Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации
4Л. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Сборник методических указаний МУК 4.1.2048—4.1.2061—06
Издание официальное
Москва, 2009
ББК 51.21 037
037 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009— 148с.
1. Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В. Н. Ракитский, проф. Т. В. Юдина); при участии специалистов федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
ББК 51.21
Формат 60x88/16 Печ. л. 9,25
Тираж 100 экз.
Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89
ипатка. (Выпаривание проводить осторожно, так как возможно вспенивание ацетонитрила).
Добавляют в концентратор 5 мл ацетонитрила, обмывают стенки концентратора, припивают 50 мл 2% раствора хлористого натрия, перемешивают содержимое, и переносят в делительную воронку емкостью 250 мл. Приливают в делительную воронку 50 мл хлористого метилена и встряхивают воронку в течение 1-2 минут. После разделения слоев нижний слой чпористого метилена сливают в концентратор емкостью 250 мл через безводный сульфат на-)рия. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 50 мл хлористого метилена. Экстракты объединяют в концентраторе и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С досуха
9.1 X Очистка экстракта на набивной колонке, заполненной Флопизилом.
Сухой остаток в концентраторе разводят в 2 мл ацетона, добавляют 8 мл гексана, перемешивают содержимое, обмывая стенки концентратора, и наносят на колонку с Флоризи-;юм. Промывают колонку 15 мл гексана, смыв отбрасывают. Наносят на колонку 5 мл смеси t ексан:ацетон - 3:2, смыв отбрасывают, Пропускают через колонку 15 мл смеси гексан: ацетон - 2:3, собирая элюент в концентратор, и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С досуха,
Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетона и вводят в хроматограф 1 мкл.
9.2, Условия хроматографирования
Хроматограф газовый “Кристалл 2000м” с термоионным детектором на азот (ТИД) с пределом детектирования по азоту в азобензоле 5x10'13 г/см3 и приспособлениями для капиллярной колонки или другой с аналогичными характеристиками.
Капиллярная кварцевая колонка DB-1701 (14% цианопрошшфенил - 86% метил), длина 15 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,25 мкм.
Температура термостата колонки пршраммированная: начальная температура -180°С, выдержка - 4 мин; назрев колонки по 25°С/мин., до 270°С; выдержка 5 мин.
Продувка детектора после анализа азотом - 65 мл/мин в течение 3 минут с нагревом колонки до 280°С.
Температура испарителя - 280°С, детектора - 37043.
Регулятор расхода гелия - РРГ-11; режим - Splitless.
Газ 1 - гелий, линейная скорость - 23 см/сек, давление на входе - 32,84 кПа.
Газ 2 -гелий (продузка испарителя), расход-1,0 мл/мин; сброс 1:60.
Газ 3 - азот (поддув в детектор), расход во время анализа - 45 мл/мин.
Расход водорода-16 мл/мин, воздуха -180 мл/мин.
Г6~
Абсолютное время удерживания Метамитрона - 8 мин 49 сею
Минимально детектируемое количество Метамирона в анализируемом объеме - 0,3 нг
Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,3 - 5,0 нг.
Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.
Образцы, дающие лики больше, чем стандартный раствор с концентрацией Метамитрона 5,0 мкг/мл соответственно, разбавляют.
Количественное определение Метамитрона проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов Метамитрона с концентрацией 0,03 - 5,0 мкг/мл.
10. Обработка результатов анализа
Для определения содержания Метамитрона в пробах методом ГЖХ используют следующую формулу:
$np*A’V
X--хР
100‘ScT-sn
где X - содержание Метамитрона в пробе, мг/кг;
Sex - площадь пика стандарта, мВ;
Slip - площадь пика образца, мВ;
А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; m - масса анализируемого образца, г;,
Р - содержание Метамитрона в аналитическом стандарте, %.
11. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
12. Разработчики.
Калинин В.А., Калинина Т.С.
Российский государственный аграрный университет- МСХА имени К.А, Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов», 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (095) 976-37-68, факс: (095) 976- 43-26.
Содержание
1. Методические указания по определению остаточных количеств
сульфометурон-метнла в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2048-06........................................................................4
2. Методические указания по измерению концентраций глифосата в атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии. МУК
4 Л.2049-06...................................................................................................17
3. Методические указания по измерению концентраций Карбосульфана в воздухе
рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2050-06...................28
4. Методические указания по измерению концентраций тефлутрина в воздухе рабочей
зоны методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2051-06..............................35
5. Определение остаточных количеств метальдегида в воде, почве, овощах (капуста,
салат, Китайская капуста, шпинат, редис и др.), фруктах (яблоки, сливы и др.), ягодах (земляника, смородина и др.) и винограде методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2052-06.......................................................................44
6. Методические указания по определению остаточных количеств метамитрона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии.
МУК 4.1.2053-06............................................................................................58
7. Методические указания по определению остаточных количеств Прохлораза в воде,
почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2054-06......................................................67
8. Методические указания по определению остаточных количеств флудиоксонила в
зерне и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2055-06...................................................................................................80
9. Методические указания по определению остаточных количеств оксифлуорфена в семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии.
МУК 4.1.2056-06............................................................................................91
10. Методические указания по определению остаточных количеств карбоксила в клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
МУК 4.1.2057-06..........................................................................................101
11. Методические указания по определению остаточных количеств флуазифоп-п-бутила
в семенах и масле рапса, подсолнечника, зерне и масле сои, зерне гороха и луке по основному метаболиту флуазифоп-п кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2058-06.....................................................................109
12. Методические указания по определению остаточных количеств прометрина в
семенах и масле подсолнечника и сои, зерне и масле кукурузы, зерне гороха, клубнях картофеля и корнеплодах моркови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4,1.2059-06.....................................................................117
13. Методические указания по определению остаточных количеств никосульфурона в масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
МУК 4.1.2060-06..........................................................................................126
14. Методические указания по определению остаточных количеств абамектина в
ягодах и соке винограда, перце и баклажанах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, МУК 4,1.2061-06.....................................................137
з
УТВЕРЖДАЮ Главный государствт|Ц^нитарны]1 врач ^^Й^^#едсрации, службы
4Л, МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ, ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ МЕТАМИТРОНА В БОТВЕ Й КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения в ботве и корнеплодах сахарной свскяы массовой концентрации Метамитрона в диапазоне 0,03 - 0,5 мг/кг.
Метамитрон - действующее вещество препарата Голтйхс; СП, 700 г/кг# фирма - производитель: Мактешим Аган (Израиль);
Название действующего вещества по ИЮПАК: 4-амино-З-метил-б-фенил-1,2,4-триазин-5-он.
Структурная формула:
О NH2
Эмпирическая формула; СюНюИдСЪ; молекулярная масса: 202,2; агрегатное состояние: 1фисталлическое вещество; цвет, запах: бесцветный, без запаха; температура плавления: 166,6 °С;
SI
летучесть (давление паров): 8,6 xlO*4 тРа (при 20°С) и 2х 10’4 тРа (при 25°С). растворимость в воде при 20 °С: 1,7 г/л; растворимость в органических растворителях: дихлорметане - 30-50; циклогексане - 10-50; изопропаиоле - 5,7; толуоле - 2,8; гексане - <0,1; метаноле - 23; этаноле - 1,1; хлороформе - 29 г/л при 20°С.
Метамитрон стабилен в кислой среде, быстро гидролизуется сильными щелочами (рН>10); ОТ» (при 22°С) - 410 дней (pH 4), 740 часов (pH 7), 230 часов (pH 9). коэффициент распределения в системе октанол/вода при 25 °С: Kow 1о£Рв0,83.
Очень быстро разлагается в воде водоемов и почве.
Краткая гигиеническая характеристика:
Метамитрон относится к малоопасиым веществам по острой оральной (ЛД$оАля крыс - 2000 и мышей -1450 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс >4000 мг/кг), но к опасным по ингаляционной токсичности (ЛС50 дяя крыс 330 мг/м3).
Не раздражает кожу и слизистую оболочку глаз.
В России установлены следующие гигиенические нормативы:
ДСД - 0,025 мг/кг/сут.
МДУ в сахарной и столовой свекле - 0,03 мг/кг.
Область применения:
Метамитрон - избирательный системный гербицид, ингибирует фотосинтез. В растения проникает через корни, но может проступать и через листья. Препарат на основе Метамитроиа фирмы Мактешим Аган - Голтикс; СП, 700 г/кг - применяется для борьбы с однолетними двудольными сорняками при возделывании сахарной, столовой и кормовой свеклы при нормах расхода 1,5-2 кг/га путем опрыскивания почвы до посева (с заделкой), до всходов или в фазу 1-2-х настоящих листьев культуры. Рекомендовано совместное использование с другими гербицидами, применяемыми в посевах свеклы, в том числе с метолахлором и фенмедифамом.
1. Метрологическая характеристика метода.
Ботва сахарной свеклы Предел обнаружения: 0,05 мг/кг Диапазон определяемых концентраций; 0,05- 0,50 мг/кг Среднее значение извлечения: 81%
S9
Стандартное отклонение: 1,4%
Доверительный интервал среднего результата: + 0*83% Корнеплоды сахарно свеклы Предел обнаружения: 0,03 мг/кг Диапазон определяемых концентраций: 0,03- 0,30 мг/кг Среднее значение извлечения: 82%
Стандартное отклонение: 2,1%
Доверительный интервал среднего результата: ± 1,2%
Таблица
|
Полнота извлечения Метамитрона из ботвы и корнеплодов сахарной свеклы (б повторностей для каждой концентрации, Р ® 0,95) |
|
Предел обнаружения,
мг / кг (л) |
Среднее значение
определения, мкг / кг (л) |
Полнота
определения,
% |
Стандартное
отклонение
SD,% |
Доверительный интервал
среднего результата
± SE, % |
|
Ботва |
|
0,05 |
0,0412 |
82,4 |
1,61 |
0,0018 |
|
0,10 |
0,0808 |
81,9 |
1,91 |
0,0043 |
|
0,25 |
0,2020 |
80,8 |
1,89 |
0,0110 |
|
0,50 |
0,4062 |
81,2 |
1,68 |
0,0190 |
|
Корнеплоды |
|
0,03 |
0,0242 |
80,7 |
1,44 |
0,0010 |
|
0,06 |
0,0508 |
84,7 |
2,31 |
0,0033 |
|
0,15 |
0,1215 |
81,0 |
3,47 |
0,0120 |
|
0,30 |
0,2477 |
82,6 |
2,44 |
0,0170 |
|
2. Метод измерений
Метод основан на извлечении Метамитрона из ботвы и корнеплодов сахарной свеклы ацетонитрилом, лереэкстракции в хлористый метилен, очистке полученного экстракта от мешающих анализу веществ на колонке, заполненной Флоризилом, и окончательным определением Метамитрона методом ГЖХ с использованием термо-ионного детектора.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен и может применяться для определения остатков Метамитрона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы в присутствии других пестицидов.
3. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ.
3.1, Средства измерений
1 .новый хроматограф «Кристалл 2000м» с термоионным детектором на азот (ТИД) с пределом
актирования по азоту в азобензоле 5х 10'13 г/см3 и приспособлениями для капиллярной колошей.
Месы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 34104-80Е
11ссы лабораторные технические ВЛТК-500 ГОСТ 7328;
Колбы мерные вместимостью 10,50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74;
Микрошприцы вместимостью 10 мкл, Гамильтон;
11ипетки мерные вместимостью 1,2,5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характери-мгками.
3.2, Реактивы
Аналитический стандарт Метамитрона с содержанием 99,5% д.в„ ГСО 7659-99;
Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.
Ацетонитрил, х.ч., ТУ 6-09-06-1092-83;
Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79;
Иода дистиллированная, ГОСТ 7602-72; н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78;
Гелий, очищенный марки “А”, ТУ-51-940-80 Метилен хлористый, ч., ГОСТ 19433-88.
Натрий сернокислый, безводный, х.ч. ГОСТ 4166-76.
Натрия хлорид, х.ч., ГОСТ 4233-77
Флоризнл для колоночной хроматографии с размером частиц 60 - 80 меш, фирма Мерк. Стандартный раствор Метамитрона в ацетоне - 1 мг/мл (хранить в холодильнике, срок годности 120 сут).
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3, Вспомогательные устройства, материалы Аппарат для встряхивания проб АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73;
Банки с крышками для экстракции на 250 мл, полипропилен, кат.№3120-0250, NALGHNE. Воронки химические для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613-75;
Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ 10054-75;
&
Вакуумный ротационный испаритель МР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней В 461;
Колбы грушевидные (концентраторы), ГОСТ 10394-74;
Концентраторы грушевидные (конические) 250 мл, ГОСТ 10394-72 •
Колонка хроматографическая, капиллярная хварцевая DB-1701 (14% цианопролилфенилми-ликона + 86% метилсшшкона), длина 15 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленкяз 0,25 мкм, фирма J&W Scientific.
Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.
Фильтры бумажные "красная лента", ТУ 6-09-2678-77.
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматтлраф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе ке должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПД К) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучепия работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.
б. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.
и
выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендо-п.шных технической документацией к прибору.
7, Подготовка к выполнению измерений
7.1. Подготовка колонки, заполненной Флоризнлом, для очистки экстрактов
ботвы и корнеплодов сахарной свеклы.
На дно пластиковой хроматографической колонки (высота 15 см, диаметр 1,5 см) помещают пробку из стекловаты и заполняют колонку Флоризнлом на высоту 5 см. На слой Флоризила насыпают слой безводного сернокислого натрия толщиной 1,0 см. За день до о'шетки экстракта колонку промывают последовательно 20 мл ацетона и 10 мл гексана, смыли отбрасывают. После промывки колонка готова к работе.
7.2. Проверка хроматографического поведения Метамитрона на колонках с Фло-
ризилом.
При отработке методики или поступлении новой партии Флоризила проводят изучение поведения Метамитрона на колонке. В концентратор вносят 2 мл стандартного раствора Метамитрона с концентрацией 3 мкг/мл, добавляют 8 мл гексана, перемешивают содержимое концентратора и наносят на колонку. Промывают колонку 15 мл гексана, смыв отбрасывают. Наносят на колонку 5 мл смеси гексан-.ацетон - 3:2, смыв отбрасывают. Пропускают через колонку 20 мл смеси гексан:ацетон - 2:3, отбирая последовательно по 5 мл элюента. Каждую фракцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С досуха.
Сухой остаток в концентраторах растворяют в 2 мл ацетона и вводят в хроматограф 1 мкл. По результатам обнаружения Метамитрона в каждой фракции определяют объем смеси гексан;ацетон-2:Зт необходимый для полного вымывания Метамитрона.
ПРИМЕЧАНИЕ; Проверку хроматографического поведения Метамитрона следует проводить обязательно при постановке методики и /или получении новой партии Флоризила, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.
7.3. Приготовление рабочих растворов
7.3.1. Приготовление 2% раствора хлористого натрия.
20 г хлористого натрия вносят в мерную колбу на 1л, добавляют 600-700 мл биди-стиллированной воды, перемешивают до полного растворения соли и доводят водой до метки.
£з
7.4. Приготовление градуировочных растворов
50 мг Метам трона (аналитического стандарта) взвешивают в мерной колбе вместимостью 50 мл, растворяют навеску в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном (стандартный раствор №1, концентрация 1 мг/ см3). Раствор хранится в холодильнике около 120 суток.
Методом последовательного разбавления исходного раствора №1 ацетоном готовят рабочие растворы Метамитрона с концентрацией 0,3; 0,6; 1,5; 3,0 мкг/ см3, которые могут храниться в холодильнике не более 30 сут.
7.5. Установление градуировочной хара$стеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Метамитрона в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки ло 4-м растворам для градуировки с концентрацией 0,3; 0,6; 1,5; 3,0 мкг/ см3.
В испаритель хроматографа вводят no 1 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.
8. Отбор и хранение проб Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов д объектов окружающей среды для определения микрокодичеств пестицидов», №2051*79 от 21.08.79 г.
Пробы ботвы и корнеплодов сахарной свеклы хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0-4 °С в течение суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранятся в морозальной камере при температуре -18°С.
9. Выполнение определения
9.1. Ботва и корнеплоды сахарной свеклы,
ЭЛЛ. Экстракция гербицида из анализируемой пробы
Навеску измельченной ботвы и корнеплодов сахарной свеклы массой 20 г помещают в полипропиленовые банки объемом 250 мл, заливают 70 мл (для ботвы) или 50 мл (для корнеплодов) ацетонитрила и встряхивают в течение 30 мин. Экстракт отфильтровывают через воронку с бумажным фильтром в концентратор емкостью 250 мл. Экстракцию повторяют еще 2 раза, используя каждый раз по 50 мл ацетонитрила и встряхивая смесь в течение 15 мин.
Экстракты отфильтровывают и объединяют в концентра горе. Растворитель выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С до водного
