Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ, БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств мандипропамида в воде, почве, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах томата, огурцов и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2544—09

Определение остаточных количеств мандипропамида в воде, почве, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах томата, огурцов и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009.—24 с.

1.    Разработаны Российским государственным aipapiibiM университетом МСХЛ им. К. А. Тимирязева Учебно-научный консультационный iicinp «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов», Минсельхоза России (авторы Калинин В. Л., профессор, каид. с-х. наук., Довшлевич Е. В., ст. н. сотр., канд. биол. наук, Довгилевич А. В., ст. и. сотр., каид. хим. наук, Устименко Н. В., ст. н. сотр., канд. биол. наук, Щербинкина Е. Н., инженер).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией но санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты нрав потребителей и благополучия человека (протокол от 25 июня 2009 г. № 2).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 9 сентября 2009 г.

4.    Введены в действие с 1 декабря 2009 г.

5.    Введены впервые.

© Роспотребнадзор, 2009 ©Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Росногребнадзора, 2009

7.1.2.    Очистка гексана. Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором перманганата калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А. Гордон, Р. Форд Спутник химика, Москва, 1976 г., с. 441).

7.1.3.    Очистка бидистиллированнои воды. Ьидистиллят кипятят в течение 6 ч с марганцовокислым калием, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.

7.1.4.    Очистка этилового эфира уксусной кислоты. Этиловый эфир уксусной кислоты промывают равным объемом 5 %-го раствора соды, сушат над безводным хлористым кальцием (Беккер Г. и др. Органикум, Москва 1979 г., с. 372), кипятят в течение 1 ч с прокаленным сульфатом магния и затем перегоняют.

7.2.Приготов.чениерастворов для проведения анашза

7.2.1.    Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ. Для приготовления подвижной фазы используют свсженерегнанныс ацетонигрил и очищенную воду.

В плоскодонную колбу объемом 1 дм³ помещают 600 ем³ ацетонитрила и 400 см³ очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нес газообразный гелий со скоростью 20 см³/мин в течение 5 мин, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

7.2.2.    Приготовление градуировочных растворов.

7.2.2.1.    Стандартный раствор с концентрацией мандипропамида

1.0    мг/см³. Взвешивают 50 мг мандипропамида в мерной колбе объемом 50 см³. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

7.2.2.2.    Стандартный раствор с концентрацией мандипропамида 10,0мкг/см³. Из стандартного раствора мандипропамида с концентрацией

1.0    мг/см³ отбирают пипеткой 1 ем³, помещают в мерную колбу объемом 100 см³ и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании.

7.2.2.3.    Стандартные растворы мандипропамида с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см³ для построения качибровочиои кривой и внесения в образцы. Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см³ и используют зги растворы для хромагографического исследования и для внесения в образцы.

МУК 4.1.2544—09

7.3. Установление градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации мандипропамида в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки но 4 растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см³.

В инжектор хроматографа вводят но 20 мм³ каждого 1радуировоч-ного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.4. Осуществляют нс менее 3 параллельных измерений.

7.4. Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки жстракта

7.4.1.    Подготовка колонки с окисью алюминия для очистки экстракта. В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 5 г окиси алюминия с зернением 40/250 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента высотой примерно 5 см. Непосредственно перед использованием колонку промывают 10 см³ ацетонитрила.

7.4.2.    Проверка хроматографического поведения мандипропамида на колонке с окисью алюминия. В концешратор объемом 50 см³ вносят 1 см³ стандартного раствора мандипропамида в ацетонитриле с концентрацией 1,0 мкг/см³ и упаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 10 см³ ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и упаривают досуха при температуре нс выше 30 °С. Исходную колбу обмывают еще двумя порциями ацетонитрила объемом 10 см³ каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см³ ацетонитрила и 20 мм³ пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие мандипропамид, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.

Изучение поведения мандипропамида на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии окиси алюминия.

7.5. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С для очистки жстрактов.

7.5.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С для очистки экстракта. Все процедуры происходят с использованием вакуума.

11

скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см³/мин.

Патрон Диапак С устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см³ (исполь зуют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 см³ смеси тексана с этилацетатом в соотношении 1:1, затем 10 см³ гексана. Элюат отбрасываюг.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.5.2. Проверка хроматографического поведения мандипропамида на концентрирующей патроне Диапак С. Из стандартного раствора мандипропамида в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/см³ отбирают 1 см³, помещают в круглодонную колбу объемом 100 см³ и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30°°С. Сухой остаток растворяют в 2 см³ этил ацетата, прибавляют 8 см³ гексана, перемешивают и смыв вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см³ , упаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют. Исходный концентратор обмывают 5 см³ смеси гексана с этилацетатом в соотношении

4    : 1 и полученный расгвор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор объемом по 100 см³, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30°°С, сухой остаток растворяю! в 2 см ацетонитрила и хроматографируют. Исходный концентратор обмывают гремя порциями смеси гексан-этилацетат в соотношении 2 : 1 объемом но 5 см³ и последовательно вносят на патрон. Элюаг после прохождения каждой порции собирают в отдельный концентратор объемом 100 см³, упаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют.

Определяют фракции, содержащие мандипропамид, полноту смывания с широка и необходимый объём элюата.

7.6. Подготовка концентрирующего питрона Диапак С16 для очистки экстрактов

7.6.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстракта. Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать

5    см³/мин.

Патрон Диапак 06 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см³ (используют как емкость для элюентов).

МУК 4.1.2544—09

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 10 см³ смеси ацетонитрила е водой соотношении 1:1, затем 10 ем³ воды. Элюа-ты отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.6.2. Проверка хроматографического поведения маидипропамида на концентрирующем патроне Диапак С16. Из стандартного раствора маидипропамида в ацетонитриле, содержащею 1 мкг/см³ , отбирают 1 см³, помещают в концентратор объемом 100 см³ и упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляю! 8 см³ воды, перемешивают и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют. Исходный концентратор обмывают последовательно 10 см³ смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1 : 4, затем 10 см³ смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1 : 1 и полученные растворы последовательно вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции элюентов собирают в отдельные концентраторы объемом по 100 см³, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографи-руют. Определяют фракции, содержащие мандипропамид, полноту смывания е на фона и необходимый объем элюата.

7.7. Подготовка колонки с флор из илом для очистки жстрактов.

7.7.1.    Подготовка колонки с флоризилом. В стеклянную или плат-массовую колонку длиной 15 ем, диаметром 1,5 ем помещают на дно стекловату и заполняют колонку флоризилом на высоту 10 см. На слой флоризила насыпают слой безводного сернокислого натрия толщиной

1,0 см. В день очистки экстракта колонку промывают последовательно 10 ем³ смеси гексана е этилацетатом в соотношении 1 : 1 и 20 см³ гексана. После промывки колонка готова к работе.

7.7.2.    Проверка хроматографического поведения маидипропамида на колонке с флоризилом. При офаботке методики или поступлении новой партии сорбента (флоризил) проводят изучение поведения манди-нронамида на колонке.

Для этою в концентратор (или пробирку) вносят 1 ем³ стандартного раствора маидипропамида концентрацией 1 мкг/мл, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 30 °С или в токе теплою воздуха.

Затем растворяют мандипропамид в 2 см³ этила цетата, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см³ гексана, перемешивают и вносят на подготовленную, как укатано выше, колонку. Промывают колонку 15 см³ смеси гексана с этилацетатом в соотношении 2:1, смыв отбрасывают. Затем пропускают через колонку 20 см³ смеси гексана с этилацетатом в соотношении 2 : 3, отбирая последовательно но 5 см³ элю-ента. Каждую фракцию собирают отдельно в концентраторы объемом 100 см³ упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие мандипропамид, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюата.

7.7. Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколон-кой Symmetry Shield Cl8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25 °С и скорости потока подвижной фазы 1 см/мин 3—4 ч.

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051—79 от 21.08.79), а также в соответствии с ГОСТ Р 51592—2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 1743.01 — 83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 26950-89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ 7176-85 «Картофель свежий продовольственный, заготовляемый и поставляемый. ТУ», ГОСТ 26832-86 «Картофель свежий для переработки на продукты питания. ТУ», ГОСТ 25896-83 «Виноград свежий столовый. ТУ», ГОСТ Р 51810-2001 «Томаты свежие, реализуемые в розничной торговой сети», ГОСТ Р 1726-85 «Огурцы свежие. ТУ» и ГОСТ Р 51783-2001 «Лук репчатый свежий, реализуемый в розничной торговой сети. ТУ».

Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре + 4 °С не более 10 суток. Пробы винограда, клубней картофеля, томатов, огурцов и лука хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0—4 °С не более 3 сугок. Для длительного хранения пробы клубней картофеля, винограда, томатов, огурцов и лука замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре - 18 °С до 2 лет.

МУК 4.1.2544—09

Пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

9. Проведение определений

9.1. Кода

9.1.1.Экстракция. Пробу воды объемом 100 ем³ помещают в делительную воронку объемом 250 см³ и экстрагируют тремя порциями хлористого метилена объемом но 30 см³, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний слой (хлористый метилен) объединяют в концентраторе объемом 250 см³, собирая его через слой безводного сульфата натрия . Экстракт упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С.

9.1.2.Очистка на концентрирующих патронах Диапак С16. Сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила, тщательно обмывая стенки концентратора, прибавляют 8 см³ воды, перемешивают и вносят на патрон, подготовленный по п. 7.6.1. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 10 см³ смеси ацетонитрила с водой в соотношении

1    : 4, элюат отбрасывают, мандипропамид элюируют 10 см³ смеси ацетонитрила с водой в соотношении 1:1. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см³ и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в

2    см³ ацетонитрила и хроматографируют.

9.2.    Почва

9.2.1.Экстракция. Пробу почвы весом 20 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 250 см³, прибавляют 10 см³ воды, тщательно перемешивают содержимое и добавляют 70 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 9:1. Банку помещают в ультразвуковую ванну и выдерживают в течение 10 мин. Но истечении срока банку дополнительно встряхивают 10 мин на механическом встряхивателс. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин на скорости 4 000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют через фильтр «красная лента» в коническую колбу объемом 250 см³ с 5 г хлорида натрия.

Экстракцию повторяют еще два раза, используя по 70 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 9 : 1 и помещая каждый раз на 10 мин в ультразвуковую ванну и дополнительно на 10 мин на механический встряхиватель. Супернатант каждый раз фильтруют через фильтр «красная лента» в ту же коническую колбу объемом 250 см³ с 5 г хлорида па-

МУК 4.1.2544—09

Содержание

Определение остаточных количеств манлипропамида в воде, почве, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах томата, огурцов и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматозрафии.....................3

1.    Метрологическая характеристика метода............................................................5

2.    Метод измерений....................................................................................................6

3.    Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и

материалы...............................................................................................................6

3.1.    Средства измерений........................................................................................6

3.2.    Реактивы...........................................................................................................7

3.3.    Вспомогательные устройства и материалы...................................................8

5. Требования к квалификации операторов..............................................................9

7.    Подготовка к выполнению определений..............................................................9

7.1.    Подготовка органических растворителей.....................................................9

7.2.11риготовлснис раегворов для проведения анализа.....................................10

7.3.    Установление градуировочной характеристики.........................................11

7.4.    Подготовка колонки с окисью алюминия для очиегки зкетракга.............11

7.5.    Подютовка концентрирующею патрона Диапак С для очистки зкетрактов. ................................................................................................................................И

7.6.    Подютовка концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки

зкетрактов.............................................................................................................12

7.7.    Подютовка колонки с флори зилом для очиегки зкетрактов......................13

7.7.    Подютовка и кондиционирование колонки для жидкостной

хроматографии......................................................................................................14

8.    Отбор проб и хранение.........................................................................................14

9.    Проведение определений.....................................................................................15

9.1. Вода.................................................................................................................15

9.2. Почва...............................................................................................................15

9.3.    Клубни картофеля и ягоды ви hoi рада, плоды томата и oiypua.................17

9.4.    Лук-репка.......................................................................................................17

9.5.    Условия хроматографирования.....................................................................18

10.    Обработка результатов.......................................................................................19

11.    Проверка приемлемости результатов    параллельных определений................20

12.    Оформление результатов...................................................................................20

13.    Котроль качества результатов и змерений......................................................20

14.    Разработчики.......................................................................................................22

2

МУК 4.1.2544—09

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

9 сентября 2009 г.

Дата введения: 1 декабря 2009 г

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств мандипропамида в воде, почве, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах томата, огурцов и луке-репке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.2544—09_

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хромато1рафии для определения массовой концентрации мандипропамида в диапазоне 0,005—0,05 мг/дм¹ в воде, 0,01—0,1 мг/кг в почве, 0,02—0,2 мг/кг в клубнях картофеля, ягодах винограда и виноградном соке, плодах томата, огурцов и луке-репке. Название действующего вещества по ИЮПАК: 2-(4-хлорфенил)-Ы-[3-метокси-4-(проп-2-инилокси) фенэтил]-2-(проп-2-инилокси)ацетамид Структурная формула:

Молекулярная масса: 411,9.

Эмпирическая формула: C23H22CINO4.

Агрегатное состояние: порошок.

Цвет, запах: светлобежевый цвет.

Давление паров < 9,4 х 10 ⁴ Ра (при 25 °С)

Коэффициент распределения октанол-вода: A^logP = 2,1 при pH 7,0.

Температура плавления: 96,4—97,3 °С.

Растворимость в воде: 4,2 мг/дм³ (25 °С).

Растворимость в органических растворителях (г/дм³): ацетон - 300; этилацетат - 120; толуол - 29; дихлорметан - 400.

Устойчив к гидролизу в диапазоне pH 4—9. Разрушается при фотолизе в воде с ДТ50- 4 дня.

В почве вещество не стабильно е ДТ» 13,6 дней в полевых условиях.

Краткая токсикологическая характеристика. Препарат относится к малоопасным веществам по острой пероральной (ЛДзд для крыс составляет > 5 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД$о для крыс составляет более > 2 000 мг/кг), и к умеренно опасным веществам но острой ингаляционной токсичности (СК50 для крыс более 5 000 мг/м³). Не вызывает покраснения кожных покровов и глаз кроликов. Не обладает мутагенными, канцерогенными и тератогенными свойствами.

Область применения.

Мандипропамид - фунгицид системного действия, проникает в растения через листья. Эффективен как ингибитор мицслиального роста и епоруляции, препятствует развитию спор. Адсорбируется восковым слоем растений, что препятствует его смыванию дождями. Поскольку Ман-динропамид попадает в ткани растений, он защищает и нижнюю поверхность листьев.

Мандипропамид используют для борьбы с оомицетами на растениях винограда, картофеля и томатов, бахчевых культур с нормой расхода 100—150 г/га.

В России предлагается для применения в качестве фунгицида в посадках картофеля, томатов, посевах огурца, лука и па виноградниках с нормой расхода 0,4—0,6 л/га но препарату при четырехкратной обработке.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД для человека - 0,03 мг/кг/сут;

11ДК в воде водоема - 0,05 мг/дм³;

ОДК в почве - 0,24 мг/кг;

ВМДУ (мг/кг): томаты - 1,0, ягоды винограда - 2,0, лук-репка - 0,1, огурцы - 0,2;

МДУ (мг/кг) клубни картофеля - 0,1.

4

МУК 4.1.2544—09

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и сс составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2

Таблица 1

Метрологические парамсгрм для ман,ширинами.ia

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг I Указатель точности (граница относительной ПОфСШНОСТИ), ±8, % Р = 0,95 Стандартное отклонение повторяемости, стг, % Предел повторяе мости, г,% Предел воспроизводимое 1 и. /?,% Вода 0,005—0,01 100 3,5 9,8 11,7 Почва более 0,01—0,05 50 4,0 11,2 13,4 0,01—0,1 вкл 50 5,0 14,0 20,0 Клубни картфеля 0,02—0,1 вкл. 50 4,5 12,6 15,0 более 0,1—0,2 25 5,0 14,0 20,0 Ягоды luiiioipa.ia 0,02—0,1 вкл. 50 4,0 11,2 13,4 более 0,1—0,2 25 5,0 14,0 20,0 Плоды томата 0,01—0,1 50 1,4 3,92 4,7 0,1—1,0 25 0,9 2,52 3,0 Плоды огурца 0,01—0,1 50 1,4 3,92 4,7 0,1—1,0 25 U 3,1 3,7 Лук-реика 0,01—0,1 50 1,2 3,36 4,0

5

Таблица 2 Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднею результата дли мандинронамида

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг 1 Указатель точности Ораница относительной НОфСШНОСТИ), ±5, % Р = 0,95 Стандартное отклонение повторяемости, <тг, % 11 редел повторяемости, г, % 1 (редел воспроизводимости. Я,% Вода 0,005 0,005—0,05 95,5 1,8 0,85 Почва 0,01 0,01—0,1 80,3 4,3 0,97 Клубни карюфеля 0,02 0,02—0,2 87,8 2,2 1,26 Ягоды нипофиди 0,02 0,02—0,2 83,8 2,4 0,63 11 лоды томата 0,02 0,01—0,1 87,0 1,8 0,72 Плоды огурца 0,02 0,01—0,1 83,43 1,3 0,52 Лук-репка 0,02 0,01—0,1 86,3 1,5 1,38

2. Метод измерений

Метод основан на определении мандинронамида с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВОЖХ) с использованием ультрафиолетового или диодно-матричного детектора после его экс-тракции из образцов органическим растворителем, очистке перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, очистки экстраста на колонках с окисью алюминия, с Флоризилом, концентрирующих патронах Диапак С и Диапак С16.

Идентификация вещества проводится но времени удерживания, а количественное определение методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерении

Весы аналитические «OHAUS», I 11140

МУК 4.1.2544—09

«ACCULAB» V600 Колбы мерные на 25, 50 и 100 ем³ Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50—100 мм³

Пинетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см³ Хроматограф жидкостной Уотерс 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0, 005 единиц адсорбции на шкалу или другой аналогичного типа

Хроматограф жидкое! ной Waters 515 HPLC Pump с диодно-матричным детектором фирмы Agilent Technologies G1315В Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см³

Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Мандинропамид, аналитический стандарт е содержанием д.в. 99,2 %, фирма Сингента Алюминий окись L 40/250, нейтральная для хроматографии, Lachema Ацетонитрил о.с.ч., УФ-200 им Кальций хлористый, х.ч.

Вода бидистиллированная*, деионизированная Гексан, х.ч. для спектроскопии Гелий, о.с.ч.

Калий марганцовокислый, ч.д.а.

Кальций хлористый, х.ч.

Кислота серная концентрированная, ч.

Метилен хлористый

Натрий сернокислый, безводный, х.ч.

Натрий хлористый, х.ч.

Концентрирующие патроны Диапак С (0,6 г) Концентрирующие патроны Диапак С 16 (0,6 г) Флоризил для колоночной хроматографии е размером частиц 60—80 меш., фирма «Мерк» или аналогичный

7

Этиловый эфир уксусной кислоты, ч.д.а.    ГОСГ 223000—76

Допускается использование реактивов иных производителей с ана логичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспачогате.1Ы1ые устройства и матер на. 1Ы

Ллонж прямой е отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Диапак С 8 Аппарат для встряхивания проб «SKLO UNION TYP LTb> Нанки с крышками для экстракции на 250 см3, полипропилен, кат. № 3120-0250, NALGENE Ванна ультразвуковая «UNITRA» UNIMA OLSZTYN UM-4 Воронки химические для фильтрования, стеклянные Воронки делительные на 250 см3 Дегазатор вакуумный DG2, фирма Waters Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi e водяной баней ГОСГ 8613—75 ГОСТ 10054-75 Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 см3, КПШ-100, КПШ-250 Колонка хроматофафичсская стальная, длиной ГОСГ 10394—72

МУК 4.1.2544—09

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, фебования электробезопасности при работе е электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также фебования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматофаф.

4.2.    Помещение должно соответствовать фебованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения но ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельно-допустимые кон-цен грации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности фуда по ГОСТ 12.0.004.

§. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследоватсля, е опытом работы на жидкостном хроматофафе.

К проведению пробонодгоговки допускают оператора е квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности нс более 80 %.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматофафе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению определений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматофафической колонки, подготовка концен-фирующих патронов Диапак С 8 для очистки эксфакта, проверка хро-матофафического поведения вещества на пафонах, построение калибровочной кривой.

7.1. Подготовка органических растворителей.

7.1.1. Очистка ацетонитрила. Лцстонифил перегоняют.

9

1