Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны

Сборник методических указаний МУК 4.1.1734-4.1.1754-03

Выпуск 46

Издание официальное

Москва* 2008

МУК 4.1.1735—03

УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

29 июня 2003 г.

Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Спектрофотометрическое измерение

массовых концентраций гепарина натриевой соли в воздухе рабочей зоны

Методические указания _МУК    4,1.1735—03_

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный фотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание гепарина натриевой соли в диапазоне массовых концентраций 0,5—5,0 мг/м³.

2. Характеристика вещества

Гепарина натриевая соль (синонимы: depo-heparin, heparin sodium, liquaemin sodium, sodium heparinate и др.) является гликозаминоглика-ном (мукополисахаридом), т. е. гетерополисахаридом с повторяющимися 4-0-(а-0-глюкуронидо)-0-глюкозамин-Ы-сульфатными звеньями, связанными а-(1->4)-гексозаминидиновыми связями; содержит 1-2-сульфатные группы на дисахаридную единицу.

Гепарина натриевая соль - это эндогенное соединение, синтез и накопление которого происходит в базофильных (тучных) клетках организма человека и млекопитающих.

2.1. Структурная формула

13

Приложение 2 Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям

Давление Р. кПа/мм рт ст. 1°С 97.33/730 97,86/734 98.4/738 98,93/742 99,46746 100/750 100,53/754 101,06/758 101,33/760 101,86/764 -30 1.1582 1,1646 1,1709 1.1772 1,1836 1,1899 1.1963 1,2026 1.2058 1,2122 -26 1.1393 1.1456 1,1519 1.1581 1.1644 1.1705 1.1768 1,1831 1,1862 1,1925 -22 1,1212 1.1274 1.1336 1.1396 1,1458 1.1519 1.1581 1.1643 1.1673 1.1735 -18 1,1036 1,1097 UI58 1,1218 1.1278 1,1338 1.1399 1,1460 1.1490 1.1551 -14 1.0866 1,0926 1,0986 1,1045 1,1105 1,1164 1.1224 1,1284 1,1313 1.1373 -10 1.0701 1,0760 1,0819 1.0877 1.0986 1,0994 1.1053 1,1112 1,1141 1,1200 -6 1.0540 1.0599 1.0657 1.0714 1,0772 1,0829 1,0887 1,0945 1,0974 1.1032 -2 1.0385 1.0442 1.0499 1.0556 1.0613 1.0669 1,0726 1,0784 1,0812 1,0869 0 1.0309 1.0366 1.0423 1.0477 1.0535 1.0591 1.0648 1,0705 1.0733 1,0789 +2 1.0234 1.0291 1.0347 1,0402 1.0459 1.0514 1.0571 1.0627 1.0655 1.0712 +6 1.0087 1.0143 1,0198 1.0253 1.0309 1,0363 1,0419 1.0475 1.0502 1.0557 +10 0,9944 0,9999 0.0054 1,0108 1.0162 1.0216 1.0272 1.0326 1.0353 1.0407 + 14 0.9806 0,9860 0,9914 0,9967 1.0027 1.0074 1.0128 1.0183 1.0209 1.0263 + 18 0.9671 0,9725 0,9778 0,9830 0,9884 0.9936 0,9989 1.0043 1,0069 1.0122 +20 0.9605 0.9658 0,9711 0,9783 0.9816 0,9868 0,9921 0,9974 1.0000 1,0053 +22 0.9539 0.9592 0.9645 0,9696 0,9749 0.9800 0,9853 0.9906 0,9932 0,9985 +24 0.9475 0.9527 0.9579 0,9631 0.9683 0,9735 0.9787 0,9839 0.9865 0,9917 +26 0.9412 0.9464 0.9516 0,9566 0.9618 0.9669 0.9721 0.9773 0.9799 0.9851 '+28 0,9349 0,9401 0.9453 0,9503 0,9555 0.9605 0.9657 0.9708 0.9734 0.9785 +30 0,9288 0,9339 0.9391 0,9440 0.9432 0,9542 0.9594 0.9645 0.9670 0.9723 +34 0.9167 0,9218 0,9268 0,9318 0,9368 0.9418 0,9468 0,9519 0.9544 0,9595 +38 0.9049 0,9099 0,9149 0,9199 0,9248 0,9297 0,9347 0.9397 0.9421 0,9471

МУК 4.1.1734—4.1.1754—03

Приложение 3

Указатель основных синонимов технических, торговых и фирменных названий веществ

Синоним	Стр.
Аминостигмин	29
Лстсмизол	142
Бсмитил	158
Биса коди л	104
Диэтиловый эфир угольной кислоты	67
Кокарбоксилаза	6
Лорасспт	45
1 -Мстокси-2-пропилацстат	97
Напроксен	90
Оротат калия	119
пара-7олуолсульфокислота	60
Прозерин	21
Проксифеин	37
Стрихнина нитрат	111
треш-Бутилгипохлорит	52
Трипропилснфенол	127
Трифснилфосфин	59

2.2.    Эмпирическая формула (СиНпО^ЫБгЫаг),,.

2.3.    Молекулярная масса 12 ООО—16 ООО дальтон.

2.4.    Регистрационный номер CAS 9041-08-1.

2.5.    Физико-химические свойства.

Гепарина натриевая соль - аморфный порошок белого цвета с желтоватым оттенком, без запаха, гигроскопичен. Легкорастворим в воде и изотоническом растворе 0,9 %-го раствора хлорида натрия. В воздухе находится в виде аэрозоля.

2.6.    Токсикологическая характеристика.

Обладает общетоксическим действием.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны - 1 мг/м* .

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций с погрешностью, не превышающей ± 24 %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерение массовой концентрации гепарина натриевой соли выполняется методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на взаимодействии гепарина натриевой соли с толуидиновым синим, при котором происходит сдвиг спектра поглощения в коротковолновую область, вызывая изменение окрашивания раствора от сине-голубого к розовому. Измерение проводят при длине волны 500 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания гепарина натриевой соли в анализируемой пробе (2 см³) - 10 мкг.

Нижний предел измерения концентрации гепарина натриевой соли в воздухе при отборе 100 дм³ воздуха - 0,5 мг/м .

Метод селективен в условиях производства гепарина. Определению не мешают сопутствующие вещества (NaCl).

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы.

14

МУК 4.1.1735—03

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы Спектрофотометр типа СФ-46, длина волны 500

нм

Аспирационное устройство, модель 822 Фил ьтродержате ль Фильтр АФА-ВП-10

Колбы мерные наливные 1 или 2-го исполнения, вместимостью 25, 100, 250 см³ Пипетки 1,2 и 3-т исполнения, вместимостью

1,2, 5, 10 см³

Колбы конические, вместимостью 250 см³ Кюветы оптические с толщиной оптического слоя 10 мм

Дистиллятор

Стаканчики для взвешивания Мешалка магнитная

Весы лабораторные аналитические BJ1A-200 Пробирки конические (центрифужные) на 10 см³ Стеклянная палочка, диаметром 4 мм, длиной 20 см

5.2. Реактивы, растворы Гепарина натриевая соль, ФС 42-1327-94; содержание основного вещества 99 %

Уксусная кислота    ГОСТ 61-75

Тригидрат ацетата натрия    ГОСТ 199-68

Толуидиновый синий, фирма Sigma, США, кат. № Т3260

Вода дистиллированная    ГОСТ 6709

Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данной МВИ.

6. Требования безопасности

6.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2.    При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3.    При выполнении измерений с использованием спектрофотометра или фотоэлектроколориметра соблюдают правила электробезо-

15

пасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, имеющие навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1.    Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 ± 5) °С, атмосферном давлении 84—106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80 %.

8.2.    Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

9.1. Приготовление растворов

9.1.1.    Приготовление буферного раствора (0,2 М, pH 3.7, раствор № 1). Раствор «а» готовят путем растворения 680 мг тригидрата ацетата натрия в 25 см³ дистиллированной воды. Получают 0,2 М раствор тригидрата ацетата натрия.

Раствор «б» готовят путем смешивания 2,9 см³ уксусной кислоты с 247,1 см³ (при этом используют мерную колбу на 250 см³). Получают 0,2 М раствор уксусной кислоты.

Окончательно раствор «а» (25 см³) смешивают в мерной колбе с раствором «б» (225 см³). Получают 0,2 М буферный раствор, pH 3,7. Раствор устойчив неделю при хранении в бытовом холодильнике.

9.1.2.    Приготовление раствора толуидинового синего (0,02 %-й, раствор Ns 2). В 100 см³ буферного раствора разводят 20 mi* толуидино-го синего. Краситель растворяется медленно. Для ускорения раствор можно подогреть до 40—50 °С, кроме того, следует использовать магнитную мешалку. Раствор может храниться неделю в бытовом холодильнике в закрытой посуде.

9.1.3.    Приготовление стандартного раствора гепарина натриевой соли (0,05 мг/см³, раствор Ns 3). Стандартный раствор гепарина натриевой соли готовят путём растворения 5 мг гепарина натриевой соли в 100 см³ буферного раствора (раствор № 1).

Раствор может храниться до суток в бытовом холодильнике.

МУК 4.1.1735—03

9.2. Подготовка прибора

Подттовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации»

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины оптической плотности от массы анализируемого вещества в пробе, взятой для анализа, устанавливают при помощи градуировочных растворов гепарина натриевой соли в соответствии с <*абл. 1.

Таблица 1

№ стан дарта Объем стандартного раствора гепарина натриевом соли, см3 Объем буферного раствора, см3 Концентрация гепарина натриевой ооли, мкг/см3 Содержание тепарина натриевой соли в объеме пробы (2 см3), взятой для анализа, мкг 1 0,0 10,0 0,0 0,0 2 1,6 9,0 5,0 10,0 3 1,5 8,5 7,5 15,0 4 2,5 7,5 12,5 25,0 5 5,0 5\0 £5,0 50,0 6 7*5 2.5 37,5 75,0 7 10,0 0,0 50Д 100.0

Градуировочные растворы готовят непосредственно перед измерениями.

Экстинкцию определяют по отношению к холостой пробе (раствор К® I, табл. 1). График строят, используя б градуировочных растворов с разными концентрациями гепарина натриевой соли* производя по 5 параллельных определений для каждой концентрации.

Каждую серию состоящую из 7 растворов с. разной концентрацией гепарина натриевой соли (включая холостую пробу не содержащую гепарина натриевую соль), готовят э центрифужных пробирках на 10 см³. Для этого в каждую пробирку, содержащую 2,0 ом³ рававора гепарина натриевой соли (в соответствии с таблицей; в случае холостой пробы - 2,0 см³ раствора № 1), добавляют 8 см³ раствора № 2. Растворы перемешивают. Через 5 мцкможно фотомотрировать.

Фотометрирование проводят на длине водны 500 нм. Толщина слоя раствора в спектрофотометрической кювете - 10,0 мм. Ширина щели спектрофотометра -1,0.

Градуировочные растворы устойчивы в течение 2 ч.

17

Проверку градуировочной характеристики проводят 1 раз в 3 месяца или в случае смены партии реактивов, оборудования или приборов.

9.4. Отбор проб воздуха Воздух с объемным расходом 20 дм³/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для определения /г ПДК гепарина натриевой соли следует отобрать 100 дм³ воздуха. Пробы могут храниться на фильтре в бюксе в течение 2 недель.

10. Выполнение измерения

10.1. Экстракция гепарина натриевой соли с фильтра Фильтр с отобранной пробой переносят в пробирку, приливают в нее 5 см³ буферного раствора (раствор № 1) и оставляют на 20 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Процедуру повторяют, растворы объединяют. Общий объем раствора элюата с фильтра (общий объём пробы) равен 10 см³.

Степень десорбции гепарина натриевой соли с фильтра равняется 97 %.

10.2. Проведение анализа Анализ 2,0 см³ элюата (объём пробы, взятой для анализа) на содержание гепарина натриевой соли проводят точно так же, как при построении градуировочной характеристики.

Оптическую плотность анализируемого раствора измеряют аналогично градуировочным растворам по сравнению с холостым, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

По градуировочному графику находят количество гепарина натриевой соли в объеме пробы, взятой для анализа, соответствующее полученным значениям оптических плотностей.

Если значения оптических плотностей находятся за пределами рабочей зоны градуировочного графика, то опыт необходимо повторить с раствором, имеющим большее или меньшее содержание гепарина натриевой соли.

11. Расчет концентрации вещества в воздухе

Массовую концентрацию гепарина натриевой соли в воздухе (С, мг/м³) вычисляют по формуле:

С = 7-—(мг/м³),где о • V

МУК 4.1.1735—03

а - содержание гепарина натриевой соли, найденное в анализируемом объеме раствора по градуировочной характеристике, мкг; б - объем пробы, взятой для анализа, см³; в - общий объем пробы, см³;

V- объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, дм³ (см. прилож. 1).

12.    Оформление результата анализа

Результат количественного анализа представляют в виде (С ± С • Д/100) мг/м³, Р = 0,95, где Л - характеристика погрешности, выраженная в процентах.

13.    Контроль погрешности методики

Значения полученных метрологических характеристик погрешности, норматива оперативного контроля точности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Таблица 2

Результаты метрологической аттестации методики КХА

Диапазон определяемых концентраций гепарина натриевой соли, мг/м3 Наименование метрологической характеристики характеристика погрешности (Д),%; Р = 0,95 норматив оперативного контроля точности (К), %; Р = 0,90, /и = 3 норматив оперативного контроля воспроизводимости (D), %; Р = 0,95, /п = 2 0,5—5,0 24 31 57

13.1. Оперативный контроль воспроизводимости Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно. Анализируют в соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа: партии реактивов, набора мерной посуды и т. д., и получают два результата Cj и С₂ анализов. Результаты анализа не должны отличаться друг от друга на величину большую, чем норматив оперативного контроля воспроизводимости D (%):

1^е--^l-²⁰⁰ ^

(С,+С₂)

При превышении расхождения между двумя результатами норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторя-

19

МУ К 4.1.1735—03

ют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

13.2. Оперативный контроль точности

Внутренний оперативный контроль точности проводят для каждого интервала определяемых концентраций. Единичные контрольные измерения выполняют в одной серии с КХА рабочих проб за период, в течение которого условия проведения КХА допустимо считать постоянными. Число контрольных измерений зависит от установленных планов статистического контроля точности.

Образцами для оперативного контроля точности являются стандартные образцы с известным содержанием измеряемого вещества, величина которого должна быть близкой к анализируемым пробам.

При контроле качества результатов КХА состава воздушных сред при отсутствии в лаборатории промышленных смесей или невозможности их создания в качестве образца для контроля используют стандартный образец, нанесенный на фильтр или другое устройство, на которое собирают исследуемые вещества. При этом следует иметь в виду, что погрешность процедуры отбора проб контролируется путем поверки используемых пробоотборников, и расчет норматива контроля точности осуществляют, исходя из характеристики погрешности методики КХА за вычетом характеристики погрешнорти используемого пробоотборника и характеристики почетности, связанной с неполным извлечением анализируемых компонентов.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

< К где

См - содержание (концентрация) анализируемого вещества в образце для анализа (по приготовлению), мг/М³;

X- измеренное содержание (концентрация) вещества, мг/м³;

К- величина характеристики оперативного контроля точности, %.

14. Hopm>i затрат времени на анализ

Для проведения анализа требуется 1,5 ч.

Методические указания разработаны Российским государственным медицинским университетом (Лиманцев А. В.).

20

МУК 4.1.1734—4.1.1754—03

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

„ К, • (273 + 20) Р Vjo = —-,    где

²⁰    (273+ /)-101*33

V, - объем воздуха, отобранного для анализа, дм³;

Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

/ - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V₂₀ следует пользоваться таблицей коэффициентов (прилож. 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V, на соответствующий коэффициент.

165