Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 23

МОСКВА

ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ информации, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1995 г.

Государственная комиссия пс химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 23

МОСКВА

ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1995 г.

X - содержание хлодинафоп-пропаргила з анализируемой пробе, мг/ кг;

С - концентрация стандартного раствора, мм:

Hi - зысота пика стандартного раствора, мм:

Н: - зысота пика пробы.мм:

V2 - объем стандартного беязилированного раствора топика, введенного з хроматограф, мкл:

V1 - объем бензилированного экстракта пробы, мл;

V3 - объем беязилирозаяной пробы, введенной в хроматограф, мхл:

Р - назеска анализированной пробы, г;

К - коэффициент разведения (V4 / Vj ).

2.6.4.2. ТСХ.

Количество препарата (X. мг/кг) в анализируемой назесхе пробы зычис-ляют по формуле:

У V

где

V    - количество пестицида з хроматографируемом объеме пробы, мхг.

V    - общий объем пробы, мл;

V    i - объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;

Р - навеска пробы, г.

3. Требования техники безопасности.

Соблюдать все требования безопасности, обычно рекомендуемые хтя работы с органическими растворителями и токсическими веществами.

63

I. Ахйл- оропаквизафоп.

2-Берет-спеаиаль- фенпиклонил + имазалкл.

3.    Берет-фенпиклонил.

4. Длкуран- хлортолурон. о.Лограя- триасульфурон.

б.Маврюс- флювалинат.

7*Рубиган- фенарямол.

8. Сандофан- оксадиксил.

9. Сатис- триасульфурон + флюглшсофен. Ю.Телл- примисульфурон.

11-Тилт- пропихоназол.

12. Топик- хлодинафоп + пропаргял.

13. Фронгьер- диметенамид.

14.ЭЙМ- клорфлуазурон.

Указатель химических названий по ИЮ ПАК.

L.Диметенамид-    стр. 3, 7

2.0ксадиксил-    11

3. Примисульфурон-    19, 24

4. Пропаквизофоа-    28,33

5-Попиконазол-    40

6. Триасулъфурон-    45,51

7. Хлодинафоп-пропаргил-    56,62

8. Хлортолурон-    67

9. Хлорфлуазурон-    71

Ю.Фенаримол-    76

11 .Фенпиклонил + имазалил- 79 12.Флюгликофен-    93.98

13 .Флювалинат-    37

Псиме^ание

На странице 1С4 а указателе химических названий по ИЮ ЛАК надо учесть, что номера страниц сдвигаются на 2 згесед.

Заказ 838. Типография, Ветошный пер.. 2. Тираж 1000.

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Редакционная коллегия:

Калинин В.А.- к.с.н., профессор, зав.кафедры ТСХА; Пушкина Г.П.- к.б.н.. Российский институт лекарстр°^ичы* (л/пьтуо: Борисов Г.С.-заз. КТЛ PPC7A3P;

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательсхих учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических , контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов а продуктах литания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ответственный за выпуск - Орехов Д.А.. заместитель председателя Госхимкомиссии тел. 207-63-90

Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией зашиты растений ТлавхимзащигъГ МСХ РФ

г. Раменское Московской обл., ул. Нефтегазосъемки 11/41 тел. (246) 3-09-52

ОГЛАВЛЕНИЕ:    стр.

1.    Методичесхие указания по определению лим стенам ил а з золе, зеленой массе, почве а зерне метолом тзо;кллхостной хроматографии.

N 6232-91 29 июля 1991 г.................................... 5

2.    Методические указания по определению диметенамила з зоз-лухе рабочей зоны метолом газожидкостной хроматографии.

N 6231-91 29 июля 1991 г.................................... 9

3.    Методические указания по определению оксадикслла в картофеле, огурцах, томатах, сахарной сзехле. зинограде, почве и золе методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

N 6270-91 29 июля 1991 г.................................... 13

4.    Методические указания по определению примисульфурона в золе, почве, растительном материале методами тонкослойной и газожидкостной хроматографии.

N 6210-91 29 июля 1991 г.................................... 21

5.    Методические указания по определению примисульфурона в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

N 6211-91 29 июля 1991 г.................................... 26

6.    Методические указания по определению пропаквизафопа s воздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонхослойяой х ро матограсЬии.

N 6250-91 29 июля 1991 г.................................... 30

7.    Методические указания по определению пропаквизафопа в растительном материале, волокне и семенах хлопчатника, воде и почве: методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

N 6251-91 29 июля 1991 г.................................... 35

8.    Методические указания по определению пропиконазола в воздухе рабочей зоны методами газожидхостной и тонкослойной хроматографии.

N 6246-91 29 июля 1991 г.................................... 42

9.    Методические указания по определению триасульфурона з растительном материале, соломе, зоде и почве методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

N 6177-91 29 июля 1991 г.................................... 47

10.    Методические указания по определению триасульфурона в зоздухе рабочей зоны методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

N 6158-91 29 июля 1991 г.................................... 53

11.    Методические указания по определению хлодинафоп - пропар-гила в растительном материале, зерне, почве и воде методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии.

N 6253-91 29 июля 1991 г.

гила з воздухе рабочей зоны методами газожпдхостной и тонкослойной хроматографии.

N 6252-91 29 июля 1991 г.................................... 64

13.    Методические указания по определению хлортолурона з зоз-духе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

N 6184-91 29 июля 1991 г.................................... 69

14.    Методические указания по определению хлорфлуазурона в растительных объектах, воде и почве методом жидкостной хроматографии.

N 6150-91 29 июля 1991 г.................................... 73

15.    Методические указания по определению фенаримола з воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии.

N 6275-91 29 июля 1991 г.................................... 78

16.    Методические указания по определению фенпиклонила и има-залкла при совместном присутствии з воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

N 6157-91 29 июля 1991 г.................................... 81

17.    Методические указания по определению фенпиклонила в зерне, почве и воде методом газожидкостной хроматографии.

N 6175-91 29 июля 1991 г.................................... 85

18.    Методические указания по определению флувалината в меде и воске методом газожидхостной хроматографии.

N 6223-91 29 июля 1991 г.................................... 89

19.    Методические указания по определению флюгликофена в воде, почве, растительном материале методом газожидкостной хроматографии.

N 6247-91 29 июля 1991 г.................................... 95

20.    Методические указания по определению флюгликофена з воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

N 6213-91 29 июля 1991 г.................................... ИЮ

21. Предметный указатель.     104

2. Методика определения.

2.1.    Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода.

Метод определения хлодинафоп - про пар пт оснозан на извлечении его метаболита после пиролиза в кистой среде из исследуемого объекта смесью органических растворителей и постедующем определении с ДПР в виде бензиль-еого производного.

Метод определения гербицида в тонком слое силихаггля оснозан на извлечении его з зиле кястоты и обнаружении зон локализации проявляющим реагентом.

2.1.2. Метролопгческая характеристика метода.

Исследуемый объект | Предел об- j ! нарушения.мг/кг | Среднее значение 1 определения.'?' : ; Стандартное от-! клонение.% i Доверительный ! интервал 1 среднего. \ гжх Почва 1 0.005 * 30.0 i i 6.70 ±3.00 Растительный 0.005 j 80.0 3.70 ; —10,60 матеонал 1 Зесно (шпеянпа) * 0.005 ! 81.0 ! f 5.63 i ! ±6.90 Зерно (ячмень) ! 0.005 1 80.5 1 1 5.70 ±7.05 Зола 1 0.001 1 92.0 ! 4.65 i ±5.32 тех Почва i i о.з I 75.4 1 S.25 i ±10.12 Растительный i 0,5 1 62,0 9.05 1 ±11,11 материал 1 j I Зерно (пшеница) ! O.o ! 70.0 I 9.60 ±11.78 Зерно (ячмень) i 0.5 ! 72.0 1 9.52 ±11.34

2.2. Реактивы и растворы.

Ацетон, осч., ТУ 6-09-3513-86.

Гексан. ТУ 6-09-3375-78.

Лиэтиловыйэфир (медицинский).

Этилаиетат, ч.лл.. ГОСТ 22300-76.

0.1 N^r НС1 (фиксанал).

1.0    N НС1 (фиксанал).

1.0    N NaOH (фиксанал).

Сульфат натрия безаодный.

Лимонная кистота, ГОСТ 3652-69.

Пентафторбензилбромид. ч.. 1%-й раствор з ацетоне. <реактив по заказу синтезирует институт органической химии СО АН СССР; 630090, г. Новосибирск. проспект Лаврентьева, д. 9).

Углекислый калий, х.ч.. ГОСТ 4221 -76. 30% -Й водный раствор, промытый бензолом.

Азот з баллоне, особой чистоты. ГОСТ 9293-74.

з*9

Неподвижная фаза 5% ХЕ-60 на Хроматоне N-AW-DMCS.

2.3.    Приборы и посуда.

Ротационный испаритель типа ИР-INI. ТУ 23-11-917-76.

Колбы грушевидные (круглодонные) емкостью 500 мл, 250 мл, 100 мл и 50 мл ОКШ 500-29150-14, ГОСТ 10334-72.

Колбы мерные на шлифах, зместимостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пробирки мерные на шлифах, зместимостью 5 и 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Аппарат хтя встряхивания, ТУ 25-11-917-79.

Колба Бунзена; ГОСТ 6514-63.

Воронка Бюхнера, ГОСТ 6574-63.

Делительная воронка, емкостью 250 мл.

Холодильник Либиха.

Баня водяная.

Колбы конические, емкостью 500 мл, ГОСТ 1770-74.

Микрошприп на 10 мкл, МШ-10, TYSE - 2833.024.

Секундомер СД Спр. 1.2000, ГОСТ 5072-79.

Газовый хроматограф серии **Ивет” - с ДПР.

Колонки стеклянные длиной 1,0 м и внутренним диаметром 3,5 мм.

Камера хроматографическая, ГОСТ 23932-79.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.

Пластинки хроматографические “Салуфол” УФ-254 (Хемапол, ЧССР).

2.4.    Отбор, хранение и подготовка проб.

Отбор, хранение и доставка проб производится в соответствии с ^uУнифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пишевых продуктов и объектов окружаю шей среды хтя определения микро количеств пестицидов”, утвержденных заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР N 2057-79 от 21.08.79 г.

2.5.    Подготовка к определению.

2.5.1.    Приготовление стандартного раствора.

Основной стандартный раствор (ОСР) топика с концентрацией 100 мкг/мл готовят взятием навески 10 мг (0,0100 г) и растворением з ацетоне з мерной колбе емкостью 100 мл. Хранить з холодильнике а течение 3-х месяцев. Рабочие стандартные растворы с содержанием 10 мкг/мл и 1.0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением ОСР ацетоном. Хранить в холодильнике    з

течение 2-х месяцев.

2.5.2.    Приготовление буферного раствора с pH * 3.0.

Готовят раствор N 3 - 21,04 г лимонной кислоты помешают з 1,0 л мерную колбу, затем 200 мл 1 N раствора едкого натра и доводят до метки дистиллироза иной водой. Раствор N I -0.1N раствор НС1. раствор N 2 - 1.0 N раствор МаОН. Раствор Ы 4 - 40.3 мл раствора N 3 доводят 0,1 N раствором НС1 до метхи.

2.5.3.    Подвижная фаза хтя ТСХ.

Гексан: этилацетат: уксусная кислота » 33: 16,5: 0,5

60

2.5.4.    Проттяюший реахтиз. 0,05%-й расгзор бромфенолового синего в ацетоне (10 мл) разбавляютдо 100 мл 1 %-м водно-ацетоновым (1:3) раствором азотнокислого серебра. 5%-й раствор уксусной кислоты.

2.6. Описание определения.

2.6.1.    Экстракция, очистка экстрактов.

2.6.1.1.    Почва. 25 г анализируемой пробы помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл, заливают 100 мл смеси ацетон: буферный раствор с рН=3 (80:20). Смесь перемешивают на аппарате' для встряхивания в течение 1 часа, фильтруют на воронке Бюхнера с фильтром “синяя лента**.

Остаток на фильтре тщательно промывают 50 мл смеси ацетон: буферный раствор с рН=3 (80:20). Фильтрат (150 мл) концентрируют до 30 мл (V4 ) в закууме при - 40° С. Из V4 берут алихзоту 5 мл (Vs) я прибавляют 60 мл 0,1 N раствора НС1, плотно закрывают пробкой на шлифе и проводят гидролиз при 100° С в течение 40 мин.

Посте гидролиза к реакционной смеси прибавляют 6,0 мл IN NaOH (pH -щелочная). Смесь экстрагируют 10-15 мл гексана я затем 6-10 мл этилапетата (органическую фазу выбрасывают). К водной фазе прибавляют 6 мл 1 N НС1 (pH - кистая).

Охлаждают и экстрагируют метаболит тогшка CGA 193469 смесью гексан-диэтиловый эфир (4:1) 3x10 мл. Экстракт сушат безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме водоструйного насоса досуха. Далее проводят оензили-рование в стучае проведения определения методом ГЖХ.

2.6.1.2.    Растительный материал. 10 г измельченной зелени (ячменя) помешают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, заливают 70 мл смеси ацетон: буферный раствор с рН=3 (80:20) и экстрагируют на аппарате для встряхивания з течение I часа.

Экстракт фильтруют на зоронке Бюхнера с бумажным фильтром "синяя лента”. Остаток на фильтре промывают 30 мл указанной выше смеси. Объединенный фильтрат концентрируют при 40³ С на ротационном испарителе до 20 мл (V4 ). Далее определение проводят согласно разделу 2.6.1.1.

2.6.1.4.    Вода. 200 мл воды помешают з плоскодонную колбу емкостью 500 мл, прибавляют 70 мл хлороформа. Смесь экстрагируют на аппарате для встряхивания з течение 1.5-2 часов.

Экстракцию повторяют дважды. Отделяют хлороформный стой и упаривают его а закууме зодоструйного насоса досуха. К сухому остатку прибавляют 50-60 мл 0.1 N НС1. кислотный гидролиз проводят пои температуре водяной бани 100^а С з течение 40 мин. Охлаждают и экстрагируют метаболит топика CGA -193469 трижды смесью гексан: эфир = 4:1 по 5 мл. Экстракт упаривают досуха. Долее проводят бензилирование з стучае опредлениа методом ГЖХ.

2.6.1.3. Зерно. Определение проводят согласно разделу 2.6.1.2.

2.6.2. Получение производных.

К сухому остатху прибавляют 10 мл ацетона. 0.2 мл I % -ного ацетонового раствора пентафторбензилбромида, 0.03 мл 30% водного раствора углекислого

6L

калия я 3 г безводного сульфата натрия. Бензплнрование проводят з круглодонной колбе с обратным холодильником при 70-75³ С в течение 40 минут. Охлаждают и 3 мхл вводят з хроматограф.

2.6.3. Условия хроматографирования.

2.6.3Л. ГЖХ.

Газовый хроматограф серил ^Цзет” с ДПР.

Колонка хроматографическая стеклянная 1.0 м с внутренним диаметром 3.5

мм.

Неподвижная фаза 5% ХЕ-60 на Хроматоне N'-AW-DMCS.

Температура колонки - 220³ С.

Температура испарителя - 260° С.

Температура детектора - 260³ С.

Газ - носитель - азот с расходом 65-70 мл/мин.

Вводимый объем - 3 мхл.

Шкала множителя - 20.10    .

Скорость диаграммной ленты - 240 мм/час.

Время удерживания - 15,5 мин.

2.6.3.2. ТСХ.

Пробу метаболита топика CGA 193469, сконцентрированную до 0.2 мл количественно переносят на пластинку “ С илу фол”. Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием метаболита 0,2; 0,5 и I мкг действу-юшего вещества топика. Хроматографируют в системе растворителей гексан: этилацетат: уксусная кислота = 66: 33: I.

После высушивания пластинку обрабатывают 0.05% -ным раствором бром-феноло во го синего я обесцвечивают фон обработкой пластинки 5 % - ным раствором уксусной кислоты. Топик обнаруживается а аиле синего пятна на желтом фоне. Rf = 0.75г 0.05.

Определение содержания топика в пробе проводят путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен проб с пятнами стандартных растворов. Пропорциональная зависимость плошали пятна стандартных растворов.

Пропорцоинальнаязависимость плошали пятна от концентрации наблюдается в пределах 0,5 - 2.0 мкг. При больших концентрациях анализируют аликвоту экстракта.

2.0. 4. Обработка эезультатов анализа.

2.0. 4Л. ГЖХ.

Количественную оценку проводят методом абсолютной калибровки по сравнению со стандартом топика.

Расчет результатов анализа проводят по формуле:

С.Яд.Г\.Уг , Hi.V'z.P ⁴