МУК 4.1.1477-03
Определение остаточных количеств тиабендазола в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур (колосовые, рис, кукуруза, просо), в горохе, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тиабендазола в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур (колосовые, рис, кукуруза, просо), в горохе, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.1245—03, 4.1.1477—03

МУК 4.1.1245—03, 4.1.1477—03

Определение остаточных количеств тиабендазола в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур (колосовые, рис, кукуруза, просо), в горохе, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005.—14 с.

1.    У гверждены Главным государственным сани гарным врачом Россий

ской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г. Г. Онищенко МУК 4.1.1245—03    16    марта    2003    г.,

МУК 4.1.1447—03 29 июня 2003 г.

2.    Введены с 1 июля 2003 г.

3.    Введены впервые.

<0 Роспотребнадзор, 2005 <0 Федеральный цен ip гигиены и

шидемнологии Росно i ребнад юра, 2005

1

№ 1 и наносят на колонку. Колбу обмывают еще 5 мл элюента № 1 и также наносят на колонку. Промывают колонку 25 мл элюента № 1, затем 70 мл элюента № 2 со скоростью 1—2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают, остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.4.3) и анализируют на содержание тиабендазола но п. 2.5.6.

Фракции, содержащие тиабендазол, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют но н. 2.5.6. Рассчитывают содержание тиабендазола в элюате, определяя полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для очистки экстракта объем элюента.

Примечание: профиль вымывания тиабендазола может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

2.4.8. Подготовка приборов и средств измерения

Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Определение тиабендазола в воде Образец предварительно отфильтрованной воды объемом 100 мл подкисляют 1 мл концентрированной НС1, промывают 2 раза по 25 мл гексаном и 2 раза но 25 мл хлористым метиленом. pH раствора доводят 4М NaOH до 10—11 (контроль осуществляют pH-метром) и экстрагируют хлористым метиленом трижды но 30 мл. Объединенный экс факт фильфуют через слой безводного сульфата натрия (3 г), осушитель промывают 10—15 мл хлористого метилена. Полученный раствор выпаривают на роторном испарителе при температуре нс выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и 50 мкл раствора вводят в жидкостный хроматограф.

2.5.2. Экстракция тиабендазола из проб почвы, зерна и соломы зерновых культур (зерновых колосовых, риса, кукуру зы и проса), гороха, зеленой массы и семян подсолнечника

Навеску, массой 10 г воздушно-сухой почвы или измельченных проб растительного происхождения помещают в коническую колбу емкостью 100 мл и экстрагируют тиабендазол 50 мл 50 %-ного водного ацетона на ультразвуковой установке в течение 15 мин. Суспензию фильфуют через бумажный фильтр «красная лента». Экстракцию повторяют дважды порциями по 25 мл. Объединенный эксфакт коицен-

МУК 4.1.1245—03, 4.1.1477—03

трируют на роторном испарителе при температуре 40 °С до объема 50— 55 мл. Водный раствор доводят дистиллированной водой до объема 100 мл и подкисляют при перемешивании 1 мл концентрированной соляной кислоты. Далее очистку экстракта проводят но п. 2.5.4.

Примечание. При необходимости повышения чувствительности определения массу навески можно увеличить до 25 г.

2.5.3. Экстракция тиабендазола из масла подсолнечника

Навеску масла, массой 10 г растворяют в 25 мл гексана, раствор помещают в делительную воронку объемом 100 мл и экстрагируют гиа-бендазол 30 мл 0,1М раствора соляной кислоты. Смесь встряхивают в течение 2 мин, нижний водный слой собирают. Операцию экстракции осуществляют еще дважды. Экстракты объединяют. Далее очистку проводят по п. 2.5.4.

2.5.4. Очистка экстракта Водный раствор помещают в делительную воронку, объемом 500 мл и при энергичном встряхивании в течение 2—3 мин промывают дважды по 25 мл гексаном (верхний органический слой отбрасывают) и дважды по 25 мл хлористым метиленом (нижний органический слой отбрасывают)*. pH раствора доводят 4М NaOH до 10—11 (контроль осуществляют рН-мсфом). Тиабендазол псрсэксфагируют фижды хлористым метиленом, порциями по 30 мл, вефяхивая делительную воронку в течение 2—3 мин. Верхний водный слой отбрасывают. Объединенный экс-факт фильтруют через слой безводного сульфата натрия (2 г), осушитель промывают 10—15 мл хлористого метилена. Полученный раствор выпаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С. Дальнейшую очистку эксфакта проводят по пункту 2.5.5’*.

2.5.5. Очистка на колонке с силикагелем Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по п. 2.5.4 эксфактов растительных материалов, количественно переносят двумя порциями по 5 мл смеси гексан-апетон (70 : 30, по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку (п. 2.4.6). Промывают колонку 25 мл элюента № 1, которые отбрасывают. Тиабендазол

В случае образования сравнительно стойких эмульсий при очистке экстрактов для сокращения времени расслоения можно добавить в делительную воронку небольшое количество (до 10 мл) этилового спирта.

••

В случаях, когда очистка экстрактов контрольных проб даст удовлетворительные результаты дополнительную очистку на колонке с силикаголсм можно исключить.

11

элюируют 70 мл элюснта № 2, собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор выпаривают досуха на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 2—8 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и 50 (или 20) мкл раствора вводят в жидкостный хроматограф.

2.5.6. Условия хроматографирования

1.    Жидкостный хроматограф «Альянс» фирмы «Waters» с УФ детектором (Waters 2487), снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки.

Колонка Symmetry - С18 (250 х 4,6) мм, зернение 5 мкм (Waters, USA).

Температура колонки 30 ± 1 °С.

Нрсдколонка Waters Symmetry С-18 для защиты аналитической колонки.

Подвижная фаза для ВЭЖХ: ацетон и трил-0,02М раствор Н₃Р0₄ (9 : 91, по объему).

Скорость потока элюснта: 1 мл/мин.

Рабочая длина волны: 300 нм.

Объем вводимой пробы: 20 мкл.

Время удерживания тиабендазола: 9,00 ± 0,25 мин.

Линейный диапазон детектирования: 0,1—2,00 мкг/мл.

2.    Жидкостный хроматограф «Gold System» фирмы «Beckman», снабженный двойным насосом и УФ-детсктором.

Колонка Nucleosyl - С18 (250 х 4,6) мм, зернение 5 мкм (Sygma-Aldrich, USA).

Предколонка Nucleosyl С-18 для защиты аналитической колонки.

Подвижная фаза для ВЭЖХ: ацетонитрил-0,05М КН2РО4 (pH 2,2) (15 : 85, но объему).

Скорость потока элюента: 1 мл/мин.

Рабочая длина волны: 300 нм.

Объем вводимой пробы: 50 мкл.

Время удерживания тиабендазола: 9,25 ± 0,25 мин.

Линейный диапазон детектирования: 0,1—2,00 мкг/мл.

2.5.7. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводяг методом абсолютной ipa-дуировки, содержание тиабендазола в образце воды, почвы или проб растительного происхождения (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

Sj - площадь пика тиабендазола в стандартном растворе, мм²;

S2- площадь пика тиабендазола в анализируемой пробе, мм²;

V- объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, мл;

Р - навеска анализируемого образна, г;

С - концентрация стандартного раствора тиабендазола, мкг/мл.

Содержание остаточных количеств тиабендазола в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2 параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор тиабендазола 2 мкг/мл разбавляют.

3.    Требования техники безопасности

При проведении работы необходимо соблюдать требования инструкции «Основные правила безопасной работы в химической лаборатории», общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, а также инструкции но эксплуатации жидкостного хроматографа и электрооборудования до 400 В.

4.    Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

5. Разработчики

Долженко В. И., Цибульская И. А., Юзихин О. С., Чермснская Т. Д. (ВИЗР, Санкт-Нсгсрбург).

УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г. Г. Онищенко 16 марта 2003 г., 29 июня 2003 г.

Дата введения - 1 июля 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тиабендазола в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур (колосовые, рис, кукуруза, просо), в горохе, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.1245—03, МУК 4.1.1477—03

1. Вводная часть

Фирма производитель: ABiycr, Ксминова. Aipo Эксперт групп, Северо-Кавказский Агрохим.

Торговое наименование: ВИАЛ, Винцит, Випер, Витацит. Действующее вещество: тиабендазол.

Структурная формула:

Н

2-(1,3-тиазол-4-ил) бензимидазол (ШРАС).

2-(4-тиазолил)-111-бснзимидазол (С.А.).

Брутто формула: C10H7N3S.

Мол. масса: 201,3.

Белое кристаллическое вещество. Температура плавления: 297— 298 °С. Давление паров при 25 °С: 4,6 х ю^-4 м11а. Коэффициент распределения н-октапол/вода: K_ow log Р = 2,39 (pH 7).

МУК 4.1.1245—03, 4.1.1477—03

Растворимость (r/л) при 20 °С: н-гептан - <0,01, ксилол - 0,13, ацетон - 2,43, 1,2-дихлорэтан - 0,81, метанол - 8,28, этиланстат - 1,49, н-октанол - 3,91, вода - 10,0 (pH 2), 0,16 (pH 4), 0,03 (pH 7—10).

Устойчив к гидролизу. Водный фотолиз (20 °С, pH 5, DTso 29 часов); pKai = 4,73; рКа₂ = 12,00.

Краткая токсикологическая характеристика: Острая пероральная токсичность (LD$o) для мышей - 3 600 мг/кг, крыс - 3 100 мг/кг, кроликов - 3 800 мг/кг, птиц - более 2 250 мг/кг; острая дермальная токсичность (LDso) для кроликов - более 2 000 мг/кг, не ирритант; ингаляционная токсичность (1Х₅о) для крыс - более 0,5 мг/кг. Не токсичен для пчел. СК₅₀ для рыб 0,55 мг/л при экспозиции 96 часов. Класс токсичности по ВОЗ-III.

Гигиенические нормативы для тиабендазола в России:

ОДК в почве - 1,0 мг/кг;

ОДУ в воде водоемов - 0,05 мг/л (с.-т.);

МДУ: для зерна хлебных злаков - 0,2 мг/кг (ВМДУ). Для зерна риса, кукурузы и проса, гороха, семян и масла подсолнечника гигиенические нормативы в России нс установлены.

Область применения препарата: системный фунгицид защитного и лечебного действия. Тиабсндазол образует защитный слой на обработанной поверхности плодов и клубней, используется на овощных, плодовых и зерновых культурах. Не совместим с купратами и окисляющими агентами, такими как хлораты и нитраты.

2. Методика определения тиабендазола в воде, почве, зерне и соломе зерновых культур (колосовые, рис, кукуруза, просо), в горохе, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника

методом ВЭЖХ

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении тиабендазола методом ЮЖХ с использованием УФ детектора после его извлечения из образцов водно-ацетоновой смесью и очистке путем перераспределения между двумя жидкими фазами, а также на колонке с силикагелем.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Метролошческая характеристика метода представлена в табл. 1 и 2.

3

Merpojioi ичсскяя харак терце i икя метода

Таблица 1

Объект анализа 11рсдел обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения, % (для каждою объекта и 24) Относительное стандартное отклонение, ,V, % Доверительный интервал среднею, п = 24, Р " 0,95 Вода 0,002 0,002 0,02 93,1 4,84 4,24 Почва 0,02 0,02 0,2 86,1 3,15 2,76 Зеленая масса подсолнечника 0,02 0,02 0,2 83,7 5,61 4,92 Масло подсолнечника 0,02 0,02 -0,2 94,0 2,75 2,41 Семена подсолнечника 0,02 0,02 -0,2 85,1 4,49 3,94 Солома 0,02 0,02 -0,2 87,8 7,12 6,24 Зерно зерновых колосовых 0,02 0,02 -0,2 90,0 3,38 2,96 Зерно риса 0,02 0,02 0,2 85,0 4,41 3,87 Зерно проса 0,02 0,02 -0,2 86,6 4,42 3,87 Зерно кукурузы 0,02 0,02 -0,2 85,3 5,86 5,14 Горох 0,02 0,02 -0,2 81,4 5,46 4,79

Таблица 2 Полнота определения гиябендязоля в воде, почве, зерне и соломе риса, зерне кукурузы и проса, горохе (W = 5 для каждой концентрации)

Среда Внесено, мг/кг Найдено, мг/кг Стандартное отклонение, ± 11олнота определения, % 1 2 3 4 6 Вода 0,002 0,00189 ос о о 94,3 0,004 0,00370 2,25 • Ш4 92,5 0,01 0,00927 5,16- Ш4 92,7 0,02 0,0186 9,32 • 10-4 93,0 Среднее 93.1

МУК 4.1.1245—03,4.1.1477—03

Продолжение табл. 2

1 2 3 4 6 11очва 0,02 0,0168 4,97 • 10*4 84,1 0,04 0,0342 8,80 • 10-4 85,6 0,1 0,0883 3,77 • 10*3 88,3 0,2 0,1728 8,29 • 10'3 86,4 Среднее 86,1 Зеленая масса под-солнечника 0,02 0,0168 1,52- 10*3 84,1 0,04 0,0313 1,54- 10 3 78,3 0,1 0,0875 4,82 • 10'3 87,5 0,2 0,1698 1,30- 10*2 84,9 Среднее 83,7 Масло подсолнечника 0,02 0,0190 4,60 • 10*4 95,2 0,04 0,0385 6,81 • 10*4 96,3 0,1 0,0957 4,46 • 10*3 95,7 0,2 0,1778 5,06 • 10’3 88,9 Среднее 94,0 Семена нодсолнеч- ника 0,02 0,0181 1,06- 10'3 90,5 0,04 0,0324 1,77- 10*3 81,0 0,1 0,0861 5,10- 10*3 86,1 0,2 0,1658 6,33 • 10*3 82,9 Среднее 85,1 Солома 0,02 0,0177 1,74- 10'3 88,3 0,04 0,0351 2,79 • 10'3 87,4 0,1 0,0905 5,44 • 10'3 90,5 0,2 0,170 1,50- 10'2 85,0 Среднее 87,8 Зерно зерновых колосовых 0,02 0,0194 5,03 • 10*4 96,8 0,04 0,0368 1,67- 10*3 92,1 0,1 0,0872 3,47 • 10*3 87,2 0,2 0,1682 6,70 • 10 3 84,0 Среднее 90,0 Зерно риса 0,02 0.0173 8,12 • 10'1 86,4 0,04 0,0350 1,73 • 10'3 87,5 0,1 0,0851 4,44 • 10*3 85,1 0,2 0,1622 9,61 • 103 81,1 Среднее 85,0

5

Продолжение табл. 2

1 2 3 4 6 Зерно проса 0,02 0,0182 9,57 • 10*4 91,0 0,04 0,0325 1,84 • 10*4 81,3 0,1 0,0852 4,22 • 10 3 85,2 0,2 0,1774 8,13 • 10‘3 88,7 Среднее 86,6 Зерно куку-РУЗЫ 0,02 0.0179 " о ГЛ О 89,7 0.04 0.0341 2,26 • 10'3 85,3 0,1 0.0844 5,35 • 10'3 84,4 0,2 0,1638 1,46* 10'2 81,9 Среднее 85,3 Горох 0,02 0,0162 9,96 • 10-4 81,2 0,04 0.0324 1,81 • 10*3 81,1 0.1 0,0834 5,29 • 10'3 83,4 0.2 0,1598 1.41 • Ю’3 79,9 Среднее 81,4

2.1.3. Избирательность метода Присутствие других пестицидов, близких по химическому строению и области применения, определению не мешает.

2.2. Реактивы и материалы

Ацетон, чда

Ацетонитрил для ВЭЖХ, «В-230НМ» или хч Бумажные фильтры «красная лента»

Вода бидистиллированная, деиони зированная Тиабендазол, аналитический стандарт с содержанием д.в. 98,7 %, производства ВНИИХСЗР Дихлорметан, хч Калий углекислый, хч Калия перманганат

Калий фосфорно-кислый 1-замещенный, ч

Кислота ортофосфорная, чда 85 %-ный

раствор, имп. (Бельгия) или хч

Кислота соляная, хч

Натрий серно-кислый безводный, ч,

свсжспрокалснный

Натрия гидроксид, хч

н-Гексан, хч, свежсперсгнанный

МУК 4.1.1245—03, 4.1.1477—03

Подвижная фаза для ВЭЖХ:

1.    ацстони фил-0,02М раствор Н₃Р0₄ (9 : 91, по объему);

2.    ацстони фил-0,05М К11₂PO., (pi 1 2,2) (15 : 85, по объему)

Силикагель для колоночной хроматофафии 60 (0,040—0,063 mm) (Merck, Германия)

Стекловата Фосфора пснтоксид, ч

Элюснт № 1 для колоночной хроматофафии: смесь гексан-ацетон (70 : 30, но объему)

Элюснт № 2 для колоночной хроматофафии: смесь гексан-ацетон (40 : 60, по объему)

2.3. Приборы и посуда

Жидкостный хроматофаф «Альянс» фирмы «Waters» с УФ детектором (Waters 2487), снабженный дегазатором и термостатом колонки или «Gold System» фирмы «Beckman», снабженный двойным насосом и УФ-детектором или аналогичный

Колонка Symmetry - Cl8 (250 х 4,6) мм, зернение 5 мкм (Waters, USA) или Nuclcosyl С-18 (250 х 4,6) мм, зернение 5 мкм (Sygma-Aldrich, USA)

Нредколонка Waters Symmetry С-18 или Nuclcosyl С-18 для защиты аналитической колонки

Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные

Установка ультразвуковая «Серьга»

Мельница ножевая РМ-120 и лабораторная

зерновая ЛМЗ

Гомогенизатор

Ротационный испаритель вакуумный ИР-1М

или аналогичный

Бидистиллятор

Насос водоструйный

PI 1-метр универсальный ЭВ-74

Колбы плоскодонные на шлифах КП 1500 29/32 ТС

Колбы круглодонные па шлифах KII150 29-32 ТС

7

Воронки лабораторные В-75-110 Воронки делительные В Д-3-500 Цилиндры мерные на 100, 250 и 1 000 см³ Колбы мерные на 25, 50, 100 и 1 000 см³ Пипетки на 1,2, 5, 10 см³

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания свежей порции кислоты, затем промывают водой, 2 %-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего его сушат над гидроксидом нагрия и перегоняю!.

Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташем (на 1 л ацетона 10 г KMnO.j и 2 г К₂СО_?).

Ацетонитрил (хч) сушат над нснгоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием.

2.4.2. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку Symmetry-С 18 или Nuclcosyl С-18 кондиционируют в потоке подвижной фазы (1 мл/мин) до стабилизации нулевой линии в течение 1—2 часов.

2.4.3. Приготовление растворов

Для получения 0,05М раствора калия фосфорно-кислого 1-замешенного 6,8 г кристаллического KH₂PO.i помещают в мерную колбу объемом 1 л, растворяют в 600 мл дистиллированной воды и доводят объем до метки дистиллированной водой. Для получения 0,02М раствора ортофосфорной кислоты 2 г 98 % (или 2,24 г 87 %) кристаллической Н3РО4 помещают в мерную колбу объемом 1 л, растворяют в 600 мл дистиллированной воды и доводят до метки дистиллированной водой. Для получения 50 %-го водного ацетона в колбе емкостью 1 л смешиваю! 500 мл ацетона с 500 мл дистиллированной воды, используя мерные цилиндры. Для получения 4М раствора NaOH 160 г гидроксида натрия помещают в мерную колбу объемом 1 л, растворяют в 600 мл дистиллированной воды и доводят объем до метки дистиллированной водой. Для приготовления подвижной фазы № 1 в колбе на 1 000 мл смешивают 400 мл ацетонитрила с 600 мл 0,02М ортофосфорной кислоты, смесь фильтруют, при необходимости дегазируют. Для приготовления подвижной фазы № 2 смешивают в колбе на 1 000 мл 150 мл ацетонит-

МУК 4.1.1245—03, 4.1.1477—03

рила с 850 мл 0,05М раствора KII₂PO.,, piI которого доведен добавлением ортофосфорной кислоты до значения 2,2 (контроль осуществляют pH-метром), смесь фильгруют, при необходимости дегазируют. Для приготовления элюента № 1 в колбе на 1 ООО мл смешивают 700 мл н-гексана и 300 мл ацетона. Для приготовления элюента № 2 в колбе на 1 000 мл смешивают 400 мл н-гексана и 600 мл ацетона.

2.4.4. Приготовление стандартного и градуировочных растворов

Ьеруг точную навеску тиабендазола (50 мг), переносят в мерную колбу на 50 мл, растворяют навеску в ацетонигриле и доводят до метки (стандартный раствор с концентрацией 1,0 мг/мл). Градуировочные растворы с конце игра циям и 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 и 2,0 мкг/мл готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы [смесь ацетон и грил-0,05М KH₂PO,| (pH 2,2) (15 : 85, по объему)]. Стандартный и градуировочные растворы можно хранить в холодильнике при температуре 0—4 °С в течение 1 месяца. Для внесения в контрольный образец при определении полноты извлечения используют стандартный раствор, разбавленный ацетонитрилом до нужного уровня концентраций методом последовательного разбавления.

2.4.5. Построение градуировочного графика

Для построения 1радуировочного 1рафика (площадь пика - концентрация тиабендазола в растворе) в хроматофаф вводят по 50 мкл 1радуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций), измеряют площади пиков и строят 1рафик зависимости среднего значения площади пика от конценграции тиабендазола в градуировочном растворе (мкг/мл).

2.4.6. Подготовка колонки с силикагелем для очистки жанр акта

В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диамсгром 1 см помещают тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г силикагеля в 20 мл смеси гексан-ацетон (70 : 30, по объему). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонку последовательно промывают 50 мл смеси гексан-ацетон (40 : 60, по объему) и 30 мл смеси гексан-ацетон (70 : 30, по объему) со скоростью 1—2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

2.4.7. Проверка хроматографического поведения тиабендазола на колонке с силикагелем

В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора тиабендазола с концентрацией 10 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 5 мл элюента

9