Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4Л. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2048—4.1.2061—06

Издание официальное

Москва, 2009

ББК 51.21 037

037 Определение остаточных количеств пестицидов в пище-вых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009— 148с.

1.    Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В. Н. РакитскиЙ, проф. Т. В. Юдина); при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ. л.    9,25

Тираж 100 экз.

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш.» 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89

мерную колбу объемом 100 мл и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании (стандартный раствор № 2, концентрация Прохлораза- 10 мкг/мл). Стандартные растворы № 1 и 2 можно хранить в холодильнике в течение 3-х и 1-го месяцев соответственно.

Ежедневно перед анализом методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы» содержащие по 1; 0,5; 0,2; 0,1 мкг/мл вещества, и используют эти растворы для построения калибровочного графика я внесения а контрольный образец при отработке методики.

7.4. Приготовление растворов для жидкостной хроматографии

7.4.1. Приготовление подвижной фазы.

Для приготовления подвижной фазы используют свсжеперегнанный ацетонитрил и очищенную по п. 7.2. дис?шзлированную воду.

В плоскодонную колбу объемом 1 л помещают 750 мл ацетонитрила и 250 мл воды. Смесь тщательно перемешивают, затем пропускают через нее гелий со скоростью 20 мл/мин в течение 5 минут, после **сго помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенного гелия на 1 минуту. Полученный раствор используют в качестве подвижной фазы.

7.5. Построение калибросочпого графика

Для построения калибровочного графика вводят в хроматограф последовательно 3 раза по 20 мкл каждого ж полученных четырех растворов, измеряют площадь пиков, рассчитывают среднее значение площади пика для каждой концентрации и строят график зависимости площади пика от концентрации Прохлораза (мкг/мл).

8. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйствен!!' Я продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (№ 2051-79 от 21,08.79). Отобранные пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре при комнатной температуре. Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатнгй температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиям:. диаметром 1 мм, зерно и солому измельчают на лабораторной мельнице.

9. Выполнение определения

9.1,    Вода

Пробу воды объемом 100 мл помещают о делительную воронку емкостью 250 мл и фижлы экстрагируют гексаном порциями по 50 мл, встряхивая каждый раз воронку в течение 1-2 мин. После разделения фаз в воронке верхний гексановый слой сливают в концеи-I ратор, пропуская его через безводный сульфат натрия. Объединенный экстракт выпаривают юсуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°С.

Сухой остаток растворяют в 5-25 мл ацетонитрила и 20 мкл раствора вводят в хрома-юграф.

9.2,    Почва

Образец почвы массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, добавляют 5 мл дистиллированной воды, встряхивают колбу до полного смешивания и дают вы-t юяться в течение 10 минут. Затем в колбу прибавляют 30 мл ацетона и встряхивают' на механическом встряхивателе в течение 10 мин. Содержимое колбы переносят в центрифужный пакан и центрифугирую* при 2500 об/мин 5 мин. Супернатант фильтруют в концентратор объемом 250 мл через фильтр “красная лента”. Почву из центрифужного стакана возвращают обратно п коническую колбу и Прохлораз экстрагируют еще раз, используя 30 мл ацетона и потряхивая колбу в течение 10 мин, с обязательным последующим центрифугированием. Экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 мл. Объединенный экстракт выпаривают досуха при температуре не выше 30° С.

Сухой остаток растворяют в 3 мл ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют 50 мл дистиллдроваиной воды и 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят содержимое: энценгратора в делительную воронку объемом 250 мл. После зто-I о в воронку приливают 20 мл гексана, интенсивно встряхивают деятельную воронку в течение 2 мин. Дают жид-ости отстояться и после разделения слоев верхнюю гексановую фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия.. Ниж-шою фракцию возвраты: т в делительную воронку и повторяют операцию еще 2 раза, используя по 20 мл гексана каждый раз. По окончанию экстракции осушитель промывают 10 мл гексана. Гексановые экстракты объединяют в концентраторе, а водную фракцию отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°.

Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетона, тщательно обмывая стенки колбы, добав-ияют туда же 50 мл дистиллированной воды и 25 мл ОЛн раствора соляной кислоты. Затем содержимое концентратора переносят в делительную воронку объемом 250 мл, добавляют гуда же 20 мл гексана и интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2 мин. Посте разделения слоев верхнюю гексановую фракцию отбрасывают , нижний водный слой

возвращают в делительную воронку и еще раз промывают 20 мл гексана (после разделения слоев верхнюю гексановую фракцию отбрасывают)* К водному остатку добавляют 10-15 мд 5% водного раствора бикарбоната натрия (до pH 7) и трижды реэкстрагируют Прохлораз гексаном, используя каждый раз по 20 мл и интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. После разделения слоев верхнюю гексановую фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия, осушитель промывают 10 мл гексана и также собирают в концентратор. Водную фракцию отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температур® не выше 30°. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и вводят в хроматограф 20 мкл раствора.

9J. Зерно

Образец размолотого зерна массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 30 мл ацетонитрила и встряхивают на механическом встряхивателе в точение 15 мин. Экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 мл через бумажный фильтр “красная лента”. Прохлораз экстрагируют еще 2 раза порциями по 30 мл ацетонитрила в течение 15 мин. Экстракты объединяют в концентраторе. Объединенный экстракт выпаривают досуха при температуре но выше 30° С

Сухой остаток растворяют в 3 мл ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют туда же 50 мл дистиллированной воды, 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 10 мл 5% раствора бикарбоната натрия. Содержимое концентратора переносят в делительную воронку объеком 250 мл. Прохлораз трижды реэкстрагируют гексаном, используя каждый раз по 20 мл и интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. После разделения слоев гтрхнюю гексановую фракцию собирают в химический стакан объемом 100 мл. Водную фра :цик> отбрасывают.

Объединенный гексановый экстракт перекосят в делительную воронку объемом 250 мл и Прохлораз из гексана экстрагируют трижды ацетонитрилом порциями по 20 мл, интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. После разделения слоев нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в химический стакан объемом 100 мл. Гексан отбрасывают.

Объединенный ацетонитрильный экстракт переносят в делительную воронку объемом 250 мл, добавляют туда же 20 мл гексана и интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2 мин. После разделения слоев нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в концентратор объемом 250 мл, пропуская через химическую воронку с 10 г безводного сульфата натрия (осушитель промывают 10 мл ацетонитрила и объединяют с экстрактом). Гексан отбрасывают. Ацетонитрил выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°.

Сухой остаток растворяют в 3 мл ацетона, добавляют 20 мл дистиллированной воды, Ш мл 0.1 н раствора соляной кислоты и помещают в делительную воронку объемом 250 мл. Гуда же прибавляют 20 мл гексана и интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2 мин. После разделения фаз верхний гексановый слой отбрасывают, нижний водный слой возврзщают в делительную воронку и добавляют туда же 15 мл 5% раствора бикарбоната натрия (до pH 7).

Прохлораз экстрагируют гексаном, используя каждый раз по 20 мл и интенсивно встряхивая делительную коронку в течение 2 мин. После разделения слоев верхнюю гексановую фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия, осушитель промывают 1C мл гексана и также собирают в концентратор. Водную фракцию отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт выпарившот досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре ис выше 30°. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и вводят в хроматограф 20 мкл раствора.

9,4, Солома

Образец измельченной соломы массой 5 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл, прибавляют 50 мл ацетона и встряхивают на механическом встряхивателе в течение 5 мин. Экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 мл через бумажный фильтр "красная лента”. Прохлораз экстрагируют еще 3 раза порциями по 50,20 и 20 мл ацетона в течение 5 мин.. Экстракт: объединяют в конической колбе объемом 250 мл и помещают на ночь в холодильник. На следующий день объединенный экстракт фильтруют через бумажный фильтр “красная лен^о” в концентратор объемом 250 мл н выпаривают досуха при температуре не выше 30° С.

Сухой остаток рас горяют в 3 мл ацетона, тщательно обмывая стенки концентратора, добавляют туда же 50 мл дистиллированной воды и 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия. Содержимое коицгнтратора переносят в делительную воронку объемом 250 мл. Прохлораз трижды экстрагируют гексаном, используя каждый раз по 20 мл и интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. После разделения слоев верхнюю гексановую фракцию собирают в концентратор объемом 250 мл. Водную фракцию отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт выпаривают досуха при температуре не выше 30° С,

Сухой остаток растворяют в 50 мл ацетонитрила и переносят в делительную воронку объемом 250 мл. К экстракту в делительной воронке добавляют 20 мл гексана и интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения слоев нижнюю ацетонитрильную фракцию собирают в химический стакан объемом 100 мл. Гексан отбрасывают. Ацетонитрильную фракцию возвращают в делительную воронку и еще раз промывают 20 мл гексана. Гексан

ГГ

отбрасывают. Ацетонитрил собирают в концентратор объемом 100 и выпаривают досуха при температуре не выше 30° С.

Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетона, добавляют 50 мл дистиллированной воды и 25 мл ОЛн соляной кислоты и переносят в делительную воронку объемом 250 мл. К раствору в делительной воронке прибавляют 20 мд гексана и интенсивно встряхивают в течение 2 мин. После разделения слоев гексан отбрасывают. Процедуру повторяют еще 2 раза. К вод* ному слою в делительной воронке прибавляют 15 мл 5% раствора бикарбоната натрия (до pH 7). Прохлораз экстрагируют гексаном, используя каждый раз по 20 мл и интенсивно встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. После разделения слоев верхнюю гексановую фракцию собирают в концентратор, пропуская через 10 г безводного сульфата натрия, осушитель промывают 10 мл гексана и также собирают в концентратор. Водную фракцию отбрасывают. Объединенный гексановый экстракт выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30°. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и вводят в хроматограф 20 мкл раствора.

9.5. Условия хроматографирования

Хроматограф “Waters” илн другой с апалогичкыми характеристиками с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны.

Колонка стальная Xorbax SB-C18,4,6 мм х 25 см.

Температура колонки 25°С.

Подвижная фаза; ацетонитрил-вода 75:25 по объему.

Скорость потока эл:эента: 1 мл/мин.

Рабочая длина вол; гл 240 нм.

Чувствительность 0,0025 ед. оптической плотности на шкалу.

Объем вводимой гг эбы 20 мкл.

Время удерживании Прохлораза - 6,6 - 6,9 мин.

Линейный диапазон детектирования 2-20 нг.

Альтернативная колонка: Lichrosorb RP 18,зернение 5 мкм.

Подвижная фаза: ацетонитрил-10 мМ фосфатный буфер, pH 3 (55:45, по объему).

Рабочая длина волны: 228 нм.

Время удержания Г 'рохлораза - 14,6-15,4 мин.

10. Обработка результатов анализа

Содержание Прохлораза рассчитывают по формуле:

п

X---P

100 ■ Sct ■ m

где X - содержание Прохлораза в пробе, мг/кг или мг/л;

Sct - высота (площадь) пика стандарта, мм;

Snp - высота (площадь) пика образца, мм;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; ш - масса анализируемого образца, г (мл);

Р - содержание Прохлораза в аналитическом стандарте, %.

XI. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12. Разработчики

Калинин В.А., профессор, каид. с-х. наук, Калинина Т.С., ст. н. сотр., канд. с-х. наук, Довгилевич Б.В., ст. н. сотр., канд. биол. паук, Довгилевич А.В., ст. н. сотр., канд. хим. наук, Российский государственный аграрный университет - МОХА имени К.А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (095) 976-37-68, факс: (095) 976- 43-26.

&

Содержание

1.    Методические указания по определению остаточных количеств

сульфометурон-метнла в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2048-06........................................................................4

2.    Методические указания по измерению концентраций глифосата в атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии. МУК

4 Л.2049-06...................................................................................................17

3.    Методические указания по измерению концентраций Карбосульфана в воздухе

рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии. МУК 4Л.2050-06...................28

4.    Методические указания по измерению концентраций тефлутрина в воздухе рабочей

зоны методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2051-06..............................35

5.    Определение остаточных количеств метальдегида в воде, почве, овощах (капуста,

салат, Китайская капуста, шпинат, редис и др.), фруктах (яблоки, сливы и др,), ягодах (земляника, смородина и др.) и винограде методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2052-06.......................................................................44

6.    Методические указания по определению остаточных количеств метамитрона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2053-06............................................................................................58

7.    Методические указания по определению остаточных количеств Прохлораза в воде,

почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2054-06......................................................67

8.    Методические указания по определению остаточных количеств флудиоксонила в

зерне и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2055-06...................................................................................................80

9.    Методические указания по определению остаточных количеств оксифлуорфена в семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2056-06............................................................................................91

10.    Методические указания по определению остаточных количеств карбоксила в клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2057-06..........................................................................................101

11.    Методические указания по определению остаточных количеств флуазифоп-п-бутила

в семенах и масле рапса, подсолнечника, зерне и масле сои, зерне гороха и луке по основному метаболиту флуазифоп-п кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2058-06.....................................................................109

12.    Методические указания по определению остаточных количеств прометрииа в

семенах и масле подсолнечника и сои, зерне и масле кукурузы, зерне гороха, клубнях картофеля и корнеплодах моркови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2059-06.....................................................................117

13.    Методические указания по определению остаточных количеств никосульфурона в масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2060-06..........................................................................................126

14.    Методические указания по определению остаточных количеств абамектина в

ягодах и соке винограда, перце и баклажанах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2061-06.....................................................137

з

Г лавный государствц| Руковс

по надзору в сфере защиу

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по определению остаточных количеств Прохлораза в воде, почве, зерне и соломе неновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной шдкостной хроматографии для определения в воде, почве, зерне и соломе зерновых | олосовых культур массовой концентрации Прохлораза в диапазоне 0.025-0.25 мг/кг, 0.15-1.5 'и/кг, 0.025- 0.25 мг/кг, 0.05-0.5 мг/кг соответственно.

Прохлораз - действующее вещество препарата Мираж, КЭ (450 r/л), фирма * цюнзводитель: Мактешим-Аган.

14-продил-14-[2-(2Д6-трихлорофенокси)-этил]имидазол-1-карбоксамид

С,₅Н,бС1зМз0₂ Мол. масса: 376,7

Химически чисты:! Прохлораз представляет собой бесцветный кристаллический порошок* без запаха.

Температура плавления - 46,5-49,30 С

Давление паров 90 мПа (при 20 С °).

Коэффициент распределения октанол-вода Kow log Р 4Л2 (неионизированный).

Прохлораз - слабое основание, рКа - 3.8.

Растворимость в воде - 34,4 мг/л(25 С °).

Хорошо растворим в хлороформе, диэтияовом эфире; в толуоле- 2,5, ацетоне- 3,5, гексане- 7,5x10-3 (кг/л, 25 С °).

Стабилен в водных растворах с pH 7 при 20 С °. Разрушается в концентрированных кислотах и щелочах, на свету или при продолжительном нагревании при 20 С

Период полураспада в почве в полевых условиях - 5 - 37 дней.

Краткая токсикологическая характеристика:

Прохлораз относится к малоопасным веществам по острой (острая пероральная токсичность, ЛДзо для крыс - 1600 - 2400 мг/кг) и дермальной (ЛД50 крысы - более 3000 мг/кг) токсичности и умеренно опасным по ингаляционной токсичности (ЛД50 (4 часа) более 2600 мг/м^{1 2 3}). Не обладает побочными токсикологическими эффектами, не оказывает раздражающего действия л а кожу.

Область применения препарата

Прохлораз - системный фунгицид защитного и искореняющего действия из группы производных азола, высо* оэффективно подавляет развитие возбудителей болезней растений из родов Pseudocercosporella, Pyrenophora, Septoria, Alternarin, Botrylis, Fnsarmm и др. в посевах зерновых, овощных, технических культур и в плодовых садах при нормах расхода 400 - 600 г д.в. на га.

Зарегистрирован в Г осени под торговым названием Мираж (45 % к.э.) для применения на зерновых культурах : ротив сепгориоза, мучнистой росы, фузариоза колоса, сетчатой пятнистости и риихоспорг.оза с нормой расхода 1 л'га до двух обработок за сезон.

В России установлены следующие гигиенические нормативы: ОДК в почве (мг/кг) -0,3, ОДУ в воде водоемов (мг/л) - 0,05 (сашпарно-токсиколопгаеский), ОБУВ в воздухе рабочей зоны (мг/мЗ) - 0,1,11ДУ в продукции (мг/кг): зерно хлебных злаков - 0,05.

Стандартное отклонение: 0,54 %

Доверительный интервал среднего результата: + 1,13% Почва

Предел обнаружения: 0,15 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций: 0,15-1,5 мг/кг

Среднее значение извлечения: 78,3 %

Стандартное отклонение: 0,67 %

Доверительный интервал среднего результата; + 1,40% Зерно

Предел обнаружения: 0,025 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций: 0,025- 0,25 мг/кг

Среднее значение извлечения: 81,0 %

Стандартное отклонение: 0,40 %

Доверительный интервал среднего результата: + 0,85% ролома

Предел обнаружения: 0,05 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций: 0,05- 0,5 мг/кг

Среднее значение извлечения: 74,0 %

Стандартное отклонение; 0,53 %

Доверительный интервал среднего результата: + 1,12%

Таблица I.

Полнота извлечения Прохлораза из воды, почвы, зерна и соломы пшеницы. (5 повторностей для каждой концентрации, Р.=0,95).

Среда Внесено Прохлораза, мг/кг (мг/л) Обнаружено Прохлораза, мг/кг (мг/л) Полнота определения, % 1 2 3 5 Вода 0.025 0,023 4-0,0006 91,2 0.05 0,044 + 0,0011 87,6 ОЛ 0,091+0,0022 90,7 0.25 0,225 + 0,0068 90,1 среднее 89,9 почва 0.15 0,115 + 0,0007 76,4 0.30 0,247 + 0,0080 82,3 1.0 0,765 + 0,0129 76,4 1.5 1,167 + 0,048 77,8 среднее 78,3 зерно 0.025 0,020 + 0,0006 79,2 0.05 0,041 +0,0010 81,6 0.10 0,081 +0,0010 81,0 0.25 0,206 + 0,0046 82,2 среднее 81,0 солома 0.05 0,037 + 0,0006 74,4 ОАО 0,075 + 0,0014 74,8 0.20 0,154 + 0,0075 76,8 0.50 0,363 + 0,0136 72,6 среднее 74,6

2. Метод измерений

Методика основаниа определении Прохлораза методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВОЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, концентрирования экстракта упариванием в вакууме, очистки путем перераспределения между водной и органической фазами. Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютней калибровки.

В прилагаемых условиях метол специфичен в присутствии пестицидов» применяемых при выращивании зерновых.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы н материалы 3.L Средства измерений

Хроматограф жидкостной “Waters’* 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,0025 единиц адсорбции на шкалу

Весы аналитические ВЛА-200    ГОСТ    34104*80 Е

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом    ГОСТ 19491-74

взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности + 0,038 г Колбы мерные на 25,50 и 100 мл    ГОСТ    1770-74

Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50-100 мкл.

Гамильтон

Пипетки мерные на 0,2; 1,0; 5,0; 10,0 и 25,0 мл    ГОСТ    20292-74

Подвижная фаза для ВЭЖХ: ацетонитрил - 750 мл; вода очищенная* - 250 мл,

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2, Реактивы

Прохлораз, аналитический стандарт е содержанием д,в. 99,6 %, (фирма АгрЕво) Ацетонитрил ТУ 6-09-3534-87 Ацетон ТУ 6-09-3513-86 Вода бидистиллированная, деионизированная ГОСТ 7602-72 Гексан, ч. ТУ 6-09-3375 Гелий, очищенный марки “А”, ТУ-51-940-80 Калий марганцовокислый, ч.д.а ГОСТ 20490-75 Метилен хлористый ГОСТ 19433-88 Натрий сернокислый, безводный, х.ч. ГОСТ 4166-76 Натрий хлористый, х.ч. ГОСТ 4233-77 Натрий хлористый, насыщенный водный раствор Соляная кислота, конц. ГОСТ 857-88 Соляная кислота, 0.1 н водный раствор ¥t

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3,3, Вспомогательные устройства, материалы

Ванна ультразвуковая, “Серьга**

Водоструйный насос

Воронки делительные на 200 и 500 мл

Воронки конические, стеклянные диаметром 30-33 мм

Встряхиватель механический

Колбы конические плоскодонные на 250 и 500 мл

Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм, внутренним

диаметром 4,6 мм, Symmetry Shield RP18, зернение 2 мкм

Концентраторы грушевидные и крутодонные, объемом 50 и 250 мл, ГОСТ 10394-75 КТУ-100-14/19

Насос водоструйный

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М Стаканы стеклянные на 1С0-500 мл Фильтры бумажные, “красная лента”

Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм.

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками. ⁴

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже иаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории,

6.    Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

*    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при 1емпературе воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7.    Подготовка к измерению

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: подготовка и кондиционирование колонки дН жидкостной хроматшрафии, очистка бидистиллированной воды для приготовления подвктлой фазы, приготовление стандартных растворов, приготовление растворов для жидкостной хроматографии (приготовление подвижной фазы), построение калибровочного графика.

7.L Подготовка и кондиционирование колонки для жидкостной хроматографии

Колонку Zorbax SI⁴* Cl 8 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при t°~25^eC и скорости потока подвижной фазы 1 мл/мин в течение 3-4 часов.

7.2♦ Очистка §идк:тиллированной воды для приготовления подвижной фазы

2 литра бидистилллта из дистиллятора наливают в круглодонную колбу объемом 3 -3,5 л, добавляют в нее 2 марганцовокислого калия и перемешивают жидкость до полного растворения порошка. Колбу помещают на нагреватель, доводят воду до кипения и кипятят в

течение б часов. По истечении времени колбу подсоединяют к холодильнику и воду перегоняют при постоянной температуре. Подготовленную таким образом воду хранят в темной посуде с хорошо подогна: пой пробкой..

7.3. Приготовление стандартных растворов.

Взвешивают 50 мг Прохлораза в мерной колбе объемом 50 мл. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом (стандартный раствор № 1, концентрация Прохлораза 1 мг/мл). Затем 1 мл стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой в

я

1

Метрологические характеристики метода (Р = 0,95, п » 20)

2

Вода

3

Предел обнаружения: 0,025 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций: 0,025- 0,25 мг/кг

Среднее значение извлечения: 89,9 %

4

Требования безопасности

4.1.    При ВЫПОЛГ2ЯИИ измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности пр:: работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные г технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельнодопустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.01004.