Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

8 страниц

136.00 ₽

Купить МУК 4.1.2017-05 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Методика основана на определении Диазинона методом газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора после его экстракции из проб ацетонитрилом, переэкстракции в метиленхлорид и очистки на колонках с Флоризилом.

 Скачать PDF

Оглавление

1. Вводная часть

2. Методика определения остаточных количеств Диазинона в мышечной ткани, печени, почках и жире овцы

     2.1. Основные положения

     2.2. Реактивы, материалы и растворы

     2.3. Подготовка к определению

     2.4. Отбор проб

     2.5. Описание определения

     2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов

3. Требования техники безопасности

4. Разработчики

Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения Главный Государственный санитарный врач Рлггийской Федерации

1ДГ.Г. ОНИЩЕНКО П___ 2005 г.

ГХ.&П-ОЪ

Дата введения: 1

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


Методические указания по определению остаточных количеств Диазинона в мышечной ткани, печени, почках и жире овец.

Фирма производитель: ООО «Ариста Восток».

Торговое название: Диазинон.

Название действующего вещества по ИСО: Диазинон.

Название по ИЮПАК: О-О-диэтил 0-[6-мегил-2Ч1-метилэтил)-4-пиридилил] фосфоротиоат. Эмпирическая формула: C12H21N2O3PS.


С'труктурная формула:

(СН3)2СН

Молекулярная масса: 304,3.

Химически чистый Диазинон представляет собой бесцветную жидкость.

Температура кипения 89°С при давлении 13 Па.

Давление паров: 1,2 мПа х 101 при 25°С.

Растворимость в воде 60 ыг/л при 20°С.

Хорошо растворим в большинстве органических растворителе?:: ацетоне, эфире, спиртах, бензоле, толуоле, гексане, циклогексане, дихлорметане.

Кдо logP - 3,3.

Константа диссоциации р’Са ■ 2.6.

31

Разлагается под действием кислот и щелочей, в воде гидролизуется с ДТ^ при 20°С - 11,77 часов (pH 3,1), 185 дней (pH 7,4), 6 дней (pH 10,4).

При нагревании до 120°С разрушается.

Краткая токсикологическая характеристика: Диазинон относится к веществам опасным по острой оральной (ДД50 Для крыс 1250, для мышей 80-135 мг/кг) и ингаляционной токсичности (CKso, 4 часа, для крыс >2330 мг/м3) и мало опасным веществам по дермальной токсичности (ЛД50 для крыс >2150 мг/кг). Кумулятивные свойства выражены слабо.

В России установлены следующие гигиенические нормативы ДСД для человека - 0,002 мг/кг/сут.

ПДК в воздухе рабочей зоны    -    0,2 мг/мЗ.

ПДК в атмосферном воздухе    -    0,0001 мг/мЗ (с.-с.).

ПДК в воде водоема    - 0,004 мг/дмЗ (с.-т.).

ПДК в почве    -    0,1 мг/кг (тр.).

МДУ (мг/кг):

зерно хлебных злаков, кукуруза, картофель, капуста,

хлопчатник (семена и масло), лук, брюква, турнепс,

сахарная н столовая свекла - 0,1;

табак, томаты, огурцы, мак масличный - 0,5;

хмель сухой - 1,0;

мясо (в пересчете на жир) - 0,01;

морковь, молоко, молочные продукты, мясо птицы, яйца - не допускается.

Область применения препарата: Диазинон - инсектицид широкого спектра действия из группы эфиров тиофосфорной кислоты, ингибиторов ацетилхоливэстеразы, с хорошо выраженной контактной и кишечной активностью. Высокоэффективен против сосущих, минирующих и грызущих насекомых, повреждающих растения, а также подвижных стадий растительноядных клещей. Препараты на основе Диазинона широко применяются для борьбы с эндопаразитами животных.

2, Методика рнределстая остащчных количеств Дцаздаща вмыщЕфцй ткандь печеш^почках и жир? о.вещ

2.1. Рсдрвньге положения.

2,1 Л,.Прщщип мутуд^.

Методика основана на определении Диазинона методом газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора после его экстракции из проб ацетонитрилом, переэкстракции в метпленхдорид и очистки на колонках с Флоризидом.

ж

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки. 2d    р/ичехк^    ка    ^етрдг

Метрологическая характеристика метода представлена в таблицах 1-2.


Таблица 1.

Анализируемый

объект

Метрологические параметры, р “ 0,95; п ■ 20

Предел обнаружения, мг/кг

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг

Среднее

значение

определе

ния,

%

Стандартное отклонение S, %

Доверительный интервал среднего результата %, +

1

2

3

4

5

6

мышцы

0,01

0,01-0,1

88,14

0,80

1,47

печень

0,01

0,01-0,1

87,89

0,59

1,08

жир

0.01

0,01-0,2

86,73

0,75

U6


Таблица 2.

Доверительный интервал и полнота определения Диазинона в мышечной ткани, печени, точках и жире овцы.


Среда

Добгвлено

Диазинона,

мг/кг

Обнаружено

Диазинона,

мг/кг

Доверительный интервал,

+

Полнота

определе

ния,

%

мышцы

0,01

0,0087

0,0004

87,4

0,02

0,018

0,001

88,6

0,05

0,044

0,002

87,9

0,10

0,089

0,002

88,6

печень

0,01

0,0089

0,0002

88,7

0,02

0,018

0,0003

89,4

0,05

0,044

0,001

88,6

0,10

0,085

0,002

84,9

жир

0,01

0,0089

0,0005

88,7

0,02

0,017

0,0008

85,2

0,10

0,088

0,001

88,0

0,20

0,017

0,003

85,0


2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование. 2.2.1. Реактивы, материалы и_вастворы.


1.99,4%.

Дназинон,


Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Ацетон, ГОСТ 2603-79.

Ацетонитрил, ТУ 6-09-3534-87.

Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72. н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.

Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.

Метилен хлористый (метиленхлорид), х.ч., ГОСТ 19433-88 Флоризил для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш, фирмы Флюка 2.?.2J?PHfopbi, аппаратура, посуда.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081 - 73 или аналогичный.

Баня водяная, ТУ 46-22-603-75.

Банки с крышками для экстракции на 250 мл, полипропилен, кат.№3120-0250, NALGENE. Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 34104-80Е или аналогичные Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ 23336-82.

Воронки для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613-75.

Испаритель ротационный, вакуумный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 или аналогичный.

Колбы мерные на 10,25,50,100 мл, ГОСТ 1770-74.

Колонки пластиковые для адсорбционной хроматографии длиной 15 см, диаметр 1,5 см. Колонка газохроматографическая капиллярная кварцевая НР-5 длиной 15 м, с внутренним диаметром 0,32 мм, толщт на пленки 0,25 мкм.

Концентраторы грушевидпые на 100 и 250 мл НШ29 КГУ-100 (250), ГОСТ 10394-72. Микрошприц на 10 мкл, ТУ Е-2.833.0.24.

Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.

Пипетки мерные на 1,0,2,9 и 5,0 мл, ГОСТ 20292-74.

Стаканы химические на 100 мл, ГОСТ 25336-82 Е.

Фильтры бумажные "Красная лента" ТУ 6-09-1678-86.

Хроматограф газовый "Кристалл 2000 М" с термоионным детектором с пределом детектирования по азоту в азобензоле - 5х10'13.

Цилиндры мерные емкостью 25,50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74.

2.3, ЩДГ9Т9.ВЕ4У. ФДрсд^ншр.

2.3,1 • ПожШрв.ка и_крдднШ9Щ^вадйе.колднок для!^ожидк(ДгшоВ_хромат9п^ФчН-Колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе гелия при температуре на 20°С ниже предельного значения для выбранной неподвижной фазы в течение 8-10 часов.

2.3.2. Приготовление стандартных растворов.

Взвешивают 50 мг Диазинона в мерной колбе на 50 мл, растворяют навеску в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном (стандартный раствор № 1, концентрация 1 мг/мл). Стандартный раствор № 1 можно хранить в холодильнике в течение 6 месяцев.

Методом последовательного разбавления готовят стандартные растворы Диазинона в ацетоне с концентрацией 0,025; 0,05; 0,1; 0,25; 0,5 мкг/мл для построения калибровочного графика и внесения в котрольный образец.

Подобным образом готовят раствор Диазинона в гексане с концентрацией 1,0 мкг/мл для проверки хроматографического поведения аналитического стандарта на колонке с Флори зил ом.

23X Подготовка,колонки с Флрризидрм,

В пластмассовую колонку длиной 15 см, диаметром 1,5 см помещают на дно чистую стекловату и заполняют г.олонку 5 г Флоризила 60/100 меш, уплотняя его путем вибрации колонки. На слой Флоризила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см. За день до определения Флоризил в колонке промывают последовательно 20 мл ацетона и 10 мл гексана.

2.3.4. Проверка хроматографического поведенияЛиазинона на колонке,

В подготовленную солонку вносят 1 мл стандартного раствора Диазинона в гексане с концентрацией 1,0 мкг/мл (раздел 2.3.2) и 9 мл гексана. Колонку промывают последовательно 10 мл гексана и 10 мл смеси гексан: ацетон - 9:1. Смывы отбрасывают. После этого пропускают через колонку 3-4 порции смеси гексан:ацетон (1:1) по 5 мл каждая, собирая их в отдельные концентраторы. Собранные фракции выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетона и вводят в хроматограф 1 мхл пробы. Фракции, содержащие Диазинон, объединяют, выпаривают Досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетона и вводят в хроматограф 1 мкл пробы. Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смыва с колонки и необходимый для очистки объем элюата.

2.4. Отбор проб.

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (№ 2051-79 от 21.08.79). Пробы биологического материала хранят в запаянных пластиковых пакетах в замороженном виде в холодильнике. Перед анализом пробы размораживают и измельчают на мясорубке.

эг

2.5. Описание определения.

2 S.j; М ыщсчная ткань, печен^почки.

Навеску измельченного материала - 10 г помещают в пластиковую банку с крышкой емкостью 250 мл и заливают 50 мл ацетонитрила. Встряхивают 10 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в делительную воронку емкостью 250 мл. Экстракцию повторяют еще раз, заливая пробу 50 мл ацетонитрила, и, встряхивая 10 минут. Экстракт отфильтровывают в ту же делительную воронку.

К фильтрату в воронке добавляют 20 мл гексана* и встряхивают содержимое воронки в течение 1 минуты. После разделения фаз нижнюю ацетонитрильную фазу сливают в стаканчик, гексан отбрасывают. Переносят экстракт из стаканчика в делительную воронку и промывают его еще раз 20 мл гексана Ацетонитрильную фазу сливают в концентратор емкостью 250 мл через безводный сульфат натрия и упаривают до объема 5-10 мл при температуре не выше 35°С.

Остаток в концентраторе разводят 80 мл 2,5% водного раствора Na2S04, обмывают стенки концентратора еще 20 мл этого же раствора и переносят его содержимое в делительную воронку емкостью 250 мл. Добавляют в делительную воронку 30 мл метиленхлорида и экстрагируют Диазинон, встряхивая воронку 1-2 минуты. После разделения слоев нижний слой метиленхлорида собирают в чистый концентратор, пропуская через безводный сульфат натрия. Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз 30 мл метиленхлорида, и собирая его в тот же концентратор. Объединенные экстракты выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре нс выше 35°С. Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 мл гексана н проводят очистку пробы на колонке с Флоризилом.

2.5.1.1. Очистка на колонках с Флоризилом,

В подготовленную (как указано в разделе 23.3) колонку с Флоризилом переносят содержимое концентратора. Концентратор ополаскивают 10 мл гексана и пропускают гексан через колонку. Колонку промывают 10 мт шеей гексан: ацетон - 9:1. Смывы отбрасывают. Диазинон элюируют 15 мт смеси гексан-.ацетон - 1:1, смыв собирают в чистый концентратор и выпаривают его содержимое досуха на ротационном вакуумном испарителе. Сухой остаток разводят в 2 мл ацетона (Пробы печени - в 4 мл) и вводят в хроматограф 1 мкл пробы.

23:2,ЖйР:

Навеску жира 5 г помещают в пластиковую банку с крышкой емкостью 250 мл и заливают 50 мл гексана*. Встряхивают 10 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в концентратор емкостью 250 мл. Экстракцию повторяют еще раз, заливая пробу 50 мл гексана, и, встряхивая 10 минут. Экстракт отфильтровывают в тот же концентратор. Объединенный фильтрат упаривают до объема 5-10 мл пре температуре не выше 35°С.

Остаток пробы из концентратора помещают в делительную воронку емкостью 250 мл. Концентратор ополаскивают 50 мл ацетонитрила* и переносят ацетонитрил в делительную воронку. Проводят переэхетракцию Диазинона из гексана в ацетонитрил, встряхивая делительную воронку в течение 2 минут. После разделения слоев нижний слой ацетонитрила сливают в концентратор через безводный сульфат натрия. Повторяют экстракцию еще два раза, используя каждый раз по 50 мл ацетонитрила Экстракты собирают в тот же концентратор. Объединенный экстракт упаривают до объема 5-10 мл при температуре не выше 35°С.

Остаток в концентраторе разводят 100 мл 2,5% раствора Na2S04, обмывают стенки концентратора и переносят его содержимое в делительную воронку емкостью 250 мл. Добавляют в делительную воронку 30 мл метиленхлорида, экстрагируют Диазинон, как указано в разделе 2.5.1 .и очищают пробу на колонке с Флоризилом, как указано в разделе 2.5.1.1.

Очищенную пробу растворяют в 2 мл ацетона и вводят в хроматограф 1 мкл пробы.

*В анализе используют гексан, насыщенный ацетонитрилом, н ацетонитрил, насыщенный гексаном.

2 6.. У сл^в^шфщашрафирования и .обработка результатов

2Ь6Х.У£ДОЗИОРР>^

Хроматограф «Кристалл 2000 м» с термоионным детектором (ТИД) с пределом детектирования по азоту в азобензоле 510'13 г/см3.

Колонка капиллярная кварцевая НР-5; длиной 15 м с внутренним диаметром 0,32 мм; толщина пленки 0,25 мхм.

Реяшм_раб0ТЧ.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура — 150°С, выдержка 2 минуты; нагрев колонки по 25 фадусов в минуту до температуры 230°С, выдержка 5 минут, нагрев колонки по 25 градусов в минуту до температуры 260°С.

Газовый режим - Splitless.

Газ-носитель - гелий (Г1). Тип регулятора расхода гелия - РРГ 11, линейная скорость - 20 см/сек, давление на входе 27,29 кПа.

Газ 2 (Г2) - гелий (продувка испарителя), расход 1,0 мл/мин, сброс 1:50, начало сброса-5 сек, длительность сброса - 2 мин.

Газ 3 (ГЗ) - азот (поддув в детектор), расход во время анализа - 20 мл/мин.

Продувка детектора азотом после анализа при температуре 260°С в течение 2 минут -65 мл/мин.

Абсолютное время удерживания Диазинона - 4 мин 45 сек.- 4 мин. 47 сек.

Температура испарителя - 250°С, детектора - 350°С.

Расход водорода - 16 мл/мин; расход воздуха - 180 мл/мин.

Объем вводимой пробы - 1 мкл.

Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,025-0,5 нг.

2.6.2. Обработка результатов анализов.

Содержание Диаз и нона в пробах рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

Sj-A-V

Х=--Р

So*m-100

X - содержание Диазинона в пробе, мг/кг.

Si - площадь пика образца, мВ;

So - площадь пика стандарта, мВ;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования (мл); m - масса или объем анализируемого образца, г или мл.

Р - содержание Диазинона в аналитическом стандарте.

3. Требования теунщдг ^опасности..

Необходимо соблюдать требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с “Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемиологического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы М3 СССР” (№ 2455-81 от 20.10.81 г.), а также требования, изложенные в документации на приборы.

Калинин В.А., профессор, канд. с-х. наук, Калинина Т.С., ст.н. сотр., канд. с-х. наук, Фролова Н.С., ст. инж.

Московская сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева.

Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (095) 976-37-68, факс: (095) 976- 43-26.