Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний

Выпуск 3 Часть 6 МУК 4.1.1408—4.1.1411—03

ББК 51.23+51.21 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005.— Вып. 3.—Ч. 6.—52 с.

1.    Сборник подготовлен:    Федеральным научным центром гигиены

им. Ф. Ф. Эрисмана (акад. РАМН, проф. В. Н. Ракитский, проф. Т. В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К. А. Тимирязева (проф.

В. А. Калинин, к. хим. н. А. В. Довгилевич); при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А. П. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.

2.    Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

4.    Введены с 30 июня 2003 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.23+51.21

Редакторы Аванесова Л. И., Максакова Е. И. Технический редактор Климова Г. И.

Подписано в печать 12.05.05

Печ. л. 3,25 Заказ 12

Тираж 3000 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован Издательским отделом Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отдел реализации, тел. 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2005 © Федеральный центр гигиены

и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005

МУК 4.1.1409—03

Линейный диапазон детектирования: 1—10 нг

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор десме-дифама с концентрацией 0,5 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п. 7.2).

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более чем на 5 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

8. Выполнение измерений

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ ацетона, помещают на встряхива-тель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35° С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 10 см³ (воздух рабочей зоны) или 4 см³ (атмосферный воздух) подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.1.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию десмедифама в хроматографируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию десмедифама в пробе воздуха рабочей зоны (атмосферного воздуха), X, мг/м³, рассчитывают по формуле:

X = С • W/V₂₀ (о), где С - концентрация десмедифама в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,

см³;

23

МУК 4.1.1409—03

V₂q (о) - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным (давление 760 мм рт. ст., температура 20° С) или нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0° С), дм³.

V₂₀= 0,386 • Р • ut/(273+T),

V₀= 0,357 • Р • ut/(273+T), где Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор),

С;

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст; и - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин; t - длительность отбора пробы, мин.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации десмедифама в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

10. Оформление результатов измерений

За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений X! иХ₂(1 = (X! + Х₂)/2), расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d): 1 Х_а - Х₂1 < d.

d = d о™ * Х/100, мг/м³, d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м³; d_Qтн. _ норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 10 %).

Результат количественного анализа представляют в виде:

• результат анализа X (мг/м³), характеристика погрешности 8, %, Р = 0,95 или Х± А мг/м³, Р = 0,95,

* d ’"х    3

А =-,    мг/м    ,    где

100

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. ГСИ

24

МУК 4.1.1409—03

«Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

12. Разработчики

Юдина Т. В., Федорова Н. Е., Волкова В. Н., Гарбузова А. А. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).

25

МУК 4.1.1408—4.1.1411—03

Содержание

Определение остаточных количеств десмедифама в почве, корнеплодах и ботве сахарной, столовой и кормовой свеклы методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии. МУК 4.1.1408—03........................................4

Измерение концентраций десмедифама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.1409—03.......................................................................................16

Определение остаточных количеств диквата в почве и клубнях картофеля спектрофотометрическим методом.

МУК 4.1.1410—03.......................................................................................26

Определение остаточных количеств имазапира в дикорастущих грибах и ягодах методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.1411—03.......................................................................................39 ¹

МУК 4.1.1409—03

4,0 х 10"⁵ мПа. Растворимость в органических растворителях при 20° С (г/дм³): изопропанол, ацетон - 400, метанол - 180; этилацетат - 149; хлороформ - 80; толуол - 1,2; гексан - 0,5. Растворимость в воде при 25° С - 7 мг/ дм³.

Десмедифам стабилен в водной кислой среде, гидролизуется в нейтральной и щелочной средах: DT50 - 70 дней (pH 5); 20 ч (pH 7); 10 мин (pH 9).

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD ₅₀) для крыс > 10 250 мг/кг, для мышей > 5 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для кроликов > 4 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (ЬК₅₀) для крыс > 7 400 мг/м³.

Область применения препарата. Десмедифам рекомендуется к применению в качестве контактного селективного гербицида против однолетних двудольных и злаковых сорняков на посевах сахарной, столовой, кормовой свеклы.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) десмедифама в воздухе рабочей зоны - 1 мг/м³, ориентировочно безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций десмедифама выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование десмедифама из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента», экстракцию с фильтра проводят ацетоном.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1 нг.

Определению не мешают компоненты препаративной формы.

17

МУК 4.1.1409—03

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer. США) Номер Госреестра Весы аналитические ВЛА-200 15945—97 ГОСТ 24104 Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО «ОПТЭК». г. Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭА-1 ТУ 25-11-1414—78 Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797—75 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2. цена деления 1 ° С, пределы измерения 0—55° С ТУ 215—73Е Колбы мерные, вместимостью 100 и 1 000 см3 ГОСТ 1770 Пипетки градуированные 2 класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см3 ГОСТ 29227 Пробирки градуированные, вместимостью 5 или 10 см3 ГОСТ 1770 Цилиндры мерные 2 класса точности, вместимостью 50 и 500 см3 ГОСТ 1770 Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. 3.2. Реактивы Десмедифам с содержанием действующего вещества не менее 99,5 %, ВНИИХСЗР Метиловый спирт (метанол), хч ГОСТ 6995 Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная над КМп04 ГОСТ 6709 Кислота ортофосфорная, ч., 85 % ГОСТ 6652 Ацетон ГОСТ 2603 Изопропиловый спирт ТУ 6-09-402—87

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

МУК 4.1.1409—03

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные    ТУ 6-С

Воронки конусные диаметром 30—37 и 60 мм ГОСТ Груша резиновая

Колбы грушевидные на шлифе, вместимостью 100 см³    ГОСТ

Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью 250 см³    ГОСТ

Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм

Насос водоструйный    ГОСТ

Пробирки центрифужные    ГОСТ

Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария    ТУ 25-11-917—74

Стаканы химические, вместимостью 100 см³ ГОСТ 25336 Стекловата Стеклянные палочки Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Холодильник водяной, обратный    ГОСТ 9737

Хроматографическая колонка стальная, длиной 20 см, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1005-88.

19

МУК 4.1.1409—03

4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5)° С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят очистку ацетона (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.7. Очистка ацетона

Растворитель сушат над молекулярными ситами 4А и подвергают фракционной перегонке на ректификационной колонне, целиком собранной из стекла с числом теоретических тарелок не менее 30. Сосуд для перегонки погружают в водяную баню и через приемник пропускают медленно струю сухого азота. Затем температуру водяной бани повышают до 70—75° С и прибор промывают парами ацетона, после чего холодильник заполняют водой. До начала отбора главной фракции приемник несколько раз промывают дистиллятом. Перегонку продолжают до тех пор, пока в сосуде для перегонки не останется приблизительно 100 см³ ацетона. Температуру водяной бани следует снижать по мере уменьшения объема ацетона, во всех случаях она не должна превышать температуру кипения ацетона более чем на 20 .

МУК 4.1.1409—03

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 470 см³ воды, 1 см³ ортофосфорной кислоты, 50 см³ изопропилового спирта, добавляют 480 см³ метанола, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (и. 7.2) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 0,3 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов

7.4.1.    Исходный раствор десмедифама для градуировки (концентрация 1 мг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,1 г десмедифама, доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.

Растворы №№ 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.

7.4.2.    Раствор № 1 десмедифама для градуировки (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ исходного стандартного раствора десмедифама с концентрацией 1 мг/см³ (и. 7.4.1.), разбавляют метанолом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.4.3.    Рабочие растворы №№ 2—5 десмедифама для градуировки (концентрация 0,05—0,5 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 0,5, 1,0, 2,5 и 5,0 см³ стандартного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (и. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по и. 7.2), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2—5 с концентрацией десмедифама 0,05, 0,1, 0,25 и 0,5 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более 3 суток.

7.5. Отбор проб

7.5.1. Воздух рабочей зоны

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». В течение 15 мин последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 мин с объемным расходом 1—5 дм³/мин через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

МУК 4.1.1409—03

Для измерения концентрации десмедифама на уровне 0,5 ПДК воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4° С - 7 дней.

7.5.2. Атмосферный воздух

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 «ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест». Воздух со скоростью 5 дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации десмедифама на уровне 0,8 ОБУВ атмосферного воздуха необходимо отобрать 25 дм³ воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4° С - 7 дней.

7.6. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации десмедифама в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки №№ 2—5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по и. 7.6.1. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площадь пика десмедифама.

7.6.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

•    жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США);

•    колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 2,1 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Подвижная фаза: метанол - изопропиловый спирт - вода - орто-фосфорная кислота (48 : 5 : 47 : 0,1, по объему).

Скорость потока элюента: 0,3 см³/мин.

Рабочая длина волны: 240 нм.

Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

Ориентировочное время выхода десмедифама: 11,4—11,7 мин

22

1