Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКЕТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.1417 - 03; 4.1.1421 - 4.1.1425 -03; 4.1.1473 - 4.1.1477 - 03; 4.1.1785 - 4.1.1792 - 03

Выпуск 3 Част ь 9

Издание официальное

Москва • 2007

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный врач Российркой Федерации,

Первый заместитель ЬЯинисгракдраноохранення PQt^R^KOH Федерации

Г Г. Онищенко

Дата введения: /V. 01 t<&fi

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по измерению концентраций цинидон-этила в воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и высокоэффективной жидкостной хроматографии

1. ВВОДНАЯ ЧАСТЬ

Фирма производитель: БАСФ (Германия)

Торговое название: ЛОТУС Д Действующее вещество: цинидои-этил

(Х)-Этил-2-хлор-3-(2-хлор-5-(1,3-диоксо-4,5.6,7-тетрагидроизоиндол-2-ил)фо1сил] акрилат (IUPAC)

Эмпирическая формула: С^ИпС^ЖД Молекулярная масса: 394,2

Кристаллическое вещество белого цвета без запаха Температура плавления: 112,2 - 112,7°С Давление паров при 20“ С : менее 1,0*10'⁷ мбар

Растворимость в органических растворителях при 25°С (г/дм³): ацетон, зтилацетат, толуол - 100-200; метанол - 5-10; дихлормеган - более 200, н-юнтан -1.0-2,0. Растворимость в воде - 0.057 мг/дм³.

/&?

4. Кош роль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

5. Разработчики

Юдина Т.Н., Федорова ll.li., Волчек СИ., Волкова В.Н., (Московский КИИ гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана. г Мытищи Московской обл.)

Ю

яг

Цинидон-отил не сгабилен и полных растйорах при pH 3-5, 7 и 9.

Период полураспада вещества в почве 4 - 4,5 дня.

Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (Ш50) для крыс - более 2000 мг/кг, острая дермальная токсичность (LDso) Для крыс - более 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LKj,o) для крыс - 5,3 мг/л.

Область применении препараi а

Цииидон-этил - гербицид системною действия из группы производных акриловой кислоты, подавляет развитие двудольных сорняков в посевах зерновых колосовых кулыур.

Проходит регистрационные испытания в России и странах СИГ* под торговым названием Лотус Д, К.Э., комбинированный препарат, содержащий цинидон-этил (50 г/дм³) и 2,4-Д в виде изооктилового эфира (633 г/дм³).

Ориентировочно безопасный уровень воздействия (ОБУВ) и воздухе рабочей зоны - 0.8 мг/м³, в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м³.

2. МЕТОДИКА ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЦИНИДОН-ЭТИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

2.1.    Основные положения

2.1.1.    Принцип методики

Методика основана на определении цинидон-этила методом газожидкостной Хроматографии (ГЖХ) с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов или высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.

(>|бор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры “синяя лепта'*. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2

4F6

2.1.2.    Избирательность метода

В предлагаемых условиях метол специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в том числе 2,4-Д изооктиловот эфира.

2.1.3.    Метрологическая характеристика метода (F - 0,95)

Число параллельных определений: 6

Предел обнаружения и хроматографируемом объеме:    0,1    нг (измерение по п.

2.7.1., ГЖХ) и 2 нг (измерение по п. 2.7.2., ВЭЖХ).

Предел обнаружения в воздухе (при отборе 10 дм¹): 0,05 мг/м ¹ Диапазон определяемых концентраций: 0,05 - 0,5 мг/м¹ Среднее значение определения: 98%.

Стандартное отклонение (S): 6,89% (1~ЖХ), 2,20% (ВЭЖХ).

Относительное стандартное отклонение (DS): 2,81% (ГЖХ), 0,90% (ВЭЖХ), Доверительный интервал среднего: ± 7,22 (ГЖХ), ± 2,31% (ВЭЖХ),

Суммарная погрешность измерения не превышает 20% (ПКХ), 12% (ВЭЖХ).

2.2. Реактивы, рас шоры и материалы

Цинидон-этил с содержанием д.в. 99,6%, (БАСФ, Германия)

Азот особой чистоты, из баллона, ГОСТ 9293-79 Ацетон, ч, ГОСТ 2603-79

Ацетонитрил для хроматографии, хч, ТУ 6-09-4326-76 Вода бидистиллированная или деионизованная п-Гокеан, хч, ТУ 6-09-4521-77 Метиловый спирт, хч, Г ОСТ 6995-77 Этиловый эфир уксусной кислоты, ч, ГОСТ 22300-76 Инсртон N-AW-DMCS с 5% Г-301 (0,16 -0,20 мм)

Бумажные фильтры “синяя лента”, обеззоленные, ТУ 6-09-2678-77, предварительно промытые последовательно этанолом, затем этилацетатом или ацетоном.

Стекловата

2.3. Приборы, аппаратура, посула

Газовый хроматограф “Цвет” или аналогичный, снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР) с пределом детектирования по линлану 4 х 10 ¹¹ т/см³

Хроматографическая колонка стеклянная, длиной 1 м. внутренним диаметром 3

мм

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Perkin-Elmcr (США) или аналогичный

Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4 мм. содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм.

Микрошприц типа MIJJ-IM , ГУ 2.833.105, вместимостью 1 мкл Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50 -100 мкл

Аспирационное устройство типа ЭА-1.ТУ 25-11-1414-78. или аналогичное Барометр. ТУ 2504-1797-75.

Весы аналитические типа BJ1A-200, ГОСТ 34104-80Е Насос водоструйный, I ОСТ 10696-75

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76 или аналогичный Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления I ° С, пределы измерения 0-55° С. 1 ОСТ 215-73Е

Воронки химические, конусные, диаметром 34-40 мм, ГОС Г2533682 Е Колбы грушевидные со шлифом, ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл. Колбы мерные. ГОСТ 1770-74, вместимостью 50 и 100 мл.

Пинетки. I ОСТ 20292-74, вместимостью 1,2 и 5 мл.

Цилиндры мерные, I TXT 1770-7412, вместимостью 10. 50 н 250 мл.

Пробирки центрифужные. ГОС! 25336-82Е

Ректификационная стационарная установка РУ Г, ТУ 25-11-1103-75 Стаканы химические. ГОСТ 25336-82П, вместимостью 100 мл Груша резиновая Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении Фи л ьтроаержа гел и

2.4.Отбор проб

№

Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 “ССБТ. Общие саиитарно-гигисничсскис требования к воздуху рабочей зоны”.

В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 2-4 дм³/мин аспирируют в течение 5 мин через фильтр “синяя ленча”, помещенный в фильтродсржагсль.

Для измерения концентрации цинидон-тгила 0,05 мг/м³ необходимо отобрать 10 дм³ ооздуха.

Филыры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в холодильнике при температуре 4-6° С в течение 20-ти дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1.    Подготовка органических раствори гелей

2.5.1.1.    Очистка аиетоии грнла

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над иентоксидом фосфора нс менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

2.5.1.2.Очистка ацетона

Растворитель сушат над молекулярными стами 4А и подвергают фракционной перегонке на ректификационной колонне, целиком собранной из стекла с числом теоретических тарелок нс менее 30. Сосуд для перегонки погружают н водяную баню и через приемник пропускают медленно струю сухого азота. Затем температуру водяной бани повышают до 70 - 75°С и прибор промывают нарами ацетона, после чего холодильник заполняют водой. До начала отбора главной фракции приемник несколько раз промывают дистиллятом. Перегонку продолжают до чех пор, пока в сосуде для перегонки не останется приблизительно 100 см³ ацечона. Температуру водяной бани следует снижать по мере уменьшения объема ацетона, во всех случаях она нс должна превышать температуру кипения ацетона более чем на 20 °.

2.5.1.3. Очистки гексана

Гексан встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до чех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем гексан последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.

159

2.5.1.4. О чист к а зти л ацетата

')ти л ацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

Необходимую чистоту расгнорителя можно достичь перегонкой коммерческого зтнланстата на ректификационной колонне с числом теоретических тарелок нс менее

50.

2.5.2. Метод 1ЭКХ. Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (5% !'-301 на Лпертоне N-AW-DMCS) засылают в сгсклянную колонку, предваритслыю промытую последовательно этиловым спиртом, ацетоном и гексаном, уплотняют иод вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детек тору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 “С в течение 16-20 часов

2.5.3.    Мет од ВЭЖХ

2.5.3.1. Подгот овка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью ЮОО мл помещают 50 мл метиловою спирта. 300 мл бидистиллированиой воды и 650 мл ацетонитрила, переманивают, фильтруют и дегазируют.

2.5.3.2.    Кондиционирование колонки

11роммвают колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил - метанол - вода, (65 : 5 : 30. но объему) в течение 30 - 45 мин при скорости подачи растворителя 1 мл/мин до получения стабильной базовой линии.

2.5.4.    Приготовление стандарты* растворов

Стандартный раствор цииидон-этила с содержанием 1 mi/мл готовят растворением 0,0500 г вещества к этилацстагс (измерение по п. 2.7.1., I7KX) или ацетонитриле (измерение по п и. 2.7.2., ВЭЖХ) в мерной колбе на 50 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Для нриютовления стандартною раствора цинидон-этила с содержанием 10 мкг/мл в мерную колбу вместимостью 100 мл помещают I мл основного стандартного раствора (I мг/мл), доводят объем до мет ки гексаном (измерение по н.

6

'i^O

2.7.1., ГЖХ) или ацетонитрилом (измерение по п и. 2.7.2., ВЭЖХ). Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,1; 0,2; 0,3; 0,5 и 1,0 мкг/мл готовят путем последовательного разбавления раствора, содержащего 10 мкг/мл цинидон-этила в гексане или ацетонитриле, гексаном (измерение но п. 2.7.1., ГЖХ) или подвижной фазой для ВЭЖХ (измерение но и п. 2.7.2.. ВЭЖХ). Растворы хранятся в холодильнике в течение 3-х дней.

2.5.5. Построение градуировочною графика

Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводит по20мкл (ВЭЖХ) или 1мкл (ГЖХ) рабочих стандартных растворов цинидон-этмла с концентрацией 0,1; 0,2; 0,3; 0,5 и 1,0 мкг/мл.

Осуществляют нс менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты (ГЖХ) или площади (ВЭЖХ) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (Л или В) зависимости высоты или площади хроматографического пика (в мм или относительных единицах, соотвсгствснно) от концентрации ципидон-этила в растворе (в мкг/мл).

2.6.0писинне определения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл. заливают 10 мл этилацегата или смеси гексан-ацетон (9:1, но объему), оставляют па 5-7 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями этилацегата (или смеси гексан-ацетон, 9:1) объемом 10 мл.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани 40 -45° С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 мл гексана ( измерение по п. 2.7.1., ГЖХ) или подвижной фазы для ВЭЖХ (измерение по н. 2.7.2., ВЭЖХ ), центрифугируют или фильтруют через слой стекловаты, помещенный в конусную химическую воронку, и хроматографируют.

7

2.7. У слови я хроматографировании

2.7.1.    ГЖХ

Хромагофаф газовый “Цвст-560*’ с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов

Колонка стеклянная длиной 1 м. внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% П-301 па Инертоне N-AW-DMCS (0,16 -0.20 мм)

Рабочая шкала электрометра 64*10 ¹⁰ ом Скорость движения ленты самописца 200 мм/час Температура термостата колонки - 270° С детектора - 350“ С испари юля -290® С Скороегь газа-иоситсля (азота) - 30 ± 2 мл/мин Объем вводимой пробы - 1 мкл Время выхода цинидон-этила - 3 мин 15 сек Линейный диапазон детектирования: 0.1 - I нг

Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1 мкг/мл, разбавляют юксаном.

2.7.2.    ВЭЖХ

Жидкое той хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Perkin-Klmcr (США)

Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза: ацетонитрил - метанол - вода (65 : 5 : 30, по объему)

Скорость потока элюента: ! мл/мин Рабочая длина волны: 236 нм Чувствительность: 0,01 сд. абсорбции на шкалу Объем вводимой пробы: 20 мкл 13рсмм выхода цинидон-этила: 6,49 - 6,52 мин Линейный диапазон детектирования: 2 - 20 иг

8

At

Образцы, лающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1,0 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой дня ВЭЖХ.

ПРИМЕЧАНИЮ - Время удерживания 2,4-Д изооктилового эфира (компонента препаративной формы Лотус Д) составляет 28*3 - 28,4 мин, поэтому при анализе натурных образцоп последующую пробу необходимо вводить в инжектор хроматографа нс ранее чем через 30 мин.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание цинидон-эгила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

X - С ♦ W/ V , где X - содержание цинидон-эгила в пробе воздуха, мг/мЗ;

С - концентрация цинидон-этила в хроматофафирусмом растворе, найденная по градуировочному графику, мкг/мл;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматофафировании, мл;

V - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт.сг., температура 20 ° С), дм ³.

V= 0,386 *Р* u(/(273 W), где Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор). грал.С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст. и - расход воздуха мри отборе пробы, дм³/мин, t - длительность отбора пробы, мим.

З.ТРЕБСШАНИЯ ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ

11собходимо соблюдать требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с “Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпкдемиолшического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы М'З СССР** (N 2455-81 от 20.10.81 г.), а также требования, изложенные в докумен тации па приборы.

9

1