Государственная система санитарно-эпидемиологического нормирования _Российской    Федерации____

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний МУК 4.1.1437—4.1.1448—03, МУК 4.1.1453—4.1.1460—03, МУК 4.1.1467—03

Выпуск 4

Издание официальное

Москва • 2007

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний МУК 4.1.1437—4.1.1448—03, МУК 4.1.1453—4.1.1460—03, МУК 4.1.1467—03

Выпуск 4

Температура колонки 220°С, испарителя 240°С, детектора 320°С Скорость газа-носителя (азол) через колонку 45 см%ин.

Шкала электрометра 8x10¹⁰.

Объем вводимой пробы 1 мкл.

Время удерживания диниконазола 2мин 2S сек Линейный диапазон детектирования 0.1-2 нг.

2.6.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной градуировки, содержание диниконазола в образце семян или масла (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

H₂*CxV

X--

Н,хР

где Hi- высота (площадь) пика диниконазола в стандартном растворе, мм:

Нг - высота (площадь) пика диниконазола в анализируемой пробе, мм;

V - объём экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

Р - навеска анализируемого образца, г;

С - концентрация диниконазола в стандартном растворе, мкг/мл.

Содержание остаточных количеств диниконазола в анализируемом образце вычисляют как среднее из 3-х лар&щельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор диниконазола 2 мкг/мл разбавляют.

3.    Требования техники безопасности.

При проведении работы необходимо соблюдать требования инструкции «Основные правила безопасной работы в химической лаборатории», общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, а также инструкции по эксплуатации газового хроматографа и электрооборудования до 400 В.

4.    Разработчики.

Долженко В.И., Цибульская И.А., Блинова Т.Ф.

Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений (ВИЗР).

196608, Санкт-Петербург, Пушкин, шоссе Подбельского. д.З. Телефон 470-41-98.

т

ББК 51.21 0 37

О 37 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний. Вып. 4—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007.—254 с.

Настоящий сборник содержит копии оригиналов методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды.

1.    Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгнлевич); при участии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.П. Весе лов). Разработчики методов указаны в каждом из них.

2.    Методические указания рекомеидовваны к утверждению Комиссией по государственному сани гарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ.л.16,0

Тираж 150 экз.

Тиражировано отделом информационно-издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Рослотреб надзора

© Роспотребнадзор, 2007 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2007

Содержание

Определение остаточных количеств тритосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1437—03..................................................................................4

Определение остаточных количеств трифлуралина в зеленой массе и зерне зерновых культур, в семенах и масле подсолнечника, сои и рапса методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1438—03,.................................. ........................................................................20

Определение остаточных количеств фснпироксимата и его метаболитов в воде, почве, винограде и яблоках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1439—03............................... 30

Измерение концентрации фенпироксимата в воздухе рабочей зоны методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1440—03 ................................. 43

Измерение концентраций флумстсулама и флорасулама в воздухе рабочей зоны

методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1441—03............................50

Определение остаточных количеств флуметсулама и флорасулама в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1442—03................................................................................59

Определение остаточных количеств флуазифоп-П-бутил по флуазифоп-П в воде, зеленой массе растений, клубнях картофеля, зерне гороха, семенах и масле сои,

подсолнечника, рапса, льна методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1443—03..................77

Определение остаточных количеств флутриафола в воде, почве, зеленой массе, зерне и соломе зерновых колосовых культур, ботве и корнеплодах сахарной свеклы, винограде и

яблоках методом капиллярной газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1444—03.....................99

Определение остаточных количеств хлороталонила в зерне и соломе зерновых колосовых культур, винограде, яблоках, хлороталонила и его метаболита - SDS 3701

(R 182281) методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1445—03......................................113

Определение остаточных количеств эсфенвалерата в воде водоемов, почве, яблоках, клубнях картофеля, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом

газожидкостной хромаго1рафии: МУК 4.1.1446—03...................................................... —    128

Измерение концентраций карбосульфана в воздухе рабочей зоны методом

газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1447—03 .................................................................. 139

Определение остаточных количеств диниконазола в семенах и масле подсолнечника

методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1448—03................................................... 146

Измерение концентраций дикамбы в воздухе рабочей зоны газожидкостной и

тонкослойной хроматографией: МУК 4.1.1453—03.........................................................................153

Определению остаточных количеств имазамокса в воде, почве, зерне и масле сои

методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1454—03..........................164

Определение остаточных количеств клефоксидима в воде, почве, зерне и соломе

риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1455—03.................. 176

Определение остаточных количеств кломазона в воде, почве, зерне, соломе риса,

семенах и масле сои хроматографическими методами: МУК 4.1.1456—03..................................187

Определение остаточных количеств крезоксим-метила в воде, почве, яблоках и его

метаболита крезоксима в воде и почве газохроматографическим методом: МУК 4.1.1457—03......203

Определение остаточных количеств метазахлора в семенах и масле горчицы и рапса га-

зохроматографичсским методом: МУК 4.1 1458—03......................................................................215

Определение остатков пирипроксифена в воде, почве и яблоках методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1459—03..........................................223

Определение остаточных количеств тепралоксидима в воде, почве, сахарной свекле и

сое методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1460—03..„.............................................233

Определение остаточных количеств бромуконазола в воде, почве, зерне и зеленой массе зерновых колосовых культур, ягодах черной смородины и винограда методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1467—03........................ 245

3

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Первый заместнтелуминистря здравоохранения Росов^ой Федерации

Г.Г. Онищенко

W-«j

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИНИКОНАЗОЛА В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ.

1. Вводная часть

Фирма производитель: Август Торговое наименование: ВИАЛ Действующее вещество: диниконазол М (ISO). Структурная формула:

(EHR) -1-(2,4-ДихлорфенилН»4-Диметил-2Ч1Н-1,2,4*триазол*1-ил)пент-1-ен-3-ол (JUPAC).

Брутто формула: СиН^СЫ^ О Мол. масса: 326.2.

Химически чистый препарат - бесцветное кристаллическое вещество.

Температура плавления: 134-156®С

Давление паров при 20°С - 2,93, при 25°С - 4.9 тРа

Коэффициент распределения н-октанол/вода:    log    Р    ^в    4,3    (25°С)

Растворимость в воде при 25®С - 4 мг/л;

в н-гсксане - 0.7, ксилоле - 14, метаноле и ацетоне - 95 (в г/кг при 25°С).

Вещество стабильно на свету, при повышенной температуре и влажности.

Класс токсичности по ВОЗ - 1П, ЕПА - III.

Ж

Ос 1]ш пероральная токсичность (LDjd) для крыс 639 мг/кг, дермальная > 5000 mi /кг.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ПДК в воде водоемов (мг/дм³) - 0,004,

ПДК в почве (мг/кг)- не нормирован,

МДУ в продукции (мг/кг):

Зерно хлебных злаков - 0,05.

Область применения: фунгицид для борьбы с мучнистой росой, паршой, ржавчиной и др. заболеваниями виноградной лозы, зерновых, сахарной свеклы, плодовых, овощных и масличных культур. Используется как протравитель семян на зерновых.

2. Методика определения диникон&юла М в семенах ■ масле подсолнечника методом

газожидкостной хроматографии

2.1.    Основные положения

2.1.1.    Принцип метода

Методика основана на извлечении диниконазола М нз семян и масла подсолнечника водно-ацетоновым раствором или ацетонитрилом с последующей очисткой перераспределением между двумя несмешивающимися жидкостями и на колонке с флористом. Количественное определение проводят методом газожидкостной хроматографии с использованием электронозахватного детектора.

2.1.2. Избирательность метода

Избирательность метода обеспечивается очисткой экстрактов анализируемых проб и сочетанием условий хроматографирования. Присутствие других пестицидов, близких по химическому строению и области применения, определению нс мешает.

2.1.3. Метрологическая характеристика мегола

Метрологическая характеристика метода представлена в таблицах I и 2.

Метрологическая характеристика метода Таблица 1

Объект анализа Предел обнаруже ння мг/кг Диапазон определяемых концентраций мг/кг Среднее значение определения, %(для каждого объекта п=24) Относитель ное стандартное отклонение S,% .....1 Доверительный интервал среднего. п=-'24, Р=0.95 Семена 0,01 0,01-0,1 78.0 5.6 4.8 Масло 0,02 0,02- 0,2 79.1 _11_ _1!_

Полнота определения дни и конатола в семенах и масле подсолнечника (N«5 лля каждой концентрации)

Таблица 2

Среда Внесено, мг/кг Найдено. мг/кг Стандартов отклонение, S. мг/кг Доверительный интервал, (РЮ.95, п»6),% Полнота определения,% Семена 0,01 0.0075 8.2-10^ 6.01 75.0 0,02 0.0171 1.5 10° 5.23 78.3 0,05 0.040 3.7 10'J 6.10 80.0 0,1 0.079 6.3-ToJ 5.17 78.7 Среднее 78.0 [ Масло 0,02 0.0165 1.4-10'3 6.71 82.6 i 0,05 0.0375 "“з.фю* 6.68 75.0 0,1 0.0797 7.3Т0J 6.21 79.7 0.2 0.1583 1.3-10"* 6.10 79.2 Среднее _______1_ 79.1

2.2. Реактивы н материалы.

Аналитический стандарт дин и кон азола 99.8%

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Ацетонитрил, х.ч.,ТУ 6-09-3534-87.

Азот газообразный в баллонах с редуктором, ТУ-6-16-40-14-88.

Бумажные фильтры "красная лента", ТУ 6.091678-86.

Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-79.

Гексан, х.ч., ТУ 2631-003-05807999-98.

Калий углекислый, х.я., ГОСТ 4221-76.

Калия перманганат, ГОСТ 20490-75.

Кальция хлорид, х.ч., ГОСТ 4161-77.

Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76, свсжепрокаленнмй.

Натрия хлорид. х.ч., ГОСТ 4233-77.

Стекловата.

Флорисил 150-250 pm (Merck, Германия), содержание воды <2.5%.

Фосфора пентокенд ч., МРТУ 6-09-5759-69.

Хлороформ, ч.д.а^ ТУ-2631-020-11291058-%.

Насадка для колонки: хроматон N-Supcr (0.125-0.160 мм) с 5% SE-30 (Чехия). Этиловый эфир уксусной кислоты, ч.д.а., ГОСТ 22300-76.

Элюент для колоночной хроматографии №1: гексан-этилацетат (50:50 по объему). Элюент для колоночной хроматографии №2: гексан-этилацетат (20:80 по объему).

23. Приборы и посуда.

Газовый хроматограф Цвст-550 М или аналогичный с ДЭЗ (ДПР) и стеклянной насадочной колонкой, длиной 1м; внутренним диаметром 3 мм. Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 34104-80Е или аналогичные.

Весы технические ВЛКТ-500, ГОСТ 24104-80.

Мельница лабораторная зерновая ЛМЗ, ТУ 1-01-0593-79.

Установка ультразвуковая «Серьга», ТУ 3.836.008.

Ротационный испаритель вакуумный ИР-1М. ТУ 25-11-917-74 или аналогичный. Микрошприи МШ-10, МШ- ЮМ. ТУ 2-833-106.

Насос водоструйный, МРТУ 42 861-64.

Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС, ГОСТ 10384-72.

Колбы круглодонные на шлифах КШ50 29-32 ТС, ГОСТ 10384-72.

Воронки лабораторные В-75-110, ГОСТ 25 336-82.

Воронки делительные ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.

Цилиндры мерные на 100с.м³, ГОСТ 1774-74.

Колбы мерные на 25,50,100 см³, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 1,2,5.10см³, ГОСТ 22292-74.

Стаканы химические, ГОСТ 25336-82Е.

Колонка стеклянная хроматографическая длиной 25 см, диаметром 10мм.

2.4. Отбор проб.

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения .микроколичсств пестицидов» (№ 2051-79 от 21.08.79). Для длительного хранения пробы семян подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие образцы могут храниться в течение года. Перед анализом пробы семян подсолнечника измельчают на лабораторной мельнице.

2.S. Подготовка к определению.

2.5.1.    Подготовка н очистка реактивов и растворителей.

Органические растворители перед начатом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с общепринятыми методиками. Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташем (на I л ацетона 10 г КМпО< и 2 г К2СО3). Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым катием. Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора двууглекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.

2.5.2.    Кондиционирование колонки.

Перед начатом анализа колонку, заполненную хроматоном N-Super (0.125-0.160 мм) с 5% SE-30. не присоединяя к детектору, кондиционируют в токе инертного газа (азот) при температуре 250°С в течение 8-10 часов.

2.53. Приготовление стандартного и градуировочных растворов:

Берут точную навеску диниконазола (50 мг), переносят в мерную колбу на 50 мл, растворяют навеску в ацетоне и доводят до метки (Стандартный раствор с коицс1гтрацисй 1.0 мг/мл). Градуировочные растворы с концентрациями 0.1,0.2, 0.5, 1.0 и 2.0 мкг/мл готовят методом последовательного разбавления по объему, используя дня разбавления гексан. Стандартный раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0-4°С в течение 6

месяцев, градуировочные растворы - в течение недели.

Для внесения в образец при определении полноты извлечения используют градуировочные растворы.

2.5.4. Построение граду ировочного графика.

Для построения градуировочного графика (площадь пика - концентрация диниконазола в растворе) в хроматограф вводят по I мкл 1'радуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций), измеряют высоты или площади пиков и строят график зависимости среднего значения высоты (площади) пика от концентрации диниконазола в градуировочном растворе (мкг/мл).

2.5.5. Подготовка колонки с флорисилом для очистки зкетракта.

В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1 см помещают тампон из стекловаты и вносят суспензию 4 г флорисила в 20 мл смеси гексан:этилацетат (1:1, по объему), дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонку- промывают 20 мл этой же смеси со скоростью 1-2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

2.5.6. Проверка хроматографического поведения диниконазола на колонке с флорисилом.

В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,5 мл стандартного раствора диниконазола с концетрацией I мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 2 мл элюента Х*1 и вносят в колонку. Колбу обмывают еще 2 мл элюента № 1 и также вносят в колонку. Затем промывают колонку 20 мл гексана и элюируют диниконазол 50 мл элюента Х®2 со скоростью 1-2 капли в секунду . Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл гексана и анализируют на содержание диниконазола по п. 2.6.4. Фракции, содержащие диниконазол. объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл гексана и анализируют по п. 2.6.4. Рассчитывают содержание диниконазола в элюате, определяя полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для этого объем элюента.

Примечание: профиль вымывания диниконазола может меняться при использовании новой партии сорбента.

2.5.7. Подготовка приборов н средств измерения.

Установка и подготовка всех приборов и средств измерения проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.

2.6. Проведение определения

2.6.1. Экстракция диниконазола из семян подсолнечника

Навеску измельченных на лабораторной мельнице семян подсолнечника, массой 10 г помещают в коническую колбу на 250 мл, заливают 50-100 мл смеси растворителей

1S0

ацетон - вода (в соотношении 1:1) и экстрагируют диниконаэол в ультразвуковой ванне в течение 15 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр («красная лента»). Эксгракцию повторяют дважды 30 мд той же смеси. Объединенный фильтрат помешают в делительную воронку и псрсэксграгируют диниконаэол хлороформом трижды порциями по 30 мл. Объединенные хлороформные экстракты фильтруют через слой безводного сернокислого натрия. Полученный раствор упаривают на ротационном испарителе при температуре бани 50°С до полного удаления хлороформа. Далее проводят очистку экстрактов по п.2.6.3.

2.6.2.    Экстракция лнникоыазола из масла подсолнечника

Навеску' масла 10 г растворяют в 50 мл гексана и экстрагируют дпниконазол 50 мл ацетонитрила в УЗ-ванне в течение 15 мин. Полученную смесь помешают в делительную воронку объемом 250 мл. После расслоения* нижний ацетонитрильный слой сливают, из верхнего гексанового слоя экстрагируют диниконаэол ацетонитрилом еще дважды порциями по 25 мл. К объединенному ацетонитрильному экстракту добавляют воду в соотношении ацетонитрил:вода • 1:4 и псреэкстрагируют диниконаэол хлороформом трижды порциями по 30 мл. Объединенные хлороформные экстракты сушат над безводным сернокислым натрием и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре 50°С. Сукой остаток растворяют в 5 мл ацетона и помешают в морозильную камеру с температурой -18°С на 2 часа. Охлажденный ацетоновый раствор декантируют в круглодонную колбу на 10 мл через фильтр «красная лента», после чего фильтр промывают 2 мл ацетона. Полученный раствор упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40°С до полного удаления ацетона. Далее очистку проводят по п.2.6.3.

•В случае образования сравнительно стойких эмульсий можно добавить несколько мл насыщенного раствора хлористого натрия.

2.6.3.    Очистка экстрактов на колонке с флорисилом

Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по п.л. 2.6.1 и 2.6.2. эксграктов семян или масла, количественно переносят двумя порциями по 2 мл смеси гексан-эти лацетат (1:1, по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку (п. 2.5.5.). Промывают колонку 20 мл гексана, которые отбрасывают. Диниконаэол элюируют 50 мл элюента №2 (гексан-этилацетат=2:8). Весь элюат собирают в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре нс выше 50°С. Сухой остаток растворяют в 1-2 мл гексана и I мкл раствора вводят в хроматограф.

2.6.4.    Условия хрома roi ряфированмя

Газовый хроматтлраф «Цвст-550М» с ДПР (ДЭЗ) или аналогичный.

1.    Колонка стеклянная 1 м х 3 мм, заполненная хроматоном N-Super (0.125-0.160 мм) с 5% SE-30.

Температура колонки 230°С, испарителя 240°С. детектора 320°С Скорость газа-носителя (азот) через колонку 45 cmVmhh.

Шкала электрометра 8x10¹⁰.

Объем вводимой пробы 1 мкл.

Время удерживания диникоиазола 1мин 55 сек.

2.    Колонка стеклянная 1 м х 3 мм. заполненная хроматоном N-Super (0.125-0.160 мм) с 5% ХЕ-60.

///