УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Первый заместитель министра здравоохранения Россиэдвд Феде|ации

_    Г Г. Онищенко

fill** ^МУ4 4.1

Дата введения. ^    щц.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по измерению концентраций просульфурона в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации просульфурона в диапазоне 0,1 - 1,0 мг/м³.

Просульфурон - действующее вещество препарата Пик (750 г/кг), ВДГ , фирма производитель ООО Сингента, Россия.

1 -(4-метокси-6-метил-1,3,5-триазин-2-ил)-3-[2-(3,3,3-трифторпропил)фенил-сульфонил]мочевина (ЩРАС)

СН

/Г\    N ={

(' y-SOjNHCONH -<\ N

М    М

ch₂ch,cf₃    осн₃

c,5H,₆f₃n₅04S Мол. масса 419,4

Крисгалличсское вещество белого цвета, без запаха Температура плавления: 155°С (с разложением). Давление паров при 25°С < 3,5*10'³ мПа. . Растворимость в органических растворителях при 25⁰С (г/л): ацегон - 160; гексан - 0,0064, дихлорметан - 180; н-октанол - 1,4; толуол -6,1; этанол - 8,4; этилацетат - 56. Растворимость в воде при 25°С (pH 4,5) - 29 мг/л Вещество быстро гидролизуется

zoo

при pH5, DTso 5-10 дней (20°С), очень медленно - при pH 7 и 9. Не подвержено фотолитическому разложению

Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD ») для крыс- 986 мг/кг; для мышей 1247 мг/кг, острая дермальная токсичность (LD ») для кроликов 2000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (ЬК₅₀) для крыс > 5000 мг/м¹.

Область применения препарата

Просульфурон рекомендуется в качестве гербицида для борьбы

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) просульфурона в воздухе рабочей зоны - 0,6 мг/м¹ .

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25%, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций просульфурона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование просульфурона из воздуха осуществляют на бумажные фильтры “синяя лента”, экстракцию с фильтра проводят этанолом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг.

Определению нс мешают компоненты препаративной формы

nos

г. Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭА-1 ТУ 25-11-1414-78 Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1°С, пределы измерения 0 - 55°С ТУ 215-73Е Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 см3 ГОСТ 1770 Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см3 ГОСТ 29227 Пробирки градуированные вместимостью 5 или 10 см3 ГОСТ 1770 Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 500 и 1000 см3 ГОСТ 1770 Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. 3.2. Реактивы Просульфурон с содержанием действующего вещества 99,5% (Сингента) Ацетонитрил для хроматографии, хч ТУ-6-09-4326-76 Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная над КМп04 ГОСТ 6709 Метиловый спирт (метанол), хч ГОСТ 6995 Этиловый спирт (этанол) ГОСТ Р 51652 Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией 3.3. Вспомогательные устройства, материалы Бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные ТУ 6-09-2678-77 Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм Г руша резиновая ГОСТ 25336 Колбы грушевидные на шлифе вместимостью 100 см3 ГОСТ 10394 Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 250 см3 Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм ГОСТ 9737 Насос водоструйный ГОСТ 10696 Пробирки центрифужные ГОСТ 25336

ZO&

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ТУ 25-11-917-74 ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi,

Швейцария

Стаканы химические, вместимостью 100 см³    ГОСТ    25336

Стекловата

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Холодильник водяной, обратный    ГОСТ    9737

Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см,

внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100

С18, зернением 7 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50-100 мм³

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками

4. Требования безопасности

4.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1005-88.

4.2.    При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требовании к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводя! при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности нс более 80%.

яоб

• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят о условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пенгоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия

7.2. Приготовление 0,01 М раствора орто-фосфор пой кислоты

Для приготовления 0,01 М раствора орто-фосфорной кислоты в мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 0,69 см³ орто-фосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.3. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 450 см³ 0,01 М орто-фосфорной кислоты, добавляют 550 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.4. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (п. 7.3.) в течение 30 минут при скорости подачи растворителя 1,0 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.5. Приготовление градуировочных растворов

7.5.1. Исходный раствор просу л ь фурона для градуировки (концентрация 1 мг/см³) В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,1 г просульфурона, доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике не более 3-х месяцев.

Растворы № 1-5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного епшдартного раствора.

ZO</

7.5.2.    Раствор № I просулъфурона для градуировки (концентрация 10 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ исходного стандартного

раствора просульфурона с концентрацией 1 мг/см³ (л.    7.5.1), разбавляют

ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.5.3.    Рабочие /метеоры ЛЬ 2 -5 просульфурона для градуировки (концентрация 0.1 - 1.0 мкг/см³) В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1.0, 2.5, 5.0 и 10.0 см³ стандартного раствора №1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.5.2.), доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по п. 7.3.), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2 - 5 с концентрацией просульфурона 0.1, 0.25, 0.5 и 1.0 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике в течение недели

7.6. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 “ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны”.

В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 минут с объемным расходом 1-5 дм³/мин через бумажный фильтр “синяя лента”, помещенный в фильтродсржагсль.

Для измерения концентрации просульфурона на уровне 0,5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1,7 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при -М°С -    5

дней.

7.7. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации просульфурона в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м расгворам для градуировки 2-5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п 7.7.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика просульфурона.

7.7. /. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18, зернением 7 мкм.

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: 0,01 М орто-фосфорная кислота -ацетонитрил (45:55, по объему)

Скорость потока элюента: 1,0 см³/мин

Рабочая длина волны: 240 нм

Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы: 20 мм³

Ориентировочное время выхода просульфурона: 6,7 - 6,9 мин

Линейный диапазон детектирования: 2-20 иг

Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор имазамокса с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п. 7.3).

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2-х стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более, чем на 6% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы. ²

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию просульфурона в пробе воздуха рабочей зоны X, мг/м³, рассчитывают по формуле:

X = C*W/V_w, где

С - концентрация просульфурона в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V20    - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к

стандартным (давление 760 мм рт.ст., температура 20° С) условиям

V2o= 0,386 *Р* ut/(273+T),

где Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град.С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст и - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин, t - длительность отбора пробы, мин.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации просульфурона в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

10. Оформление результатов измерений

За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений X, и X? (X = (Xi г Х₂)/2), расхождение между которыми не превышаег значений норматива оперативного контроля сходимости (d): I Xj - Х₂1 £ d.

d » d ош. * Х/ЮО, мг/м³, где d -норматив оперативного контроля сходимости, мг/м³;

d о™, -норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 15%). Результат количественного анализа предегавляют в виде:

* результат анализа X (мгУм³), характеристика погрешности б, %, Р = 0,95 или

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

12. Разработчики

Юдина Т В., Федорова НЕ., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл ).

1

Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3. /. Средства измерении Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны

Весы аналитические ВЛА-200    ГОСТ    24104

Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО “ОГ1ТЭК”,

2

Выполнение измерений

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³. заливают 10 см³ этанола, выдерживают 10 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями этанола объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35°С досуха, остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы (подготовленной по и. 7.3 ) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.7.1.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию просульфурона в хроматографируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.