Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Сборник № 22 Часть 2-ая

МОСКВА

ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками

Редакционная коллегия:

Новикова К. Ф.-начальник сектора ННХСЗР; Калинин В. А.-к.с.н.,профессор, зав. кафедры ТСХА; Гиренко Д.В.-к.х.н.,зав.аналитической лаборатории УКР ВНИИГИНТОКС; Борисов Г.С.-зав. КТЛ РРСТАЗР; Устинова Т.Н.-ведущий специалист КТЛ РРСТАЗР.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

Ответственный за выпуск - Орехов Д.А.заместитель председателя

Госхимкомиссии -тел. 207-63-90

Сборник подготовлен к изданию Российской республиканской станцией

защиты растений “Главхимзащиты" МСХ РФ

г.Раменское Московской обл., ул.Нефтегазосьемки 11/41 тел. (246) 3-09-52

тавляют при комнатной температуре (исключить прямое попадание солнечного света).Через 5-7 минут глуфосинат аммоний проявляется в виде пятен сиренево-красного цвета ,К£=0,7-0,05.

Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартов.Прямопропорциональная зависимость между концентрацией и площадью пятна (при одинаковых нанесенных объемах) соблюдается в интервале 0,1-5 мкг.Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (5 мкг),для хроматографирования необходимо брать аликвоту (0,1; 0,2 мл) экстракта (из 10 мл).

Концентрацию препарата в воздухе X мгДг рассчитывают по формуле:

G-количество препарата,найденное в хроматографируемом объеме пробы,мкг; V-j-объем пробы,нанесенный на пластинку,мл;

V-общйй объем пробы (экстракта),мл;

Узд-обьем воздуха,отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям,л.

Метод ГЖХ

Полученный экстракт (10 мл) переносят в круглодонную колбу емкостью 50 мл и упаривают под вакуумом на роторном испарителе при температуре бани не более 50^С досуха .Прибавляют для удаления остаточной воды 3-5 мл этилацетата и испаряют еще раз досуха.

Получение хроматографируемых производных

К сухому остатку прибавляют, 2 мл ледяной уксусной кислоты и встряхивают 15 мин.Затем прибавляют 8 мл триметилортоацетата,интенсивно петря хивают и нагревают с обратным холодильником в течение 4-х часов на кол-

25

бонагревателе (электроплитке или песчаной бане) .периодически встряхивав колбу вместе с холодильником.По окончании прибор снимают с нагревателя, добавляют в колбу трижды по 15 мл толуола и испаряют его каждый раз под вакуумом при температуре бани не более 50°С до CW5-1 мл (до удаления запаха уксусной кислоты).К остатку прибавляют 5 мл метанола.перемешивают и упаривают растворитель до 1-1,5 мл,переносят в мерную пробирку .доводят точно до 10 мл и анализируют методом ГЖХ. Одновременно с пробами мето-ксилируют стандартные рабочие растворы для ГЖХ ("а","б",“в").

Измерение методом ГЖХ проводится на хроматографе с ТИД или ПФД~фо-сфорным:

-колонка стеклянная,длина 1 м,диаметр 3,5 мм

-фаза ЭХ 0V-17 на хроматоне N-AW-DMCS

-условия анализа -    ТИД    ПФД-фосфораыЙ

газ-носитель азот	23 мл/мин	30 мл/мин
водород	14-17 мл/мин	70 мл/мин
воздух	400 мл/мин	100 мл/мин
Температура ввода	225°С	225°С
детектора	-	225°С
колонки	220°С	220°С
Вводимый объем	2-3 мкл	2-3 мкл
Время удерживания	3,25 мин	1,5 мин

3

Концентрацию глуфосината аммония (баста) (X мг/м ) в воздухе рас считывают по формуле:

С___V__.н_.

ст ст ттр

^Hct-V^V20

С -концентрация стандартного раствора производного баста,введенного в

СТ

хроматограф, мкг/мл;

V -объем стандартного раствора производного баста,введенного в хрома-

тограф,мкл;

Ндр-высота пика хроматографируемого объема пробы,мм;

V-общий объем пробы,мл;

Н_ст-высота пика хроматографируемого объема стандарта,мм;

-хроматографируемый объем пробы,мкл;

^V20 -объем воздуха,отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям, л.

8.Требования безопасности

Выполняются в соответствии с "Правилами устройства,техники безопасности, производственной санитарии,противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, (отделениях,отделах) санэлидучреядений системы М3 СССР" Л 2255-8V от 20.01.81.

27

Предметный указатель

Альто см.ципроконазол.

Арсенал см.имазапир.

Баста см.глуфосинат аммоний.

Беномил 89.

Бенсульфурон-метил 5-Бифенат см.бифентрин.

Вифентрин 9*4(2).

БМК 90.

Бромистый п-трифенилфосфоний метилбензальдегид см.азоксофор. Бромпропилат 10(2).

Галакон см.флгаоифоп-бутил.

Гексафлюмурон 16*19(2).

Глуфосинат аммоний 24*33*20(2).

Диафентиурон 46.28(2).

Диметоморф 53*34(2).

Димилин см.дифлюбензурон.

Дифеноконазол 59*41(2).

Дифлюбензурон 45(2).

Имазапир 65*51(2).

Ймидозалинон см.имазапир.

/1мидоклоприд 72,56 (2 у.

Йнсегар см.феноксикарб.

Карбарил 78.

Карбофуран 89-Квинклорак 83.62(2).

Комби препарат 89.

Консзлт см.гексафдумурон.

134

Кумафурил 100,67(2).

Куратер см.карбофурая.

Лондакс см.бензсульфурон-метил.

4-Метилентрифенил фосфоний бромид- 4-нитродифенилазоме тин см. азо-ксофор.

Неорон см.бромпропилат.

Нортрон см.атофумесат.

0 низ ид см.флкхзифоп бутил.

Пегас см.диафентиурон.

Пеиконазол 71 (2).

Пиразосульфурон-этил 104,77(2).

Потейтин 109.

Промет см.фуратиокарб.

Пума-супер см.феноксипроп-етил.

Санмайт 116,81(2).

Сириус см.пиразосульфурон-этил.

Скор см.дифеноконазол.

Сонет см.гексафлюмурон.

Суми-альфа см.эсфенвалерат.

Тальстар см.бифентрин.

Тирам 89.

Титус 123,128,87(2).

ТМТД см.тирам 89.

Топаз см.пенконазол.

Трамат см.атофумесат.

Узген см.бевомил.

Фацет см. квинклорак.

Феноксикарб 152,91(2).

Феноксапроп-зтил 159,170,97(2).

Флюзифоп 175-

135

Флюзифоп-бутил 175.

Фосфит алюминия 202,211.

Фузилат см. флюзифоп-бутил.

Фумаран см.кумафурил.

Фунгицид 1991 см.беномил.

Фундазол см.беномил.

Фуратжжарб 18$, i05 (2). Фурадан-300 см-препарат "Комби", фуроре см. феноксагтроп-0тил.

Фуроре -супер см.феноксапроп-етил. Хлорфдуазурон 112(2).

Ципроконазол 195*117(2).

ЦГА 112913 см.хлорфлюазурон. ЦМЕ-51 см. диме томорф.

Чаппер см.имазанир.

Эйм см.хлорфлюазурон.

Этамон 123(2).

Этофумесат 130(2)

Эфаль 202,211.

CGA 71818 см.пенконазол.

CGA 106630 см.диафентиурон.

CGA 112913 см.хлорфлюазурон.

D0WC0 473 см.гексафлюмурон.

РМС 54800 см.бифентрин.

NC-11 см.пнразосульфурон.

О MS 3031 см.гексафлюмурон.

XKD 473 см.гексафлюмурон.

ХОЕ 039866 см.глюфосинат аммония. ХОЕ 046360 см.феноксапроп-атил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

МЕТ ОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ПЕСТИЦИДОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

1 . Методические указания по хроматографическому измерению концентраций стр. бифентриня (тальстара) в воздухе рабочей зоны.

Л 6220-91 , 29.07.1991.....................4.

2. Методические указания по газохроматографическому измерению концентраций бромпропилата (неорона) в воздухе.

Л 6182-91» 29.07.1991.....................10.

3- Методические указания по газохроматографическому измерению концентраций гексафдюмурона (сонета) в воздухе рабочей зоны.

Л 6219-91 * 29.07.1991.....................19-

4. Методические указания по измерению концентраций глуфосизата аммония (баста) в воздухе рабочей зоны.

J* 6190-91.    29-07.1991.....................20.

9. Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций дифентиурона (пегаса) в воздухе рабочей зоны.

Л 6254-91.    29.07.1991.....................28.

6. Временные методические указания по измерению концентраций димето-морфа (акробата) в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии.

Л 6192-91 .    29-07.1991.....................34-

7 • Методические указания по газохроматографическому измерению концентраций дифеноконазола (скора)    в воздухе рабочей зоны.

Л 6155-91 .    29.07.1991 .....................41 .

8.    Методические указания по измерению концентраций дифлюбензурона (ди~ милииа) в воздухе рабочей зоны тонкослойной хроматографией.

М 6268-91 .    27.07.1991.....................45.

9.    Временные методические указания по газохроматографическому измерению

1

матографировании в тонком слое (ТСХ) пластинок силуфол с обнаружением басты по реакции с нингидрином.

Отбор проб проводится с концентрированием (фильтр "синяя лента"» поглотитель с водой)-

Предел измерения в анализируемом объеме пробы методом ГЖХ- 0,5 нг, методом ТСХ- 0,1 мкг.

Предел измерения в воздухе (при отборе 125 л воздуха) :ГЖХ- 0,02 мг/м^,ТСХ- 0,08 мг/м^.

Диапазон измеряемых концентраций 0,02 мг/м^- 4 мг/м^.

Определению как методом ГЖХ,так и ТСХ может мешать гербицид глифо-сат.Однако,совместное применение басты и глифосата в технологиях защиты исключено.

Другие фосфор- и азот .содержащие соединения определению баста методом ГЖХ не мешают Определению методом ТСХ могут мешать соединения, содержащие аминогруппу .Граница суммарной погрешности измерения методом ГЖХ -15.IV.,методом ТСХ ±18.5/.

3 .Реактивы, растворы, материалы

Общие для ТСХ и ГЖХ

Фильтры "синяя лента".

Дистиллированная вода.

Аммиак водный,25Х,ч.,ГОСТ 3760-79-

Метиловый спирт,х.ч.,ГОСТ 6996-77.

Глуфосинат аммония,99%.

Основной стандартный раствор баста (0СР) 100 мг баста растворяют в 100 мл IX-ного водного раствора аммиака .Хранить в холодильнике не более 3-х месяцев.

К методу ТСХ

21

Этанол,96X-ТУ 6-09-17-10-77.

Медь сернокислая,чда.,ГОСТ 4165-78,прокаленная при 160^L>C до светло -голубого цвета.

Пластинки "силуфол",Хемапол,Чехословакия или отечественные“Армсорб".

Рабочие стандартные растворы глуфосинатаммония:

"а"--100 мкг/мл готовят разведением ОСР 1Х-ным водным раствором аммиака, хранят в холодильнике не более 2-х недель;раствор ^,1б"-10 мкг/мл готовят разведением раствора "а" и раствор "в" 1 мкг/мл разведением раствора "б" этанолом в день проведения исследований.

Проявляющий реагент:2Х~ный раствор нингидрина в ацетоне-Хранить в темной склянке.

К методу ГЖХ

Неподвижная фаза ЗХ 0V-17 на Хрома тоне N-AW-ДМСЗ.

Азот газообразный особой чистоты,ГОСТ 9293-74.

Водород в баллоне,ГОСТ 3022-88.

Толуол,чда.,ГОСТ 5789-78.

Этилацетат.хч.,Г0СТ 22300-81.

Уксусная кислота,ледяная,ГОСТ 18270-81.

Триме тилорто ацетат, хч.

Рабочие стандартные растворы глуфосината аммония:"а"- 40 мкг/мл, "б"- 20 мкг/мл,"в"- 10 мкг/мл готовят разведением ОСР 1Х-ным водным раствором аммиака.Для получения хроматографируемых производных берут по 0,1 мл казвдого стандарта,упаривают досуха при комнатной температуре и далее поступают как описано в разделе получения хроматографируемых производных в образце.Концентрация полученых производных глуфосинат аммония в 2 мл метанола:из "а"- 2 мкг/мл,"б^п-1 мкг/мл,“в"-0,5 мкг/мл.

4 .Приборы,аппаратура и посуда

Электроаспиратор для отбора проб воздуха,ТУ 64-1-862-82.

?2

Фильтродержатели.

Поглотители Рыхтера.

Аппарат для встряхивания колб типа АВУ-60.ТУ 64-1-2451-78.

Весы аналитические ВЛА-200 м.

Колбы конические широкогорлые или стаканы емкостью 100 мл,ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные,ГОСТ 1770-74,емкостью 50,100 мл.

Цилиндры мерные,ГОСТ 1770-74.

Пипетки мерные,ГОСТ 20292-74.

К методу ТСХ

Камера хроматографическая,ГОСТ 25336-32.

Пульверизатор стеклянный,ГОСТ 25336-82.

Камера для опрыскивания- колпак для насосов с кнопкой и рантом диаметром 160 мм,высотой 220 мм,ТУ 25-11-1022-75.

К методу ГЖХ

Газовый хроматограф серии "Цвет'¹ или аналогичный с ТИД или ПФД-фос-форным.

Колбонагреватели для круглодоных колб (50 мл) или электроплитка с закрытой спиралью.

Ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1 М,ТУ 20-11-917-74 или аналогичный.

Баня водяная,ТУ 64-1-2850-76 или аналогичная.

Холодильники Либиха 200-400 мм,ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные,ГОСТ 25336-82.емкостью 50,100 мл.

Пробирки мерные,ГОСТ 1770-74.емкостью 5,10 мл.

Микрошприцы на 10 мкл.

Колонка стеклянная длина 1 м,диаметр 3>5 см.

Секундомер.

23

Отбор проб воздуха

Воздух со скоростью 5 л/мин аспирируют через помещенный в фильтро-держатель бумажный фильтр "синяя лента" или через поглотительный прибор Рыхтера,заполненный 10 мл дистиллированной воды в течение 2Ь мин.Длительность хранения пробы в холодильнике не более 2-х суток.

6- Подготовка к измерению

Бумажный фильтр из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 10 мл дистиллированной воды.Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Экстракт сливают в мерную пробирку,доводят обьем точно до 10 мл.При отборе в поглотитель Рыхтера воду сливают в мерную пробирку и доводят обьем точно до 10 мл.

7- Проведение измерения методом ТСХ

Из полученных 10 мл водного экстракта отбирают 1 мл,прибавляют к нему 1 мл этанола и 1,2 г (~ 1мл) прокаленной сернокислой меди,перемешивают, дают отстояться и аликвоту 0,1-0,2 мл наносят на хроматографическую пластинку микропипеткой (шприцом) или пипеточным дозатором.Справа и слева от пробы наносят 0,2 мл рабочего стандартного раствора "в",что соответствует 0,2 мкг и 0,1 мл рабочего стандартного раствора "б",что соответствует 1 мкг. Пластинку при нанесении проб и стандартов для более быстрого испарения растворителя можно подогреть на электрогрелке.Когда растворитель (в пятне) испарится,пластинку помещают в хроматографическую камеру, в которую налита смесь метанол-аммиак (7:3).Дают растворителю подняться на 10 см от старта и вынимают пластинку из камеры .Помещают ее под УФ-свет на 2Ь минут,располагая на расстоянии 20 см от источника света. После облучения опрыскивают пластинку проявляющим реагентом и помещают на 1 мин в сушильный шкаф при температуре 40^С.Вынимают из шкафа и ос-

24