Государственная система санитарно-эпидемиологического нормирования _ Российской    Федерации___

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний МУК 4.1.1802—4.1.1820—03;

4.1.1822—4.1.1826—03

Выпуск 5

Издание официальное

Москва • 2007

УТВЕРЖДАЮ

1 лавныи государственный санитарным врач Российской/Федерации,

Первый заместитель мшметра здравоохранения Российр^М Федерации

(Г.Г. Онищенко

\Ш4-еЗ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по измерению концентраций спироксамнна в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии

Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации спироксамнна в диапазоне 0,1 - 1,0 мг/м³.

Спироксамин - действующее вещество препарата ФАЛЬКОН, КЭ(25 г/л спироксамнна + 167 г/л тебухоназола + 43 г/л триадименола), фирма производитель Байер КропСайенс ГмбХ, Германия.

8-третбутил-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-2-ил-мегил(этил)(проиил)амин (IUPAC).

^СН₃ CHJ

'СНг—N-CHj—СН₂-СН₃

C,eH₃₅N0₂.

Молекулярная масса 297,5.

Существует в виде смеси диастсрсоизомсров 1:2=49-56% : 51-44%. Ниже приведены (если не указано особо) свойства для смеси диастереоизомеров.

Вязкая жидкость бледно желтого цвета без запаха. Температура кипения 120°С при 6,7 Ра. Давление паров 9.7 шРа (20 °С) и 17 mPa (25^WC) для изомеров 1 и 2, соответственно.

Хорошо растворим в органических растворителях. Растворимость при 20°С в ацетоне, ацетонитриле, дихлормстане, гексане, пропаноле, толуоле более 200 г/л.

Растворимость в воде при 20 °С (r/л): при pH 3 - > 200; при pH 7 - 0,470 (изомер 1) и 0,340 (изомер 2); при pH 9 - 0,014 (изомер 1) и 0,010 (изомер 2).

Коэффициент распределения в системе н-01сганол - вода Ко* lgP = 2,79 (изомер 1) и 2,92 (изомер 2).

Спироксамин не разлагается в течение 30 дней при 25°С в водных растворах с диапазоном pH от 5 до 9. Период полураспада изомера 1 и изомера 2 в водных растворах с pH 2,1 при 37°С 6,1 и 15,4 ч, соответственно. Изомер 1 разрушается при повышенных температурах. Изомер 2 термостабилен.

Значения рК составляют 6,9 как для изомера I, так и для изомера 2.

Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль + пары.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD *>) для крыс: ~595 мг/кг (самцы), > 560 мг/кг (самки); острая дермальная токсичность (LD 50) для крыс > 1600 мг/кг (самцы), - 1068 мг/кг (самки), острая ингаляционная токсичность (LK*o) для крыс — 2772 мг/м³ (самцы), ~ 1982 мг/м³ (самки).

Область применения препарата

Фалькон, КЭ - комбинированный фунгицид широкого спектра действия на посевах зерновых культур и виноградниках, содержит спироксамина 250 мг/л + тебуконазола 167 г/л + триадименола 43 г/л.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) спироксамина в воздухе рабочей зоны - 0,3 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25%, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций спироксамина выполняют методом капиллярной газожидкостной хроматофафии (1"ЖХ) с термоионным детектором.

Коицснфирование спироксамина из воздуха осуществляют на фильтры из пенополиуретана, эксфакцию с фильтра проводят этилацетатом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 3 нг.

Определению не мешают компонснгы препарат инной формы.

г/о

3. Средства измерений, вспомогательные устройства,

реактивы н материалы 3.1. Средства измерений Газовый хроматограф «Кристалл-2000М», ТУ 9443-001-12908609-95 снабженный термоионным детектором (ТИД) с пределом Номер Госреестра детектирования 14516-95 по азоту в азобензоле 5 х 10 '13 г/с. Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104 Микрошприц типа МШ-10М, вместимостью 10 мм3 ТУ 2.833.105 Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО “ОПТЭК", г. Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭА-1 ТУ 25-11-1414-78 Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75 Гермометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1°С, пределы измерения 0 - 55°С ТУ 215-73Е Колбы мерные вместимостью 100 ГОСТ 1770 Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0,2,0, 5,0, 10 см3 ГОСТ 29227

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Спироксамин с содержанием действуюшсго вещества 97,3% (Байер, Германия)

и-Гексаи, хч    ТУ-6-09-3375-78

Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат), ч    ГОСТ 22300

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс    ТУ 64-! -2851 -78

Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм    ГОСТ 25336

Груша резиновая

Колбы грушевидные на шлифе вместимостью 100 см³ ГОСТ 10394 Колонка капиллярная НР-50, длиной 30 м. внутренним

Л/Zs

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят очистку гексана и этилацетата (при необходимости), приготовление растворов, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7. /. Очистка этилацетата

Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористою кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.2. Очистка и-гексана

Растворитель промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.3. Приготовление градуировочных растворов

7.3.1.    Исходный раствор спироксамина для градуировки (концентрация 100

мг/см³)    В мерную колбу вместимостью 100 cm^j помещают 0,01 г спироксамина,

доводят    до метки гексаном, тщательно перемешивают. Раствор хранится в

холодильнике не более 3-х месяцев.

Растворы N? 1-4 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного расгвора.

7.3.2.    Рабочие растворы №1-4 спироксамина для градуировки

(концентрация 3.0-20 мкг/см³)    В    4    мерные    колбы    вместимостью    50    см³

помешают по 1.5, 3.0, 5.0 и 10.0 см³ стандартного раствора с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.3.1), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 1 - 4 с концентрацией спироксамина 3.0,    6.0,    10.0 и 20.0

мкг/см³, соответственно, что соответствует концентрации изомера № 1 и изомера № 2 спироксамина по 1.5; 3-0; 5.0 и 10.0 мкг/см³.

Растворы хранятся в холодильнике в течение 7-ми дней.

7.4. Приготовление фильтров из пенополиуретана для обора проб воздуха

Из пенопоиурстана вырезают фильтр толщиной 2 - 2,5 мм, диаметром 48-50 мм, соотвстсвующим внутреннему диаметру фильтродержателя. Фильтр 3 раза промывают этилацетатом порциями по 25-30 см³ на воронке Бюхнера, сушат с помощью

разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре.

7.5. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 “ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны”.

В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 минут с объемным расходом 4-6 дм³/мин через фильтр из пенополиуретана, помещенный в фильгродсржатель.

Для измерения концентрации спироксамина на уровне 0,5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 20 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4°С -    10

дней.

7.6. Установление градуировочной характеристики

Градуировочные характеристики, выражающие зависимость площадей пиков (отн. единицы) от концентрации изомеров № I и № 2 спироксамина в расгворс (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№ 1 - 4.

В испаритель хроматофафа вводят по 1 мм³ каждого фадуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.6.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков изомеров № 1 и № 2 спироксамина.

7.6.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Колонка капиллярная НР-50, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, толщина пленки сорбента 0,25 мкм

Температура детектора: 350°С испарителя: 260°С

Программированный нагрев колонки: 240°С (4 мин), от 240 до 270 °С со скоростью 10 фадУмин, 270°С (2 мин).

Скорость воздуха 200 см³ /мин; водорода 11,2 см³/мин; газа 3 (азот) 30 см³/мин

Z/Y

Скорость газа 1 (азот): 35 см/сек, давление 164,39 кПа, поток 1,8062 см³/мин, деление потока 1 : 5,536, сброс 10см³/мин Хроматографируемый объем: 1 мм³

Ориентировочное время выхода изомера №1 спироксамина: 2 мин 46 сек;

изомера № 2 спироксамина: 2 мин 57 сек Линейный диапазон детектирования: 1,5-10 нг (по каждому из изомеров) Образцы, даюшие пики, большие, чем стандартный раствор спироксамина с концентрацией 20 мкг/см³, разбавляют гексаном.

Градуировочный [рафик проверяют ежедневно по анализу 2-х стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более, чем на 7 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабо«те стандартные растворы.

8. Выполнение измерений Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ этилацетата, помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями этилацетатаа объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испари теле при температуре бани не выше 45°С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 1 см³ гексана и анализируют при условиях хроматофафирования, указанных в н. 7.6.1.

Пробу вводят в инжектор хроматофафа не менее двух раз. Устанавливают площади пиков изомера № I и изомера № 2, с помощью фадуировочного графика определяют концентрацию изомеров спироксамина в хроматофафируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию спироксамина в пробе воздуха рабочей зоны X, мг/м³, рассчитывают по формуле:

Х= (С, + С₂)* W/V₂₀, где

я/я

С| и С2 - концентрация изомеров № 1 и № 2 спироксамина (соответственно) в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V20    - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к

стандартным (давление 760 мм рт.ст., температура 20° С) условиям

V₂₀= 0,386 *Р* ut/(273+T),

где Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град.С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст. и - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин, t - длительность отбора пробы, мин.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации спироксамина в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

10. Оформление результатов измерений

За результат анализа ( X) принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений Х| и Х₂ (X = (Х| + Х₂)/2), расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля    сходимости    (d):    |    Х|    -

X₂Ud.

d-d _am * X/100, мг/м³, где d -норматив оперативного кон троля сходимости, мг/м³;

d от - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 15%). Результат количественного анализа представляют в виде:

• результат анализа X (мг/м³), характеристика погрешности б, %, Р = 0,95 или Х± А мг/м³, Р - 0,95, где

6 ОС

loo ’

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и

погрешность.

Я/ff

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

12. Разработчики

Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Рогачева С.К. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмала, г. Мытищи Московской обл.).