Государствевное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств нафталевого ангидрида в почве, зерне и соломе зерновых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2300—07

Издание официальное

Москва • 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей н благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств нафталевого ангидрида в почве, зерне и соломе зерновых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2300-07

МУК 4.1.2300-07

натрия (2 г). Осушитель промывают 10-15 см³ гексана, который также объединяют с экстрактом. После этого гексан выпаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40°С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.4.

* В случае образования сравнительно стойких эмульсий для сокращения времени расслоения можно добавить в делительную воронку: на стадии промывки экстрактов гексаном - небольшое количество (до 10 см³) этилового спирта.

2.6.4. Очистка на колонке с силикагелем

Сухой остаток в колбе, полученный при выпаривании очищенных по п. 2.6.3 экстрактов, количественно переносят двумя порциями по 5 см³ смеси гексан - этилацетат (90:10, по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку (п. 2.5.5.). Промывают колонку 50 см³ элюента № 1, который отбрасывают. Нафталевый ангидрид элюируют 70 см³ элюента № 2, собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 100 см³. Раствор выпаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре не выше 40°С. Сухой остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ и 50 мм³ раствора вводят в жидкостный хроматограф.

2.6.5. Условия хроматографирования

Жидкостный хроматограф "Альянс" фирмы "Waters" с УФ детектором (Waters 2487) с дегазатором и автоматическим пробоотборником.

Рабочая длина волны 331 нм.

Аналитическая колонка Symmetry С-18 (250 х 4.6) мм, 5 мкм (Waters, USA).

Предколонка Symmetry С-18 (Waters) для защиты аналитической колонки.

Температура колонки 30±1°С.

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода в соотношении 35:65 (по объему).

Скорость потока элюента: 1 см³/мин.

Время удерживания нафталевого ангидрида 11.6 ± 0.2 мин.

2.6.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки, содержание нафталевого ангидрида в образцах почвы, зерна и соломы зерновых колосовых культур (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

11

МУК 4.1.2300-07

S₂ С V Si Р

где Sr площадь пика нафталевого ангидрида в стандартном растворе, мм;

S₂- площадь пика нафталевого ангидрида в анализируемой пробе,

мм;

V - объём пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см³;

Р - навеска анализируемого образца, г

С - концентрация стандартного раствора нафталевого ангидрида, мкг/см³.

Содержание остаточных количеств нафталевого ангидрида в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2-х параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор нафталевого ангидрида 2 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

3. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости(1):

2- |Х,-Х₂|-100

------------<_г (1)

(Х,+Х₂)

где Х|, Х₂ - результаты параллельных определений, мг/кг;

г - значение предела повторяемости (г = 2.8о_г).

При невыполнении условия (I) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

4. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

_    (X ± Л) мг/кг при вероятности Р=0.95,

где X - среднее арифметическое результатов определений, при-

12

МУК 4.1.2300-07

знанных приемлемыми, мг/кг;

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

А = 6*Х/100,

6 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе «менее нижней границы определения» (например: менее 0.005 мг/юг*, где *-0.005 мг/кг - предел обнаружения).

5. Контроль качества результатов измерении

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

5.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

5.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки Q должна удовлетворять условию:

С* = А л,х + А_л,х ,

где ± А (± А_я>х ) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

А_л =±0.84 А,

где А - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

Д = 6*Х/100,

6 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к = Х'-Х-Сг,

где X', X, Сд - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п.4) содержания компонен-

13

МУК 4.1.2300-07

та в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К - V А²,ос + А²п,_х Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

|К_к|<К,    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

5.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

2"|Х|-Хг|-100

-------------<R,    (3)

(Х,+Х₂)

где Х|, Х₂ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.

6. Требования техники безопасности

При проведении работы необходимо соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1005-88).

При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электро-безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.

МУК 4.1.2300-07

Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

7. Требования к квалификации оператора

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 5.

8. Разработчики

Долженко В.И., Цибульская И.А., Юзихин О.С.

Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург.

15

ББК 51.21 0-60

0-60 Определение остаточных количеств нафталевого ангидрида в почве, зерне и соломе зерновых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009 - 16 с.

1.    Разработаны Всероссийским НИИ зашиты растений (В.И. Довженко, ИЛ. Цибульская, О.С. Юзихин).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 21.06.2007 г. № 2).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 25 октября 2007 г.

4.    Введены в действие с 25 декабря 2007 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ.    л.    1,0.

Тираж 200 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20.

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89.

С Роспотребнадзор, 2009 О Федеральный центр гигиены н эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009

МУК 4.1.2300-07

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

25 октября 2007 г.

Дата введения: 25 декабря 2007 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств нафталевого ангидрида в почве, зерне и соломе зерновых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2300-07

1. Вводная часть

Торговое наименование препарата: Грассер, ЭМВ (нафталсвый ангидрид входит в состав препарата в качестве антидота). Фирма-производитель: ООО «СибАгрохим».

Действующее вещество: нафталевый ангидрид.

Структурная формула:

Ангидрид нафталин-1,8-дикарбоновой кислоты (ШРАС). Мол. масса: 198,17.

Брутто формула: С^НьОз. ¹

МУК 4.1.2300-07

Химически чистый нафталевый ангидрид представляет слабоок-рашенные кристаллы с температурой плавления 275-276°С, давлением паров 5.31x10° мРа (25°С).

Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода Kow lgP=5.03 (25°С).

Растворим в диметилформамиде (13.9 г/дм¹), хлороформе, слаборастворим в неполярных растворителях, в гексане, а также эфире, спирте, легко - в ледяной уксусной кислоте, относительно нерастворим в воде.

Стабилен при pH 7, в кислой среде разлагается до нафталевой кислоты. Не гигроскопичен.

Группа токсичности по ВОЗ - III; Острая пероральная токсичность LD₅₀ для крыс 12300 мг/кг. Дермальная токсичность для крыс >2000 мг/кг. Не ирритант для глаз и кожи. Ингаляционная токсичность LC50 для крыс >935 мг/м¹. Нетоксичен для пчёл.

Область применения: Нафталевый ангидрид ускоряет процесс детоксикации некоторых гербицидов в хлебных злаках, повышает устойчивость к ним урожая. Используется в комбинации с этими гербицидами в качестве антидота.

Гигиенические нормативы для нафталевого ангидрида в России не установлены.

2. Методика определения нафталевого ангидрида в почве, зерне и соломе зерновых культур методом ВЭЖХ

2.1. Основные положения

2.1.1. Область применения и принцип метода

Настоящий документ устанавливает методику определения остаточных количеств нафталевого ангидрида в почве в диапазоне концентраций 0.01 - 0.1 мг/кг, в зерне зерновых колосовых культур - в диапазоне 0.01-0.1 мг/кг, в соломе 0.04 - 0.4 мг/кг.

Методика основана на определении нафталевого ангидрида методом ВЭЖХ с использованием УФ детектора после его извлечения из образцов водно-ацетоновой смесью с последующей очисткой перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями и на колонке с силикагелем.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения

4

МУК 4.1.2300-07

анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р=0.95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций. Таблица 1 Метрологические параметры

Объект анализа Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ±5, % Стандартное отклонение повторяемости, о„% Предел по- 1 вторяемо- 1 сти, 1 г,% 1 Предел воспроиз водимости, R.% Почва 0.01-0.1 50 5.7 16.0 24.7 Зерно 0.01-0.1 50 5.6 15.7 24.3 Солома 0.04-0.1 50 4.9 13.7 21.3 Солома ] 0.1-0.4 25 3.1 8.7 13.4 1

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п=20) приведены в таблице 2. Таблица 2

Анализи руемый объект Предел обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения % Стандартное! отклонение, S.% Доверительный интервал среднего результата, ±, % Почва 0.01 0.01-0.1 80.3 4.8 4.4 Зерно 0.01 0.01-0.1 81.5 4.7 4.3 Солома 0.04 0.04-0.4 81.1 3.7 3.5 1

2.1.3. Избирательность метода Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографического анализа.

2.2. Реактивы и материалы

Ацетон, осч, ТУ 6-09-3513-86.

Ацетонитрил для ВЭЖХ, "В-230НМ" или х.ч., ТУ 6-09-3534-87. Бумажные фильтры "красная лента", ТУ 6.091678-86.

Вода бидистиллированная, деионизированная, ГОСТ 6709-79. Калий углекислый, х.ч., ГОСТ 4221-76.

Калия перманганат, ГОСТ 20490-75.

Кальция хлорид, х.ч., ГОСТ 4161-77.

Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77.

5

МУК 4.1.2300-07

Нафталевый ангидрид, аналитический стандарт с содержанием д.в. 97 % (Weil GmbH).

Натрий двууглекислый, ГОСТ 83-79.

Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76, свежепрока-ленный.

Натрий хлористый, ч.д.а., ГОСТ 4233-77.

Натрия гидроксид, хч., ГОСТ 4328-77.

н-Гексан, х.ч., ТУ 2631-003-05807999-98, свежеперегнанный.

Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил - вода (35:65, по объему).

Силикагель для колоночной хроматографии 60 (0.040-0.063 mm) (Merck, Германия).

Стекловата.

Фосфора пентоксид, ч., МРТУ 6-09-5759-69.

Элюент №1 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этил-ацетат (90:10, по объему).

Элюент №2 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этил-ацетат (50:50, по объему).

Этиловый эфир уксусной кислоты, ч.д.а., ГОСТ 22300-76.

2.3. Приборы н посуда

Жидкостный хроматограф "Альянс" фирмы "Waters" с УФ детектором (Waters 2487) с дегазатором и автоматическим пробоотборником или аналогичный.

Аналитическая колонка Symmetry С-18 (250 х 4.6) мм, 5 мкм (Waters).

Предколонка Symmetry С-18 (Waters).

Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-2001 или аналогичные.

Установка ультразвуковая «Серьга», ТУ 3.836.008.

Мельница ножевая РМ-120 и лабораторная зерновая ЛМЗ, ТУ 1-01-0593-79.

Ротационный испаритель вакуумный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 или аналогичный.

Бидистиллятор.

PH-метр универсальный ЭВ-74, ГОСТ 22261-76.

Насос водоструйный, МРТУ 42 861-64.

Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32ТС, ГОСТ 10384-72.

6

МУК 4.1.2300-07

Колбы круглодонные на шлифах КШ50 29/32 ТС, ГОСТ 10384-72.

Воронки лабораторные В-75-110, ГОСТ 25 336-82.

Воронки делительные ВД-3-250, ГОСТ8613-75.

Цилиндры мерные на 100,250 и 1000 см³, ГОСТ 1774-74.

Колбы мерные на 25, 50, 100 и 1000 см³, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 1, 2, 5, 10 см³, ГОСТ 22292-74.

Колонки стеклянные (25х 1) см.

2.4. Отбор проб

Отбор проб почвы производится в соответствии с ГОСТ 28168-89 «Почвы. Отбор проб»; зерна - по ГОСТ Р 50436-92 (ИСО 950-79) «Зерновые. Отбор проб зерна». Пробы зерна и соломы для определения остатков в урожае хранят в бумажной или тканевой упаковке при комнатной температуре. Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, зерно и солому измельчают на лабораторной мельнице.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 см³ растворителя упаривают в ротационном вакуумном испарителе при температуре 40°С до объема 1 см³ и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками. Гексан встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания свежей порции кислоты, затем промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего его сушат над гидроксидом натрия и перегоняют. Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташом (на 1 дм³ ацетона 10 г КМпС>4 и 2 г К2СО3). Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием. Этил ацетат промывают равным объёмом 5%-ного раствора двууглекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.

7

МУК 4.1.2300-07

2.5.2.    Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку (Symmetry С-18) кондиционируют в потоке подвижной фазы (1 см³/мин) до стабилизации нулевой линии в течение 1 -2 часов.

2.5.3.    Приготовление растворов

Для получения 50%-го водного ацетона в колбе емкостью 1 дм³ смешивают 500 см³ ацетона с 500 см³ дистиллированной воды, используя мерные цилиндры.

Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с бидистиллированной водой в соотношении 35:65 по объему, используя мерные цилиндры.

Для приготовления насыщенного раствора хлорида натрия 380 г NaCl растворяют при нагревании в 1 дм³ дистиллированной воды, полученный раствор фильтруют через фильтр «красная лента» и охлаждают до комнатной температуры.

Для приготовления элюента №1 в колбе на 1000 см³ смешивают 900 см³ н-гексана и 100 см³ этилацетата. Для приготовления элюента № 2 в колбе на 1000 см³ смешивают 500 см³ н-гексана и 500 см³ этилацетата.

Приготовление стандартного и градуировочных растворов:

Берут точную навеску нафталевого ангидрида (50 мг), переносят в мерную колбу на 100 см³, растворяют навеску в ацетонитриле и доводят до метки (стандартный раствор с концентрацией 0.5 мг/ см³). Градуировочные растворы с концентрациями 0.1, 0.2, 0.5, 1.0 и 2.0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы - смесь ацетонитрил - вода (50:50, по объему).

Стандартный раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0-4°С в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение

суток.

При изучении полноты извлечения нафталевого ангидрида используют ацетонитрильные растворы вещества. Растворы внесения с концентрациями 0.2, 2.0 и 10.0 мкг/см³ готовят из стандартного раствора с концентрацией 0.5 мг/см³ методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.

8

МУК 4.1.2300-07

2.5.4. Построение градуировочного графика Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация нафталевого ангидрида в растворе) в хроматограф вводят по 50 мм³ градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации нафталевого ангидрида в градуировочном растворе (мкг/см³).

2.5.5. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1 см помещают тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г силикагеля в 30 см³ смеси гексан - этилацетат (90:10, по объему). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонку последовательно промывают 50 см³ элюента № 2 и 50 см³ элюента № 1 со скоростью 1-2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

2.5.6. Проверка хроматографического поведения нафталевого ангидрида на колонке с силикагелем В круглодонную колбу емкостью 10 см³ отбирают 0,1 см³ стандартного раствора нафталевого ангидрида с концентрацией 10 мкг/см³. Отдувают растворитель током теплого воздуха (температура не выше 40°С), остаток растворяют в 5 см³ элюента № 1 и наносят на колонку. Колбу обмывают еще 5 см³ элюента № 1 и также вносят на колонку. Промывают колонку 50 см³ элюента № 1, затем 70 см³ элюента № 2 со скоростью 1-2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 см³ каждая, выпаривают досуха, остаток растворяют в 1 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.5.3.) и анализируют на содержание нафталевого ангидрида по п. 2.6.5.

Фракции, содержащие нафталевый ангидрид, объединяют, выпаривают досуха, остаток растворяют в ) мл подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют по п. 2.6.5. Рассчитывают содержание нафталевого ангидрида в элюате, определяя полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для этого объем элюента.

Примечание: параметры удерживания нафталевого ангидрида и сопутствующих экстрактивных веществ могут меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

9

МУК 4.1.2300-07

2.6. Проведение определения

2.6.1.    Извлечение нафталевого ангидрида из проб почвы Образец воздушно-сухой почвы массой 20 г помещают в коническую колбу емкостью 250 см³ с притертой пробкой, добавляют 50 см³ 50%-го водного ацетона и экстрагируют в течение 15 мин на ультразвуковой бане. Суспензию фильтруют на стеклянной воронке через бумажный фильтр "красная лента". Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу и экстракцию повторяют с 50 см³ 50%-ного водного ацетона. Объединенные экстракты упаривают до водного остатка (70-75 см³) на роторном испарителе при температуре не выше 40°С. Доводят объём экстракта до 100 см³ насыщенным раствором хлорида натрия. При необходимости (наличие взвеси) раствор дополнительно фильтруют через бумажный фильтр "красная лента".

Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.3.

2.6.2.    Извлечение нафталевого ангидрида из проб зерна

и соломы зерновых колосовых культур Навеску размолотого на лабораторной мельнице зерна массой 20 г или измельчённой на ножевой мельнице соломы массой 5 г помещают в коническую колбу емкостью 250 см³ и экстрагируют нафталсвый ангидрид 50 см³ смеси ацетон-вода (1:1, по объёму) на ультразвуковой установке в течение 15 мин. Суспензию фильтруют через бумажный фильтр "красная лента". Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу и экстракцию повторяют с 50 см³ 50%-водного ацетона, выдерживая в ультразвуковой ванне в течение 15 мин. Экстракцию повторяют. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40°С до полного удаления ацетона. Объём водного остатка доводят до 100 см³ насыщенного раствора хлорида натрия. При необходимости (наличие взвеси) раствор дополнительно фильтруют через бумажный фильтр "красная лента". Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.3.

2.6.3. Очистка экстрактов Полученные по п.п. 2.6.1. и 2.6.2. водные экстракты помещают в делительную воронку, объёмом 250 см³ и экстрагируют трижды гексаном порциями по 50 см³, встряхивая делительную воронку каждый раз в течение 2-3 мин и собирая верхний органический слой/ Гексановые экстракты объединяют, пропускают через слой безводного сульфата

1