Государе I венное caiiuiapiiooiuucMHOJioi н чес кое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств иидоксакарба в воде, почве, яблоках, ягодах винограда, яблочном и виноградном соках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2284—07

Издание официальное

Москва • 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты нрав потребителей и благополучия человека

4.1. Методы контроля. Химические факторы

Определение остаточных количеств индоксакарба в воде, почве, яблоках, ягодах винограда, яблочном и виноградном соках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2284-07

7,2. Приготовление растворов для проведения анализа.

7.2.1.    Приготовление подвижной фазы для НЭЖХ

Для приготовления подвижной фазы используют свежеперегиапные ацетонитрил и очищенную воду.

В плоскодонную колбу объемом I дм³ помещают 700 см³ ацетонитрила и 300 см³ очищенной воды. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 cmVmmh в течение 5 минут, после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 минуту.

7.2.2.    Приготовление градуировочных растворов

7.2.2.1. Стандартный раствор с концентрацией

Индоксакарба 200,0 мкг/см³ Взвешивают 10 мг Индоксакарба в мерной колбе объемом 50 см³. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилам.

7.2.2.2. Стандартный раствор с концентрацией

Индоксакарба 10.0 мкг/см³ Из стандартного раствора Индоксакарба с концентрацией 200,0 мг/см³ отбирают пипеткой 5 см³, помещают в мерную колбу объемом 100 см³ и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании.

7.2.2.3.Стандартные растворы Индоксакарба с концентрацией 1,0;

0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см³ для построения калибровочной кривой и внесения в растительные образцы, воду и почву Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 1,0; 0,5; 0,2 и 0,1 мкг/см³ и используют эти растворы для хроматографического исследования.

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Индоксакарба в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с концентрацией 1,0; 0,5; 0,2 и ОД мкг/см³.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.6. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений (рисунок 1).

МУК 4.1.2284-07

7.4. Подготовка концентрирующих патронов Диапак Нитрил и Диапак С16 для очистки экстрактов

7.4.1. Подготовка концентрирующего патрона Диапак Нитрил для очистки экстракта Вес процедуры происходят с нспольюианием вакуума, скорость потока растворов через патрон пс должна превышать 5 cmVmhh.

Патрон Диапак Нитрил устанавливаю г па алоиж с опюдом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер обье-мом нс менее 10 см³ (используют как емкость для элюенши).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают после-довагельно 10 см³ смеси гексан- ацетон в соопюшсшш 9:2. Элюаг отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.4.1.1. Проверка хроматографического поведения Индоксакарба на концентрирующем патроне Диапак Нитрил Из стандартного раствора Индоксакарба в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/ см³ отбирают 1 см³, помещают в круглодонную колбу объемом 100 см³ и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 30°С*

Сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 см³ гексана, смесь перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюаг собирают в концентратор, упаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют. Тот же концентратор обмывают двумя порциями по 10 см³ смеси гексан-ацетон в соотношении 9:2 и последовательно вносят на патрон. Элюаты после прохождения каждой порции собирают в отдельные концентраторы, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Индоксакарб, объединяют их и рассчитывают объем растворителя, необходимою для вымывания вещества из патрона.

7.4.2. Подготовка концентрирующего патрона Диапак-С! 6 для очистки экстракта Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см³/миа. При работе па патронах Диапак-С16 используют очищенную воду.

11

Патрон Диалак-С16 устанавливают на алонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 см³ (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают 5 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 7:3 и 20 см³ воды. Элюат отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона!

7.4.2.1. Проверка хроматографического поведения Индоксакарба на концентрирующем патроне Диапак-С 16

Из стандартного раствора Индоксакарба в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/ см³, отбирают 1 см³, помещают в круглодонную колбу объемом 100 см³ и добавляют туда 9 см³ воды, перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют.

Исходный концентратор обмывают 10 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1:4 и вносят на патрон. Элюат выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют.

Исходный концентратор обмывают 10 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1:2 и вносят на патрон. Элюат выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют.

Исходный концентратор обмывают двумя порциями по 10 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 7:3 и вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции упаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Индоксакарб, объединяют их и рассчитывают объем растворителя, необходимого для вымывания вещества из патрона.

7,5* Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматограф и и

Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 с предколон-кой Symmetry С18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25°С и скорости потока подвижной фазы 1 см³/мин 3-4 часа*

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых

МУК 4.1.2284-07

продуктов и объектов окружающей среды для определения микрокод]!-честв пестицидов” (№ 2051-79 от 21.08.79), а также в соответствии с ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 1743.01-83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 26950-89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ 25896-83 «Виноград свежий столовый. ТУ», ГОСТ 25892-83Е «Сок виноградный натуральный. ТУ», ГОСТ 27572-87 «Яблоки свежие для промышленной переработки. ТУ», ГОСТ 656-79 «Соки плодовые и ягодные натуральные».

Пробы воды и соков хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре +4°С не более 10 суток. Пробы винограда и яблок хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0-4 °С не более суток. Для длительного хранения пробы яблок и винограда замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18°С до 2-х лет.

Пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

9. Проведение определений

9.1. Вода

9.1.1. Экстракция Пробу воды объемом 100 см³помещают в делительную воронку объемом 250 см³, прибавляют 5 г сухого хлорида натрия и интенсивно встряхивают до полного растворения соли.

Затем в ту же делительную воронку помещают 30 мл гексана и интенсивно встряхивают 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в химический стакан объемом 150 см³, верхний гексановый слон собирают в концентратор объемом 250 см³ через слой безводного сульфата натрия. Водную фазу возвращают в делительную воронку и экстрагируют Индоксакарб еще двумя порциями гексана объемом по 30 см³ в тех же условиях. Гексановый экстракт объединяют в концентраторе объемом 250 см³, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Осушитель затем обмывают 10 см³ гексана, смыв объединяют с основным экстрактом и экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С Сухой экстракт очищают на концентрирующих патронах Диапак С16.

13

9,} ,2, Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак С 16

Сухой остаток, полученный по 9.1.1. растворяют в 1 см³ ацсюпмт-рила, тщательно обмывая стенки концентратора. Заюм в копнем i раюр добавляют 9 см* воды, смесь перемешивают и подученный раелвор вносят на патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концешраюр обмывакгг 10 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1:4 и вносят на патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 10 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1:2 и вносят па патрон. Элюат отбрасывают. Исходный концентратор обмывают 10 см³ смеси ацез опт рил-вода в соотношении 7:3 и вносят на патрон. Элюат собирают в чистый концентратор и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С Сухой остаток растворяют в 2-5 см³ ацетонитрила и хроматографируют.

9.2. Почва

9.2. L Экстракция Образец почвы массой 20 г помещают в центрифужный флакон объемом 200 см³, прибавляют 50 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 9:1 и помещают в ультразвуковую ванну на 5 минут. Затем банку встряхивают 5 минут на механическом встряхивателе при комнатной температуре, и содержимое банки центрифугируют 4 минуты при скорости 4000 об/мин. Супернатант фильтруют через фильтр “красная лента” в колбу объемом 250 мл с 5 г сухого хлорида натрия.

К остатку в центрифужном флаконе прибавляют 50 см³ смеси ацетонитрил-вода в соотношении 9:1, перемешивают содержимое флакона до гомогенного состояния стеклянной палочкой и повторяют экстракцию в ранее описанных условиях. Супернатанты объединяют в конической колбе с хлоридом натрия, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 10 минут. Затем содержимое колбы (без не растворившейся соли) переносят в делительную воронку объемом 250 см³ и выдерживают 5 минут. Выделившуюся нижнюю водную фазу отбрасывают, а верхнюю ацетонитрильную собирают в концентратор объемом 250 см³ через слой безводного сульфата натрия и выпаривают досуха при температуре не выше 30°С

9.2.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.2.1., прибавляют 3 см³ ацетона и обмывают стенки колбы. Туда же прибавляют

14

МУК 4Л .2284-07

100 мл дистиллированной воды , 5 г сухого хлорида натрия и перемешивают до полного растворения соли. Затем содержимое концентратора переносят в делительную воронку обьемом 250 см\ прибавляю г гуда 30 см³ гексана и встряхивают делительную воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в химический стакан обьемом 150 см³ , а верхний гексановый слой собирают в в концентратор объемом 250 cm^j через слой без-воднош сульфата натрия. Водный слой возвращают в делительную воронку и потеряют экстракцию двумя порциями гексана объемом по 30 см³. Гексановые фракции объединяют в концентраторе, осушитель обмывают 10 см³ гексана, объединяют с основным экстрактом и выпаривают досуха при температуре ие выше 30°С Водную фазу отбрасывают. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетона и очищают на концентрирующих патронах Диапак Нитрил.

9.2.3, Очистка экстракта на концентрирующих патронах Диапак Нитрил и Диапак С 16 Сухой остаток, полученный по п.9.2.2, растворяют в 2 см³ ацетона, обмывая стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 см³ гексана, смесь перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Исходный концентратор обмывают 10 см³ смеси гексан-ацетон в соотношении 9:2 и также вносят на патрон. Элюаты собирают, объединяют, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С, растворяют в 1 см³ ацетонитрила и подвергают дальнейшей очистке на патронах Диапак С16, как указано в п.9.1.2. После очистки элюат выпаривают досуха, растворяют в 2 см³ ацетонитрила и хроматографируют.

93. Яблоки

93.1. Экстращия Образец измельченных плодов яблок массой 10 г помещают помещают в коническую колбу объемом 250 см³, прибавляют 50 см³ ацетонитрила и помещают в ультразвуковую ванну на 5 минут. Затем экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 см³ с 5 г сухого хлорида натрия Экстракцию повторяют еще два раза в тех же условиях, используя по 50 см³ ацетонитрила. Экстракты объединяют в конической колбе с хлоридом натрия, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 10 минут. Затем содержимое колбы (без не растворившейся

15

МУК 4,1.2284-07

соли) перенося г в делительную воронку объемом 250 см³ и выдержи-вают 5 минут. Выделившуюся нижнюю водную фазу очбрасывают, а верхнюю ацетонитрильную собирают в концентратор объемом 250 см³ через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха при температуре не выше 30°С

9.3.2.    Очистка экстракта перераспределением в системе

несмешивающихся растворителей К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.3.1,, при-бавляют 3 см³ ацетона и обмывают стенки колбы . Туда же прибавляют 100 мл дистиллированной воды, 5 г сухого хлорида натрия и перемешивают до полного растворения соли. Затем содержимое концентратора переносят в делительную воронку объемом 250 см³, прибавляюг туда 30 см³ диэтилового эфира и встряхивают делительную воронку 2 минуты. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (эфир) с эмульсией собирают в концентратор объемом 250 см³. Водный слой возвращают в делительную воронку. Экстракцию повторяют двумя порциями диэтилового эфира объемом по 30 см³ в тех же условиях. Объединенный эфирный экстракт упаривают досуха при температуре не выше 30°С

9.3.3.    Очистка экстракта на концентрирующих патронах

Диапак Нитрил и Диапак С16 Очистку экстракта проводят по п. 9,2.3.

9.4. Ягоды винограда

Экстракцию, очистку экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на концентрирующих патронах Диапак Нитрил и Диапак С 16 проводят так же, как описано в пп. 9.3Л, 9.3.2 и 9.3.3.(яблоки).

9.5. Яблочный и виноградный соки

9.5.1. Экстракция

Образец виноградного сока объемом 10 см³ помещают в делительную воронку объемом 250 см³. Туда же прибавляют 5 г сухого хлорида натрия, 100 см³ дистиллированной воды и перемешивают до полного растворения соли. Индоксакарб экстрагируют 30 см³ диэтилового эфира, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 минуты. После пол-

МУК 4Л .2284-07

нот разделении фаз в делшсльной воронке верхний слой (эфир) с эмульсией собирают в химический стакан обьемом 150 см³. Водный слой возвращают в делительную воронку. Экстракцию нови оря ют двумя порциями диэтилового эфира объемом по 30 см³ в тех же условиях. Эфирный экстракт с эмульсией объединяют в химическом стакане объемом 150 см³.

9.5.2.    Очистка экстракта перераспределением в системе

песмешивающ ихся растворителей

Эфирный экстракт возвращают в делительную воронку, прибавляют туда же 100 мл дистиллированной воды и интенсивно встряхивают 2 минуты. После полного разделения фаз нижний водный слой отбрасывают, а верхний эфирный слой собирают в концентратор объемом 250 см³ через слой безводного сульфата натрия, осушитель обмывают 10 см³ эфира, объединяют с основным экстрактом и и упаривают досуха при температуре не выше 30°С Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетона и очищают на концентрирующих патронах Диапак Нитрил и Диапак С 16.

9.5.3.    Очистка экстракта па концентрирующих патронах

Диапак Нитрил и Диапак С 16

Очистку экстракта на концентрирующих патронах Диапак Нитрил и Диапак С 16 проводят так же, как описано в пп. 9.3.1, 9.3.2 и

9.3.3.(яблоки).

9.6. Условия хроматографирования

Хроматограф “Waters” или другой с аналогичными характеристиками с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны.

Колонка стальная Symmetry Shield RP18, 4,6 мм х 25 см, зернением 5 мкм.

Предколонка стальная Symmetry С18, 3,9 мм х 2 см, зернением 5 мкм

Температура колонки: 25°С

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода в соотношении 70:30

Длина волны 300 нм

Время удерживания Индоксакарба - 9,07- 9,44 мин.

Чувствительность 0,005 ед. оптической плотности на шкалу.

Объем вводимой пробы 20 мм³.

Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 2-20 нг

17

10. Обработка результатов

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа Millenium 3.05.01.

Альтернативная обработка результатов.

Содержание Индоксакарба рассчитывают по формуле:

Snp- А • V

X- -хР

100 • Sct* m

где X - содержание Индоксакарба в пробе, мг/кг или мг/дм³;

Sct - высота (площадь) пика стандарта, мм;

Snp - высота (площадь) пика образца, мм;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,

см³;

m - масса анализируемого образца, г (см³);

Р - содержание Индоксакарба в аналитическом стандарте, %.

11. Контроль погрешности измерении

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСГ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

21X^X21-100 <г    (1)

(X, + Х₂)

где Х₍, Х₂- результаты параллельных определений, мг/кг;

г- значение предела повторяемости (таблица 1), при этом г = 2.8 о_г. При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела

повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

18

МУК 4.1.2284-07

13. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(Х± А) мг/кг при вероятности Р= 0.95,

где X- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

А = 5*Х/100,

5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентрации, таблица 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе менее 0,01мг/кг» *

* - 0.01 мг/кг - предел обнаружения.

14, Контроль качества результатов измерении

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений котролнруют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки С_б должна удовлетворять условию:

Со ~~ А Л'Х A lx I

где, ± А .,,Т(±А ₄jc) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

А ,, = =Ь 0,84 А,

где А -Л2>аница абсолютной погрешности, мг/кг;

А = 5*Х/100,

5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %, Результат_контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к = Х*~ Х~Со,

19

Ш< 51.21 0-60

0-60 Определение остаточных количеств индокеакирба в воде, почве, яблоках, ягодах винограда, яблочном и випенрад-ном соках методом высокоэффективной жидкостей хроматографии. Методические указании. - М,: Федеральный центр гигиены И эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009.-20 с.

1.    PaipaGoiaiiu Российским государстценным aipapiibiM упи-всрситеюм МСХА им. К-Л. Тимиряюва, Учебно-научным консультационным центром «Лгрозколшня пестицидов и а!рохимика-тов» Минсельхоза России ( Калинин В.А. - профессор, каид. с-х. наук., Дов1илевич Е.В. * ст.н.сотр., канд. биол. наук, Дошилсвич А.В. - ст.н.согр., канд. хим. наук, Устименко II.В. - ст n.coip., канд. биол. наук).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией но санигарио гигиеническому нормированию Федеральной службы по надзору R сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 2 от 21.06.2007 г.).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав погребшелей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 9 октября 2007 г.

4.    Введены в действие с 9 декабря 2007 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    ГГеч.    л.    1,25

Тираж 200 экз.

федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав ногребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер , д. 18/20.

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора П7105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89.

О Pocno 1 ребнад к>р, 2009 ©Федеральный цетр ihi иены и эпидемиологии Роспотребнадюра, 2009

где Х\ X, С₍, среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми но и. I I), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг;

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К = >/£,.* + £\Х

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

|К_к| < К,    (2)

процедуру анализа признаю г удовле творительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)

2*[Х| — Х₂\ • 100 <R    (3)

(X! + Х₂)

где Х|, Хг - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R - предел воспроизводимости ( в соотвегствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

15. Разработчики

Калинин В.А., профессор, канд. с-х. наук, Довгилевич Е.В., ст.н.сотр., канд. биол.наук, Довгилевич А.В., ст.н.сотр., канд.хим.наук, Устименко Н.В., ст.н.сотр., канд. биол. наук.

Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева.

Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., Д. 53/1. Телефон: (095) 976-37-68, факс: (095) 976- 43-26.

20

Arpcianioc сое нищие: порошок.

Цвет, запах: белого цвета.

Давление насыщенного пара: 2.5 ' 10'⁵ мПа (25°С)

Коэффициент распределения в системе окзанол/вода при 25° С: K_ow logP= 4,65.

Температура плавления: 88,1 °С.

Растворимость в воде: 0,2 мг/дм^э. Растворимость в органических растворителях (г/дм³ при 20°С): ацетон - более 250, ацетонитрил - 139, метанол - 103, н-октанол - 14,5.

Гидролитически стоек в кислой и нейтральной среде с ДТ50 более 30 дней (pH 5), 38 дней (pH 7), но быстро разрушается в щелочном растворе (ДТ₅₀-1 день при pH 9).

Индоксакарб средне стоек в почве и мало подвижен.

Краткая токсикологическая характеристика: Индоксакарб относится к опасным веществам по острой пероральной (ЛДзо для крыс 268 мг/кг) и по ингаляционной [ЛК$о для крыс - 2000 мг/м³ воздуха] и к мало опасным веществам по накожной (ДЦ50 для кроликов > 5000 мг/кг) токсичности. Не вызывает покраснения кожи и глаз у кроликов.

В России гигиенические нормативы не установлены:

Область применения: Индоксакарб - инсектицид из класса оксадиа-зинов контактного и кишечного действия, блокирует натриевые каналы нервных клеток. Он эффективно подавляет развитие вредителей из отряда Lcpidoptera.

Проходит регистрационные испытания в России под торговым названием Авант, КС, 150 г/л в качестве инсектицида для борьбы с вредителями яблоневых садов и виноградников с нормой расхода 0,4 — 0,5 л/га и 5-ю обработками за сезон.

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в Таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п - 20) приведены в Таблице 2

4

МУК 4.1.2284-07

Mcipojioi ичсскпс нирамо ры дли Нндокслкирба

Таблица 1

Анализируемый объект Диана юн определяемых копией 1 раций, мг/кг Показ.нсли jo'inueiM (i р.ишца о]-пооиелмюй not решмо-ст»), +5, % I’" 0,05 Ciaimapi-ное oiKjio-пспис повторяемости, Ог, % 11редел по-торяемо-етн, г, % Предел Bouipont- нодимосш, к,% Вода 0,005-0,01 100 3,5 9,8 11,7 Более 0,01-0,05 50 4,0 11,2 13,4 Почва 0,01 0,1 вкл 50 5,0 14,0 20,0 Яблоки 0,02-0,1 вкл 50 5.0 14,0 20,0 Более 0,1-0,2 25 3,5 9,8 11,7 Яблочный сок 0,02-0,1 50 3,5 9,8 П,7 0,1-0,2 25 4,0 11,2 13,4 Я| оды винограда 0,02-0,1 вкл 50 4,0 11,2 13,4 Более 0,1 -0,2 25 5,0 14,0 20,0 Виноградный сок 0.02-0,1 вкл. 50 3,5 9,8 П,7 Более 0,1-0,2 2S 4,0 и ,2 13,4

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для Индоксакарба

Таблица 2

Анализируемый объект Me зоологические параметры, Р — 0,95, п - 20 Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное 01-клонение, S,% Довери тельный интервал среднего результата, ±,% Вода 0,005 0,005 - 0,05 89,2 4,4 1,8 Почва 0,01 I о 0 1 о 85,8 3,0 1,2 Яблоки 0,02 0,02 - 0,2 85,5 2,9 1.2

5

МУК 4.1,2284-07

ЯБЛОЧНЫЙ сок 0.02 0,02 - 0,2 90,8 2,3 1,0 Я] оды винограда 0,02 0,02 0,2 89,2 2,1 0,9 Виноградный сок 0,02 0,02- -0,2 89,7 2.1 0,9

2. [Метод измерений

Метод основан на определении Индоксакарба с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистке перераспределением между двумя несмсшивающимися фазами и на концентрирующих патронах на основе силикагеля (Диапак Нитрил и Диапак С16).

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.L Средства измерений.

Весы аналитические «OHAUS», Z 11140.

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности + 0,038 г «ACCULAB» V600.

Колбы мерные на 25, 50 и 100 дм³, ГОСТ 1770-74.

Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50-100 мм³.

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см³, ГОСТ 20292-74.

Хроматограф жидкостной Уотерс 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу или другой аналогичного типа, номер гос-регистрации 15311-02.

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см³, ГОСТ 1770-74.

Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

6

МУК 4.1.2284-07

J.Z Реактивы

Индоксакарб, аналитический стандарт с содержанием действующего исщеоьа 99,6% ( фирма Дюпон де 11смур 11н герпешнл, С, А)

Ацетон, осч. ГУ 2633-00-4-11291058-94

Ацетонитрил осч., УФ-205 нм, ТУ 6-09-2167-84.

Вода бидистиллированная, деионизированная, ГОСТ 7602-72.

Гексан, х.ч. д/спсктроскопии, ТУ 6-09-06-657-84

Калий марганцовокислый, ч.д.а. ГОСТ 20490-75.

Кальций хлористый, х.ч. ГОСТ 4161-76.

Натрий сернокислый, безводный, х.ч. ГОСТ 4166-76.

Натрий хлористый, х.ч. ГОСТ 4233-77.

Эфир диэтиловый, ГОСТ 6265-74

Концентрирующие патроны Диапак Нитрил (0,6 г), ТУ 4215-002-05451931-94

Концентрирующие патроны Диапак С 16 (0,6 г), ТУ 4215-002-05451931-94

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Диапак С, Диапак Нитрил и Диапак С 16.

Аппарат для встряхивания проб «SKLO UNION TYP LT1».

Банки с крышками для экстракции на 250 мл, полипропилен, кат.ЖЗ 120-0250, NALGENE.

Ванна ультразвуковая «UNITRA» UNIMA OLSZTYN UM-4.

Воронки химические для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613-75.

Воронки делительные на 250 см³, ГОСТ 10054-75.

Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi или ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 с

водяной баней;

Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 см³, КПШ-100, КПШ-250, ГОСТ 10394-72.

Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP18, зернение 5 мкм, фирма Уотерс.

7

Колбы конические, плоскодонные объемом 250, 500 и 1000 см\ ГОСТ 9737-70

Концентраторы грушевидные и кругсюдонные, объемом 100 и 250 см\ ГОСТ 10394-75

Насос диафрагменный РТЛ9 фирмы KNP Neu Laboport. Нредколонка хроматографическая стальная. Symmetry С 18, длиной 20 мм, внутренним диаметром 3,9 мм, зернение 5 мкм, фирма Уогерс Стаканы стеклянные объемом 100-500 см³, ГОСТ 25366-801:. Установка для перегонки растворителей Фильтры бумажные, “красная лента”, ТУ-6-09-1678-86.

Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм, фирма Уотерс

Центрифуга MPW-350e с набором полипропиленовых банок емкостью 200 мл.

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4Л При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12Л.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12Л.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12Л .004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5Л 313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5* Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

8

МУК 4.1.2284-07

6. Условия измерении

При выполнении намерений соблюдают следующие условия:

-    процессы приготовлении растворов и подготовки проб к анализу проводя !' при т емпературе воздуха (20±5)^с,С и относи тельной влажности не более 80%.

-    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению определений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей ( при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка концентрирующих патронов Диапак С, Диапак С 16 и Диапак Нитрил для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества па патронах, построение калибровочной кривой.

7.7. Подготовка органических растворителей

7.1.1. Очистка ацетона Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия (А.Гордон, Р.Форд Спутник химика, Москва, 1976 г., с.438-439)

7.1.2. Очистка ацетонитрила Ацетонитрил перегоняют.

7.1.3. Очистка гексана Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором перманганата калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А.Гордон, Р.Форд Спутник химика, Москва, 1976 г., с.441).

7.1.4. Очистка бидистиллированной воды Бидистиллят кипятят в течение 6 часов с марганцовокислым калием, добавленным из расчета 1 г/д и затем перегоняют.

7.1.5. Очистка диэттового эфира Диэтиловый эфир перегоняют.

9