Государственная система санитарно-эпидемиологического нормирования _ Российской    Федерации___

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний МУК 4.1.1802—4.1.1820—03;

4.1.1822—4.1.1826—03

Выпуск 5

Издание официальное

Москва • 2007

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный врач

Первый заместитель ми/истра здравоохранения

.Г. Онищенко

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по измерению концентраций тритосульфурона в воздухе рабочей зоны методом

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации тритосульфурона в диапазоне 0,1 - 1,0 мг/м³.

Тритосульфурон - действующее вещество препарата Серто Плюс, ВДГ (250 г/кг тритосульфурона + 500 г/кг дикамбы), фирма производитель БАСФ, Германия.

Кристаллическое вещество белого цвета без запаха. Температура плавления: 166,5 - 169,4°С. Давление паров при 20°С : 1 х 10⁷ мбар. Растворимость в органических растворителях: хорошо растворим в ацетоне (25-30 г/100 см³), умеренно растворим в метаноле (2,3 г/100 см³), дихлорметане (2,5 г/100 см³), этилацетате, (8,3-8,6 г/100 см³) ацетонитриле (9,0-9,4 г/100 см³); не растворим в н-гептанс. Растворимость в ноле при 20°С: 0,04 г/л (деионизованная вода), 78,32 г/л (pH 10,2); 0,001 г/л (pH 1,7). Стабилен я водных растворах при 25°С с темноте; не стабилен при температуре выше 50°С, в кислой и щелочной средах.

Лфсгатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD 50) для крыс: 4700 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD 50) для крыс > 2000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LKso) для крыс > 5700 мг/м³.

Область применения препарата

Препарат Серто Плюс, ВДГ (250 г/кг тритосульфурона + 500 г/кг дикамбы) рекомендуется в качестве высокоизбирательного комбинированного послевсходового гербицида системного действия для борьбы с однолетними двудольными сорняками в посевах зерновых колосовых культур при однократном назеном опрыскивании в период вегетации.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) тритосульфурона в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25%, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций тритосульфурона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хромато(рафии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование тритосульфурона из воздуха осуществляют на бумажные фильтры “синяя лента”, экстракцию с фильтра проводят ацетоном.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг.

Определению нс мешают компоненты препаративной формы.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы н материалы

3.1. Средства измерений Жидкостной хроматофаф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны

Весы аналитические ВЛА-200    ГОСТ 24104

Пробоо сборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО “ОПТЭК”, г.

Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭЛ-1 ТУ 25-11-1414-78

/ЯЛ

Ьирометр-анероид М-67    ТУ    2504-1797-75

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1°С, пределы измерения 0 - 55°С ТУ 215-73Е Колбы мерные вместимостью 100 и 1000 см3 ГОСТ 1770 Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0,2,0, 5,0, 10 см3 ГОСТ 29227 1 {робирки 1радуированные вместимостью 5 или 10 см3 ГОСТ 1770 Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 500 и 1000 см3 ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы Тритосульфурон с содержанием действующего

вещества 98,0% (БАСФ, Германия) Ацетон, осч ГОСТ 2603 Ацетонитрил для хроматографии, хч ТУ-6-09-4326-76

Иода бидистиллированная, деионизованная или ГОСТ 6709

перегнанная над КМПО4 Кислота орто-фосфорная, ч., 85%

ГОСТ 6652

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные    ТУ    6-09-2678-77

Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм	ГОСТ 25336
Груша резиновая Колбы грушевидные на шлифе вместимостью 100 см3 Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм	ГОСТ 10394
I Inc ос водоструйный	ГОСТ 10696
Н|юбирки центрифужные	ГОСТ 25336

Ректификационная колонна с число теоретических колонок нс менее 30

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ТУ 25-11-917-74

ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi,

Швейцария

Стаканы химические, вместимостью 100 см³    ГОСТ    25336

Стекловата

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Холодильник водяной, обратный    ГОСТ    9737

Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см,

внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100

С18, зернением 7 мкм (ЭЛСИКО, Россия)

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50-100 мм³

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОС Ту 12.1005.

4.2.    При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию нс ниже лаборанта-исследоватсля, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила и ацетона (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением пцетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2. Очистка ацетона

Растворитель сушат над молекулярными ситами 4А и подвергают фракционной перегонке на ректификационной колонне, целиком собранной из стекла с числом теоретических тарелок не менее 30. Сосуд для перегонки погружают в водяную баню и через приемник пропускают медленно струю сухого азота. Затем температуру водяной бани повышают до 70 • 75°С и прибор промывают парами ацетона, после чего холодильник заполняют водой. До начала отбора главной фракции приемник несколько put промывают дистиллятом. Перегонку продолжают до тех пор, пока в сосуде для перегонки не останется приблизительно 100 см³ ацетона. Температуру водяной бани следует снижать по мере уменьшения объема ацетона, во всех случаях она нс должна превышать температуру кипения ацетона более чем на 20°.

7.3. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

И мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 450 см³ дистиллированной полы. 1 см³ орто-фосфорной кислоты, добавляют 550 см³ ацетонитрила, подмешивают, фильтруют и дегазируют.

7.4. Кондиционирование хроматографической колонки

11роммвают колонку подвижной фазой (п. 7.3.) в течение 30 минут при скорости молили растворителя 1,0 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.5. Приготовление градуировочных растворов

1.5.1. Исходный раствор тритосульфурона для градуировки (концентрация 1 «.•/<• «*) И мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,1 г тритосульфурона,

доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике не более месяца.

Растворы № 1-5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.

7.5.2.    Раствор N$ 1 тритосульфурона для градуировки (концентрация 10 мкг/см³) В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ исходного стандартного раствора тритосульфурона с концентрацией 1 мг/см³ (п. 7.5.1.), разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в 7-ми дней.

7.5.3.    Рабочие    растворы    №    2-5 тритосульфурона    для

градуировки (концентрация 0.1 - 1.0 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помешают по 1.0, 2.0, 5.0 и 10.0 см³ стандартного раствора №1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.5.2.), доводят до мет ки подвижной фазой (подготовленной по п.

7.3.), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы .№№ 2 - 5 с концентрацией тритосульфурона 0.1, 0.2, 0.5 и 1.0 мкг/см³, соответственно.

Растворы готовятся и используются в день анализа.

7.6. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 “ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны”.

В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируюг в течение 5 минут с объемным расходом 1-5 дм³/мин через бумажный фильтр ‘‘синяя лента”, помещенный и фильтродержатсль.

Для измерения концентрации тритосульфурона на уровне 0,5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать I дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4°С -    10

дней.

7.7. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации тритосульфурона в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки N«Ns 2-5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.7.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика тритосульфурона.

7.7.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18 , зернением 7 мкм.

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил - вода - орто-фосфорная кислота (550:450:1, по объему)

Скорость потока элюента: 1,0 см³/мин Рабочая длина волны: 230 нм Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу Объем вводимой пробы: 20 мм³

Ориентировочное время выхода тритосульфурона: 8,12-8,21 мин Лииейкый диапазон детектирования: 2 - 20 нг

Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор тритосульфурона с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п.

7.3).

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2-х стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более, чем на 7 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

8. Выполнение измерений Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ ацетона, помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35°С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы (подготовленной по п. 7.3.) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.7.1.

Пробу вводят в инжектор хроматшрафа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию тритосульфуроиа в хроматографируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию тритосульфуроиа в пробе воздуха рабочей зоны X, мг/м³, рассчитывают по формуле:

X = С • W/V20, где

С - концентрация тритосульфуроиа в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V₂₀    - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к

стандартным (давление 760 мм рт.ст., температура 20° С) условиям

V₂₀= 0,386 *Р* ut/(273+T),

где Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град.С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст. и - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин, t - длительность отбора пробы, мин.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации тритосульфуроиа в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хромато!-рафических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

10. Оформление результатов измерений

За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений Х| и Х₂ (Х=(Х| + Х₂)/2), расхождение между которыми нс превышает значений норматива оперативного ко1ггроля    сходимости    (d):    I    Х|    -

X₂|sd.

d ” d <лм. * X/100, мг/м³,

где d -норматив оперативного контроля сходимости, мг/м³;

d от - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 15%).

Результат количественного анализа представляют в виде:

• результат анализа X (мг/м³), характеристика погрешности 5, %, Р *= 0,95 или Х±Д мг/м³, Р“ 0,95, где

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

12. Разработчики

Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).