ метанола, вносят 400 см³ 0,025 N раствора соляной кислоты, перемешивают.

7.5. Приготовление смеси для экстракции проб растительного масла В колбу вместимостью 1000—2000 см³ помещают 500 см³ ацетонитрила, вносят 500 см³ деионизованной воды и 20 см³ ледяной уксусной кислоты, перемешивают.

7.6. Приготовление 0_t05 Мраствора уксуснокислого аммония В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 3,85 г уксуснокислого аммония, доводят водой до метки, вносят 1 см³ ледяной уксусной кислоты, перемешивают.

53

7.7. Приготовление 25% раствора метанола в 0,05 М растворе уксуснокислого аммония

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 25 см³ метанола, доводят до метки 0,05 М раствором уксуснокислого аммония, перемешивают.

7.8. Приготовление 2 % раствора уксусной кислоты в этилацетатс

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 2 см³ ледяной уксусной кислоты, доводят до метки этилацетатом, перемешивают.

7.9. Приготовление 0,!% раствора марганцовокислого калия

В мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 0,5 г марганцовокислого калия, доводят водой до метки, перемешивают.

7.10. Приготовление 0,1% раствора орто-фосфорной кислоты

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 300—400 см³ деионизованной воды, вносят 1 см³ орто-фосфорной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.

7.11. Подготовка концентрирующих патронов Sep Рак Silica

Патрон устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума*.

Концентрирующие патроны промывают с помощью медицинского шприца (или разряжения, создаваемого водоструйным насосом) последовательно метанолом, этилацетатом, хлористым метиленом порциями по 5 см³ со скоростью прохождения растворителя через патрон 1—2 капли в сек. Патроны готовят непосредственно перед использованием. Нельзя допускать высыхания верхнего слоя сорбента.

* Примечание: В отсутствие специального аллонжа, жидкость продавливают через патрон с помощью поршня медицинского шприца, скорость продавливания раствора не должна превышать 1—2 капли в сек.

7.12. Подготовка концентрирующих патронов С18 Sep Рак

7.12.1.    Первая ступень очистки. Концентрирующий патрон промывают с помощью медицинского шприца или разряжения, создаваемого водоструйным насосом, 5 см³ метанола со скоростью прохождения растворителя через патрон 1—2 капли в сек., затем 5 см³ 0,01 N раствора соляной кислоты.

7.12.2.    Вторая ступень очистки. Концентрирующий патрон промывают с помощью медицинского шприца или разряжения, создаваемого водоструйным насосом, последовательно гексаном, хлористым мети-

МУК 4.1.2665—10

леном, метанолом, водой. 0,05 N раствором соляной кислоты порциями по 3 см³.

Патроны готовят непосредственно перед использованием.

7.75. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

7.13.1.    Измерение по п. 9.3.1.

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 200 см³ ацетонитрила, вносят 800 см³ 0,1 % раствора орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.

7.13.2.    Измерение по п. 9.3.2.

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 180 см³ ацетонитрила, вносят 820 см³ деионизованной воды, 1 см³ орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.

7.14. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.13.1 или 7.13.2) при скорости подачи растворителя соответственно 0,8 или 1 см³/мин не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии.

7.15. Приготовление градуировочных растворов

7.15.1.    Исходный раствор имазамокса для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г имазамокса, растворяют в 50—70 см³ метанола, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Градуировочные растворы №2—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора.

7.15.2.    Растворы Ns 1 имазамокса для градуировки (концентрация 10 мкг/см³).

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1,0 см³ исходного раствора имазамокса с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.15.1), доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают.

Раствор хранится в холодильнике не более месяца.

7.12.3.    Рабочие растворы NsN° 2—5 имазамокса для градуировки (концентрация 0,1—1,0 мкг/см³).

В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1,0, 2,0, 5,0 и 10 см³ раствора №1 имазамокса с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.15.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.13.1 или 7.13.2, тщательно перемешивают, получают рабочие рас-

55

творы №№ 2—5 с концентрацией имазамокса 0,1, 0,2, 0,5 и 1,0 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более 5-ти дней.

7.16. Приготовление растворов внесения для оценки полноты извлечения имазамокса из образцов

7.16.1.    Исходный раствор (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г имазамокса, растворяют в 50—70 см³ изопропилового спирта, доводят им же до метки, тщательно перемешивают.

7.16.2.    Основной раствор имазамокса для внесения (концентрация

10 мкг/см³).

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10,0 см³ исходного раствора имазамокса с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.16.1), доводят до метки изонропанолом, тщательно перемешивают.

Раствор хранится в холодильнике не более месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено».

7.17. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площадей пиков (тАи*сек) от концентрации имазамокса в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для фадуировки №№ 2—5.

В инжектор хроматофафа вводят 20 мм³ каждого фадуировочного раствора и анализируют в условиях хроматофафирования по п. 9.3.1 или 9.3.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

Градуировочную характеристику проверяют перед проведением измерений, анализируя один из фадуировочных растворов. Если значение площади отличается более, чем на 10% от данных, заложенных в 1радуировоч1{ую характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для фадуировки.

8. Отбор и хранение проб

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами 10852—86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб», 10583-76 «Рапс. Требования при заготовках и поставках», 52062—2003 «Масло растительное. Правила приемки и мето-

МУК 4.1.2665—10

ды отбора проб», 8988—2002 «Масло рапсовое. Технические условия», «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (№ 2051—79 от 21.08.79).

Семена подсушивают в темноте до постоянного веса и хранят в тканевых мешочках в сухом, защищенном от света месте при комнатной температуре не более 6-ти месяцев. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.

Пробы масла (помещенные в стеклянные флаконы) хранят в холодильнике в темноте.

Перед анализом образцы семян измельчают.

9. Выполнение определения

9.1.    Семена рапса

9.1.1.    Экстракция

Образец измельченных семян массой 20 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 400 см³ на шлифе, добавляют 200 см³ смеси для экстракции (метанол-0,025 N раствор соляной кислоты, 60 :40, по объему), приготовленной по п. 7.4, интенсивно перемешивают в течение 5 мин.

Пробам дают отстояться, затем надосадочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр «красная лента», осадок на фильтре промывают 25 см³ метанола. Отфильтрованный экстракт переносят в мерный цилиндр вместимостью 250 см³ с пришлифованной пробкой, перемешивают, измеряют объем раствора, 1/5 его часть, эквивалентную 4 г семян (около 40 см³), переносят в круглодонную колбу вместимостью 150 см³, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С до объема 8—10 см³. Очищают окислением, перераспределением в системе несмешивающихся растворителей по п. 9.1.2, затем на концентрирующих патронах Sep Рак Silica по п. 9.1.3.

9.1.2. Очистка экстракта окислением и перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

Остаток в колбе, полученный по п. 9.1.1 с помощью 30 см³ деионизованной воды переносят в делительную воронку вместимостью 250 см³, колбу дополнительно обмывают 20 см³ воды, которую также переносят

МУК 4.1.2662—4.1.2667; 4.1.2669—4.1.2672—10

капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2662—10.....................................................................................4

Измерение концентраций пендиметалина в атмосферном воздухе населенных мест методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2663—10.......................................................19

Измерение концентраций аминопиралида в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом капиллярной

газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2664—10..........................30

Определение остаточных количеств имазамокса в семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2665—10.......................................................46

Определение остаточных количеств МЦПА в воде и почве методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2666—10...................................................................................64

Измерение концентраций изопротурона в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2667—10.......................................................79

Измерение концентраций пеноксулама в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2669—10.......................................................93

Измерение концентраций дифлюфеникана в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2670—10...............................107

Измерение концентраций биксафена в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2671—10.................................................................................121

Определение остаточных количеств боскалида в яблоках, ягодах винограда, яблочном и виноградном соках, луке-репке методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2672—10.................................................................................134 ¹

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

02 августа 2010 г.

Дата введения: 1 октября 2010 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств имазамокса в семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии Методические указания МУК 4.1.2665—10

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций имазамокса в семенах и масле рапса в диапазоне 0,1 -1,0 мг/кг.

Имазамокс

(К$)-2-(4-изопропил-4-метил-5-оксо-2-имидазолин-2-ил)-5-метокси-метилнико-тиновая кислота (IUPAC)

C15H19N3O4

Мол. масса 305,3

Кристаллическое вещество белого цвета, без запаха. Температура плавления: 166,0—166,7 °С. Давление паров при 20 °С < 1,3 * 10'² мПа. Растворимость в органических растворителях при 20 °С (г/дм¹): ацетон -

46

МУК 4.1.2665—10

29,3; ацетонитрил - 19,0; гексан - 0,007; дихлорметан - 218,0; метанол -67,5. Растворимость в воде при 20 °С - 4,16 г/дм³. Вещество стабильно к гидролизу при pH 5, 7 и 9. Быстро подвергается фотолитическому разложению в воде: DT₅₀- 6,8 ч.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - более 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для кроликов > 4000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LK50) Для крыс > 6300 мг/м³.

Область применения препарата

Имазамокс рекомендуется в качестве гербицида для борьбы с однолетними двудольными и злаковыми сорняками в посевах подсолнечника сои, рапса (опрыскивание в период вегетации).

Рекомендуемый МДУ имазамокса в семенах и масле рапса -0,1 мг/кг.

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ± 5, % Р = 0,95 Стандартное отклонение повторяемости, % Предел повторяемости, г, % Предел воспроизводимости, R, % Семена рапса от 0,1 до 1 25 4,6 13 15 Масло рапса от 0,1 до 1 25 2,6 7 9

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (п = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 2

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20 Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций мг/кг Полнота извлечения вещества, % Стандартное отклонение, S,% Доверительный интервал среднего результата, ±,% Семена рапса 0,1 0,1—1,0 79,4 4,1 2,3 Масло рапса 0,1 0,1—1,0 93,0 2,5 1,4

2. Метод измерений

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после экстракции из анализируемых проб семян смесью метанол-соляная кислота, масла - ацетонитрил-вола-уксусная кислота, последовательной очистки экстракта семян окислением, перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, затем на патронах Sep Рак Silica, масла 2-х стадийной очистки на концентрирующих патронах С18 Sep Рак.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях определения метод специфичен в присутствии имазапира и метазахлора.

Допускается использование реактивов иных производителей с более высокой квалификацией, не требующих выполнения п. 7.1 (очистка растворителей).

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аллонж прямой с отводом для вакуума (для работы с концентрирующими патронами) Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс ТУ 64-1-2851—78 Бумажные фильтры «красная лента», обеззоленные или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ ТУ 2642-001 -05015242-07 Воронка Бюхнера ГОСТ 9147 - -80 Воронка делительная вместимостью 250 и 500 см3 ГОСТ 9737-93 Воронки конусные диаметром 30—37 и 60 мм ГОСТ 25336-82 Груша резиновая ТУ9398-05-0576-9082-2003 Индикаторная бумага, универсальная. pH 1—10 ТУ 6-09-1181—89 Колба Бунзена ГОСТ 25336- 82 Колбы плоскодонные на шлифе вместимостью 1000 —2000 см5 ГОСТ 25336-82 Колбы конические (плоскодонные) вместимостью 100, 200—250,400—500, 1000—2000 см3 ГОСТ 23932-90 Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100 и 150 см3 ГОСТ 9737-93 Мельница лабораторная электрическая Мембранные фильтры микропористые, марки ММК, капроновые, диаметром 50 мм, размер пор 0,45 мкм ТУ 9471-002-10471723-2003 Набор для фильтрации растворителей через мембрану Насос водоструйный вакуумный ГОСТ 25336-82 Стаканы химические, вместимостью 100, 500 см3 ГОСТ 25336-82 Стекловата Стеклянные палочки

МУК 4.1.2665—10

Патроны для твердофазной экстракции

С18 Sep Рак, Classik (Waters, США),

масса сорбента 360 мг

Патроны для твердофазной экстракции

Sep Рак Silica, (Waters, США), объем сорбента 2 см³

Ректификационная колонна с числом

теоретических тарелок 30

Ротационный вакуумный испаритель В-169

фирмы Buchi, Швейцария

Установка для перегонки растворителей

Хроматографическая колонка стальная,

длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм,

содержащая Eclipse XDB С18, зернение 5 мкм

Хроматографическая колонка стальная,

длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм,

содержащая Zorbax SB С8, зернением 5 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного

хроматографа вместимостью 50—100 мм³

Шприцы медицинские с разъемом Льюера

вместимостью 5 и 10 см³

Центрифуга

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельнодопустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

51

1