Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4Л. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2048—4.1.2061—06

Издание официальное

Москва, 2009

9J. Условия хроматографирования

Жидкостной хроматограф «Breeze» с ультрафиолетовым детектором (фирма Waters, США)

Колонка стальная длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Symmetry® С18, зернением 5 мкм

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетошприл - вода - орто-фосфорная кислота (40:60:0,1, по объему)

Скорость потока злюеита: 1,0 см³/мии Рабочая длина волны: 250 им Объем вводимой пробы: 20 мм³

Ориентировочное время выхода карбоксина: 8,9 - 9,2 мин Линейный диапазон детектирования: 2 - 20 нг

Образца!, дающие пики большие, чем градуировочный раствор карбоксила с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п. 7.2).

10. Обработка результатов анализа

Содержание карбоксина в пробе рассчитывают по формуле:

Ах V

X --------------- ,    где

m

X - содержание карбоксина в пробе, мг/кг;

А - концентрация карбоксина, найденная по градуировочному графику, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

ш - масса анализируемого образца, г.

11. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-б. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12. Разработчики.

Юдина Т.В., Федорова Н.Б., Волкова В.Н., - ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора»

т

Содержание

1.    Методические указания по определению остаточных количеств

сульфометурон-метнла в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2048-06........................................................................4

2.    Методические указания по измерению концентраций глифосата в атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии. МУК

4 Л.2049-06...................................................................................................17

3.    Методические указания по измерению концентраций Карбосульфана в воздухе

рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии, МУК 4Л .2050-06...................28

4.    Методические указания по измерению концентраций тефлутрина в воздухе рабочей

зоны методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2051-06..............................35

5.    Определение остаточных количеств метальдегида в воде* почве, овощах (капуста*

салат, Китайская капуста, шпинат, редис и др.), фруктах (яблоки, сливы и др.), ягодах (земляника, смородина и др.) и винограде методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2052-06.......................................................................44

6.    Методические указания по определению остаточных количеств метамитрона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2053-06............................................................................................58

7.    Методические указания по определению остаточных количеств Прохлораза в воде,

почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2054-06......................................................67

8.    Методические указания по определению остаточных количеств флудиоксонила в

зерне и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2055-06...................................................................................................80

9.    Методические указания по определению остаточных количеств оксифлуорфена в семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2056-06............................................................................................91

10.    Методические указания по определению остаточных количеств карбоксила в клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2057-06..........................................................................................101

11.    Методические указания по определению остаточных количеств флуазифоп-п-бутила

в семенах и масле рапса, подсолнечника, зерне и масле сои, зерне гороха и луке по основному метаболиту флуазифоп-п кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2058-06.....................................................................109

12.    Методические указания по определению остаточных количеств прометрииа в

семенах и масле подсолнечника и сои, зерне и масле кукурузы, зерне гороха, клубнях картофеля и корнеплодах моркови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2059-06.....................................................................117

13.    Методические указания по определению остаточных количеств никосульфурона в масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2060-06..........................................................................................126

14.    Методические указания по определению остаточных количеств абамектина в

ягодах и соке винограда, перце и баклажанах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, МУК 4,1.2061-06.....................................................137

з

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по определению остаточных количеств карбоксина в клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в клубнях картофеля массовой концентрации карбоксина в диапазоне 0,05 - 0,5 мг/кг.

Карбоксин - действующее вещество препарата Витавакс 200 ФФ. ВСК, (200 + 200 г/л), д.в. карбоксин + тирам, фирма производитель «Кромптон Юроп Б.В.»

5,6- ди гидро-2 -метил-1,4-оксатиин-З-карбоксанилид (ШРАС)

C₁₂HuN0₂S Мол. масса 235,3

Белое кристаллическое вещество. Температура плавления 9!.5-92.5°С и 98-100°С (в зависимости от кристаллической структуры). Давление паров при 25^WC .

0.025 мПа. Растворимость в органических растворителях при 25°С (г/дм³): ацетон -

177: лнхлорметан - 353; метанол - 88: этилацетат - 93. Растворимость в воде при 25°С - 199 mi/дм⁵. Вещество устойчиво к гидролиду (25^WC, pH 5-9).

Константа диссоциации рКа < 0,5.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD <«) для крыс ЗЯ200 \и кч: острая дермальная токсичность (LD jo) для кроликов > 4000 мг/кг: острая ингаляционная токсичность (LK*o) для крыс > 20 мг/дм\

Область применения препарата

Карбоксин - фунгицид, используется для протравливания семян пшеницы, ячменя, картофеля против головневых заболеваний, корневых гнилей, плесневення семян,

Рекомендуемый МДУ карбоксина в клубнях картофеля 0.1 мг/кг.

1. Метрологические характеристики метода (Р ~ 0,95* п * 24)

Предел обнаружения: 0,05 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций: 0,05 - 0,5 мг/кг

Среднее значение извлечения: 94%

Стандартное отклонение: 2,77%

Дооерительный интервал среднего результата: + 3,18%

Таблица

Полнота извлечения карбоксина из клубней картофеля (б повторностей для каждой концентрации. Р ® 0.95)

Среда Внесено карбоксина, мг/кг Обнаружено карбоксина. мг/кг Полнота извлечения.% 0,05 0.04652 ± 0.00213 93.04 Клубни картофеля 0,125 0,11915 + 0.00844 95.32 0,25 0.23289 ± 0,02005 У3.1о 0,5 0,47220 + 0,04586 94.44

2. Метод измерений

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после гомогенизирования анализируемого образца измельченного картофеля с флориенлом. последующей экстракции карбоксина системой растворителей дихлорметан-ацетон. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

т

3. Средства измерений! вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений Жидкостной хроматограф с    ультрафиолетовым

детектором с переменной длиной волны (фирмы Waters,

США)

Весы аналитические ВЛА-200

Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г Колбы мерные 2-100-2, 2-250-2 и 2-1000-2 Меры массы

Пипетки градуированные 2-го    класса точности

вместимостью 1,0,2,0, 5,0 и 10 см³ Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 10,25,50,100. 500 и 1000см^}

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3,2. Реактивы

Карбоксин. аналитический стандарт с содержанием ГСО 7505-98 действующего вещества 99.7% (ВНИИХСЗР, НПК «Блок-1»)

Ацетон, осч    ГОСТ

Ацетонитрил для хроматографии, хч    ТУ-6-09-4326-76

Вода деионизованная или перегнанная над КМиО*    ГОСТ 6709

Кислота орто-фосфорная, хч, 85%    ГОСТ 6552

Метилен хлористый (дихлорметан), хч    ГОСТ 12794

Натрий сернокислый, безводный, хч    ГОСТ 4166

Флорисил (60-100 меш), адсорбент для хроматографии |'<Флука». Швейцария)

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или полее высокой квалификацией.

/03

3.3. Вспомогательные устройства^ материалы Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм    ГОСТ    25336

Груша резиновая

Колба круглодонные на шлифе вместимостью 250 см³ ГОСТ 9737 Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм Насос водоструйный    ГОСТ    10696

Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 50

Ротационный вакуумный испаритель ШЧМ или ТУ 25-11-917-74 ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi.

Швейцария

Стаканы химические, вместимостью 100 и 400 см³    ГОСТ    25336

Стекловата

Стеклянная колонка длиной 30 см, внутренним диаметром i S мм

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Хроматографическая колонка стальная, длиной 15 см.

внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Symmetry Cl 8,

зернением 5 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50-100 мм³

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007. требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009, Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-

т

03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-и следователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

б. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

*    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции:    очистка

органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки установление градуировочной характеристики.

7. Л Подготойт органических растворителей

7. I. 1 Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.1.2. Очистка ацетона

7.1. Очистка ацетона

Ацетон перегоняют над небольшим количеством KMnQ* и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом гсорстическах тарелок не менее 50.

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 400 см³ ацетонитрила. 600 см³ деионизованной воды и ! см³ 85%-ной орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

73. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения

7.4.1.    Исходный раствор карбоксина для градуировки (концентрация / мг/смЧ

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,1 г карбоксина, доводят

до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Растворы № 1-5 готовят объемным методом путем последовательною разбавления исходного раствора.

7.4.2.    Раствор № I карбоксина для градуировки (концентрация /0 м кг/см¹)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ исходного раствора

карбоксина с концентрацией I мг/см³ (п. 7.4.!.). разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.4.3.    Рабочие растворы №2-5 карбоксина    для    градуировки

(концентрация 0.J - 1.0 мкг/см³)    В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³

помещают по 1.0, 2.5, 5.0 и 10.0 см³ градуировочного раствора №\ с концентрацией 10 мкг/см³ (п, 7.4.2.), доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по л. 7.2.). тщательно перемешивают, получают рабочие растворы Ка№ 2 - 5 с концентрацией карбоксина 0Л, 0.25, 0.5 и 1.0 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более 3-х суток.

7.4.4.    Раствор карбоксина для внесения (концентрация /0мкг/см*) В мерн>ю колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ исходного раствора карбоксина с концентрацией I мг/см³ (п. 7.4.1.), разбавляют ацетоном до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

М

7.5. Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации карбоксина в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№ 2 - 5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

7.6. Подготовка колонки с флорисилом Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 30 см, внутренним диаметром 18 мм уплотняют тампоном из стекловаты, насыпают 2 г безводного сульфата натрия, сверху помещают 1 г флорисила.

8. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТ 7001-91.

Отобранные пробы картофеля анализируют в день отбора или хранят при 4°С в течение 7-ми дней. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре ниже - 18°С.

Перед анализом картофель измельчают (не размораживая) на гомогенизаторе или терке с мелкими ячейками.

9, Выполнение определения

Образец измельченных клубней картофеля массой 10 г помещают в химический стакан вместимостью 400 см³, порциями при перемешивании вносят 15 г флорисила, продолжают перемешивание до достижения сыпучего состояния. Затем пробу переносят (насыпая небольшими порциями через воронку) в колонку, подготовленную по п. 7.5. Заполненная колонка не должна содержать пустот. Колонку смачивают 20 см³ смеси хлористый метилен-ацетон (9:1, по объему).

Карбоксин элюируют с колонки этой же смесью объемом 130 см³ со скоростью 2-3 капли в секунду 'непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 250 см³ н упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40°С. Сухой остаток в колбе растворяют в 5-ти см³ подвижной фазы, перемешивают и анализируют содержание карбоксина по л. 9.1.

/ОТ