Федеральная служба по напору в сфере laiiuu ы прав iiorpcCine.icii и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды
Сборник методических указаний
Выпуск 3 Часть 8
МУК 4.1.1416—03, 4.1.1418—4.1.1420—03 1
ББК 51.23+51.21 060
060 Oupc.ie. iciiiic остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2007.—13 с — Вып. 3.—Ч. 8.
1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. г)рисмана (чл.-корр. РАМН. проф. В. Н. Ракшский. проф.
Т. В. Юлина): Московской ссльскохтяйс1венной академией им. К. А. Тимирязева (нроф. В. А. Калинин, к. х. н. А. В. Дов1 илевич). при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А. Г1. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.
2. Меюднческие указа пня рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. Первым заместителем Миниара здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. Введены с 30 июня 2003 г.
5. Введены впервые.
ББК 51.23+51.21
С1 Роспотребнадзор, 2007 €> Федеральный центр гигиены иэпидемиологии Росно гребка пора, 2007
9. Обработка результатов измерений
Массовую концентрацию фенмедифама в пробе атмосферного воздуха X. мг/м . рассчитывают по формуле:
С - концентрация фенмедифама в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
/Г-объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3: V0 - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст.. температура 0 °С). дм3.
Т- температура возду ха при отборе пробы (на входе в аспиратор). °С: Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст: и - расход воздуха при отборе пробы. дм3/мин: t - длительность отбора пробы, мин.
Примечание. Идентификация и расчет концетрации фенмедифама в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.
10. Оформление результатов измерений
За результат анализа (X ) принимается среднее арифметическое
результатов двух параллельных определений Х\ и Х2 (X = (Xj + Х:)/2). расхождение между которыми нс превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d): | Xj - Х: I < d.
d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м3:
do™ - норматив оперативного контроля сходимости. % (равен
10%).
Результат количественного анализа представляют в виде:
• результат анализа X (мг/м3). характеристика погрешности б. %. Р = 0.95 или
(X ± А) мг/м3, Р = 0.95. где
Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
11. Контроль погрешности измерении
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. «ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».
12. Разработчики
Юдина Т. В.. Федорова Н. Е.. Волкова В. Н.. Гарбузова А. А. (Фс-деральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана. г. Мытищи Московской обл.).
Содержание
Определение остаточных количеств метилизотиоцианата в томатах и огурцах методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1416—03..............................4
Измерению концентраций шрама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии:
МУК 4.1.1418—03....................................................................................................15
Измерение концентраций фенмедифама в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1419—03....................................................................................................24
Измерение концентраций флудиоксонила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1420—03..............33
3
УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,
Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации Г. Г. Онищенко
24 июня 2003 г.
Дата введения: 30 июня 2003 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций фенмедифама в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания _МУК 4.1.1419—03_
Вводная часть
Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в атмосферном воздухе массовой концентрации фенмедифама в диапазоне 0,0008—0,0080 мг/м\
Фенмедифам - действующее вещество препарата БЕТАНЕС. КЭ (70 г/л дссмсдифама + 90 г/л фенмедифама + 110 г/л этофумезата), фирма-производитель «Август», Россия.
Метил 3-(3-метилфеннлкарбамоилокси)фснилкарбамат (IUPAC)
СНз
С16Н,6 N:0.j Мол. масса 300,3.
Бесцветное кристаллическое вещество. Температу ра плавления 143—144 °С. Давление паров при 25 °С: 1,33 х 10*6 мПа.
МУК 4.1.1419—03
Растворимость в органических растворителях при 20 °С (г/дм3): ацетон, циклогексанон - 200; метанол - 50: хлоро<|юрм - 20; бензол -2.5: дихлорметан - 16.7: этилацетат - 56.7: толуол - 0.97: гексан - 0.5. Растворимость в воде при 25 °С - 4.7 мг/ дм3.
Фенмедифам стабилен в водной кислой среде, гидролизуется в нейтральной и щелочной средах: DT4) - 50 дней (pH 5); 14.5 ч (pH 7); 10 мин (pH 9).
Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
Область применения препарата. Фенмедифам рекомендуется к применению в качестве контактного селективного гербицида против однолетних двудольных сорняков на посевах сахарной, столовой, кормовой свеклы.
Ориентировочно-безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в атмо-сфсрном воздухе - 0.001 мг/м3.
1. Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, нс превышающей ± 25%. при доверительной вероятности 0.95.
2. Метод измерения
Измерения концентраций фенмедифама выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
Концентрирование фенмедифама из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента», экстракцию с фильтра проводят ацетоном.
Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1нг.
Определению нс мешают компоненты препаративной формы.
3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы н материалы
3.1. Средства чем ере ни и
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (фирмы Pcrkin-Elmcr. США)
Весы аналитические ВЛА-200 Пробоотборнос устройство ОП-442ТЦ (ЗАО «ОПТЭК». г. Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭА-1
25
|
Барометр-анероид М-67 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2. цена деления 1 °С. пределы |
ТУ 2504-1797—75 |
|
|
измерения 0—55 °С ТУ 215—73Е
Колбы мерные, вместимостью 100 и 1 ООО см3 ГОСТ 1770 Пипетки грядуировинные 2-го класса точности, вместимостью 1.0. 2.0. 5.0. 10.0 см3 ГОСТ 29227 |
|
Пробирки градунрованные, вместимостью 5 или 10 см3 |
ГОСТ 1770 |
|
Цилиндры мерные 2-го класса точности, вместимостью 50 и 500 см3 |
ГОСТ 1770 |
|
|
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. |
|
3.2. Реактивы Фсн.медифам с содержанием действующего |
|
вещества не менее 99.0 %. ВНИИХСЗР
Метиловый спирт (метанол), хч
Вода бидистиллированная. деионизованная |
ГОСТ 6995 |
|
или перегнанная над KMnO.j Кислота ортофосфорная. ч. 85 % Ацетон
Изопропиловый спирт |
ГОСТ 6709 ГОСТ 6652 ГОСТ 2603 ТУ 6-09-402—87 |
|
|
Допускается использование реактивов иных производителей с ана логичной или более высокой квалификацией. |
|
3.3. Вспомогательные устройства, материалы Бумажные фильтры «синяя лента». |
|
обеззо ленные |
ТУ 6-09-2678—77 |
|
Воронки конусные, диаметром 30—37 и60 мм |
ГОСТ 25336 |
|
Груша резиновая
Колбы грушевидные на шлифе.
вместимостью 100 см3 |
ГОСТ 10394 |
|
Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью 250 см3 |
ГОСТ 9737 |
|
Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм Насос водоструйный Пробирки центрифужные |
ГОСТ 10696 ГОСТ 25336 |
|
МУК 4.1.1419—03
Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30 Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ротационный вакуумный
испаритель В-169 фирмы Buchi. Швейцария ТУ 25-11-917—74
Стаканы химические, вместимостью 100 см3 ГОСТ 25336
Стекловата
Стеклянные палочки
Установка для перегонки растворителей
Набор для фильтрации растворителей
через мембрану
Холодильник водяной обратный ГОСТ 9737
Хроматографическая колонка стальная, длиной 20 см. внутренним диаметром 2 мм. содержащая Sphcrisorb S5 ODS 2. зернением 5 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа, вместимостью 50—100 мм3
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1005.
4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила элсктробсзопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию нс ниже лаборанта-исслсдоватсля. с опытом работы на жидкостном хроматографе.
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности нс более 80 %;
27
МУК 4.1.1419—03
• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Перед выполнением измерений проводят очистку ацетона (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ. приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.
7.1. Очистка ацетона
Растворитель сушат над молекулярными ситами 4А и подвергают фракционной перегонке на ректификационной колонне, целиком собранной из стекла, с числом теоретических тарелок нс менее 30. Сосуд хтя перегонки погружают в водяную баню и через приемник прот екают медленно струю сухого азота. Затем температуру водяной бани повышают до 70—75 °С и прибор промывают парами ацетона, после чего холодильник заполняют водой. До начала отбора главной фракции приемник несколько раз промывают дистиллятом. Перегонку продолжают до тех пор. пока в сосуде хтя перегонки нс останется приблизительно 100 см3 ацетона. Температу ру водяной бани следует снижать по мере уменьшения объема ацетона, во всех случаях она не должна превышать температуру кипения ацетона более чем на 20°.
7.2. Подготовка подвижной фа1ы для ВЭЖХ
В мерную колбу вместимостью 1 000 см3 помещают 470 см3 воды. 1 см3 орто(|юс(|юрной кислоты. 50 см3 изопропилового спирта, добавляют 480 см3 метанола, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
7.3. Кондиционирование хроматографической колонки
Промывают колонку подвижной фазой (п. 7.2) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 0.3 см3/мнн до установления стабильной базовой линии.
7.-1. Приготовление градуировочных растворов
7.4.1. Исходный раствор фенмедифама для градуировки (концентрация 1 мг/см3)
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 0.1 г фенмедифама. доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.
МУК 4.1.1419—03
Растворы № 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.
7.4.2. Раствор.Уд I фенмедифама Оля градуировки (концентрация 10 мкг/см3)
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1 см3 исходного стандартного раствора фенмедифама с концентрацией 1 мг/см3 (п. 7.4.1). разбавляют метанолом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
7.4.3. Рабочие растворы № 2—5 фенмедифама Оля градуировки (концентрация 0,05—0,50 мкг/см3)
В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают по 0.5; 1.0; 2.5 и 5.0 см3 стандартного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 7.4.2). доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по п. 7.2). тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2—5 с концентрацией фенмедифама 0.05; 0.10; 0.25 и 0.50 мкг/см3. соответственно.
Растворы хранятся в холодильнике нс более 3-х суток.
7.5. Отбор проб
Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 «ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест». Воздух со скоростью 5 дм7.мин аспирируют через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродсржатсль.
Для измерения концентрации фенмедифама на уровне 0.8 ОБУВ атмос(|)срного воздуха необходимо отобрать 125 дм3 воздуха.
Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4 °С - 7 дней.
7.6. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации фенмедифама в растворе (мкг/см3). устанавливают методом абсолютной калибровки по четырем растворам для градуировки № 2—5.
В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.6.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика фенмедифама.
29
7.6.1. Условия хроматографирования
Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США).
Колонка стальная длиной 25 см. внутренним диаметром 2.1 мм. содержащая Spherisorb S5 ODS 2. зернением 5 мкм.
Температура колонки: комнатная.
Подвижная фаза: метанол-изопропиловый спирт-вода-орто(|юсфор-ная кислота (48 : 5 : 47 : 0.1. по объему).
Скорость потока элюента: 0.3 cm V.muh.
Рабочая длина волны: 240 нм.
Чувствительность: 0.02 сд. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы: 20 мм3.
Ориентировочное время выхода фенмедифама: 12.8—13.1 мин.
Линейный диапазон детектирования: 1—10 нг.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор фенмедифама с концентрацией 0.5 мкг/см3, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п. 7.2).
Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2-х стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более чем на 5 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.
8. Выполнение измерений
Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см3, заливают 10 см3 ацетона, помещают на встряхива-тсль на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 см3.
Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани нс выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. остаток растворяют в 2 см3 подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.1.
Проб> вводят в инжектор хроматографа нс менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию фенмедифама в хроматографируемом растворе.
Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.
1
