Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

19 страниц

183.00 ₽

Купить МУК 4.1.1921-04 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

 Скачать PDF

Оглавление

1. Вводная часть

2. Методика определения остаточных количеств Пираклостробина в воде, почве, ягодах винограда, виноградном соке и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     2.1. Основные положения

     2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование

     2.3. Подготовка к определению

     2.4.Отборпроб

     2.5. Описание определения

     2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов

3. Требования техники безопасности

Нормативные ссылки:
Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16
Стр. 17
стр. 17
Стр. 18
стр. 18
Стр. 19
стр. 19

Фсдера и.паи служба по манору в сфере защиты прав iioi рсбитслсн и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств Пнраклостробина в воде, почве, ягодах винограда, виноградном соке и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1Л921—04

ББК 51.23+51.21 060

060 Определение остаточных количеств Пнраклостробнна в воде, почве, ягодах винограда, виноградном соке и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России. 2005.—19 с.

1.    Разработка Московской сельскохозяйственной академией им. К. Л. Тимирязева. Учебно-научным ценiром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» (авторы В. А. Калинин. А. В. Довгилевич. Е. В. Довгилевич. II. В. Устименко).

2.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты нрав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко.

3.    Введены впервые.

ББК 51.23+51.21

€> Роспотребнадзор, 2005 €> Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2005

МУК 4.1.1921—04

ацетон в соотношении 9 : 1 и также вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Пнраклостробин. объединяют их и рассчитывают полноту его смыва с колонки.

2.3.6. Подготовка концентрирующего патрона Диапак-С 16 для очистки экстракта

Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон нс должна превышать 5 мл/мин. При работе на патронах Диапак-С 16 используют очищенную воду.

Патрон Диапак-С 16 устанавливают на аллонж с отводом для вакуума. сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 мл (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 10 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 1 и 20 мл воды. Элюат отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона!

2.3.6.1. Проверка хроматографического поведения Пнраклостроби-на на концентрирующем патроне Диапак-С 16.

Из стандартного раствора Пираклостробнна в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/мл. отбирают 1 мл. помещают в круглодонную колбу объемом 100 мл и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре нс выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетонитрила, помещают на 10 с в ультразву ковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 мл воды, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографиру ют. Концентратор обмывают 10 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 4 и смесь вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют. Концентратор обмывают 10 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 2 и вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографиру ют. Концентратор обмывают тремя порциями по 10 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 1 и также вносят на патрон. Элюат после прохождения каждой порции собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют. Определяют фракции, содержащие Пираклостро-бин. объединяют их и рассчитывают полноту его смыва с колонки.

11

2.3.7. Подготовка концентрирующего патрона Диопак-Лмин для очистки экстракта

Вес процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон нс должна превышать 5 мл/мин. При работе на патронах Диапак-Амин используют очищенную воду.

Патрон Диапак-Амин устанавливают на аллонж с отводом для вакуума. сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом не менее 10 мл (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 10 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 1 и 20 мл воды. Элюат отбрасывают.

Нельзя дот екать высыхания поверхности патрона!

2.3.7.1. Проверка хроматографического поведения Пнраклостроби-на на концентрирующем патроне Диапак-Амин.

Из стандартного раствора Пираклостробина в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/мл. отбирают 1 мл. помещают в круглодонную колбу объемом 100 мл и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре нс выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетонитрила. помещают на Юс в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 мл воды, тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют. В исходный концентратор добавляют 1 мл ацетонитрила, стенки колбы тщательно обмывают, добавляют 9 мл воды, тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют. Процедуру повторяют еще раз. Определяют фракции. содержащие Пираклостробин. объединяют их и рассчитывают полноту его смыва с колонки.

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколн-чсств пестицидов» (№ 2051—79 от 21.08.79). утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР.

12

МУК 4.1.1921—04

2.5. Описание определении

2.5.1.    Вода

Пробу воды объемом 100 мл помещают в делительную вороню емкостью 250 мл. Затем в делительную вороню добавляют 30 мл хлористого метилена и интенсивно встряхивают ее 2 мин. После полного разделения фаз нижний слой (хлористый метилен), содержащий Пирак-лостробнн. собирают в концентратор объемом 250 мл. пропуская его через слой безводного сульфата натрия. Водный экстракт возвращают в делительную вороню и экстрагируют Пираклостробин еще двумя порциями хлористого метилена по 30 мл. интенсивно встряхивая делительную вороню 2 мин. Каждый раз после полного разделения фаз нижний слой (хлористый метилен), содержащий Пираклостробин. собирают в концентратор, пропуская его через слой безводного сульфата натрия. Выпаривают объединенный экстракт досуха. Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетонитрила и аликвоту объемом 20 мкл вводят в хроматограф.

2.5.2.    Почва

2.5.2.1. Экстракция и предварительная очистка. Образец почвы массой 20 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл. прибавляют 10 мл 0.1 %-ной соляной кислоты и выдерживают при комнатной температуре 10 мин. Затем к содержимому колбы прибавляют 30 мл ацетонитрила и экстрагируют Пираклостробин 5 мин на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 мин на механическом встряхиватслс. После экстракции пробу центрифугируют 5 мин при скорости 3 000 об./мнн и супернатант переносят через бумажный фильтр «красная лента» в коническую колбу объемом 250 мл с 10 г поваренной соли. Экстракцию повторяют еще 3 раза, используя по 30 мл ацетонитрила и экстрагируя по 5 мин на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 мин на механическом встряхиватслс. После центрифугирования и фильтрования экстракты объединяют в конической колбе с 10 г поваренной соли, перемешивают и оставляют на 10 мин при комнатной температуре. Затем экстракт переносят в делительную вороню объемом 250 мл и выделившийся нижний водный слой отбрасывают. Верхний ацетонитрильный слой пропускают в концентратор объемом 250 мл через слой безводного сульфата натрия и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С.

К сухому остатку в концентраторе добавляют 5 мл ацетона и тщательно обмывают его стенки, затем туда же добавляют 100 мл дистиллированной воды и 5 г поваренной соли и перемешивают до полного растворения соли. Полученную смесь переносят в делительную воронку

объемом 250 мл. концентратор обмывают 30 мл гексана, помещают в ту же делительную воронку и интенсивно встряхивают ее 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой сливают в коническу ю колбу объемом 250 мл, а верхний гексановый слой - в химический стакан объемом 100 мл. Затем водную фазу возвращают в делительную воронку и экстрагируют Пнраклостробин еще двумя порциями гексана объемом по 30 мл. Гексановые экстракты объединяют. переносят в делительную вороню, добавляют туда же 50 мл 5 %-ного водного раствора гидрокарбоната натрия и интенсивно встряхивают 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой отбрасывают, а гексановый экстракт промывают еще раз 50 мл 5 %-ного водного раствора пирокарбоната натрия, интенсивно встряхивая делительную воронку 2 мин. Гексановый экстракт переносят в концентратор объемом 250 мл, пропу ская через слой безводного сульфата натрия. Осушитель обмывают 10 мл гексана, объединяют смыв с основным экстрактом и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С.

2.5.2.2.    Очистка на концентрирующем патроне Диапак-А.мин. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетонитрила, помещают на 10 с в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 мл воды, тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в чистый концентратор. В исходный концентратор добавляют еще раз 1 мл ацетонитрила, стенки колбы тщательно обмывают, добавляют 9 мл воды, тщательно перемешивают и полученный раствор вновь вносят на патрон. Элюаты объединяют и подвергают дальнейшей очистке.

2.5.2.3.    Повторная очистка и очистка на патроне Днапак-С16. К объединенному элюату добавляют 100 мл дистиллированной воды. 5 г поваренной соли и перемешивают до полного растворения соли. Затем полу ченную смесь переносят в делительную воронку объемом 250 мл, концентратор обмывают 30 мл гексана, помещают смыв в ту же делительную воронку и интенсивно встряхивают 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в коническу ю колбу объемом 250 мл. а верхний гексановый слой собирают в концентратор объемом 250 мл, пропу ская через слой безводного сульфата натрия. Экстракцию Пираклостробина повторяют еще двумя порциями гексана по 30 мл. экстракты объединяют, осушитель обмывают 10 мл гексана, объединяют смыв с основным экстрактом и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температу ре нс выше 30 °С.

МУК 4.1.1921—04

Сухой остаток растворяют в I мл ацетонитрила, помещают на Юс в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 мл воды, тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Элюат отбрасывают.

Концентратор обмывают 10 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 4 и вносят на патрон. Элюат отбрасывают.

Концентратор обмывают 10 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 2 и вносят на патрон. Элюат отбрасывают.

Пираклостробин элюируют 20 мл смеси ацетонитрил-вода в соотношении 1:1. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.

2.5.3. Яблоки

2.5.3.1. Экстракция и предварительная очистка. Образец измельченных на терке яблок массой 10 г помещают в коническу ю колбу объемом 250 мл. прибавляют 30 мл ацетонитрила и экстрагируют 5 мин на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 мин на механическом встряхн-вателс. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» в коническую колбу объемом 250 мл с 5 г поваренной соли. Экстракцию повторяют еще 3 раза, используя по 30 мл ацетонитрила и экстрагируя по 5 мин на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 мин на механическом встряхиватслс. После фильтрования экстракты объединяют, перемешивают и оставляют на 10 мин при комнатной температуре.

Затем экстракт переносят в делительную вороню объемом 250 мл и выделившийся нижний водный слой отбрасывают. Верхний ацетонитрильный слой пропускают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 мл и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С.

К сухому остатку в концентраторе добавляют 5 мл ацетона и тщательно обмывают его стенки, затем туда же добавляют 100 мл дистиллированной воды. 5 г поваренной соли и перемешивают до полного растворения соли. Полученную смесь переносят в делительную воронку объемом 250 мл. концентратор обмывают 30 мл гексана, который помещают в ту же делительную воронку и интенсивно встряхивают ее 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний водный слой помещают в коническую колбу объемом 250 мл, а верхний гексановый слой собирают в концентратор объемом 250 мл. протекая через слой безводного сульфата натрия. Водный слой возвращают в делительную воронку и экстрагируют Пираклостробин еще дважды порциями гексана объемом по 30 мл. Водный слой отбрасывают, а гексановый экс-

МУК 4.1.1921—04

тракт пропускают через слой безводного сульфата натрия и объединяют в концентраторе объемом 250 мл. Осушитель обмывают 10 мл гексана, объединяют смыв с основным экстрактом и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С.

К сухому остатку в концентраторе прибавляют 2 мл ацетона и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор прибавляют 50 мл гексана, тщательно перемешивают и переносят в сухую делительную воронку объемом 250 мл. Пираклостробин экстрагируют из ацетоново-гексановой смеси тремя порциями ацетонитрила объемом по 20 мл. интенсивно встряхивая делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой пропускают в концентратор объемом 100 мл через слой безводного сульфата натрия и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С.

2.5.3.2. Очистка на патроне Диапак-С. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, помещают на Юс в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки концентратора. Затем в концентратор добавляют 9 мл гексана, смесь тщательно перемешивают и полученный раствор вносят на патрон. Концентратор тщательно обмывают 10 мл смеси гексан-ацетон в соотношении 9 : 1 и также вносят на патрон. Элюаты объединяют и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и аликвоту 20 мкл вводят в хроматограф.

2.5.4. Виноград (ягск)ы)

2.5.4.1. Экстракция и предварительная очистка. Образец измельченных ягод винограда массой 10 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл. прибавляют 30 мл ацетонитрила и экстрагируют 5 мин на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 мин на механическом встряхн-вателе. Экстракт переносят через бумажный фильтр «красная лента» в коническую колбу объемом 250 мл с 5 г поваренной соли. Экстракцию повторяют еще 3 раза, используя по 30 мл ацетонитрила и экстрагируя по 5 мин на ультразвуковой ванне и дополнительно 5 мин на механическом встряхиватслс. После фильтрования экстракты объединяют в конической колбе с 5 г поваренной соли, перемешивают и оставляют на 10 мин при комнатной температу ре. Затем экстракт переносят в делительную воронку объемом 250 мл и выделившийся нижний водный слой отбрасывают. Верхний ацетонитрильный слой возвращают в делительную воронку, добавляют туда же 50 мл насыщенного раствора поваренной соли и интенсивно встряхивают 2 мин. После полного разделения <|>аз в делительной воронке нижний водный слой с выпавшими в осадок

МУК 4.1.1921—04

Содержание

1.    Вводная часть..........................................................................................................4

2.    Методика определения остаточных количеств 11ираклостробина в воде,

почве, ягодах винограда, виноградном соке и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии....................................................5

2.1.    Основные положения......................................................................................5

2.2.    Реактивы, растворы, материалы и оборудование..........................................7

2.3.    Подготовка к определению.............................................................................9

2.4.    От<х>р проб.....................................................................................................12

2.5.    Описание определения...................................................................................13

2.6.    Условия хроматографирования и    обработка    результатов...........................18

3.    Требования техники безопасности......................................................................19

3

МУК 4.1.1921—04

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

11 августа 2004 г.

Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств Пира км остроб н на в воде, почве, ягодах винограда, виноградном соке и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.1921—04

1. Вводная часть

Фирма производитель: БАСФ. Германия.

Торговое название: Кабрно. Кабрио Топ.


Название действующего вещества по ИСО: Пираклостробин. Название действующего вещества по ИЮПАК: mcth.t-N-{2-[ 1-(4-хлорфенил)-1 Н-пиразол-3-илоксимстнл]фснил }(И-мстокси)карбамат. Структу рная формула:

Эмпирическая формула: CiyH^ClNjO,

Молекулярная масса: 387.8

Химически чистый Пираклостробин представляет собой белый или светло-бежевый кристаллический порошок без запаха.

Температу ра плавления: 63.7—65.2 °С.

4

МУК 4.1.1921—04

Давление паров 2.6 х 10'5 мПа (при 20 °С).

Коэффициент распределения октанол-вода К^ logP - 3,99 (22 °С).

Растворимость в воде - 1.9 мг/л (при 20 °С).

Растворимость в органических растворителях (г/л при 20 °С): ацетон - более 200. ацетонитрил - более 980. июпропанол - 40. метанол - 140.

Сохраняется в водной среде более 30 дней при pH 5.7 и температуре 25 °С: подвержен фотолизу в воде - ДТ*. составляет менее 2 ч. В почве период полураспада составляет 2—37 дней.

Краткая токсикологическая характеристика. Пираклостробин относится к малоопасным по острой оральной (СД*, для крыс - более 5 000 мг/кг). дермальной токсичности (СД*> для крыс - более 2 000 мг/кг) и умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (СК50 4 ч для крыс 4 000—7 000 мг/м3). Он нс вы бывает раздражения слизистых оболочек глаз и кожи и не обладает мутагенным, тератогенным. эмбриотоксичсскнм. канцерогенным действием.

В России гигиенические нормативы не установлены.

Область применения препарата. Пираклостробин - фунгицид из группы стробилуринов контактного и глубинного действия с длительным защитным эффектом. Высокоэффективен против возбудителей ложной и мучнистой настоящей росы, в т. ч. против рас возбудителя, устойчивых к Мсталаксилу и производным трназола.

Рекомендуется для борьбы с фитопатогеннымн грибами на зерновых. овощных и плодовых культурах с нормой расхода 50—250 г д.в./га.

2. Методика определения остаточных количеств Пнраклостробина в воде, почве, ягодах винограда, виноградном соке и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении Пнраклостробина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистке перераспределением между двумя нссмсшнвающимися фазами и на концентрирующих патронах на основе силикагеля (Диапак С. Диапак-А.мин и Диапак С 16). Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

5

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1 и 2.

Таблица 1

Метрологическая характеристика метода определения

Метрологические параметры, р = 0,95, п = 20

Анализируемый

об1>ект

Предел обнаружения, мг/кг (мг/л)

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/л)

Среднее значение определения, %

Стан

дартное

отклоне

ние,

S

Доверительный интервал среднего результата, '%, ±

Вода

0,005

0,005—0,05

98,1

2,86

1,34

Почва

0,01

0,01—0,10

76,8

2,17

1,01

Ягоды винограда

0,02

0,02—0,20

75,3

2,24

1,05

Виноградный сок

0,02

0,02—0,20

84,6

2,69

1,26

Яблоки

0,02

0,02—0,20

75,2

1,42

0,664

Таблица 2

Полнота определения Пнраклостробнна в воде, почве, ягодах винограда, виноградном соке и яблоках (5 повторностей для каждой копнен границ)

Среда

Внесено, мг/кг (мг/л)

Обнаружено, мг/кг (мг/л)

Доверительный интервал, ±

11олнота определения.

%

1

2

3

4

5

Вода

0,005

0,0048

0,00027

96,0

0,010

0,0098

0,00018

98,0

0,020

0,0197

0,00074

98,5

0,050

0,0499

0,00082

99,8

Среднее

98,1

Почва

0,01

0,0076

0,00026

76,0

0,02

0,0154

0,00052

77,0

0,05

0,0394

0,00112

78,8

0,10

0,0754

0,00112

75,4

Среднее

76,8

Яш;ц>1 винограда

0,02

0,0149

0,00038

74,5

0,04

0,02%

0,00116

74,0

1,0

0,0764

0,00227

76,4

2,0

0,1525

0,00650

76,3

Среднее

75,3

Виноградный сок

0,02

0,0166

0,00044

83,0

Продолжение табл. 2

1

2

3

4

5

0,04

0,0333

0,00141

83,3

1,0

0,0840

0,00187

84,0

2,0

0,1758

0,00165

87,9

Среднее

84,6

Яблоки

0,02

0,0151

0,00041

75,5

0,04

0,0301

0,00097

75,3

1,0

0,0756

0,00156

75,6

2,0

0,1490

0,00187

74,5

Среднее

75,2

2.1.3. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в прису тствии пестицидов. применяемых при выращивании яблок и винограда.

2.2. Реактивы, растворы, матершиы и оборудование

2.2.1. Реактивы, материалы и растворы

ТУ 2633-004-11291058—94 ТУ 6-09-3534—87 ГОСТ 7602-72 ТУ 6-09-33—75 ГОСТ 20490-75 ГОСТ 4161-76 ГОСТ 4204-77 ГОСТ 857-88 ГОСТ 61-75 ТУ 6-09-2662—77 ГОСТ 2156-76 ГОСТ 4166-76 ГОСТ 4233-77 МРТУ 6-09-5759—69 ГОСТ 223000-76 ТУ 4215-002-05451931—94 ТУ 4215-0024)5451931—94 ТУ 4215-0024)5451931—94 ТУ 6-09-1678—86

Пираклостробин. аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,9 %. фирма БАСФ Ацетон, осч. 9-5 Ацетонитрил

Вода бидистиллированная, деионизированная Гексан, ч

Калий марганцово-кислый, чда

Кальций хлористый, хч

Кислота серная концентрированная, ч

Кислота соляная, концентрированная

Кислота уксусная, ледяная

Метилен хлористый, хч

Натрия гидрокарбонат, хч

Натрий серно-кислый, безводный, хч

Натрий хлористый, хч

Фосфора пентоксид. ч

Этиловый эфир уксусной кислоты, чда

Концентрирующие пггтроны Диапак-Амин (0.6 г)

Концентрирующие патроны Днапак-С (0.6 г)

Концентрирующие патроны Диапак-С 16 (0.6 г)

Фильтры бумажные, «красная лента»

7

МУК 4.1.1921—04

Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм. с отверстиями пор 20 мкм. фирма Уотерс или аналогичные

Перед началом эксперимента проверяют чистоту ацетонитрила, ацетона, гексана и хлористого метилена. Для этого досуха выпаривают на ротационном вакуумном испарителе 200 мл растворителя, добавляют в концентратор 1 мл ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора и хроматографируют при 270 нм. При недостаточной чистоте растворителей проводят их очистку .

Бидистиллят кипятят в течение 6 ч с марганцово-кислым калием, добавленным из расчета 1 г/л. и затем перегоняют.

Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия (Гордон А.. Форд Р. Спутник химика. М.. 1976. С. 438—439).

Ацетонитрил перегоняют.

Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором перманганата калия до тех пор. пока раствор нс перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (Гордон А.. Форд Р. Спутник химика. М.. 1976. С. 441).

Хлористый метилен встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают водным раствором карбоната натрия, водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют над оксидом (V) фосфора (Гордон А.. Форд Р. Спутник химика. М.. 1976. С. 440).

2.2.2. Приборы и оборудование

Хроматограф жидкостный Уотерс 510 с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью нс ниже 0.005 единиц адсорбции на шкалу или другой аналогичного типа Колонка хроматографическая стальная, длиной 250 мм. внутренним диаметром 4.6 мм. Symmetry Shield RP18. зернение 5 мкм. фирма Уотерс Предколонка хроматографическая стальная.

Symmetry С 18. длиной 20 мм. внутренним диаметром 3,9 мм. зернение 5 мкм. фирма Уотерс Ванна ультразвуковая

Весы аналитические ВЛА-200    ГОСТ 34104—80Е

или аналогичные

8

МУК 4.1.1921—04

Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г Воронки делительные на 250 и 500 мл Воронки конические стеклянные, диаметром 50—60 мм

Колбы конические плоскодонные на 500 и 1 000 мл

Колбы мерные на 25. 50 и 100 мл Концентраторы грушевидные и круглодонные, объемом 50. 100 и 250 мл. КТУ-100-14/19 Микрошприц для жидкостного хроматографа на 50—100 мкл Насос водоструйный Пипетки мерные на 1.0; 2.0; и 5.0 мл Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный

Стаканы стеклянные на 100—500 мл Аллонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Днапак-Амин. Диапак-С. Диапак-С16.

2.3. Подготовка к определению

2.3.1.    Подготовка и кондиционирование колонки

для жидкостной хроматографии Хроматографическую колонку Symmetry Shield RP18 устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 25 °С и скорости потока подвижной фазы 1 мл/мин 3—4 ч.

2.3.2.    Приготовление стандартных растворов Взвешивают 100 мг Пираклостробина в мерной колбе объемом

100 мл. Навеску растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом (стандартный раствор с концентрацией Пираклостробина 1,0мг/мл). Затем 1,0 мл стандартного раствора с концентрацией 1.0 мг/мл отбирают пипеткой в мерную колбу объемом 100 мл и доводят объем до метки ацетонитрилом при перемешивании (стандартный раствор с концентрацией Пираклостробина 10.0 мкг/мл). Стандартные растворы можно хранить в холодильнике в течение трех месяцев. Методом последовательного разведения ацетонитрилом готовят растворы, содержащие по 5.0; 2.0; 1,0; 0,5; 0.2 и 0.1 мкг/мл. и используют их для хроматографического поведения и внесения в контрольные образцы.

9

2.3.3. Приготовление растворов для ж идкостной хроматографии Для приготовления подвижной фаты используют свсжспсрсгнан-ные ацетонитрил и очищенную воду.

Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ В плоскодонную колбу объемом 1 л помещают 600 мл ацетонитрила. 300 мл очищенной воды и 1 мл ледяной уксусной кислоты. Смесь тщательно перемешивают, пропускают через нее газообразный гелий со скоростью 20 мл/мин в течение 5 мин. после чего помещают в ультразвуковую ванну для удаления растворенных газов на 1 мин.

2.3.4. Построение ка пи бровочного графика Для построения калибровочного графика вводят в хроматограф последовательно 3 раза по 20 мкл каждого из стандартных растворов, содержащих Пнраклостробнн с концентрациями 1.0; 0.5; 0.2 и 0.1 мкг/мл, измеряют площадь пиков, рассчитывают среднее значение площади пика для каждой концентрации и строят график зависимости площади пика от концентрации Пнраклостробина.

2.3.5. Подготовка концентрирующего патрона Диапак-С для очистки экстракта Все процедуры происходят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон нс должна превышать 5 мл/мин.

Патрон Днапак-С устанавливают на аллонж с отводом для вакуума, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Люер объемом нс менее 10 мл (используют как емкость для элюентов).

Кондиционирование: концентрирующий патрон промывают последовательно 10 мл смеси гексан-ацетон в соотношении 1 : 1 и 10 мл гексана. Элюат отбрасывают.

Нельзя допускать высыхания поверхности патрона!

2.3.5.1. Проверка хроматографического поведения Пнраклостробн-на на концентрирующем патроне Диапак-С.

Из стандартного раствора Пнраклостробина в ацетонитриле, содержащего 1 мкг/мл. отбирают 1 мл. помещают в круглодонную колбу объемом 100 мл и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре нс выше 30 °С. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, помещают на 10 с в ультразвуковую ванну и тщательно обмывают стенки ко н центр это ра. Затем в концентратор добавляют 9 мл гексана, смесь тщательно перемешивают и полу ченный раствор вносят на патрон. Элюат собирают в концентратор, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в 2 мл ацетонитрила и хроматографируют. Концентратор тщательно обмывают двумя порциями по 10 мл смеси гсксан-