Государственное санитарно-эпндсмно.кн ичсское нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.2116—06

Издание официальное

Москва • 2008

Федеральная сдужба по напору в сфере защиты нрав ноз ребшедей н G.iaioiio.ivmiih че.ювека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.21*16—06

МУК 4.1.2113—06

температура термостата колонок - 90 °С; температура испарителя - 170 °С; температура детектора - 250 °С: расход газа-носителя (азота) - 30 см³/мин; скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч; время удерживания хлороформа - 3 мин 05с:

тетрахлорметана - 4 мин 20 с:

1.2-дихлорэтана - 5 мин 30 с.

На полученной хроматограмме определяют площади пиков определяемых компонентов и по средним результатам из 6 серий строят граду ировочную характеристику . Градуировку проверяют 1 раз в квартал и при смене партии реактивов.

7.5. Отбор проб

Отбор проб мочи в объеме нс менее 200 см³ производится в тщательно вымытый стеклянный сосуд с притертой пробкой. Анализ мочи проводить сразу или хранить в холодильнике не более 12 ч после отбора пробы.

8. Выполнение измерений

В два флакона из-под пенициллина помещают по 5 см³ мочи, флаконы закрывают резиновой пробкой и ставят в металлические цилиндры с просверленными в стенках отверстиями и навинчивающейся крышкой. Первый цилиндр с флаконом погружают в кипящмо водяную баню. По истечении 5 мин отбирают нагретым в термостате при t = 60 °С шприцем из флакона 5 см³ парогазовой пробы и вводят ее в хроматографическую колонку через испаритель. Процедуру повторяют аналогично для второго образца и проводят выполнение измерений двух параллельных проб мочи. Условия выполнения измерений аналогичны условиям при установлении градуировочной характеристики (п. 7.4).

9. Вычисление результатов измерений

На хроматограмме рассчитывают площадь пика и по граду ировоч-ной характеристике определяют концентрацию алифатических хлорированных углеводородов в моче. За резу льтат измерения принимают среднее арифметическое значение двух параллельных определений Х_тая, Х_т1П, расхождение между которыми нс должно превышать значения предела повторяемости г_п (табл. 3).

Результат измерений представляют в виде (X ± А) мкг/см³, где

143

МУК 4.1.2113—06

при условии:    Х_пт-х_тп<,-^-    ^Л""    *    ^Л. где

Х_ят - максимальный результат из 2-х параллельных измерений;

Х_тт - минимальный результат из 2-х параллельных измерений: г„ - значение предела повторяемости. %:

Л - характеристика погрешности, мкг/см³ при Р = 0.95. равная:

S-X

А =    .    где    д    -    относительное    значение    характеристики    по-

100

грешности. %.

10. Внутренний контроль качества результатов измерений

Внутренний контроль качества (ВКК) результатов измерений - повторяемость. внутри лабораторная прецизионность (воспроизводимость), точность - осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве измерений и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению в соответствии с нормативным документом МИ 2335—2003 «ГСОЕИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа». Методика выполнения измерений обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, нс превышающей значений, приведенных в табл. 2 и 3.

Таблица 2

Диапазон измерений, значении показателей точности, повторяемости, воспроизводимоеги

Наименование определяемого компонента и диапазон измерений, мкг/см3	1 Указатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), <7Г, %	Показатель воспроизво;щмос ш (относительное сре;ц секвадратическое отклонение BOCI 1роизводимос ш).	I Указатель точности (i-раницы относительной ишрешносш При вс*роя пюсти Р = 0,95), ± 8, %
Хлороформ, от 0.0015 до 0,09	11,6	12,7	28,3
Гетрахлорметан, от 0.0004 до 0.03	11,4	15,2	15,6
1,2-Дихлорэтан, от 0,0125 до 0,37	10,6	13,9	9,1

МУК 4.1.2113—06

Таблица 3 Значении пределов повторяемости и воспроизводимости при доверите. 1Ы1оп верой i нос ш /'=0,95

I 1аимснованис определяемого компонента и диапазон измерений, мкг/см3 Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений), г„% 11редел внутрилабораторной воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхожде-Ш1Я между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории, но в разных условиях), Ч’% Хлороформ, от 0,0015 до 0,09 вкл. 32,1 35,1 Тетрахлорметан, от 0,0004 до 0,03 вкл. 21,6 24,4 1,2-Дихлорэтан, от 0,0125 до 0,37 вкл. 19,3 21,1

10.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят раз в квартал в анализируемой серин измерений. Определяют содержание исследуемых соединений в градуировочных растворах, которые соответствуют началу, середине и концу градуировочного интервала. Градуировка признается стабильной, если расхождение между заданными и измеренными значениями концентраций не превышает 5 %.

10.2. Контроль повторяемости Относительное расхождение между результатами двух измерений, выполненных в соответствии с методикой одним оператором при измерении образцов одной и той же рабочей пробы, с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов, в течение возможно минимального интервала времени, нс должно превышать значения предела повторяемости г_п (табл. 3)

Повторяемость результатов параллельных измерений признают удовлетворительной, если

-*min S — -^Xttm+Xnin .где ^mm 100 2

r_n - значение предела повторяемости. %:

145

МУК 4.1.2113—06

X_maf - максимальный результат из 2-х параллельных измерений;

Х_тт - минимальный результат из 2-х параллельных измерений;

Если условие нс выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

10.3. Контроль воспроизводимости Внутренний контроль качества воспроизводимости проводят с использованием рабочей пробы. Пробу делят на две равные части и анализируют в соответствии с методикой, максимально варьируя условия проведения анализа (разные операторы, разнос время, разные партии реактивов одного типа, разные наборы мерной посуды и т. д.). Воспроизводимость результатов контрольных измерений признают удовлетворительной. если выполняется условие:

Х_] - средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных измерений, мкг/см³;

Х₂ — средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных измерений, полученный в других условиях, мкг/см³;

Rji ~ значение предела внутрилабораторной воспроизводимости. %

(табл. 3).

Расхождение между результатами измерений .V, и Х₂. полученных в разных условиях, нс должно превышать значений показателя воспроизводимости R.- при доверительной вероятности Р = 0.95. указан-

^Ле

ных в табл. 3.

Если условие нс выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

10.4. Контроль точности Контроль точности с использованием метода добавок состоит в сравнении результата контрольной процедуры, равного разности между результатом контрольного измерения содержания алифатических хлорированных соединений (хлороформ, тетрахлорметан, 1.2-дихлорэтан) в пробе с известной добавкой (Л' ). в рабочей пробе без добавки (ЛГ) и

МУК 4.1.2113—06

величиной добавки С_с (добавка должна составлять нс менее 40 % от содержания алифатических хлорированных соединении в рабочей пробе) с нормативом точности К.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:

X^х - средний результат контрольного измерения содержания определяемого компонента в рабочей пробе с известной добавкой из 2-х параллельных измерений, мкг/см³;

X - средний результат контрольного измерения содержания определяемого компонента в рабочей пробе из 2-х параллельных измерений. мкг/см³;

С_д - величина добавки к пробе, мкг/см³.

Качество контрольной процедуры признают удовлетворительной при выполнении условия: К к £ А.'.

При превышении норматива контроля К эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

Периодичность ВКК регламентируют в руководстве по качеству лаборатории.

Литература

1. Бандман А. Л.. Войтенко Г. А.. Волкова Н. В. и др. Вредные химические вещества. Углеводороды. Галогенпроизводные углеводородов: Справ, изд. /Под ред. В. А. Филова и др. Л.: «Химия». 1990.

Методические указания разработаны Пермским научно-исследовательским клиническим институтом детской экопатологии (Т. С. Уланова. Т. В. Нурисламова. Г. И. Леготкина. Н. А. Попова).

147

МУК 4.1.2113—06

1 - термометр; 2 - инертная прокладка; 3 - шприц; 4 - металлический цилиндре завинчивающейся крышкой; 5 - отверстие в металлической крышке; 6 - пенициллиновый флакон;

7 - проба мочи; 8 - термостатируемая водяная баня

Рис. 1. Прибор для анализа равновесной паровой фазы

148

Определение вредных веществ в биологических средах: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2008.—183 с.

1.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 11.07.06 №2).

2.    Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 9 августа 2006 г.

3.    Введены впервые.

ЬКК 28.072

<    Роспотребнадзор, 2008

<    Федеральный центр iтн ненм и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008

МУК 4.1.2102-4.1.2116—06

Содержание

Измерение массовой концешрации селена в моче методом атомко-

абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2102—06............................................4

Определение массовой концентрации ванадия в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической

атомизацией: МУК 4.1.2103—06........................................................................14

Определение массовой концентрации меди, магния, кадмия в пробах мочи

методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2104—06..................25

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах

волос методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2105—06 37

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии:

МУК 4.1.2106—06................................................................................................50

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2107—06....................................63

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2108—06....................................74

Определение массовой концентрации 2-хлорфенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2109—06....................................85

Определение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах мочи методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2110—06................................................................................................96

Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2111—06..............................................................................................ПО

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, гетрахлормешна. хлорбензола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2112—06..................................125

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана в биосредах (моча) методом газохроматографического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2113—06...............................................137

Определение массовой концентрации хлороформа. 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана, хлорбензола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2114—06..................................149

Определение массовой концепграции хлороформа, 1,2-дихлорэтана,

тетрахлорметана в биосредах (кровь) методом газохромато1рафического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2115—06...............................................162

Определение массовой концентрации стирола в пробах крови методом

высокоэффективной жидкостной хромаго1рафии: МУК 4.1.2116—06.........174

МУК 4.1.2113—06

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

9 августа 2006 г.

Дата введения: I сентября 2006 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение массовой концентрации хлороформа,

1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана в биосредах (моча) методом газохроматографического анализа равновесного пара

Методические указания _МУК    4.1.2113—06_

1. Область применения

Методические указания по определению концентраций химических веществ в биологических средах предназначены для использования Федеральной службой по надзору в с(|юрс защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологии и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды.

Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием органических соединений в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды.

Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 «ГСОЕИ. Методики выполнения измерений». ГОСТ Р 1.5-92 «ГСС. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов». Методика анализа обеспечивает выполнение измерений массовой концентрации алифатических хлорированных углеводородов в моче в диапазоне концентраций:

137

•    хлороформ от 0.0015 до 0.0900 мкг/см³ с погрешностью 28.3% при доверительной вероятности 0.95:

•    тетрахлорметан от 0.0004 до 0.0300 мкг/см³ с погрешностью 15.6 % при доверительной вероятности 0.95:

•    1.2-дихлорэтан от 0.0125 до 0.3700 мкг/см³ с погрешностью 9.0 % при доверительной вероятности 0.95.

Хлороформ (трихлорметан)

СНСЬ    Молекулярная    масса    119.38

Хлороформ - бесцветная жидкость с характерным сладковатым за-пахом. Температура кипения 61.15 °С. температура плавления (- 63.5 °С). Хлороформ растворим в органических растворителях и малорастворим в воде, наркотик |1|.

Тетрахлорметан

ССЦ    Молекулярная масса    153.82

Тетрахлорметан - бесцветная жидкость. Температура кипения 76.75 °С. температу ра плавления (-22.87 °С). Тетрахлорметан растворим в органических растворителях и малорастворим в воде. Тетрахлорметан - сильнейший наркотик 111.

1.2- Дихлорэтан

С:Н.₁С1:    Молекулярная масса 98.97

1.2- Ди.хлорэтан - бесцветная жидкость. Температура кипения 83.5 °С. температура плавления (-35.3 °С). 1.2-ди.хлорэтан растворим в органических растворителях и малорастворим в воде, явтястся токсичным соединением 111.

2. Сущность метода

Методика основана на предварительном выделении алифатических хлорированных углеводородов из биологического материала (моча) путем нагревания объекта и последующем газохроматографическом анализе парогазовой пробы.

Выполнение измерений массовой концентрации алифатических хлорированных углеводородов проводят методом газовой хроматографии с детектором электронного захвата. Определению нс мешают ацетон. ароматические углеводороды, алифатические спирты, трихлорэтилен. при содержании каждого из указанных веществ нс более 0.5 мкг/см³.

Длительность анализа одной пробы мочи - 20 мин.

138

МУК 4.1.2113—06

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений. вспомогательные устройства, материалы, реактивы и растворы. Допускается применение других типов средств измерений, вспомогательного оборудования и химреактивов с аналогичными или лучшими метрологическими и техническими характеристиками.

3.1. Средства измерении

Хроматограф газовый с детектором электронного захвата Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические ГОСТ 24104-01 Разновесы Г:-210 ГОСТ 7328-01 Секундомер «Агат» ТУ 25-1894.003—90 Мнкрошприцы МШ-10 ТУ 5Е2.833.106 Линейка измерительная ГОСТ 427-75 Лупа измерительная ГОСТ 25706-83 Шприцы медицинские стеклянные, вместимостью 5 см3 ТУ 64-1-378—83 Колбы мерные, вместимостью 25. 50.100 и 1 (ХЮ см3 ГОСТ 1770-74 Пробирки мерные со шлифом 10 см3 ГОСТ 1770-74 Пипетки мерные 5. 10 см3 ГОСТ 29227-91 Хлороформ фарм. Массовая доля основного вещества. % нс менее 99.7 ГСО 7288—96 Тстрахлорметан. ч. Массовая доля основного вещества. % нс менее 99.9 ГСО 7211—95 1,2-Дихлорэтан, хч. Массовая доля основного вещества. % не менее 99.6 ГСО 7332—96 3.2. Вспомогитеяьн ые устройства Хроматографическая колонка стальная длиной 3 м и внутренним диаметром 3 мм Бидистиллятор стеклянный БС ТУ 25-11.1592—81 Редуктор кислородный ТУ 26-05-236—73 3.3. Материи 1ы Азот газообразный ГОСТ 9293-74

3.-1. Реактивы Apiczon L на хроматонс N-cyncp фракции 0.16— 0.20 мм - неподвижная фаза хзя заполнения хроматографической колонки

139

ГОСТ 4220-75 ГОСТ 4233-77 ТУ 2633-039-44493179—00 ГОСТ 14262-78

3.5. Растворы Раствор калия дихромата. 3 %-й

4. Требования к безопасности

4.1.    При выполнении работ должны быть соблюдены меры противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004—85 и правила техники безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007—76.

4.2.    При работе необходимо соблюдать «Правила по технике безопасности и производственной санитарии при работе в химических лабораториях» (Утверждены М3 СССР 20.12.82) и «Правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением» (Утверждены Госгортехнадзором СССР 27.11.87).

4.3.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

4.4.    При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженсра-химика. опыт работы на газовом хроматографе и в химической лаборатории, прошедшие соответствующий инструктаж, освоившие метод в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы оперативного контроля при выполнении процедур контроля погрешности.

6. Условия измерений

6.1.    При проведении процессов приготовления растворов и подготовки проб к анализу соблюдают следующие условия:

•    температура воздуха (20 ± 5) °С;

•    атмосферное давление 630—800 мм рт. ст.;

•    влажность воздуха не более 80 % при температу ре 25 °С.

6.2.    Выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией по прибору.

140

МУК 4.1.2113—06

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды, подготовка хроматографической колонки, приготовление imecTOBtiHHbix смесей, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка посуды

Используемую посуду замочить на 1 ч в свежеприготовленном 3 %-м растворе дихромата калия в серной кислоте (3 г дихромата калия на 100 см³ концентрированной серной кислоты), отмыть в проточной водопроводной воде, ополоснуть бидистиллированной водой и просушить при температу ре 120 °С.

7.2. Подготовка хроматографической колонки

Хроматографическую колонку перед заполнением неподвижной фазой промывают бидистиллированной водой, ацетоном, высушивают в токе инертного газа. Заполнение хроматографической колонки насадкой проводят под вакуумом. Концы колонки закрывают стекловатой, устанавливают в хроматограф и. нс подключая к детектору, кондиционируют в токе газа-носителя (азота) с расходом 30 см³/мин при температуре 200 °С в течение 18 ч. После охлаждения колонку подключают к детектору. записывают ну леву ю линию в рабочем режиме. При отсутствии мешающих влияний колонка готова к работе.

7.3. Приготовление аттестованных смесей

Для построения градуировочного графика собирают мочу, нс содержащую определяемых компонентов, и готовят серию аттестованных растворов.

Исходный аттестованный раствор. В мерну ю колбу объемом 1 000 см³, содержащую бидистиллированну ю воду в объеме 500 см³, вводят микрошприцем 4 мм³ хлороформа ГСО 7288—96. 1 мм³ тстрах-лорметана ГСО 7211—95. 20 мм³ 1.2-дихлорэтана ГСО 7332—96 и заполняют колбу до метки водой. Весовое содержание компонентов в исходной аттестованной смеси составляет (с учетом плотности) хлоро-<1юрм - 5.95 мкг/см³. тстрахлормстан - 1.63 мкг/см³. 1.2-дихлорэтан -25.0 мкг/см³. Срок хранения - 12 ч.

Рабочий аттестованный раствор. В мерную колбу объемом 100 см³, содержащу ю 30 см³ мочи, вносят 10 см³ исходного аттестованного раствора и заполняют колбу до метки мочой.

141

7.4. Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристик) устанавливают методом абсолютной калибровки на градуировочных смесях хлорированных углеводородов. Она выражает зависимость площади пика на хроматограмме (мм²) от массы компонента (мкг) и строится по 6 сериям аттестованных растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из 6 аттестованных растворов, готовят в мерных колбах объемом 100 см³, содержащих 30 см³ мочи. В каждую колбу вносят исходное вещество в соответствии с табл. 1 и заполняют колбу до метки мочой. Срок хранения -12 ч.

Таблица 1

Аттестованные смеси для установления градуировочной характерист ики при определении концентрации алифатических хлорированных углеводородов

11омер смеси для градуировки	1	2	3	4	5	6
Хлороформ, объем исхо;щой аттестованной смеси (0,595 мкг/см3), см3	0,25	1,0	2,0	5,0	10,0	15,0
Содержание хлороформа, мкг/см'	0,0015	0,0060	0,0120	0,0300	0,0600	0,0890
Тетрахлорметад i, объем исходной аттестованной смеси (0,163 мкг/см3), см3	0,25	1,0	2,0	5,0	10,0	15,0
Содержа! те тетрахлормета! ia, мкг/см3	0,0(Ю4	0,0016	0,0030	0,0080	0,0160	0,0240
1,2-Дихлортган, объем исходной аттестованной смеси (2,50 мкг/см3), см3	0,5	1,0	2,0	5,0	10,0	15,0
Содержание 1,2-дихлорэтана, мкг/см3	0,0125	0,0250	0,0500	0,1250	0,2500	0.3700

Во флаконы из-под пенициллина помещают по 5 см³ мочи с аттестованной смесью, флаконы закрывают резиновой пробкой и ставят в металлические цилиндры с просверленными в стенках отверстиями и навинчивающейся крышкой (рис. 1). Первый цилиндр с флаконом погружают в кипящую водяную баню. По истечении 5 мин отбирают нагретым в термостате при t = 60 °С шприцем из флакона 5 см³ парогазовой пробы и вводят ее в хроматографическую колонку через испаритель. Процедуру повторяют аналогично для каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях: