Главный государственный санитарный врач f Российской Федерации |
|
Дата введения: 3 Olu%>m 2WJ г |
УТВЕРЖДАЮ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕНДИМЕТАЛИНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, КОЧАНАХ КАПУСТЫ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
1. Вводная часть.
Краткая характеристика препарата.
Фирма-изготовитель: Агротрейд.
Торговое название: КОБРА,
Действующее вещество: пендиметалин.
Название по ИЮПАК: А-(1-этилпропш1)-2>6-динитро-3,4-=кси-лидин. Структурная формула:
сн3
Эмпирическая формула: C13H19N3O4.
Молекулярная масса: 281,3.
Химически чистое вещество: кристаллы желтого цвета.
3
Температура плавления д.в.: 56-57°С. Растворимость д.в. (г/1000мл) при 20°С в воде - 0,3 , хорошо растворим в ароматических углеводородах и их галогенпроизвод-ных. Устойчив в щелочной и кислой средах.
Краткая токсикологическая характеристика: LD50 для крыс - 1050-1250 мг/кг, дерм, для кроликов - > 5000 мг/кг, для птиц - 4-10 мг/кг, для пчел - > 49,8 мкг/особь.
Гигиенические нормативы; ПДК в воде водоемов - 0,05 мг/л, ОДК в почве - 0,15 мг/кг, ВМДУ в капусте - 0,05 мг/кг, в сое (семенах и масле) - 0,1 мг/кг.
Область применения препарата: КОБРА, КЭ - гербицид для борьбы с однолетними двудольными и злаковыми сорными растениями.
2. Метод определения пендиметалина в воде, почве, кочанах капусты,семенах и масле подсолнечника с применением газожидкостнойхроматографии.
2.1. Основные положения.
2.1.1. Принцип метода.
Метод основан на извлечении остаточных количеств пендиметалина из анализируемого объекта органическими растворителями, проведении очистки экстракта перераспределением в системе несмешиватощихся растворителей и на хроматографической колонке с оксидом алюминия. Количественное определение проводят методом внешнего стандарта с применением газожидкостной хроматографии с использованием детектора электронного захвата (ДЭЗ).
2.1.2. Избирательность метода.
Метод специфичен в присутствии других применяемых пестицидов. Проведение очистки экстрактов, а также использование селективного детектора позволяет устранять влияние коэкстрактивных веществ на анализ пендиметалина.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода.
Диапазоны измеряемых концентраций, пределы обнаружения и другие метрологические параметры метода представлены в таблицах 1 и 2.
12
Пендиметалин элюируют 30,0 мл смеси н-гексан: ацетон (90:10), собирая элюат в колбу-кон центратор. Растворители элю ага упаривают досуха в ротационном вакуумном испарителе при температуре +40°С.
Сухой остаток ашоата растворяют в 1 мл ацетона и анализируют его на содержание пендиметалина по п.2.7.6.
2.7.4. Семена подсолнечника.
2.7.4.1. Экстракция пендиметалина.
Аналитическую пробу семян подсолнечника массой 10±0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, добавляют 100 мл смеси ацетон:н-гексан (80:20), слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 10 мин. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Внутренние стенки колбы с пробой ополаскивают 50 мл смеси ацетон:н-гексан (80:20) и также фильтруют в колбу-концентратор.
При использовании аппарата для встряхивания в плоскодонную колбу с аналитической пробой вносят 100 мл смеси ацетон:н-гексан (80:20) и встряхивают в течение 60 минут. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Внутренние стенки колбы с пробой ополаскивают 50 мл смеси ацетон:н-гексан (80:20) и также фильтруют в колбу-концентратор.
Колбу-концецтрагор с объединенным ацетоно-гексановым фильтратом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители до объема 10-20 мл при температуре +40°С. В колбу-концентратор добавляют 150 мл бидистиллиро-ваняой воды, 25 мл водного насыщенного раствора хлористого натрия и содержимое колбы перемешивают встряхиванием. Колбу-концентратор помещают в холодильную камеру на 60 минут и выдерживают при +4-б°С или в морозильную камеру на 15 минут, где выдерживают при температуре -18°С. После этого содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр красная лента в делительную воронку емкостью 500 мл. В делительную воронку добавляют 1,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия и после перемешивания 75 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80:20). Содержимое воронки энергично встряхивают в течение 2-х минут. После 5-ти минутного отстаивания нижний ацетоно-водный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя - 2,0-2,5 см), помещенный на бумажный фильтр синяя лента, в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с исполь-
13
зованием 50 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80:20), После этого нижний ацетоно-водный слой отбрасывают.
Колбу-концентратор с объединенным гексано-эфирным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители при температуре т40°С до объема 3-5 мл. Остаток экстракта количественно переносят во флакон (типа пенициллинового) емкостью 10 мл и упаривают растворители в токе азота досуха при температу ре +40°С.
2.7,4.2, Очистка экстракта.
Очистку экстракта проводят на хроматографической колонке с оксидом алюминия по п. 2.7.3.2.
2.7.5. Масло подсолнечника.
2.7.5.1. Экстракция пендиметалина.
Аналитическую пробу масла массой 10,0±0,1 г растворяют в 50 мл н-гексана (насыщенного ацетонитрилом) в плоскодонной колбе емкостью 100 мл и после этого гексановый раствор масла переносят в делительную воронку емкостью 250 мл. Колбу промывают 50 мл ацетонитрила (насыщенного н-гексаном) и переносят его в воронку. Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После 5-ти минутного отстаивания нижний ацетонитрильный слой сливают в колбу-концентратор емкостью 100 мл. Колбу промывают еще 25 мл ацетонитрила (насыщенного н-гексаном) и также переносят в воронку (250 мл). Содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут, отстаивают 5 минут и нижний ацетонитрильный слой объединяют с предыдущим. Верхний гексановый слой отбрасывают.
Колбу-концентратор с объединенным ацетонитрильным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворитель досуха при температуре +50°С. Сухой остаток растворяют и количественно переносят в делительную воронку емкостью 500 мл тремя объемами 10+10+10 мл ацетона. К ацетоновому экстракту, находящемуся в делительной воронке, добавляют 100 мл дистиллированной воды,
1,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия и 50 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают встряхиванием в течение 1-й минуты. После этого в воронку добавляют 75 мл смеси н-гексан:этиловьш эфир (80:20) и содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После 5-ти минутного отстаивания нижний ацетоно-водный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя - 2,0-2,5 см), помещенный на бумажный фильтр синяя лепта, в колбу-
14
концентратор емкостью 250 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80:20). После этого нижний ацетоноводный слой отбрасывают.
Колбу-концентратор с объединенным гексано-эфирным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители при температуре +40°С до объема 3-5 мл. Остаток экстракта количественно переносят во флакон (типа пенициллинового) емкостью 10 мл к упаривают растворители в токе азота досуха при температуре +40°С.
2.1.52. Очистка экстракта.
Очистку экстракта проводят на хроматографической колонке с оксидом алюминия по п. 2.7.3.2.
2.7.6. Условия хроматографирования.
2.7.6.1. При использовании набивной колонки.
Газовый хроматограф "Цвет-560" с ДПР .
Колонка хроматографическая набивная длиной 1,0 м и внутренним диаметром 3,0 мм с неподвижной фазой 5% SE-30 на хроматоне N - Super, 0,125-0,16 мм.
Показания электрометра: 8 х 109.
Скорость движения ленты самописца: 0,25 см/мин.
Температура колонки: 190°С.
Температура испарителя: 230°С.
Температура детектора: 300°С.
Расход газа-носителя (азот в/ч): 40 см3/мин.
Объем вводимой пробы: 1 мкл.
Время удерживания пендиметалина: 3,8±0,1 мин.
Предал детектирования: 0,25 иг.
Линейный диапазон детектирования: 0,5-8,0 нг.
2.7.6.2. При использовании капиллярной колонки,
Газовый хроматограф с ДЭЗ (ДПР).
Колонка хроматографическая капиллярная длиной 15 м и внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой SE-52, толщина слоя 0,4 мкм.
Температура колонки: программирование от 80°С (1 мин) до 280°С (15 мин) со скоростью 10°С/мин.
Температура испарителя: 230°С.
Температура детектора: 300°С,
15
Расход газов: газа-носителя (азот в/ч) - 2,0 см3/мин, дополнительного газа (азот в/ч) к ДЭЗ - 40 смэ/мин.
Объем вводимой пробы: 1 мкл.
Время удерживания пендиметалина: 15,75±0,05мин.
Предел детектирования: 0,25 нг.
Линейный диапазон детектирования: 0,5-8,0 нг.
2.7.7. Обработка результатов анализа.
Содержание пендиметалина рассчитывают методом внешнего стандарта по формуле:
HixAxV
X» -.где:
Нохт
X - содержание пендиметалина в пробе, мг/кг или мг/дм3,
Hi - высота (площадь) пика анализируемого вещества, мм (мм2).
Но - высота (площадь) пика стандартного вещества, мм (мм2),
А - концентрация стандартного раствора пендиметалина, мкг/мл,
V - объем экстракта, подготовленного для хромато1'рафироваыия,мл,
М - объем (см3) или масса (г) аналитической пробы.
3. Требования техники безопасности.
Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации к приборам.
4. Контроль погрешности измерений.
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями iMH 2335-95 "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".
5. Разработчики.
В.И. Долженко, П.А.Тарарин, ТА. Маханькова, Л.В. Григорьева, Е.И.Кожемякова (ВНИИ защиты растений).
4
Таблица 1.
Метрологические параметры метода. |
Метрологические параметры, Р=0,95, п=28 |
|
Анализируемые объекты: |
|
Вода |
Почва |
Кочаны
капусты |
Семена
подсол
нечника |
Масло
подсол
нечника |
Предел обнаружения, мг/дм3, мг/кг |
0,005 |
0,05 |
0,025 |
0,05 |
0,05 |
Диапазон определяемых концентраций, мг/дм3, мг/кг |
0,005-0,04 |
0,05-0,4 |
0,025-0,2 |
0,05-0,4 |
0,05-0,4 |
Среднее значение определения, % |
90,2 |
88,3 |
91,0 |
84,6 |
80,6 |
Стандартное отклонение, S% |
4,3 |
5,8 |
4,7 |
6,5 |
6,8 |
Относительное стандартное отклонение, DS % |
2,1 |
2,3 |
2,5 |
3,3 |
3,4 |
|
Таблица 2.
Полнота определения пендиметалина в модельных пробах (п=6) |
Анализируемые
объекты |
Внесено, мг/дм3, мг/кг |
Извлечено,
% |
Доверительный интервал среднего результата, % |
Вода |
0,005 |
85,6 |
±4,5 |
|
0,01 |
88,0 |
±4,3 |
|
0,02 |
91,4 |
±3,9 |
|
0,04 |
95,8 |
±3.4 |
Почва |
0,05 |
83,4 |
±4,9 |
|
0,1 |
87,0 |
±4,1 |
|
0,2 |
90,1 |
±3,3 |
|
0,4 |
92,8 |
±3,0 |
Кочаны капусты |
0,025 |
85,6 |
±4,4 |
|
0,05 |
90,0 |
±3,9 |
|
0,1 |
93,1 |
±3,5 |
|
0,2 |
95,0 |
±3,3 |
|
5
Семена подсолнечника |
0,05
0,1
0,2
0,4 |
80,6
83,1
85,9
88,7 |
±5,5
±4,6
±3,9
±3,5 |
Масло подсолнечника |
0,05 |
75,7 |
±7,0 |
|
0,1 |
80,0 |
±6,3 |
|
0,2 |
82,0 |
±5,7 |
|
0,4 |
84,7 |
±4,9 |
2.2. Реактивы, растворы, материалы.
Аналитический стандарт пендиметалина.
Азот газообразный высокой чистоты, ТУ 301-07-25-89.
Ацетон, осч, ТУ 2633-004-11291058-94.
Ацетонитрил для хроматографии, хч, ТУ 6-09-4326-76.
Вата медицинская, ТУ 9393-001-00302238-97.
Вода дистиллированная и перегнанная над KMgCU и щелочью. н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
Калия гидроокись, чда, ГОСТ 24363-80.
Натрий сернокислый б/в (сульфат), чда. ГОСТ 4166-76.
Натрий хлористый, чда, ГОСТ 4233-77.
Оксид алюминия для хроматографии, ч., размер частиц 100-200 мкм, 2-й степени активности по Брокману, нейтральный.
Смесь н-гексан:этиловь1Й эфир, 80:20, по объему.
Фильтры бумажные, красная лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
Фильтры бумажные, белая лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
Фильтры бумажные, синяя лента, ТУ 2642-001-42624157-98.
Эфир этиловый (серный), ОСТ 84-2006-88.
Элюент для колоночной хроматографии: смесь н-гексан : ацетон, 90:10, по объему.
2.3. Приборы, аппаратура, посуда.
Хроматограф газовый с ДЭЗ (Д11Р).
Колонка хроматографическая набивная стеклянная длиной 1м и внутренним диаметром Змм с неподвижной фазой 5% SE-30 на хроматоне N-Super, 0,125-0,160 мм.
Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая длиной 15 м и внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной фазой SE-52, толщина пленки 0,4 мкм.
6
Колонки хроматографические стеклянные длиной 30 см и внутренним диаметром 1,0 см с оксидом алюминия 2-й степени активности по Брокману для очистки экстрактов.
Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73 или аналогичный.
Весы аналитические типа ВЛА-200, ГОСТ 34104-80.
Весы лабораторные типа ВЛКТ-500, ГОСТ 24104-80.
Воронки делительные емкостью 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
Воронки для фильтрования стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Инструментарий для подготовки проб (пинцет анатомический, скальпель, ножницы и др.).
Колбы-концентраторы емкостью 100 и 250 мл, ГОСТ 25336-82.
Колбы плоскодонные емкостью 100, 300 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные со шлифом емкостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Мельница электрическая лабораторная, ТУ 46-22-236-79 или аналогичная. Микрошприц МШ-10, ТУ 2-833-106.
Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.
Ротациошгый вакуумный испаритель типа ИР-1 или аналогичный.
Пипетки мерные емкостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Сито с диаметром отверстий 1,0 мм.
Стаканы химические на 100, 200 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
Ступка фарфоровая с пестиком, ГОСТ 9147-80.
Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении.
Установка для упаривания растворителей в токе азота.
Установка ультразвуковая "Серьга" УЗМ002 или аналогичная.
Флаконы стеклянные (типа пенициллиновых) емкостью 10,0 мл.
Чашки фарфоровые, ГОСТ 9147-80 Е.
Шкаф сушильный, ТУ 64-1-1411-76 Е.
Электроплитка, ГОСТ 14919-83 Е.
2.4. Подготовка к определению.
2.4.1. Подготовка и очистка растворителей.
Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном вакуумном испарителе при температуре +40°С до объема 1,0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в
7
наружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.
2.4.2. Подготовка и кондиционирование набивной колонки.
Подготовленной насадкой ( 5% SE-30 на хроматоне N-Super или другом носителе) заполняют стеклянную колонку и уплотняют ее под вакуумом. Колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и кондиционируют ее при рабочем расходе газа-носителя и температуре 250°С в течение 8-10 часов.
2.4.3. Приготовление стандартных растворов.
Основной раствор пендиметалина с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением в ацетоне 0,01 г аналитического стандарта в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре +4-6°С не более трех месяцев.
Рабочие стандартные растворы с концентрациями 4,0, 2,0, 1,0 и 0,5 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора пендиметалина последовательным разбавлением ацетоном. Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре +4-6°С не более месяца.
В модельных опытах при изучении полноты извлечения пендиметалина используют ацетоновые растворы стандартного вещества.
2.4.4. Построение калибровочного графика.
Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 1-2 мкл рабочего раствора пендиметалина с концентрацией 0,5, 1,0, 2,0 и 4,0 мкг/мл. Осуществляют не менее трех параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (мм2) от концентрации пендиметалина в растворе в мкг/мл.
2.4.5. Подготовка хроматографической колонки с оксидом алюминия 2-й степени активности по Брокману для очистки экстрактов.
Оксид алюминия прогревают в фарфоровой чашке в сушильном шкафу при +150°С в течение 5-ти часов и охлаждают до комнатной температуры. Для приготовления оксида алюминия 2-й степени активности по Брокману внутреннюю поверхность колбы со шлифом объемом 0,5 л увлажняют 2,8 мл дистиллированной воды и добавляют в колбу 100 г активированного оксида алюминия. Содержимое колбы тщательно перемешивают. Колбу с подготовленным оксидом алюминия хранят герметично закрытой.
Стеклянную колонку длиной 30 см и внутренним диаметром 1,0 см заполняют (при легком встряхивании) 5,0 г оксида алюминия (высота слоя -7,0 см). Над слоем о к-
8
си да алюминия помещают слой безводного сульфата натрия высотой 2,0 см и содержимое колонки перед использованием промывают 15 мл смеси н-гексан: ацетон (90:10).
2.5. Отбор, первичная обработка и хранение проб.
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными 21.08.1979г., №2051-79.
Пробы воды при наличии взвеси фильтруют через бумажный фильтр красная лента и хранят в закрытой стеклянной таре при температуре +4-6°С не более 3 дней.
Пробы почвы просушивают до воздушно-сухого состояния при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света и хранят при комнатной температуре в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре.
Из каждого кочана пробы капусты по осевой линии вырезают 1/4 часть. Полученную среднюю пробу измельчают и хранят в морозильной камере при температуре не выше -18°С в закрытой полиэтиленовой таре.
Пробы семян подсолнечника просушивают до стандартной влажности и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре.
Пробы масла подсолнечника хранят при +4-6°С в закрытой стеклянной таре.
2.6. Подготовка проб к определению.
Пробы почвы перед анализом рассыпают на бумаге или кальке и пестиком разминают крупные комки, из проб пинцетом удаляют включения: корни растений, насекомых, камни, стекло, кости, уголь и другие. После этою пробы почвы растирают в ступке пестиком, просеивают через сито с диаметром отверстий 1,0 мм и после перемешивания отбирают усредненную аналитическую пробу.
Пробы семян подсолнечника перед анализом рассыпают на бумаге или кальке и пинцетом удаляют включения. Семена измельчают на лабораторной мельнице и после перемешивания измельченной массы отбирают усредненную аналитическую пробу.
2.7. Проведение определения.
2.7.1. Вода.
2.7.1 Л. Экстракция пендиметалина.
Аналитическую пробу воды объемом 100 см3 помещают в делительную воронку емкостью 500 мл, добавляют 1,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия и 50 мл
9
насыщенного водного раствора хлористого натрия. В воронку добавляют 75 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80:20) и содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После 5-ти минутного отстаивания нижний ацетоно-водный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя - 2,0-2,5 см), помешенный на бумажный фильтр синяя лента, в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80:20). После этого нижний ацетоно-водный слой отбрасывают.
Колбу-концентратор с объединенным гексано-эфирным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители при температуре +40°С до объема 3-5 мл. Остаток экстракта количественно переносят во флакон (типа пенициллинового) емкостью 10 мл и упаривают растворители в токе азота досуха при температуре +40°С.
Сухой остаток, находящийся во флаконе, растворяют в 1 мл ацетона и проводят количественное определение пендиметалина по п.2.7.6.
2.7.1.2. Очистка экстракта.
При обнаружении в хроматографируемой пробе коэкстрактивных веществ, метающих определению, проводят очистку экстракта на хроматографической колонке с оксидом алюминия по п. 2.7.3.2.
2.7.2. Почва.
2.7.2.1. Экстракция пендиметалина.
Аналитическую пробу почвы массой 10,0+0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, добавляют 100 мл смеси ацетон:бидистиллировшшая вода (95:5), слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 10 минут. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Внутренние стенки колбы с пробой ополаскивают 20 мл ацетона, который также фильтруют в в колбу-концентратор.
При использовании аппарата для встряхивания в плоскодонную колбу с аналитической пробой вносят 100 мл смеси ацетон:бидистиллированная вода (95:5) и встряхивают в течение 60 минут. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Внутренние стенки колбы с пробой ополаскивают 20 мл ацетона, который также фильтруют в колбу-концентратор.
10
Колбу-концентратор с объединенным ацетоновым экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворитель при температуре +40°С до объема 20-30 мл. Остаток экстракта количественно переносят в делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 100 мл дистиллированной воды, 1,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия и 50 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают встряхиванием в течение 1 -й минуты. После этого в воронку добавляют 75 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80;20) и содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После 5-ти минутного отстаивания нижний ацетоно-водный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя - 2,0-2,5 см), помещенный на бумажный фильтр синяя лента, в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80:20). После этого нижний ацетоноводный слой отбрасывают.
Колбу-концентратор с объединенным гексано-эфирным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители при температуре +40°С до объема 3-5 мл. Остаток экстракта количественно переносят во флакон (типа пенициллинового) емкостью 10 мл и упаривают растворители в токе азота досуха при температуре +40°С.
Сухой остаток, находящийся во флаконе, растворяют в 1 мл ацетона и проводят количественное определение пендиметалина по п.2.7.6.
2.7.2.2. Очистка экстракта.
В случае обнаружения в хроматографируемой пробе коэкстрактивных веществ, мешающих определению, проводят очистку экстракта на хроматографической колонке с оксидом алюминия по п. 2.7.3.2.
2.73. Кочаны капусты.
2.7.3Л. Экстракция пендиметалина.
Аналитическую пробу капусты массой 20,0+0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл, добавляют 150 мл ацетона, слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 10 минут. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. К остатку пробы, находящейся в колбе, приливают 50 мл ацетона и процедуру экстрагирования и фильтрования повторяют.
п
При использовании аппарата для встряхивания в колбу с аналитической пробой вносят 150 мл ацетона и встряхивают в течение 60 мин. Содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Внутренние стенки колбьг с пробой ополаскивают 50 мл ацетона, который также фильтруют в колбу-концентратор.
Колбу-концентратор с объединенным ацетоновым экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворитель при температуре +40°С до объема 20-30 мл. Остаток экстракта количественно переносят в делительную воронку емкостью 500 мл. В воронку добавляют 100 мл дистиллированной воды, 1,0 мл 10% водного раствора гидроокиси калия я 50 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают встряхиванием в течение 1 -й минуты. После этого в воронку добавляют 75 мл смеси н-гехсан:этиловый эфир (80:20) и содержимое воронки встряхивают в течение 2-х минут. После 5-ти минутного отстаивания нижний ацетоно-водный слой сливают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, а верхний гексано-эфирный слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя ~ 2,0-2,5 см), помещенный на бумажный фильтр синяя лента, в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл смеси н-гексан:этиловый эфир (80:20). После этого нижний ацетоноводный слой отбрасывают.
Колбу-концентратор с объединенным гексано-эфирным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают растворители при температуре ^40°С до объема 3-5 мл. Остаток экстракта количественно переносят во флакон (типа пенициллиновою) емкостью 10 мл и упаривают растворители в токе азота досуха при температуре +40°С.
2.7.3.2. Очистка экстракта на колонке с оксидом алюминия 2-й степени активно-ста по Брокману.
Сухой остаток во флаконе растворяют в 5,0 мл смеси н-гсксан:ацетон (90:10) и переносят его в подготовленную хроматографическую колонку с оксидом алюминия. В хроматографической пробе (пробы воды и почвы, пп.2.7.1. и 2.7.2.) упаривают ацетон досуха в токе азота при температуре +40°С. После охлаждения до комнатной температуры сухой остаток экстракта растворяют в 5,0 мл смеси н-гексан:ацетон (90:10) и переносят его для очистки в подготовленную колонку с оксидом алюминия.