Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

15 страниц

191.00 ₽

Купить МУК 4.1.2107-06 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Методические указания по определению концентраций химических веществ в биологических средах предназначены для использования Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологии и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды. Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием органических соединений в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды.

 Скачать PDF

Оглавление

1 Область применения

2 Сущность метода

3 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

     3.1 Средства измерений

     3.2 Вспомогательные устройства

     3.3 Материалы

     3.4 Реактивы

     3.5 Растворы

4 Требования к безопасности

5 Требования к квалификации оператора

6 Условия измерений

7 Подготовка к выполнению измерений

     7.1 Подготовка посуды

     7.2 Подготовка хроматографической колонки

     7.3 Приготовление аттестованных смесей

     7.4 Определение градуировочных коэффициентов фенола по отношению к внутреннему стандарту

     7.5 Отбор проб

8 Выполнение измерений

9 Вычисление результатов измерений

10 Внутренний контроль качества результатов измерений

     10.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики

     10.2 Контроль повторяемости

     10.3 Контроль воспроизводимости

     10.4 Контроль точности

Нормативные ссылки:
Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15

Государственное санитарно-эпндсмно.кн ичсское нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.2116—06

Издание официальное

Москва • 2008

Федеральная сдужба по напору в сфере защиты нрав ноз ребшедей н G.iaioiio.ivmiih че.ювека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.21*16—06

МУК 4.1.2107—06

7.5. Отбор проб

Отбор проб мочи в объеме нс менее 200 см3 производят в тщательно вымытый стеклянный сосуд с притертой пробкой. Анализ мочи про-водить сразу или хранить в холодильнике не более 12 ч после отбора пробы.

8. Выполнение измерении

Пробу мочи в объеме 50 см3 помещают в делительную вороню объемом 250 см3, добавляют внутренний стандарт - нафталин 0.1 см(исходный аттестованный раствор 4(Х) мкг/см3) и 2 г кристаллического карбоната нгггрия. Плавным покачиванием перемешивают содержимое воронки, затем вводят в вороню 0.3 см3 уксусного ангидрида и встряхивают в течение 0.5 мин для перевода фенола в уксуснокислый эфир. Продукт ацилирования дважды экстрагируют метиленхлоридом порциями по 2.5 см3 в течение 2 мин. Экстракты объединяют и центрифугируют в течение 10 мин. После удаления белка объединенные органические вытяжки помещают в бюксу и упаривают под ИК-лампой до 1 см3. Полученный экстракт хроматографируют и проводят количественное определение анализируемого соединения в подготовленной пробе методом внутреннего стандарта. Процедуру повторяют аналогично для второго образца и проводят выполнение измерений двух параллельных проб мочи. Условия выполнения измерений аналогичны условиям при установлении градуировочной характеристики (п. 7.4).

9. Вычисление результатов измерений

На хроматограмме рассчитывают площади пиков фенилацетата и внутреннего стандарта (нафталина).

За результат измерения принимают среднее арифметическое значение двух параллельных измерений Х^, Хт1П. расхождение между которыми нс должно превышать значения предела повторяемости г„ (табл. 3).

S, -<ис, К, с,

.S c И


Х =


. где


Расчет концентрации фенола (мкг/см3) в биопробс вычисляют по формуле:

X- концентрация фенола в биопробс. мкг/см3;

S„ Set - площади пиков фенилацетата и нафталина, мм*;

А'.ст - градуировочный коэффициент (устанавливается по градуировочному графлю -Kfa-Sj/Scj):

69

Результат измерения представляют в виде (X ± А) мкг/см3, где

т„ - навеска нафталина, мкг; V - объем пробы, см3.


_     X    +    X

X - средний результат анализа, мкг/см3, X - ——-—

г X + X при условии:    XmLX    - Xтп < —---—-— гдс

100 2

Хтах - максимальный результат из 2-х параллельных измерений:

Хтт - минимальный результат из 2-х параллельных измерений: г„ - значение предела повторяемости. %:

А - характеристика погрешности, мкг/см3 при Р = 0.95. равная: л 8-Х

Д =-. где д - относительное значение характеристики по-

100

грешности. % (табл. 2).

10. Внутренний контроль качества результатов измерений

Внутренний контроль качества (ВКК) результатов измерений - повторяемость. внутрилабораторная прецизионность (воспроизводимость), точность - осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве измерений и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению в соответствии с нормативным документом МИ 2335—2003 «ГСОЕИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа». Методика выполнения измерений обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведенных в табл. 2 и 3.

Таблица 2

Диапазон измерений, значении показателей точности, повторяемости, воспроизводимости

I Именование определяемого компонента и диапазон измерений, мкг/см3

I Указатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), <тг,%

Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадра-гическое отклонение воспроизводимости),

,%

xt

Показатель точности (границы относительной покатости при вероят ности Р = 0,95), ± б, %

Фенол,

от 0,04 до 0,40 пел.

6,9

2,9

10,0

МУК 4.1.2107—06

Таблица 3

Значении npe.ie.ioit нонюриемос!н и воспроизводимости при ловери re.ii.iion вероятности /'= 0,95

Наименование определяемого компонента и диапазон измерений, мкг/см3

Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами нарал-лельных определений), Гт %

Предел вттрилабораторной воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатам измерений, полученными в одной лаборатории, но в разных условиях),

*.«>»

Фенол,

от 0,04 до 0,40 вкл.

10,3

8,0

10.1. Контроль стабильности гравировочной характеристики Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят раз в квартал в анализируемой серии измерений. Определяют содержания исследуемых соединений в градуировочных растворах, которые соответствуют началу, середине и концу градуировочного интервала. Градуировка признается стабильной, если расхождение между заданным и измеренным значением концентраций нс превышает 5 %.

10.2. Контроль повторяемости

Относительное расхождение между результатами двух измерений, выполненных в соответствии с методикой одним оператором при измерении образцов одной и той же рабочей пробы, с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов, в течение возможно минимального интервала времени, не до.тжно превышать значения предела повторяемости г„ (табл. 3).

Повторяемость результатов параллельных измерений признают удовлетворительной, если

loo

где

х_+х.

гп - значение предела повторяемости. %:

Хтах - максимальный результат из 2-х параллельных измерений:

Хтт - минимальный результат из 2-х параллельных измерений.

Если условие нс выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

10.3. Контроль воспроизводимости Внутренний контроль воспроизводимости проводят с использованием рабочей пробы. Пробу делят на две равные части и анализируют в

71

соответствии с методикой, максимально варьируя условия проведения анализа (разные операторы, разнос время, разные партии реактивов одного типа, разные наборы мерной посуды и т. д.). Воспроизводимость результатов контрольных измерений признают удовлетворительной, если выполняется условие:

|у у I < Rx, Х,+Х.

Xj - средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных измерений, мкг/см3;

Х2 - средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных измерений, полученный в других условиях, мкг/см3;

Rxf - значение предела внутрилабораторной воспроизводимости. %

(табл. 3).

Расхождение между результатами измерений X; и Х2 . получен-ными в разных условиях, не должно превышать значений показателя воспроизводимости Ryf при доверительной вероятности Р = 0.95, ука

занных в табл. 3.

Если условие нс выполняется, эксперимент повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

10.4. Контроль точности

Контроль точности с использованием метода добавок состоит в сравнении результата контрольной процедуры, равного разности между результатом контрольного измерения содержания фенола в пробе с известной добавкой (Л' ) в рабочей пробе без добавки (X) и величиной добавки С0 (добавка должна составлять не менее 40 % от содержания фенола в рабочей пробе) с нормативом точности К.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:

1-Х-Сд\ = Кк,где

Xх - средний результат контрольного измерения содержания определяемого компонента в рабочей пробе с известной добавкой из 2-х параллельных измерений, мкг/см3;

X - средний результат контрольного измерения содержания определяемого компонента в рабочей пробе из 2-х параллельных измерений. мкг/см3;

МУК 4.1.2107—06

Cd- величина добавки к пробе, мкг/см3.

К = 0.84 • J(— • X)2 + (— • Xх)2

V loo юо

Качество контрольной процедуры пришлют удовлетворительной при выполнении условия: А* <, К.

При превышении оперативного контроля погрешности эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, устраняют их и процедуру контроля повторяют.

Периодичность контроля исполнения процедуры ВКК регламентируют в руководстве по качеств) лаборатории.

Литература

1. Бандман А. Л.. Войтснко Г. А.. Волкова Н. В. и др. Вредные химические вещества. Углеводороды. Галогснпроизводныс углеводородов: Справ, изд. /Под рсд. В. А. Филова и др. Л.: «Химия». 1990.

Методические указания разработаны Пермским научно-исследовательским клиническим институтом детской экопатологии (Т. С. Уланов;!. Т. В. Нурисламова. Н. А. Попова).

73

Определение вредных веществ в биологических средах: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2008.—183 с.

1.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 11.07.06 №2).

2.    Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 9 августа 2006 г.

3.    Введены впервые.

ЬКК 28.072

<    Роспотребнадзор, 2008

<    Федеральный центр iтн ненм и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008

МУК 4.1.2102-4.1.2116—06

Содержание

Измерение массовой концешрации селена в моче методом атомко-

абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2102—06............................................4

Определение массовой концентрации ванадия в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической

атомизацией: МУК 4.1.2103—06........................................................................14

Определение массовой концентрации меди, магния, кадмия в пробах мочи

методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2104—06..................25

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах

волос методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2105—06 37

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии:

МУК 4.1.2106—06................................................................................................50

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2107—06....................................63

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2108—06....................................74

Определение массовой концентрации 2-хлорфенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2109—06....................................85

Определение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах мочи методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2110—06................................................................................................96

Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2111—06..............................................................................................ПО

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, гетрахлормешна. хлорбензола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2112—06..................................125

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана в биосредах (моча) методом газохроматографического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2113—06...............................................137

Определение массовой концентрации хлороформа. 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана, хлорбензола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2114—06..................................149

Определение массовой концепграции хлороформа, 1,2-дихлорэтана,

тетрахлорметана в биосредах (кровь) методом газохромато1рафического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2115—06...............................................162

Определение массовой концентрации стирола в пробах крови методом

высокоэффективной жидкостной хромаго1рафии: МУК 4.1.2116—06.........174

МУК 4.1.2107—06

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|)срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

9 августа 2006 г.

Дата введения: 1 сентября 2006 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (моча) газохроматографическим методом

Методические указания МУК 4.1.2107—06

1. Область применения

Методические указания по определению концентраций химических веществ в биологических средах предназначены для использования Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологин и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды.

Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием органических соединений в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды.

Молеку лярная масса 128.56

Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 «ГСОЕИ. Методики выполнения измерений». ГОСТ Р 1.5-92 ГСС. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов». Методика анализа обеспечивает выполнение измерений массовой концентрации фенола в моче в диапазоне концентраций: от 0.04 до 0.4 мкг/см3 с погрешностью 10.0 % при доверительной вероятности 0.95.

Фенол    Молекулярная    масса    128.56

СбН5ОН

63

Фенол - бесцветные кристаллы с характерным «шахом. Тиш -181.75 °С Растворим в воде и органических растворителях. Является сильным нейротоксином, поражает печень, почки, проникает через кожу 11|.

2. Сущность метода

Методика основана на предварительном переводе фенола в фе-нилацетат с помощью уксусного ангидрида в щелочной среде, концентрировании продукта дериватизации из биологического материала (моча) экстракцией метиленхлоридом и последующем газохроматографическом анализе экстракта. Необходимость превращения фенола в производные вызвана тем. что прямой газохроматографический анализ фенолов. особенно следовых количеств, осложнен высокой полярностью фенольных соединений и низким давлением их паров. Улучшить газохро-матографические свойства фенола можно путем превращения их в менее полярные соединения.

Выполнение измерений массовой концентрации фенола проводят методом газовой хроматографии с использованием пламенно-ионизационного детектора. Определению не мешают о-, м-. п-крезолы. ксиленолы. хлорфенолы в количествах, не превышающих верхнюю границу измеряемых концентраций фенола. Длительность анализа, включая экстракцию пробы. - 20 мин.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений. вспомогательные устройства, материалы, реактивы и растворы. Допускается применение других типов средств измерений, вспомогательного оборудования и хнмрсактивов с аналогичными или лучшими метрологическими и техническими характеристиками

3.1. Средства и смерен и it

Хроматограф газовый с пламенно-ионизационным детектором Секундомер «Агат»

Микрошприцы МШ-10

Весы аналитические ВЛР-200

Разновесы Г2-210

Линейка измерительная

Лупа измерительная

Колбы мерные, вместимостью 25. 50.

Пипетки, вместимостью 5, 10 см3


ТУ 25-1894.003—90 ТУ 2.833.106—00 ГОСТ 24104-01 ГОСТ 7328-01 ГОСТ 427-75 ГОСТ 25706-83 и 1 000 см3 ГОСТ 1770-74 ГОСТ 29227-91


МУК 4.1.2107—06

ТУ 25-11.1592—81 ТУ 26-05-236—73

ГОСТ 25336-82 ГОСТ 23932-90

3.2. Вспомогател ьн ые устройства Хроматографическая колонка стеклянная длиной 3 м и вну тренним диаметром 3 мм Бидистиллятор стеклянный БС Редуктор кислородный Центрифуга СМ-4. 3 ()(Х) об./мин Бюксы стеклянные Воронка делительная

3.3. Материалы

Гслий в б&злонс Водород технический Возду х в баллоне

ТУ 6-09-5303—86 ТУ 6-09-2200—77 ГОСТ 83-79 МРТУ 6-09-5708—68 ТУ 2633-004-11291058—94 ТУ 6-09-2662—77 ГОСТ 14262-78 ГОСТ 4220-75

3.4.    Реактивы 3 %OV-l на хроматоне N-cynep фракции 0.16 0.20 мм - неподвижная фаза хтя заполнения хроматографической колонки Фенол, чда Нафталин, хч Натрия карбонат, чда Уксусный ангидрид, ч Ацетон, осч Мстилснхлорид. хч Серная кислота, осч Калия дихромат, чда

3.5.    Растворы Раствор калия дихромата. 3 %-й

4. Требования к безопасности

4.1.    При выполнении работ должны быть соблюдены меры противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004—85 и правила техники безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007—76.

4.2.    При работе необходимо соблюдать «Правила по технике безопасности и производственной санитарии при работе в химических лабораториях» (утверждены М3 СССР 20.12.82) и «Правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением» (у тверждены Госгортехнадзором СССР 27.11.87).

65

4.3.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

4.4.    При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию нс ниже ннжснсра-химика и опыт работы на газовом хроматографе и в химической лаборатории, прошедшие соответствующий инструктаж, освоившие метод в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы оперативного контроля при выполнении процедур контроля погрешности.

6. Условия измерений

6.1.    При проведении процессов приготовления растворов и подготовки проб к анализу соблюдают следующие условия:

•    температура воздуха (20 ± 5) °С;

•    атмосферное давление 630—800 мм рт. ст.;

•    влажность воздуха нс более 80 % при температу ре 25 °С.

6.2.    Выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией по прибор) .

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды, подготовка хроматографической колонки, приготовление аттестованных смесей, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка посуды

Используемую посуду замочить на 1 ч в свежеприготовленном 3 %-м растворе дихромата калия в серной кислоте (3 г дихромата калия на 100 см3 концентрированной серной кислоты), отмыть в проточной водопроводной воде, ополоснуть бидистиллированной водой и просушить при температу ре 120 °С.

7.2. Подготовка хроматографической колонки

Хроматографическую колонку перед заполнением неподвижной фазой промывают дистиллированной водой, ацетоном, высу шивают в токе инертного газа. Заполнение хроматографической колонки насадкой проводят под вакуумом. Концы колонки закрывают стекловатой, уста-

66

МУК 4.1.2107—06

навливают в хроматограф и. нс подключая к детектору, кондиционируют в токе газа-носителя (гелий) с расходом 30 см3/мин при температуре 250 °С в течение 18 ч. После охлаждения колонку подключают к детектору. записывают нулевую линию в рабочем режиме. При отсутствии мешающих влияний колонка готова к работе.

7.3. Приготовление аттестован чьих смесей

Для построения градуировочного графика собирают мочу, нс содержащую исследуемого компонента, и готовят серию рабочих аттестованных растворов.

Исходный аттестованный раствор фенола. В мерную колбу объемом 25 см3, содержащую ацетон в объеме 15 см3, вводят 10 мг фенола, и объем доводят до метки ацетоном. Весовое содержание определяемого веществ<1 в исходном аттестованном растворе составляет 400 мкг/см3. Срок хранения -5 ч.

Исходный аттестованный раствор нафталина. В мерную колбу объемом 25 см3, содержащую ацетон в объеме 15 см3, вводят 10 мг нафталина и объем доводят до метки ацетоном. Весовое содержание определяемого вещества в исходном аттестованном растворе составляет 400 мкг/см3. Срок хранения - 3 дня.

7.4. Определение градуировочных коэффициентов фенола по отношению к внутреннему стандарту

Рабочий аттестованный раствор. В мерную колбу объемом 50 см3, содержащую 30 см3 мочи, вносят объемы исходных аттестованных растворов фенола и нафталина согласно табл. 1. Содержимое колбы доводят до метки мочой.

Таблица 1

Рабочие аттестованные растворы для установления градуировочных козфф||цпе111он фенола но отношению к внутреннему стандарту

Номер смеси

1

2

3

4

5

6

Фенол,

объем исходного аттестованного раствора (400 мкг/см3), см3

0,005

0,01

0,02

0,025

0,04

0,05

Конце! гграция фенола, мкг/см3

0,04

0,08

0,16

0,20

0,32

0,40

Нафталин,

объем исходного аттестованного раствора (400 мкг/см3), см3

0,10

0,09

0,07

0,05

0,03

0,02

Концентрация нафталина, мкг/см3

0,80

0,72

0,56

0,40

0,24

0,16

Для определения градуировочных коэффициентов в делительную воронку объемом 250 см3 вносят 50 см3 рабочего аттестованного раствора и добавляют 2 г кристаллического карбоната натрия. Плавным покачиванием перемешивают содержимое воронки, затем вводят в воронку 0.3 см3 уксусного ангидрида и встряхивают в течение 0.5 мин для перевода фенола в уксуснокислый эфир.

Продукт ацилирования дважды экстрагируют метиленхлоридом порциями по 2.5 см3 в течение 2 мин. Экстракты центрифугируют в течение 10 мин. После удаления белка объединенные органические вытяжки помещают в бюксу и упаривают под ИК-лампой до 1 см3.

В хроматографическую колонку через испаритель вводят по 10 мм3 каждого экстракта рабочего аттестованного раствора и анализируют в условиях:

температу ра термостата колонок - ПО °С; температу ра испарителя - 170 °С: температура детектора - 170 °С: расход газа-носителя (гелий) - 30 см3/мин; скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч: время удерживания ацетата фенола - 3 мин 20 с;

нафталина - 6 мин.

На полученной хроматограмме определяют высоты или площади пиков определяемого компонента и внутреннего стандарта и по средним результатам из 6 серий рассчитывают градуировочные коэффициенты.

-*С ,-й

Si'ОсX


К


. где


Hex


Значение градуировочного коэффициента вычисляют по ([юр-муле:

Si, S„ - площади пиков исследуемого компонента (фенилацетата) и внутреннего стандарта (нафталина), мм*;

О,. Qcx - количество исследуемого компонента (фенилацетата) и внутреннего стандарта (нафталина), мкг.

По результатам 7 измерений определяется среднее значение граду ировочного коэффициента и строится граду ировочный график в координатах граду ировочный коэффициент - отношение площадей пиков Si/Scj.

Граду ировку проверяют 1 раз в квартал и при смене партии реактивов.

68