Государственное санитарно-эпндсмно.кн ичсское нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.2116—06

Издание официальное

Москва • 2008

Федеральная сдужба по напору в сфере защиты нрав ноз ребшедей н G.iaioiio.ivmiih че.ювека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.21*16—06

9.3. Подготовка к работе спектрометра и гидрид ной приставки ГРГ-107

Таблица 2 Рабочие параметры, устанавливаемые на спектрометре, и условия определении селена для ртутно-гидрпдного генератора, диапазон определяемых копнет раций

Длина волны. нм Ши рина щели, мм 11редва-ритель-ный продув, с За держ ка, с Реги стра ция, с Реагент боргидрид натрия 1,5 %-й раствор, см3 Рабочая газовая смесь 11ламя Диш ia зон определяемых кон-центра- ЦИЙ, мкг/см3 196,0 0,50 20 10 50—60 не более 40 аргон- воздух воз- дух- аце- тилен 0,0010— 0,0200

9.4. Установление и контроль градуировочной характеристики Таблица 3

Рас I норм для установления градуировочной характеристики при определении селена

11омер стандартного раствора Объем раствора, взятый для установлеш1я 1радуировочной характеристики, см3 Раствор соляной кислоты 6М, с»г Массовая концентрация селена в градуировочных растворах, мкг/см3 0 0,0 10,0 0 7 10,0 0 0,001 6 10,0 0 0,002 5 10,0 0 0,005 4 10,0 0 0,010 3 10,0 0 0,020

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины абсорбции от массовой концентрации селена (мкг/см³), устанавливают путем измерения величины абсорбции градуировочных растворов с массовой концентрацией селена, мкг/см³: 0,001; 0.002; 0,005; 0.010; 0.020.

Замеряют величину абсорбции укатанных градуировочных растворов и холостой пробы по алгоритму программы спектрометра.

МУК 4.1.2102—06

В реакционный сосуд «Р» помещают с помощью пипетки 10 см³ градуировочного раствора или холостой пробы, устанавливают сосуд в реакционный блок, проводят измерение.

Проводят по четыре параллельных измерения со всеми пятью указанными градуировочными растворами.

Программа компьютера строит по средним значениям результатов измерений абсорбции градуировочную характеристику.

Перед каждым началом работы, а также в процессе работы через 10—15 измерений уточняют вызванную из памяти компьютера градуировочную характеристик) по одном) или двум растворам.

10. Выполнение измерений

Выполняют два параллельных измерения концентраций селена в подготовленных по п. 9.2 пробах мочи. Измерения величины абсорбции анализируемых проб проводят аналогично замерам абсорбции градуировочных растворов.

Холостую пробу готовят аналогично анализируемой пробе, используя тс же реактивы.

При замерах концентраций селена в пробах свыше 0.020 мкг/см³ пробы разбавляют.

11.    Вычисление результатов измерений

Измеренные массовые концентрации селена в мкг/см³ (мг/дм³) в моче после минерализации выводятся на экране компьютера на основе вычислений, заложенных в программу прибора.

Окончательный результат вычисляют по формуле:

С = С, * где ¹ 1

С - массовая концентрация селена в анализируемой моче, мкг/см³ (мг/дм³);

С/ - концентрация селена в анализируемом растворе (минерализа-те). мкг/см³;

V₂- объем пробы после минерализации, см³ по п. 9.2;

V_t - обл»см мочи, взятой на анализ (пробоподготовк)). см³ по п. 9.2.

12.    Оформление результатов измерений

За результат анализа принимают среднее арифметическое четырех параллельных определений, если выполняется следующее неравенство:

11

х

Х/пох, ^хт,п - максимальный и минимальный результат параллельных определений;

х - среднее арифметическое результатов параллельных определений;

г - предел повторяемости (допускаемое расхождение между результатами параллельных определений).

Значение предела повторяемости представлено в табл. 4.

При превышении предела повторяемости, определения повторяют. При повторном превышении указанного норматива анализ прекращают до выяснения причин, приводящих к неудовлетворительным результатам контроля, и устранения их.

Результат количественного анализа С (мкг/см³) представляют в виде (С ± Д) мкг/ см³ при Р = 0,95.

Таблица 4

Диана юн измерений, значения пределов повторяемости и воспроизводимости, норматива контроля точности при доверительной вероятности 0,95

Диапазон анализируемых массовых концентраций селена, мкг/см3 11редел повторяемости, (для 4 результатов параллельных определений), /•, % отн. 11редел воспроизводимости (для двух результатов анализа) R, % отн. От 0,001 до 0,002 вкл. 20 24 Свыше 0,002 до 0,020 вкл. 13 15

13. Контроль точности

13.1.    Контроль внутрилабораторной прецизионности.

13.1.1.    Контроль выполняют повторным определением массовой концентрации селена в проанализированных ранее пробах в условиях внутрилабораторной прецизионности (анализ проводится в разное время или разными исполнителями).

13.1.2.    Контроль проводят по мере необходимости.

13.1.3.    Контроль внутрилабораторной прецизионности считают удовлетворительным, если расхождение между результатами первичного и повторного анализов нс превышает предела внутрилабораторной прецизионности R:

■»><>%

х

МУК 4.1.2102—06

*mor. ^хтт - максимальный и минимальный результат первичного и повторного анализов;

R_a - предел внутрилабораторной прецизионности

R - предел воспроизводимости (табл. 4).

13.1.4. При превышении предела внутрилабораторной прецизионности эксперимент повторяют. При повторном превышении норматива контроля воспроизводимости выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

13.2. Оперативный контроль точности с использованием метода добавок.

13.2.1.    Контроль точности проводят по мере необходимости, но нс реже одного раза в квартал.

13.2.2.    Сравнивают результат контрольной процедуры К_ю равный разности между результатом контрольного измерения содержания определяемого компонента в пробе с известной добавкой Х_а. в пробе без добавки Х„ и величиной добавки С (добавка должна составлять 50—150 % от содержания компонента в пробе), с нормативом контроля точности К_н.

13.2.3.    Точность результатов измерений признают удовлетворительной. если выполняется неравенство:

\хл - х„ -с\

К_к =     2-1 .100 % £ К_и

X

За норматив контроля точности К_н принято значение показателя точности методики: К_н = Д.

13.2.4.    При превышении норматива точности эксперимент повторяют. При повторном превышении норматива выясняют причины и принимают меры к их устранению. Анализы повторяют.

13.2.5.    Все результаты измерений, в том числе и те. которые нс укладываются в норматив точности, фиксируют в рабочем журнале.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения анализа 8 проб мочи на содержание селена требуется 6—8 ч.

Методические указания разработаны ФГУН Нижегородским НИИ гигиены и профпатологин (В. П. Ипполитова. И. Н. Мухина. И. А. Лобачева).

13

Определение вредных веществ в биологических средах: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2008.—183 с.

1.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 11.07.06 №2).

2.    Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 9 августа 2006 г.

3.    Введены впервые.

ЬКК 28.072

<    Роспотребнадзор, 2008

<    Федеральный центр iтн ненм и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008

МУК 4.1.2102-4.1.2116—06

Содержание

Измерение массовой концешрации селена в моче методом атомко-

абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2102—06............................................4

Определение массовой концентрации ванадия в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической

атомизацией: МУК 4.1.2103—06........................................................................14

Определение массовой концентрации меди, магния, кадмия в пробах мочи

методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2104—06..................25

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах

волос методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2105—06 37

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии:

МУК 4.1.2106—06................................................................................................50

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2107—06....................................63

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2108—06....................................74

Определение массовой концентрации 2-хлорфенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2109—06....................................85

Определение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах мочи методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2110—06................................................................................................96

Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2111—06..............................................................................................ПО

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, гетрахлормешна. хлорбензола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2112—06..................................125

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана в биосредах (моча) методом газохроматографического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2113—06...............................................137

Определение массовой концентрации хлороформа. 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана, хлорбензола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2114—06..................................149

Определение массовой концепграции хлороформа, 1,2-дихлорэтана,

тетрахлорметана в биосредах (кровь) методом газохромато1рафического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2115—06...............................................162

Определение массовой концентрации стирола в пробах крови методом

высокоэффективной жидкостной хромаго1рафии: МУК 4.1.2116—06.........174

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|)срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

9 августа 2006 г.

Дата введения: 1 сентября 2006 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовой концентрации селена в моче методом атомно-абсорбционной спектрометрии

Методические указания _МУК    4.1.2102—06_

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают методик) количественного химического анализа мочи для определения в ней селена методом атомно-абсорбционной спектрометрии в диапазоне массовых концентраций от 0.001 до 0.020 мкг/см³.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений». ГОСТ Р ИСО 5725-2002 (части 1—6) «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

Методические указания по измерению массовой концентрации селена в моче методом атомно-абсорбционной спектрометрии предназначены для органов и учреждений Роспотребнадзора и мог>т быть использованы в лечебных и научных учреждениях, работающих в области медицины труда, промышленной экологии и экологии окружающей среды.

2. Характеристика вещества

2.1.    Символ химического элемента - Se.

2.2.    Атомная масса - 78.96.

2.3.    Регистрационный номер CAS 7782-49-2.

2.4.    Физико-химические свойства.

Селен - тёмно-серый с коричневым оттенком порошок. Т_а1 221 °С.

МУК 4.1.2102—06

T„o, - 685.3 °С. плотность - 4,79 г/см³.

При обычной температуре селен устойчив к действию воздуха, кислорода, воды, концентрированной соляной и разбавленной серной кислот, хорошо растворяется в концентрированной азотной кислоте.

Химическая форма селена может изменяться после контакта с влажными слизистыми оболочками.

2.5. Токсикологическая характеристика.

Селен обладает двойственным характером воздействия на организм. С одной стороны, он токсичен, по характеру действия соединения селена напоминают соединения мышьяка, обладают политропным действием, вызывают изменение ткани зубов, заболевания ногтей, желудочно-кишечные нарушения, нервные расстройства, врожденные уродства.

С другой стороны, селен является эссенциальным микроэлементом, основными функциями которого являются разрушение гидроперекисей и перекисей липидов и защита организма от оксидантного стресса. Селен выводится из организма с мочой, концентрация селена в моче хорошо коррелирует с уровнем содержания этого микроэлемента в организме. что позволяет использовать этот показатель в качестве критерия обеспеченности селеном организма.

Нормальной концентрацией селена в моче считается диапазон от 0,002 до 0,031 м кг/см³*.

3. Метрологические характеристики

Настоящая методика обеспечивает получение результатов анализа с погрешностями, нс превышающими значений, приведенных в табл. 1.

Таблица 1

Приписанные характеристики погрсншост МВИ и ее составляющих при доверительной вероятности 0,95

Диапазон анализируемых массовых концентраций селена. МКГ/См I Указатель повторяемости (среднего квадратического отклонения повторяемости), 0 Ог( Д ), % ОШ. 1 Указатель воспроизводимости (среднего квадратического отклонения воспроизводимости), 0 oR( А ), % оти. 1 Указатель правильности (границы, в которых находится неис ключа п 1ая систематическая погрешность методики), ± Дс, % отн. 1 (ока ?aie.ii. точности (Р = 0,95), ± Д, % ош. От 0,001 до 0,002 вкл. 5,4 8,7 14 22 Св. 0,002 до 0,020 вкл. 3,7 5,3 5,0 12

Камышников В. С. Клинические лабораторные тесты от А до Я: Справочное пособие. Минск: «Белорусская наука». 1999.

4. Метод измерений

Метод основан на образовании гидрида селена в генераторе ГРГ-107. его термическом разложении и измерении величины резонансного поглощения линии селена на атомно-абсорбционном спектрометре, после предварительной минерализации проб мочи.

Нижний предел измерения концентрации селена в моче 0.001 мкг/см³.

Мешают определению селена мышьяк и сурьма при концентрациях. превышающих концентрацию селена в 50 и более раз.

5. Средства измерения, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерения. вспомогательные устройства, материалы, реактивы.

5.1. Средства тм ере ни и, вспомогательные устройства, материалы

Атомно-абсорбционный спектрометр КВАНТ-2А. ГКНЖ 30.00.000. оснащенный гидридной приставкой ГРГ-107. ГКНЖ 46.00.000 и источником излучения для определения селена (лампой с полым катодом) Весы лабораторные марка ВЛТЭ 2 класса точности, наименьший предел взвешивания нс более 10 мг. наибольший предел взвешивания нс менее 50 г, дискретность не более 0.0001 г Колбы мерные 2-25-2; 2-50-2; 2-100-2; 2-200-2; 2-250-2

Пипетки градуированные 1-2-1-1; 1-2-1-2;

1-2-1-5; 1-2-1-10; 1-2-1-20 Пробирки мерные. П-2-10 14/23 Стаканы Н-1-10 ТХС. Н-1-25; Н-1-100 Программируемая двухкамерная печь ПДП-18М. аттестат № 1353

Ацетилен технический в баллонах Аргон газообразный в баллонах

5.2. Реактивы

Вода дистиллированная или бидистиллированная Натрия гидроксид

6

МУК 4.1.2102—06

Боргидрид натрия (тстрагидроборат натрия)

Перекись водорода, осч. 30 %-й раствор Стандартный образец состава раствора ионов селена с массовой концентрацией селена 1.0 мг/см³

Кислота азотная, осч 27-4. плотность 1.41 г/см³ Кислота соляная, осч 20-4. плотность 1.18 г/см³

Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования, материалов и реактивов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией нс хуже приведенных в разделе.

6. Требования безопасности

6.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2.    При работе с электроустановками соблюдают правила электро-безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и 12.1.038.

6.3.    При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением, необходимо соблюдать «Правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением», утвержденные постановлением Госгортехнадзора России от 11.06.03 № 91 и ГОСТ 12.2.085.

6.4.    Помещение должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

6.5.    Вентиляционная система помещения должна обеспечивать многократный обмен воздуха в соответствии с ГОСТ 12.4.021.

6.6.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования инструкции по ТБ. действующей в лаборатории.

7. Требования к квалификации оператора

7.1. К выполнению измерений и обработке результатов допускаются лица с высшим или срсднсспсциальным образованием, имеющие опыт работы в химической лаборатории, овладевшие персональным компьютером и программным обеспечением на уровне пользователя, техникой эксплуатации пламенно-абсорбционного спектрометра типа «Квант», генератора ртутно-гидридного ГРГ-107.

7

8. Условия измерений

8.1.    Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С. атмосферном давлении 84— 106 кПа и относительной влажности воздуха нс более 80 % согласно ГОСТ 15150-69.

9. Подготовка к выполнению измерений

Пробы анализируют на атомно-абсорбционном спектрометре, оснащенном гидридной системой и источником излучения для определения селена.

Перед выполнением измерений проводят следующие работы:

•    отбор, подготовка и хранение проб:

•    приготовление растворов, необходимых для анализа:

•    подготовка к работе гидридной приставки ГРГ-107;

•    установление градуировочной характеристики:

•    подготовка пробы к измерению.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1.    Раствор соляной кислоты молярной концентрации 6 моль дм³. В мерную колбу вместимостью 1 дм³ помещают 486 см³ соляной кислоты. доводят объем до метки дистиллированной водой.

9.1.2.    Раствор № 1 с массовой концентрацией селена 50 мкг/см³ готовят из ГСО селена с массовой концентрацией 1.0 мг/см³. Вскрывают ампулу, содержимое выливают в сухую пробирку, отмеряют пипеткой 5 см³, переносят его в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят до метки 6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения раствора - 3 месяца.

9.1.3.    Раствор ЛЬ 2 с массовой концентрацией селена 0.5 мкг/сМ³ готовят из раствора № 1. В коническую колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ этого раствора и доводят до метки 6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения раствора - 1 месяц.

9.1.4.    Раствор ЛЬ 3 с массовой концентрацией селена 0,020 мкг/см³ готовят из раствора № 2. Пипеткой переносят 4 см³ раствора в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят до метки 6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения раствора - 1 день.

9.1.5.    Раствор ЛЬ 4 с массовой концентрацией селена 0,010 мкг/см³ готовят из раствора № 2. Отбирают пипеткой 2 см³ раствора и помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, доводят до метки 6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения раствора - 1 день.

МУК 4.1.2102—06

9.1.6.    Раствор № 5 с массовой концентрацией 0,005 мкг/см³ готовят из раствора № 2. В мерную колбу вместимостью 100 см³ переносят 1 см³ раствора селена с концентрацией 0,5 мкг/см³ и доводят до метки 6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения - 1 день.

9.1.7.    Раствор № б с массовой концентрацией селена 0,002 мкг/см³ готовят из раствора № 3. Отбирают пипеткой 10 см³ раствора и помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, доводят 6М раствором соляной кислоты до метки. Срок хранения - 1 день.

9.1.8.    Раствор № 7 с массовой концентрацией 0,001 мкг/см³ готовят из раствора № 4. Отбирают 10 см³ раствора, помещают в мерную колбу на 100 см³ и доводят до метки 6 М раствором соляной кислоты. Срок хранения - 1 день.

9.1.9. Раствор гидроксида натрия с массовой долей 1% готовят растворением 1 г гидроксида натрия в 99 см³ бидистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 100 см³. Срок хранения - 14 дней.

9.1.10.    Раствор боргидрида натрия с массовой долей 1,5 % готовят растворением 1,5 г боргидрида натрия в 98.5 см³ 1 %-го раствора гидроксида натрия. Срок хранения - 1 день.

9.2. Отбор, подготовка и хранение проб

Проводят суточный сбор мочи в числ ю посуду. Отбирают 50 см³ пробы мочи в химически числ ю пробирку с пришлифованной пробкой. Мочу можно сохранять до анализа в холодильнике в течение 15 дней при температу ре 4 °С. В кварцевый стаканчик помещают 10 см³ пробы мочи, добавляют 2 см³ азотной кислоты осч. Стаканчик помещают в камеру выпаривания двухкамерной печи ПДП-18М и медленно нагревают до 90 °С. через 40 мин повышают температу ру до 150 °С. упаривая пробу мочи до трети первоначального объема. Стаканчик охлаждают, добавляют по каплям 1 см³ 30 %-й перекиси водорода, после окончания реакции вновь помещают стаканчик с пробой в камеру выпаривания и упаривают содержимое до влажных солей. Пробу охлаждают, добавляют в стаканчик 8 см³ 6 М раствора соляной кислоты для растворения осадка, раствор нагревают 15—20 мин при температуре 100 °С в печи ПДП-18М. количественно переносят в пробирку и доводят объем до 10 см³ 6 М раствором соляной кислоты.

При невозможности немедленного анализа минсрализаты хранят в холодильнике при температу ре 4 °С. Срок хранения минерализатов -1 месяц.

9