УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека,
Главный государственны/* санитарный врач Российской^^едерауии
Г.Г. Онищенко _ 200.Г г.
Дата введения: t L
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по определению остаточных количеств квизалофоп-П-тефурнла по основному метаболиту квизалофопу-П в семенах рапса и растительных маслах (рапса, сон, подсолнечника) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в семенах рапса и растительных маслах (рапса, сои. подсолнечника) массовых концентраций квизалофоп-П-тефурила по метаболиту квизалофопу-П в диапазоне 0.02 - ОЛмг/кг.
Квизалофоп-П-тефурил - действующее вещество препарата ПАНТЕРА. КЭ (40 г/л).
фирма производитель «Кромптон» (Англия). (Ю-2-[4-(6-=хлорхиноксалин-2-илокси) фенокси] пропионовой кислоты тетрагидро-фурфуриловый эфир (IUPAC)
C22H21CIN2O5
Мол. масса 428.9
Кристаллический порошок белого цвета без запаха. Температура плавления 72.5 - 74.5°С. Давление паров при 25°С: 7.9 х 10'3мПа. Растворимость в органических растворителях (г/дм3): метанол - 64: толуол - 652: н-гексан - 12. Растворимость в воде - 4 мг/дм ‘ (при 25°С ). Коэффициент распределения в системе октанол/вола: K,«vlogP - 4.32.
Квизалофоп-П-тефурил стабилен при комнатной температуре (в герметичной упаковке) не менее года, при 55°С - не менее 14-ти дней, на свету - не менее 7-ми дней. Стабильность в водных растворах: DT50 (22°С) - 82 дня (нейтральная среда); 8.1 дня (pH 5): 7 час. (pH 9).
Основным продуктом гидролитического разложения (метаболитом) квизало-фоп-П-тефурила является Квизалофоп-П (кислота).
Краткая токсикологическая характеристика:
Острая пероральная токсичность (LD so) для крыс - 1012 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD so) для кроликов > 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LKso) для крыс > 4.8 мг/дм3 (4 часа).
Квизалофоп-П
2-(4-(6-хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовая кислота
СН5
Cl N Ct7H13CIN204
Мол. масса 344.8
Кристаллический порошок белого цвета. Давление паров при 20°С: 8.7 х 10'7 мПа Растворимость в воде 3 мг/дм3 (при 20°С). Вещество хорошо растворимо в метаноле. этаноле, ацетоне, ксилоле, умеренно в ацетонитриле. Коэффициент распределения в системе октанол/вода: KnwiogP - 4.32.
Вещество относительно стабильно в кислой среде, период полураспада в почве до 60-ти дней.
Квизалофоп-П является основным биологически активным метаболитом, определяемым в растениях и почве.
Область применения препарата
Квизалофоп-П-тефурил - послевсходовый гербицид для борьбы с однолетними и многолетними злаковыми сорными растениями при возделывании овощных и технических культур.
Гигиенические нормативы: МДУ в картофеле, моркови, томатах, капусте, подсолнечнике (семена), сое (семена), свекле сахарной, кормовой, столовой - 0,04 мг/кг; луке (репка), подсолнечнике (масло), сое (масло) - 0,06 мг/кг.
стимостью 400 см3, вносят 100 см3 смеси ацетонитрил-вода-уксусная кислота (90:10:1. по объему) и помешают на встряхиватель на 1 час.
Раствор фильтруют на воронке Бюхнера через двойной бумажный фильтр «красная лента» под вакуумом. Осадок на фильтре трижды промывают смесью ацетонитрил-вода-уксусная кислота (90:10:1. по объему) порциями по 40 и 30 см3 (дважды). Экстракт и промывки переносят в мерный цилиндр вместимостью 200 - 250 см3 с пришлифованной пробкой, перемешивают. Далее половину раствора (соответствующую массе анализируемого образца 10 г) переносят в делительную воронку вместимостью 500 см3 и проводят очистку экстракта по п. 9.1.2.
9.1.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
К экстракту, полученному по п. 9.1.1. помещенному в делительную воронку вместимостью 500 см3, добавляют 0.1 н раствора гидроксида калия, перемешивают и оставляют на 30 мин. Затем в делительную воронку вносят 50 см3 гексана, интенсивно ее встряхивают в течение 2-х мин. После полного разделения фаз верхний органический слой отделяют и отбрасывают. Операцию промывки щелочного раствора повторяют еще дважды, используя по 30 см3 гексана.
Далее раствор в делительной воронке подкисляют с помощью 6 н раствора серной кислоты до pH 3 (контролируя его значение по универсальной индикаторной бумаге). Вносят в воронку 50 см3 хлористого метилена, интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2-х мин. После полного разделения фаз нижний органический слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 250 см3.
Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя по 40 см”* хлористого метилена. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха и подвергают дополнительной очистке на колонке по п. 9.1.3.
9.1.3 Очистка экстракта на колонке с кизелъгеяем
Остаток, полученный по п. 9.1.2. находящийся в круглодонной колбе, растворяют в 2-х см3 этилацетата. помещая на ультразвуковую баню на 1 мин. добавляют 8 см3 гексана, перемешивают, вновь помешают на ультразвуковую баню на I мин. Затем раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.11. Колбу обмывают трижды порциями гексана по 3 cmj. которые также наносят на колонку. Промывают колонку по-
4S
следовательно 30 см3 гексана. 25 см3 смеси гсксан-этилацетат (8:2, по объему), 25 см3 смеси гексан-этилацетат (1:1. по объему) и 30 см3 этилаиетата. элюат отбрасывают.
Квизалофоп-П элюируют с колонки 50 см3 0.2%-ного уксусной кислоты в этил* ацетате со скоростью 1-2 капли в сек. собирая элюат в круглодонную колбу. Раствор упаривают досуха при температуре не выше 35°С. остаток в колбе растворяют в 2-х см3 подвижной фазы и анализируют содержание квизалофопа-П по п. 9.3.
9.2. Масло
9.2.1. Экстракция
Образец масла массой 10 г помешают в коническую колбу вместимостью 200 -250 см3, вносят 50 см3 ацетонитрила и помешают на магнитную мешалку на 15 мин. После полного разделения фаз верхний ацетонитрильный слой осторожно декантируют через бумажный фильтр, помещенный в конусную воронку, в круглодонную колбу вместимостью 150-200 см3. Экстракцию повторяют еще дважды порциями ацетонитрила по 30 см3. Объединенный отфильтрованный экстракт, помешенный в круглодонную колбу, упаривают досуха при температуре не выше 35°С. упаривают досуха и подвергают очистке по п. 9.2.2.
9.2.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей
Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в делительную воронку вместимостью 250 см3, добавляют 50 см3 гексана, интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2-х мин. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой отделяют, перенося в коническую колбу. Верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильную фазу вновь переносят в делительную воронку и повторяют операцию промывки еще дважды, используя по 30 см3 гексана. Ацетонитрильный раствор переносят в круглодонную колбу вместимостью 250 см3 и подвергают очистке на колонке с кизельгелем по п. 9.1.3.
9.3. Условия хроматографирования
Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.
Колонка стальная, длиной 25 см. внутренним диаметром 4.0 мм. содержащая Кромасил 100 С 18. зернением 8 мкм
Температура колонки: комнатная
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-орто-фосфорная кислота (550:450:1. по объему)
Скорость потока элюента: 1.0 см3/мин Рабочая длина волны: 240 нм Чувствительность: 0.02 ед. абсорбции на шкалу Объем вводимой пробы: 20 мм3
Ориентировочное время выхода квизалофопа-П: 9.S-9.8 мин.
Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор квизалофопа-П с концентрацией I мкг/см3. разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ (подготовленной
по п. 7.7.).
10. Обработка результатов анализа
Содержание квизалофоп-П-тефурила в пробе (X. мг/кг) по основному метаболиту
квизалофопу-П рассчитывают по формуле:
Ах V х К
X »------------- , где
m
А • концентрация квизалофопа-П. найденная по градуировочному графику, мкг/см3;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3: m - масса анализируемого образца, г;
К- коэффициент пересчета содержания квизалофопа-П на квизалофоп-П-тефурил. равный 1.24 (по соотношению молекулярных масс).
11. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
12. Разработчики.
Юдина Т.В.. Федорова Н.Е.. Волкова В.Н.. - Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (ФНЦГ им. Ф.Ф.Эрисмана)
Рис. 1. Градуировочная характеристика, выражающая зависимость площади хроматографического пика от концентрации квизалофопа-П в растворе |
|
S = 92 + 1,05581 х 106 х С (г * 0,99924),
где S - площадь хроматографического пика, mV х сек;
С - концентрация квизалофопа-П в растворе, мкг/см3 г - коэффициент корреляции.
Жидкостной хроматограф ‘‘Perkin-Elmer” (США) с ультрафиолетовым детектором (рабочая длина волны 240 нм), колонка (25 см х 4,0 мм), содержащая Кромасил 100 CI8 (8 мкм), подвижная фаза; ацетонитрил-вода-орто-фосфорная кислота (550:450:1, по объему), чувствительность 0,02 ед. оптической плотности на шкалу, объем вводимой пробы 20 мм3.
*<S
1. Метрологические характеристики метода Метрологические характеристики метода представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица I
Метрологические параметры |
Анализируемый
объект |
Метрологические параметры. Р - 0.95. п “ 20 |
Предел
обнару
жения.
мг/кг |
Диапазон
определяемых
концентраций,
мг/кг |
Среднее
значение
определения
% |
Стандартное
отклонение.
S.% |
Доверительный интервал среднего ре- ! зультата. +, % j |
Семена рапса |
0.02 |
0.02-0,2 |
86,00 |
7.49 |
10.4 |
Растительное масло (рапса) |
0.02 |
0.02-0,2 |
89,80 |
5.53 |
7.7
I |
|
Таблица 2 |
Полнота извлечения квизалофопа-П из семян и масла рапса (5 повторностей для каждой концентрации)
Среда |
Внесено
квизалофопа-П
мг/кг |
Обнаружено
квизалофопа-П
мг/кг |
Полнота извлечения.
% |
|
0,02 |
0,017328 ± 0,003723 |
89.54 |
Семена |
0.04 |
0,033877 + 0.004753 |
84,69 |
|
0.1 |
0.085099 + 0,012797 |
85,10 |
|
0.2 |
0,169332 ± 0,025369 |
84.67 |
|
0,02 |
0,017845 + 0,002737 |
89.22 |
Масло |
0.04 |
0,035282 ± 0,003918 |
88.21 |
|
0.1 |
0,090569 + 0.012616 |
90.57 |
|
0.2 |
0,182424 + 0,021874 |
91.21 |
2. Метод измерений
Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором (УФ) после экстракции из анализируемой пробы семян смесью ацетонитрил-вода-уксусная кислота. масла - ацетонитрилом, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешиваюшимися фазами и на колонке с кизельгелем.
У?
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме пробы - 2 нг.
В предлагаемых условиях определения метод специфичен в присутствии пестицидов. применяемых в технологии выращивания рапса, подсолнечника, сои.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
Номер Госреестра 15945-97
3.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer. США)
Весы аналитические ВЛА-200
Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0.038 г Колбы мерные 2-50-2. 2-100-2 и 2-1000-2 Меры массы
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0. 2.0, 5.0.10 см3
Пробирки градуированные вместимостью 10 см3 Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью
25. 50. 100. 200 и 1000 см3
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Квизалофоп-П-тефурил. аналитический стандарт с содержанием основного вещества 99,2% (фирма Кромптон)
Квизалофоп-П. аналитический стандарт с содержанием основного вещества 98.4% (фирма Кромптон)
Кизельгель 60. для колоночной хроматографии. 30-60 мкм (Riedel-de-Ha€n. Германия)
Ацетонитрил Для хроматографии, хч ТУ-6-09-4326-76
Вода деионизованная ГОСТ 6702
н-Гексан. хч |
ТУ-6-09-3375 |
Изопропиловый спирт (пропанол-2), хч |
ТУ 6-09-402-75 |
Калий гидроксид, осч |
ОСТ 6-01-301 |
Кислота орто-фосфорная, хч, 85% |
ГОСТ 6552 |
Кислота серная, хч |
ГОСТ 4204 |
Кислота уксусная, ледяная, хч |
ГОСТ 61 |
Метиловый спирт (метанол), хч |
ГОСТ 6995 |
Метилен хлористый (дихлорметан), хч |
ГОСТ 12794 |
Натрий сернокислый, безводный, хч |
ГОСТ 4166 |
Этиловый эфир уксусной кислоты, ч |
ГОСТ 22300 |
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3. Вспомогательные устройства, материалы |
Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс |
ТУ 64-1-2851-78 |
Аквадистиллятор
Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария) |
ГОСТ 22340 |
Бумажные фильтры «красная лента», обеззоленные или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ |
ТУ 6-09-2678-77 |
Воронка Бюхнера |
ГОСТ 25336 |
Воронки делительные вместимостью 250 и 500 см3 |
ГОСТ 25336 |
Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм Груша резиновая |
ГОСТ 25336 |
Дефлегматор елочный Индикаторная бумага универсальная |
ГОСТ 9773 |
Колба Бунзена |
ГОСТ 25336 |
Колбы плоскодонные вместимостью 100, 250 и 400 см3 |
ГОСТ 9737 |
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 100 и
250 см3 |
ГОСТ 9737 |
Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм Мешалка магнитная ММ-5
Набор для фильтрации растворителей через мембрану |
ТУ 25-11.834-80 |
|
Насос водоструйный вакуумный
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария
Стаканы химические, вместимостью 100 и 250 см3 Стекловата
Стеклянная колонка длиной 25 см. внутренним диаметром 8-10 мм
Стеклянные палочки Установка для перегонки растворителей Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см. внутренним диаметром 4.0 мм. содержащая Кромасил 100 С18. зернением 8 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 - 100 мм3
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019. а также требования. изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны)». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0 004.
S. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию нс ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант». имеющего опыт работы в химической лаборатории.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.
• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с кизельгелем для очистки экстракта. проверка хроматографического поведения вещества на колонке.
7.1. Подготовка органических растворителей
7.1.1. Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
7.1.2. Очистка этилацетата
Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.
7.1.3. Очистка н-гексана и хлористого метилена
Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор. пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод. перегоняют над поташом.
7.2. Приготовление смеси растворителей для экстракции
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 900 см3 ацетонитрила. 100 см3 дистиллированной воды и 1 см3 уксусной кислоты, тщательно перемешивают.
4ГГ
7.3. Приготовление 0,2% раствора уксусной кислоты в этилацетате
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 600-700 см3 этилаиетата. вносят 2 см3 уксусной кислоты, тщательно перемешивают.
7.4. Приготовление 0,2 н раствора гидроксида калия
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помешают 11,2 г гидроксида калия, растворяют в 600-700 см3 деионизованной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.
7.5. Приготовление 6 н раствора серной кислоты
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 400 - 500 см3 деионизованной воды, вносят 336 см3 концентрированной серной кислоты, перемешивают, доводят водой до метки, вновь перемешивают.
7.6. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помешают 550 см3 ацетонитрила. 450 см* деионизированной воды. 1 см3 орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
7.7. Кондиционирование хроматографической колонки
Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.6) при скорости подачи растворителя 1.0 см3/мин до установления стабильной базовой линии.
7.8. Приготовление градуировочных растворов
7.8.1. Исходный раствор квизалофопа-П для градуировки (концентрация 500 мкг/см*) В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0.01 г квизалофопа-П. растворяют в 50-70 см3 метанола, доводят метанолом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.
Растворы № 1-5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора.
7.8.2. Раствор Ns 1 квизалофопа-П для градуировки (концентрация 10 мкг/см1).
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 2.0 см3 исходного раствора с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 7.8.1.). доводят до метки подвижной фазой (приготовленной по п. 7.6). тщательно перемешивают.
Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
яг
7.8.3 Рабочие растворы N°N? 2-5 квизалофопа-П Оля градуировки (концентрация О/ - I.0 мкг/см3).
В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают по 1.0. 2.0. 5.0 и 10.0 см3 раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 7.8.2.), доводят до метки подвижной фазой. тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2 - 5 с концентрацией квизалофопа-П 0.1, 0.2, 0.5 и 1.0 мкг/см3. соответственно.
Растворы хранятся в холодильнике не более недели.
7.9. Приготовление растворов внесения для оценки полноты извлечения квизалофопа-П из исследуемых образцов
7.9.1. Исходный раствор квизалофопа-П (концентрация 100 мкг/см*) В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0.01 г квизалофопа-П. растворяют в 50-70 см3 изопропилового спирта, доводят им же до метки, тщательно перемешивают.
7.9.2. Основной раствор квизалофопа-П для внесения (концентрация 10
мкг/см3).
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помешают 10,0 см3 исходного раствора с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 7.9.I.). доводят до метки изопропанолом, тщательно перемешивают.
Раствор хранится а холодильнике не более 2-х недель.
7.10. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость плошали (высоты) пика от концентрации квизалофопа-П в растворе (мкг/см3). устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки XaJfe 2-5.
В испаритель хроматографа вводят по 1 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3. Осуществляют не менее З-.х параллельных измерений.
7.11. Подготовка колонки с кизельгелем для очистки экстракта
Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 8-10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г кизельгеля в 15-20 см3 гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помешают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1.5 см. После этого колонка готова к работе.
7.12. Проверка хроматографического поведения квизалофопа-П на колонке с
к из ель гелем
В круглояонную колбу вместимостью 10 см3 помешают 0.5 см3 основного раствора квизалофопа-П для внесения с концентрацией квизалофопа-П 10 мкг/см3 (п.
7.9.2.). растворитель упаривают досуха, добавляют 1 см3 этилацетата. помешают на ультразвуковую баню на 1 мин. вносят 4 см3 гексана, перемешивают, вновь помещают на ультразвуковую баню на 1 мин и наносят на колонку, подготовленную по п. 7.11. Промывают колонку последовательно 30 см3 гексана. 25 см3смеси гексан- этилацетат (8:2. по объему), затем 25 см3 смеси гексан- этилацетат (1:1. по объему) и 30 см3 чтил-ацетата, злюат отбрасывают.
Затем колонку промывают 70 см3 2%-ным раствором уксусной кислоты в этил-аиетате (п. 7.3.) со скоростью 1-2 капли в сек. Фракиионно (по 10 см3) отбирают элю-ат. упаривают, остатки растворяют в 1 см3 подвижной фазы, анализируют содержание квизалофопа-П по п. 9.3.
Фракции, содержащие квизалофоп-П. объединяют и вновь анализируют.
Устанавливают уровень вещества в элюате. определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
ПРИМЕЧАНИЕ: Проверку хроматографического поведения квизалофопа-П следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.
8. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТ 10852-86.
Отобранные пробы семян рапса хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 10-ти дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18°С.
Пробы масла (помещенные в стеклянные флаконы) хранят в холодильнике в течение месяца.
Перед анализом образцы семян измельчают.
9. Выполнение определения 9.1. Семена рапса
9/2.1 Экстракция
Образец измельченных семян массой 20 г помещают в коническую колбу вме-