Государствснное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2076-4.1.2088—06

Издание официальное

Москва. 2009

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2076—4.1.2088—06

Издание официальное

в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 1 см³ подвижной фазы, подготовленной по п.

7.5., перемешивают и анализируют на содержание люфенурона по п. 9.5.

7.4. Подготовка концентрирующего патрона Диапак С8 Концентрирующий патрон Диапак С8 промывают с помощью медицинского шприца 5 см³ ацетонитрила со скоростью прохождения растворителя через патрон 1 -2 капли в сек., затем 5 см³ бидистиллированной воды. Патрон готовят непосредственно перед использованием для очистки экстракта.

7.5. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 700 см³ ацетонитрила, 300 см³ деионизованной воды, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.

7.6. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку для ВЭЖХ подвижной фазой, приготовленной по п. 7.5., при скорости подачи растворителя 1 см³/мин. не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии.

7.7. Приготовление градуировочных растворов

7.7.1. Исходный раствор люфенурона для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,010 г люфенурона, растворяют в 40-50 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18°С в течение 3-х месяцев.

7.7.2.    Раствор люфенурона Ns 1 для градуировки (концентрация 10 мкг/см³).

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора люфенурона с концентрацией 100 мкг/см³ (п.7.7.1.), разбавляют ацетонитрилом до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов №№ 2-5, а также проб плодов томата с внесением при оценке полноты извлечения люфенурона из исследуемых образцов.

Градуировочный раствор № 1 хранят в морозильной камере при температуре не выше -18°С в течение месяца.

7.7.3.    Рабочие растворы NsNs 2-5 люфенурона для градуировки (концентрация 0,05 - 0.5 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают 0,5 . 1,0,2,5 и 5,0 см³ градуировочного раствора Jfe 1 люфенурона с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.7.2.), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.5., тщательно

(г

перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2-5 с концентрацией люфенурона 0,05,0,1,0,25 и 0,5 мкг/см³, соответственно.

Растворы готовят непосредственно перед употреблением.

7.8. Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику, выражающую зависимость высоты пика (мм) от концентрации люфенурона в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5.

8. Отбор и хранение проб Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТом 1725-85 «Томаты свежие». Пробы плодов томата хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 1 дня; для длительного хранения пробы замораживают и хранят при температуре -18°С. Перед анализом плоды томата измельчают ножом.

9. Выполнение определения

9.1. Экстракция люфенурона Образец плодов томата массой 25 г помещают в гомогенизатор, добавляют 100 мл метанола и гомогенизируют 3 минуты при 10000 об/мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Остаток на фильтре промывают 50 мл метанола. Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан вместимостью 500 см³, перемешивают, измеряют объем раствора, 1/5 его часть (эквивалентна 5 г образца) переносят в делительную воронку вместимостью 250 см³. Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.

9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся

растворителей

К экстракту, полученному по п. 9.1. и помещенному в делительную воронку, прибавляют 60 см³ деионизованной воды, перемешивают. В воронку вносят 30 см³ хлористого метилена, интенсивно встряхивают воронку в течение 2 минут. После полного разделения фаз нижний дихлорметановый слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. Операцию экстракции воднометанольной фазы повторяют еще дважды, используя по 20 см³ хлористого метилена. Объединенный дихлорметановый экстракт упаривают

&

досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30°С и подвергают дополнительной очистке на колонке по п.9.3.

9.3. Очистка экстракта на колонке с силикагелем Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по п.9.2., растворяют в 0,5 cm^j этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,5 см³ гексана, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п.7.2. Колбу обмывают 3 см³ смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему), которые также наносят на колонку. Промывают колонку 50 см³ смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему) со скоростью 1-2 капли в сек., элюат отбрасывают. Люфенурон элюируют с колонки 50 см³ смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40°С, и остаток подвергают дополнительной очистке на концентрирующем патроне Диапак С8 по п. 9.4.

9.4. Очистка экстракта на концентрирующем патроне Диапак С8

Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 9.3., растворяют в 0,8 см³ ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 1,2 см³ деионизованной воды, перемешивают, вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор вносят с помощью медицинского шприца на концентрирующий патрон Диапак С8, подготовленный по п. 7.4., со скоростью 1-2 капли в сек. Колбу обмывают 1 см³ смеси ацетонитрил-вода (4:6, по объему), которые также вносят на патрон. После нанесения пробы патрон промывают 6 см³ смеси ацетонитрил-вода (4:6, по объему), элюат отбрасывают. Люфенурон элюируют с патрона 17 см³ смеси ацетонитрил-вода (5:5, по объему), отбрасывая первые 6 см³ элюата и собирая последующие 11 см³ элюата в круглодонную колбу вместимостью 50 см³. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40°С. Остаток в колбе растворяют в 1 см³ ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., вносят 1 см³ подвижной фазы, подготовленной по п. 7.5., перемешивают и анализируют на содержание люфенурона по п.9.5.

9.5. Условия хроматографирования Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирмы Клаиег, Германия)

Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасфером 110-С 18 (5 мкм)

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода (7:3, по объему)

Скорость потока элюента: 0,7 см³/мин Рабочая длина волны: 254 нм

Чувствительность детектора: 0,005 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 20 мм³

Время удерживания люфенурона: 12,5 мин.

Линейный диапазон детектирования: 1 - 10 нг

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой, приготовленной по п. 7.5.

Альтернативная неподвижная фаза: Диасорб 130-С16 (5 мкм)

Время удерживания люфенурона: около 12 минут

10. Обработка результатов анализа Содержание люфенурона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

Н,х Ах V X =--------------,    где

Но х ш

X - содержание люфенурона в пробе, мг/кг;

Н| - высота пика образца, мм;

Но - высота пика стандарта, мм;

А - концентрация стандартного раствора люфенурона, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматшрафирования, см³; m - масса анализируемой части образца, г (для плодов - 5 г).

11. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12. Разработчики Талалакина Т.Н., науч. сотр., Макеев А.М., зав. лаб., канд. биол. наук.

ГНУ ВНИИ фитопатологии, 143050, Мосхэдскаях&л., п/о Большие Вяземы.

оЖоЛ

Подпись руки Талалакиной Т.Н: к МакёеА*АОДлдо'&ряю

Зав. канцелярией ВНИ#Ф

ББК 51.21 037

037 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009— 188с.

1.    Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (академик РЛМН, проф. В. Н. Ракитский, проф. Т. В. Юдина); при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребизелей и благополучия человека.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко.

4.    Введены впервые.

ЫЖ 51.21

Формат 60x88/16    Псч.    л.    11.75

Тираж 100 экз.

Тиражировано отделом издазсльского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва. Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел ./факс 952-50-89

Содержание

1.    Методические указания по определению остаточных количеств глюфосинат аммония и его метаболита в зерне гороха газохроматографическом методом.

МУК 4.1.2076-06.............................................................................................4

2.    Методические указания по измерению концентраций дикамбы в

атмосферном воздухе населенных мест методом i-азожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2077-06....................................................................................................22

3.    Методические указания но определению остаточных количеств квинклорака в зерне риса методом капиллярной газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2078-06...........................................................................................35

4.    Методические указания по определению остаточных количеств квинклорака в зерне риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2079-06............................................................................................49

5.    Методические указания но определению остаточных количеств люфенурона в томатах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2080-06............................................................................................62

6.    Методические указания по определению остаточных козгичеств мстамитрона в воле,

почве, ботве и корнеплодах сахарной, столовой и кормовой свеклы методом капиллярной i-азожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2081-06................................72

7.    Методические указания но определению остаточных количеств Трибенурон-мстила

в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2082-06..........................................................*............87

8.    Методические указания по определению остаточных количеств тиамстоксама в

семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2083-06.....................................................................106

9.    Методические указания по определению остаточных количеств тсбуконазола в

семенах, масле и зеленой массе рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2084-06...,.................................................................120

10.    Методические указания по измерению концентраций тринсксагТак-этила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2085-06......................................... 132

11.    Методические указания по определению остаточных количеств тринсксапак-этила и его основного метаболита тринексапака-кислоты в воде, тринсксаиак-этила по метаболиту тринсксапаку-кислотс в почве, зерне и соломе зерновых

колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2086-06..........................................................................................142

12.    Методические указания по определению остаточных количеств

Ляьфа-циперметрина в семенах и масле рапса методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2087-06.....................................................................162

13.    Методические указания по измерению концентраций эсфенвалерата в атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2088-06.....................................................................................

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека,

Г л ав ы>гй1т)Сударственный санитарный врач Рде&ийской <Цн&дии Л

|.\    ^ -Г- Онищенко

июля 2006г.

<0s '    1    _ь>'    .    ^

Дата введения;.    2сei •

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЛЮФЕНУРОНА В ТОМАТАХ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ

ХРОМАТОГРАФИИ

к/ 2erv c6

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации люфенурона в томатах в диапазоне 0,02-0,2 мг/кг.

Люфенурон - действующее вещество инсектицида Матч, КЭ (50 г/л), фирма производитель Сингента Кроп Протекши АГ (Швейцария).

(RS)-1 -/2,5-дихлор-4-( 1,1,2,3,3.3-гексафторпропокси)фенил/-3-(2,6-дифтор-бензоил)моче»ина (ИЮПАК)

М-///2,5-дихлор-4-( 1,1,2,3,3.3-гексафторпропокси)фенил/амино/карбонил/-2,6-дифторбензамид (С.А.).

C₁₇H_eCl₂F₈N₂0₃ Мол. масса: 511,2

Бесцветное кристаллическое вещество без запаха, Температура плавления: 168,7-169,4°С. Давление паров при 25°С: 4x10‘⁶ Па. Коэффициент распределения н-октанол-

вода: Ко* log P = 5,12. Растворимость (г/дм³) при 20°С: ацетон - 460, толуол - 72, этанол -41, гексан - 0,13; растворимость в воде - 0,00006.

Вещество стабильно на воздухе и на свету, медленно гидролизуется в водных растворах при pH 5-9 (DTso³ 160 дней (pH 5), 70 дней (рН7) и 32 дня (рН9).

В биологически активных почвах в аэробных условиях люфенурон быстро разлагается почвенными микроорганизмами: DT»- 13-20 дней.

Краткая токсикологическая характеристика Острая пероральная токсичность (LD50) Для крыс и мышей - более 2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - более 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LD50) для крыс - более 2350 мг/м³ воздуха. Люфенурон не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика. LC50 для рыб 30-70 мг/дм³ (96 час.). Инсектицид нетоксичен для диких животных, птиц, пчел, земляных червей, почвенных микроорганизмов и токсичен для дафний. Рекомендуемый норматив для люфенурона в томатах - 0,1 мг/кг.

Область применения препарата

Люфенурон - ннсектоакарицид из группы ингибиторов синтеза хитина, эффективно уничтожает листогрызущие личинки чешуекрылых и жесткокрылых, эриофиидных клещей на хлопчатнике, овощных и декоративных культурах, винограде, семечковых плодовых, картофеле и кукурузе в течение вегетационного периода.

Зарегистрирован в России под торговым названием Матч, КЭ (50 г/л) в качестве инсектицида для обработки яблоневых садов, посадок картофеля и томатов при норме расхода препарата 0,3-1,0 л/га и одно- или двукратной обработке.

1. Метрологические характеристики метода Метрологические характеристики метода представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анапизи-    Метрологические параметры, Р=0,95, п= 20

объект Предел Диапазон Среднее Стандарт- Относи- Довсритель-обнару- определи- значение ное откло- тельное ный интер-жения емых кон- опреде- нение,    отклоне-    вал среднего

мг/кг центраций ления,    S, % ние    %

мг/кг    %    DS,    %

Томаты 0,02    0,02-0,2    84,2    3,6    1,6    +/-3,4

Таблица 2 Полнота определения люфенурона в модельной матрице (п = 5)

Матрица Внесено мг/кг Открыто % Доверительный интервал среднего результата, % 0,02 81,2 +/- 3,6 Томаты 0,04 84,1 +/- 3,3 0,1 85,0 +/- 2,7 0,2 86,5 +/- 2,8

2. Метод измерений

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором. Контроль люфенурона в матрице осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из плодов метанолом, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с силикагелем и концентрирующем патроне Диапак С8.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы 3.1 Средства измерений

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым    Номер Госреестра

детектором с переменной длиной волны (фирма Knaucr, № 16848-03 Германия)

Весы аналитические ВЛА-200    ГОСТ 2104

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим ГОСТ 7328 пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г

Колбы мерные вместимостью 2-100-2,2-1000-2    ГОСТ 1770

Меры массы    ГОСТ 7328

Пипетки градуированные 2-го класса точности    ГОСТ 29227

вместимостью 1,0;2,045,0; 10,0 см³

Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой ГОСТ 1770 вместимостью 5 см³

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 100, 500 и 1000 см³

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Люфенурон, аналитический стандарт с содержанием

д.в. 99,7% (Сингента, Швейцария)

Ацетонитрил для хроматографии, хч    ТУ 6-09-3534-87

Вода бидистиллированная или деионизованная    ГОСТ 6702

н-Гексан, хч    ТУ 6-09-3375

Метилен хлористый (дихлорметан), хч    ГОСТ 12794

Метиловый спирт (метанол), хч    ГОСТ 6995

Натрий сернокислый, безводный, хч    ГОСТ 4166

Этиловый эфир уксусной кислоты, ч    ГОСТ 22300

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Ванна ультразвуковая, модель D-50, фирма Branson Instr. Со. (США)

Воронка Бюхнера    ГОСТ 0147

Воронки делительные вместимостью 250 см³    ГОСТ 25336

Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм    ГОСТ 25336

Г омогенизатор    МРТУ 42-1505

Дефлегматор елочный    ГОСТ 9737

Колба Бунзена вместимостью 500 см³    ГОСТ 5614

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 50 и 100 см³ ГОСТ 9737 Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 25 см и внутренним диаметром 8-10 мм

Колонка хроматографическая, стальная, длиной 15 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Диасфер 110-С 18 (5 мкм)

Насос водоструйный вакуумный    ГОСТ    10696

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или    ТУ    25-11-917

ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi (Швейцария) Стаканы химические вместимостью 100 и 500 см³    ГОСТ    25336

Стекловата

Установка для перегонки растворителей

Фильтры бумажные «красная лента», обеззоленные    ТУ    6-09-2678

или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 20-100 мм³

Шприц медицинский с разъемом Льюера вместимостью 10 см³ ГОСТ 22090

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20+5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений Измерениям предшествуют следующие операции:    очистка органических

растворителей (при необходимости), приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление

градуировочной характеристики, подготовка колонки с силикагелем и концентрирующих патронов Диапак С8.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1.    Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником нал пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют. Перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прохаленным карбонатом натрия.

7.1.2.    Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения ее окрашивания в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.1.3.    Очистка этилацетата

Этил ацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

7.2. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8-10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г силикагеля в 20 см³ гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 см³ этилацетата со скоростью 1-2 капли в сек., затем 30 см³ смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему). После этого колонка готова к работе.

7.3. Проверка хроматографического поведения люфенурона на колонке с силикагелем

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают 1 см³ градуировочного раствора X? 1 люфенурона с концентрацией 1 мкг/см³ в ацетонитриле (п. 7.6.2) и отдувают растворитель током азота. Остаток растворяют в 0,3 см³ этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., добавляют 2,7 см³ гексана, перемешивают и вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по п.7.2. Промывают колонку 50 см³ смеси гексан-этилацетат (9:1, по объему) со скоростью 1-2 капли в сек., элюат отбрасывают. Затем колонку промывают 60 см³ смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему). Фракционно (по 10 см³) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 см³ ацетонитрила, помещая