Купить МУК 4.1.1236-03 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее
Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"
Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.
Документ служит для определения остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды
1 Вводная часть
2 Методика определения остаточных количеств флуфензина в воде, почве, яблоках, винограде, виноградном и яблочном соках хроматографическими методами
2.1 Основные положения
2.2 Реактивы, растворы, материалы, приборы, аппаратура и посуда
2.3 Отбор проб
2.4 Подготовка к определению
2.5 Описание определения
2.6 Условия хроматографирования и обработка результатов
3 Требования техники безопасности
4 Контроль погрешности измерений
5.Разработчики
Дата введения | 01.07.2003 |
---|---|
Добавлен в базу | 01.02.2017 |
Актуализация | 01.01.2021 |
16.03.2003 | Утвержден | Главный государственный санитарный врач Российской Федерации |
---|---|---|
Разработан | Учебно-научный консультационный центр Агроэкология пестицидов и агрохимикатов | |
Разработан | МСХА им К.А. Тимирязева | |
Издан | Роспотребнадзор |
Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Сборник методических указаний
Выпуск 2 Часть 7 МУК 4.1.1236—4.1.1239—03
МУК 4.1.1236—03
УТВЕРЖДАЮ
Главный государственный санитарный нр«ч Российской Федерации,
11ор»ыЯ заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
16 марта 2003 г.
Дата введения - 1 июля 2003 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Фирма-производитель: Агро-Кеми защита растений.
Торговое название: Флумайт.
Название действующего вещества: Флуфензин.
Название по ИЮПАК: 3-(2-хлорфенил)-6-(2,6-дифторофенил)-
1,2,4,5-тетразин.
Структурная формула:
Эмпирическая формула: C14H7N4CIF2.
Молекулярная масса: 304,69.
Химически чистый флуфензин представляет собой кристаллический порошок малинового цвета.
Температура плавления: 187- 1Я9°С.
Давление паров < 1,0 х 10'2 мПа (мри 25 °С).
Растворимость (г/л): ацетон 14.4; бензол —3.2; н-гексан — 0.3; метанол - 3,7; хлороформ —50; дихлормеш! - 7.2; ацетонитрил - 13,7. Растворимость в воде -0,23 мг/л (pH 7,0 при 25 °С).
Коэффициент распределения октимол/водн K1IW logP = 3,3 при 25 °С.
МУК 4.1.1236—-03
- » 1 MW
PR
X- содержание флуфензина в пробе, мг/кг (мг/л);
А - количество флуфензина в пробе, мг;
Р - масса (объем) анализируемой пробы, кг (л).
Оценку количества флуфензина в пробе (Л, мг) проводят путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен проб и стандартных количеств флуфензина или рассчитывают по величине площади пятен по формуле:
А = Л2 ~ М ~ ^ (s2 -S), где S2 - S\
А - количество флуфензина в пробе, мг;
S - площадь пятна флуфензина в пробе, мм ;
А, и Л2 - стандартные количества флуфензина в пятнах на хроматограмме с меньшим и большим содержанием по сравнению с анализируемой пробой соответственно, мг;
S, и S2 - площадь пятен стандартных количеств флуфензина с меньшим и большим содержанием по сравнению с анализируемой пробой, мм2.
Величину площади пятен определяют, накладывая на пластинку прозрачную бумагу или кальку, очерчивают контур пятна, переносят его на миллиметровую бумагу и подсчитывают число мм2, входящих в контур.
Помещение, в котором проводится определение флуфензина, обязательно должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией.
Работу с образцами, стандартами и растворителями следует проводить в вытяжном шкафу с использованием индивидуальных средств защиты.
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95 «ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».
Калинин В. А., проф.; Рыбакова О. И. Московская сельскохозяйственная академия им. К. А. Тимирязева. 127550, г. Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1, У НКЦ «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». Телефон/факс: 976-43-26.
Гринько А. П., к. х. н.; Чмиль В. Д. д. б. н., к. х. н.; Михайлов В. С., Зварич Г. В. Институт экогигиены и токсикологии им. Л. И. Медведя М3 Украины, Киев.
13
МУК 4.1.1236—03
Флуфензин в водных кислых средах гидролитически стабилен, но при pH > 7 быстро гидролизуется с ДТ50 - 60 ч. При pH 9,0 период полураспада в почве от 30 до 44 дней.
В воздухе может находиться в виде аэрозоля и пара.
Гигиенические нормативы:
ОДУ в воде - 0,002 мг/дм3;
ОДК в почве - 0,07 мг/кг;
ВМДУ в яблоках - 0,04 мг/кг и винограде - 0,02 мг/кг;
Область применения препарата. Флуфензин - специфический ака-рицид контактного и частично трансламинарного действия из группы производных тетразина. Эффективно подавляет растительноядных клещей во всех стадиях их развития при нормах расхода 60—100 г д.в./га.
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Методика основана на определении остаточных количеств флуфен-зина с помощью газожидкостной (ГЖХ), высокоэффективной жидкостной (ВЭЖХ) или тонкослойной (ТСХ) хроматографии после его экстракции из проб почвы, яблок, винограда ацетоном, из проб воды и сока - гексаном, очистки полученных экстрактов путем перераспределения в системе жидкость-жидкость и очистки в тонком слое силикагеля. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки или путем сравнения величины и интенсивности пятен на пластинках с пятнами аналитического стандарта.
2.1.2. Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в плодовых садах и на виноградниках.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода
Метрологическая характеристика метода представлена в табл. I. 1
Таблица 1 Метрологическая характеристика метода определения флуфензина в воде, почве, яблоках, винограде и соках (и ** S) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
2.2. Реактивы, растворы, материалы, приборы, аппаратура и посуда
2.2.1. Реактивы, растворы и материалы Флуфензин, аналитический стандарт, 97,3 %
Г ОСТ 9293—74 ТУ 6-09-3513—86 ГОСТ 5955-75 ТУ 6-09-3375—78 ГОСТ 20015-74 ГОСТ 6995-77 ГОСТ 5962 67 ГОСТ 7602 72
(фирма «Агро-Кеми защита растений», Венгрия)
Азот, осч Ацетон, осч Бензол, чда Гексан, чда Хлороформ, чда
72
-76
Спирт метиловый, для жидкостной хроматографии Спирт этиловый, ректификат Вода дистиллированная Вода бидистиллированная, деионизированная или перегнанная над перманганатом калия Натрия сульфат безводный, чда (прокаленный)
Серебра нитрат, чда Калия перманганат, ч
Аммония гидроксид, чда, 25 %-й водный раствор
МУК 4.1.1236—03
Подвижная фаза для ВЭЖХ:
Метиловый спирт-вода (9+1, об/об)
Подвижные фазы для ТСХ:
№ 1 - хлороформ
№ 2 - бензол-гексан-ацетон (15+ 10 + 2, об/об)
Проявляющий реактив для ТСХ:
0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 10 мл гидроксида аммония, перемешивают до полного растворения нитрата серебра и доводят объем раствора до 200 мл ацетоном. Хранят в темной склянке в холодильнике Фильтры бумажные обеззоленные «красная лента» ТУ 6-09-2678—77
Фильтры бумажные «синяя лента» ТУ 6-09-2678—77
Пластинки хроматографические «Силуфол»
(Чехия), 15 х 15 см
Основной стандартный раствор флуфензина для ГЖХ и ТСХ готовят с концентрацией 100 мкг/мл в ацетоне в мерной колбе и хранят в холодильнике не более 3 месяцев.
Рабочие стандартные растворы флуфензина для ГЖХ с концентрацией 1—10 мкг готовят непосредственно перед использованием путем разбавления основного стандартного раствора ацетоном в мерных колбах вместимостью 25 мл.
Основной стандартный раствор флуфензина для ВЭЖХ готовят с концентрацией 100 мкг/мл в метиловом спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и хранят в холодильнике не более 3 месяцев.
Рабочие стандартные растворы Флуфензина для ВЭЖХ с концентрацией 0,3—3,0 мкг/мл готовят непосредственно перед использованием путем разбавления основного стандартного раствора смесью растворителей метиловый спирт-вода (9+1, об/об).
ТУ 64-1-1081—73
ТУ 25-11-917 —74 ТУ 46-22-603—75 ГОСТ 10394-72 ГОСТ 1770—74Е ГОСТ 25336—82Е ГОСТ 25336—82Е ГОСТ 25336—82Е ГОСТ 1770—74Е ГОСТ 1770—74Е ГОСТ 20292-74
2.2.2. Приборы, аппаратура и посуда
Аппарат для встряхивания колб типа АВУ-60 или аналогичный
Испаритель ротационный с набором колб Баня водяная
Колбы конические, вместимостью 100 мл Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100 мл Воронки делительные, вместимостью 500, 1 000 мл Воронки химические Воронка Бюхнера Колба Бунзена
Колбы мерные, вместимостью 50, 100 мл Пипетки мерные, вместимостью 0,1; 1,0; 10,0 мл 2
Цилиндры измерительные, вместимостью 50, 100 мл Пробирки градуированные на шлифах, вместимостью 10 мл
Хроматограф газовый с детектором постоянной скорости рекомбинации Колонка стеклянная (1 000 х 3,5 мм), заполненная Хроматоном N-AW-DVCS (0,16—0,20 мм) с 5 % SE-30 Микрошприц МШ-10
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны Хроматографическая колонка стальная, длина 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм, содержащая Inertsil ODS-2 (зернение 5 мкм)
Камера хроматографическая Пульверизатор стеклянный
2.3. Отбор проб
Отбор, хранение и доставка проб проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» № 2051-79 от 21.08.79.
2.4. Подготовка к определению
2.4.1. Подготовка и кондиционирование колонки для газовой хроматографии Готовую насадку (5 % SE-30 на Хроматоне Н-АИ) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 °С в течение 8—10 ч.
2.4.2. Подготовка и кондиционирование колонки
для жидкостной хроматографии Колонку Inertsil ODS-2 (зернение 5 мкм) устанавливают в термостате хроматографа и стабилизируют при температуре 20 °С и скорости потока подвижной фазы 1 мл/мин в течение 3—4 ч.
2.4.3. Приготовление стандартных растворов
Основной стандартный раствор флуфензина для ГЖХ и ТСХ готовят с концентрацией 100 мкг/мл в ацетоне в мерной колбе вместимостью 50 мл и хранят в холодильнике не более 3 месяцев.
Рабочие стандартные растворы флуфензина для ГЖХ с концентрацией I—10 мкг готовят непосредственно перед использованием путем разбавления основного стандартного раствора ацетоном в мерных колбах вместимостью 25 мл.
МУК 4.1.1236—03
Основной стандартный раствор флуфензина для ВЭЖХ готовят с концентрацией 100 мкг/мл в метиловом спирте в мерной колбе вместимостью 50 мл и хранят в холодильнике не более 3 месяцев.
Рабочие стандартные растворы флуфензина для ВЭЖХ с концентрацией 0,03—3,0 мкг/мл готовят непосредственно перед использованием путем разбавления основного стандартного раствора смесью растворителей метиловый спирт-вода (9+1, об/об) в мерных колбах вместимостью 25 мл.
2.5. Описание определения
2.5.1. Вода
Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку вместимостью 1 000 мл, добавляют 10 г хлорида натрия, перемешивают раствор до полного растворения соли и экстрагируют гексаном трижды порциями по 50 мл в течение 2 мин каждый раз. Верхний органический слой отделяют, собирая в коническую колбу вместимостью 250 мл, и сушат настаиванием над безводным сульфатом натрия (10 г) в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Затем переносят экстракт в грушевидную колбу вместимостью 200 мл, фильтруя через бумажный фильтр «красная лента», помещенный в химическую воронку. Промывают фильтр с сульфатом натрия гексаном дважды порциями по 5 мл, присоединяют смывы к основному экстракту. Упаривают объединенный экстракт на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 40 °С до объема -1 мл, а затем досуха в токе азота или сухого воздуха.
2.5.2. Почва
Навеску воздушно-сухой почвы (25 г) помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, приливают 50 мл смеси вода- ацетон (1+5, об/об) и экстрагируют в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Затем содержимое колбы фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр «синяя лента» в колбу Бунзена. Экстракцию повторяют еще дважды порциями той же смеси (30 мл), встряхивая каждый раз по 30 мин.
Объединенный экстракт переносят в делительную воронку вместимостью I 000 мл, добавляют 350 мл дистиллированной воды, 10 г хлорида натрия, перемешивают до полного растворения соли и экстрагируют флу-фензин гексаном (3 х 50 мл). Отделяют гексановый слой, сушат безводным сульфатом натрия (10 г) в течение 30 мин при периодическом встряхивании, переносят в грушевидную колбу вместимостью 200 мл и упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 40 °С до объема ~1 мл, а затем досуха в токе азота или сухого воздуха. 3
МУК 4.1.1236—03
Затем проводят очистку в тонком слое силикагеля (при определении методами ГЖХ и ВЭЖХ). Для этого сухой остаток после упаривания количественно наносят на пластинку «С илу фол» с помощью ацетона. Параллельно наносят стандарт флуфензина (5 мкг). Пластинку помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин до начала хроматографирования налита смесь подвижных растворителей № 1 или № 2. После развития хроматограммы (высота подъема фронта растворителей 10 см) пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в вытяжном шкафу до полного удаления растворителей. Отмечают зону локализации флуфензина в пробе на уровне стандарта флуфензина в виде красного пятна. Вырезают полоску с зоной локализации флуфензина в пробе, помещают ее в плоскодонную колбу вместимостью 50 мл и приливают 10 мл ацетона. Экстрагируют флуфензин со слоя силикагеля в течение 15 мин при периодическом встряхивании. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» в круглодонную колбу вместимостью 50 мл. Колбу и фильтр промывают несколькими порциями ацетона по 5 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 40 °С до объема ~1 мл, а затем досуха в токе азота или сухого воздуха.
2.5.3. Яблоки, виноград
Помещают 25 г измельченной пробы в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл, приливают 50 мл ацетона и экстрагируют в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Содержимое колбы фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр «синяя лента» в колбу Бунзена. Экстракцию повторяют дважды. Объединенный экстракт переносят в грушевидную колбу вместимостью 200 мл и упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 40 °С до полного удаления ацетона. К водному остатку добавляют 10 мл ацетона и помещают колбу в морозильную камеру на 1 ч при температуре - 4 °С. Затем охлажденный экстракт фильтруют через складчатый фильтр «красная лента» в делительную воронку вместимостью 500 мл, добавляют 6 г хлорида натрия, 100 мл дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения соли и экстрагируют трижды гексаном порциями по 50, 30, 30 мл в течение 2 мин каждый раз. Объединенный гексановый экстракт сушат настаиванием над безводным сульфатом натрия (10 г) в течение 30 мин при периодическом встряхивании, переносят раствор в грушевидную колбу вместимостью 200 мл и упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 40 °С до объема ~1 мл, а затем досуха в токе азота или сухого воздуха.
Затем проводят очистку проб в тонком слое силикагеля так, как описано в п. 2.5.2.
МУК 4.1.1236—03
2.5.4. Сок (виноградный, яблочный)
100 мл сока помещают в делительную воронку вместимостью 500 мл, добавляют 100 мл дистиллированной воды, 5 г хлорида натрия, перемешивают раствор до полного растворения соли. Экстрагируют флуфензин гексаном (3 х 50 мл) по 2 мин каждый раз. При образовании эмульсии добавляют 10 мл этилового спирта для лучшего расслоения фаз. Объединенный гексановый экстракт сушат настаиванием над безводным сульфатом натрия (10 г) в течение 30 мин, при периодическом встряхивании, переносят раствор в грушевидную колбу вместимостью 200 мл и упаривают на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 40 °С до объема ~1 мл, а затем досуха в токе азота или сухого воздуха.
2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов
2.6.1. Условия хроматографирования
ГЖХ.
Сухой остаток, полученный после упаривания, количественно переносят ацетоном в градуировочную пробирку (общий объем ацетона 1 мл). 3 мкл полученного раствора с помощью микрошприца вводят в испаритель хроматографа и хроматографируют при следующих условиях: температура термостата колонок - 200 °С, температура испарителя -240 °С, температура детектора - 260 °С, скорость газа-носителя (азот осч) через колонку - 60 мл/мин, шкала электрометра - 20 х Ю4 Ом, скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч. Время удерживания флуфен-зина 6 мин 15 с. Линейный диапазон детектирования 3—30 нг.
Хроматографирование одной пробы проводят дважды. Измеряют на хроматограммах высоты пиков, соответствующих флуфензину, и вычисляют среднее значение из двух параллельных определений. Количественное определение проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хромато1раммами стандартных растворов флуфснзина с концентрацией 1 —10 мкг/мл.
ВЭЖХ.
Сухой остаток, полученный после упаривания, количественно переносят смесью растворителей метиловый спирт-вода (9 + 1, об/об) в градуированную пробирку (общий объем пробы 1 мл). 20 мкл полученного раствора вводят в инжектор хроматографа и хроматографируют при следующих условиях: стальная колонка (длина 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм); температура колонки - 20 °С; подвижная фаза: метиловый спирт-вода (9+1, об/об); скорость потока подвижной фазы -1,0 мл/мин; рабочая длина волны УФ-детектора - 270 нм; чувствительность - 0,04 ед. абсорбции на шкалу; скорость диаграммной ленты -5 мм/мин; неподвижная фаза Inertsil ODS-2 (5 мкм); время удерживания флуфензина - 4,4 мин. Линейный диапазон детектирования 6—60 нг. 5
Хроматографирование одной пробы проводят дважды. Измеряют на хроматограммах высоты пиков, соответствующих флуфензину и вычисляют среднее значение из двух параллельных определений. Количественное определение проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов Флу-фензина с концентрацией 0,3—3,0 мкг/мл.
Сухой остаток, полученный после упаривания, растворяют в 0,2 мл ацетона и количественно наносят на хроматографическую пластинку с тонким слоем силикагеля («Силуфол»). На эту же пластинку наносят 2, 4, 6 и 10 мкг флуфензина в виде раствора в ацетоне и проводят хроматографирование в одной из систем подвижных растворителей (№ 1 или №2). Для хроматографирования используют камеру, насыщенную парами подвижных растворителей. Для этого в хроматографическую камеру наливают за 30 мин до хроматографирования смесь растворителей. Через 30 мин поднимают крышку камеры и быстро помещают в нее пластинку для развития хроматограммы. После окончания процесса хроматографирования пластинку извлекают из камеры и сушат в вытяжном шкафу до полного исчезновения следов растворителей. Флу-фензин обнаруживается на пластинке в виде пятна красного цвета. Для повышения надежности идентификации флуфензина пластинку обрабатывают проявляющим реактивом, а затем помещают на 30 мин под источник Уф-излучения. Флуфензин обнаруживается в виде темно-серого пятна на светло-сером фоне с величинами Rf - 0,78 ± 0,05 (подвижная фаза № 1) и 0,75 ± 0,05 (подвижная фаза № 2).
Количество флуфензина определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятна пробы и стандарта. Линейная зависимость между концентрацией и площадью пятна соблюдается в интервале 2—10 мкг.
2.6.2. Обработка результатов анализа Для определения содержания флуфензина в пробах с помощью ГЖХ и ВЭЖХ используют следующую формулу:
X =
, где
А • Hi • Уг ЮР
H\V\P
X- содержание флуфензина в пробе, мг/кг (мг/л);
А - количество стандарта флуфензина, введенного в хроматограф, мг; Н, - высота хроматографического пика стандарта флуфензина, мм; И2 - высота хроматографического пика флуфензина в пробе, мм;
У, - объем экстракта пробы, введенной в хроматограф, мкл;
У2 ~ общий объем упаренного экстракта, мкл;
Р - масса (объем) анализируемой пробы, кг (л).
Для определения содержания флуфензина в пробах с помощью ТСХ используют следующую формулу: 4
1
2
3
4
5