Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Сборник № 22 Часть 1-ая
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.
УТВЕРЖДЕНО
МИНИСТЕРСТВОМ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР и 1991 г
Л 6154-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИМИДОКЛОПРИДА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, САХАРНОЙ СВЕКЛЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
1. Краткая характеристика препарата
Действующее вещество имидоклоприда -1- 1б-хлоро-Э-пиридинил/метил]-4, дигидро- нитро-1н-имидазол-2 -амии.
Структурная формула:
Эмпирическая формула: C^H^gClNgOp
Молекулярная масса - 255,6
Химически чистое соединение - белое кристаллическое вещество беи запаха.
Препарат растворим /20°С/ в воде - 0,58 г/л, гексане -0,1 г/л, дихло* метане 81 г/л, 2- пропаноле-1,6 г/л, толуоле - 0,94 г/л.
ПДК в воде - 0,005 мг/л, ОДК в почве - 0,04 мг/кг, МДУ в сахарной св< чле - не допускается.
2. Методика определения имидоклоприда в поде, почве, сахарной свекле.
Разработчики: Готлиб В.И., Рижский Мединститут. 72
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Методика основана на определении имидоклоприда в воде, почве, сахарно: свекле тонкослойной хроматографией после экстракции препарата из проб хлороформом и очистки экстракта.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Предел обнаружения - 0,5 мкг.
Нижний предел определения: вода - 0,001 иг/л почва - 0,005 мг/кг сахарная свокла - 0,01 мг/кг
Среднее значение определения: вода: - 99,5'/. почва - 90/.
сахарная свокла - 95,0/.
Суммарная погрешность определения - +11-12/
2.2. Реактивы и материалы
/мидоклоприд, 99,5/ препарат, фирма "Вауег".
Хлороформ, ч, ГОСТ 20015-74-
с-Толидин. ТУ 6 09-2232-75-
Ацетон, чда, ГОСТ 2603*79.
Гексан, хч, ТУ-6 09-3375-70.
Бензол, хч, ГОСТ 5965*75.
Натрий сернокислый безводный, чда, ГОС? 4266-76*
Ею да дистиллированная. ГОСТ 7602-72.
Пластины "Силуфол" /ЧССР/.
Фильтры бумажные, "красная лента"
?У 6-09-1678-77, диаметр 6.0-9,0- мм.
Зата гигроскопическая.
Уксусная кислота, чда, ГОСТ 61-75. Калий йодистый, чда, ГОСТ 4232-74.
2.3. Приборы, посуда
Весы аналитические, ВЛА-200, ГОСТ 19491-74.
Аспирационное устройство ТУ 64-1 -862-77-.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Холодильник бытовой.
Шкаф електрический сушильный, ТУ 64-1-1411-72.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 25336-82.
Колбы грушевидные, вместимостью 50-100 мл /для отгонки растворителя/,
ГОСТ 25336-82.
Холодильник, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные, цилиндры мерные пробирки, ГОСТ 1770-74.
Колбы конические плоскодонные. ГОСТ 25336-82.
Воронки лабораторные, диаметр 56 мл, ГОСТ 25336-82.
Пипетки на 1,5; 10,0 мл, ГОСТ 20292-74.
Воронки делитольныо на 250 мл, ГОСТ 25336-82.
Микрогшлетки на 0,1; 0,2 мл, ГОСТ 20292-74.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
Скальпель.
Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.
Камера для опрыскивания пластинок, ГОСТ 25336-82.
Секундомер, ГОСТ 5072-79.
Лампа ртутно-кварцевая ПРК-4, ТУ 536-280-74.
2.4. Подготовка к определению 2-4.1. Отбор и подготовка проб
Отбор проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и обьек-тов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79г. Л 2051-79.
2.4.2. Приготовление стандартного, рабочих растворов имидоклоприда.
Стандартны^ раствор имидоклоприда с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением соответствующей навески препарата /10,0мг/ в ацетоне в морной колбе-на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике.Годен к употреблению в течение 30 дней.
Рабочие растворы имидоклоприда с концентрацией 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках, вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора.
Хранят рабочие растворы имидоклоприда в холодильнике. Годен к употреблению в течоние 3-5 дней.
2.4•3.Проявляющий реактив
Готовят раствор о-толидина /16г/ я 30 мл уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистилированной водой и прибавляют 1 г иодида калия. После опрыскивания пластинку следует обдучать УФ-светом.
2.4.4 Приготовление пластин "Силуфол".
Пластинку "Силуфол" помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон, 25%-ный аммиак в соотношении 7:3 /об/об/. Глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 см. После подье фронта растворителя до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе.
2.5- Проведение определения
2.5*1* Экстракция и очистка
Вода.Пробу воды /500 мл/ фильтруют от механических примесой. Имидоклс прид экстрагируют хлороформом по 15-20 мл три раза.
Обьединенный хлороформный экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при t=55°C досуха.
Почва.Пробу воздушно-сухой почвы просеивают через сито. Для анализа берут 100 Г почвы. Экстракцию проводят хлороформом 3 раза по 50 мл. Обье-диныошй хлороформный экстракт фильтруют через плотный двойной бумажный
75
фильтр, пропускают через безводный сульфат натрия и упаривают на ротационном испарителе при t*55° С досуха.
Сахарная свекла. 50-100 г навески измельчают. Экстрагируют хлороформом 3 раза по 30-50 мл. Обьединенный хлороформный окстракт фильтруют через плотный бумажный фильтр, пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при t°C=55,6° досуха.
«'•5.?. Хроматографирование
Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетоне, закрывают колбу герметичной пробкой*, перемешивают содержимое и 0,2 мл полученного раствора наносят микропипеткой на подготовленную пластинку "оилуфол". Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого рабочего раствора имидоклоирида, что соответствует содержанию в пятне 0,5; 1,0; 2,0 мкг препарата.
Пластинку помещают е хроматографическую камеру, куда за 10-15 мин до хроматографирования наливают смесь растворителей бензол-ацетон /1:1/- смесь > 1 либо гексан-ацетон /1:1/ смесь ^ 2 в таком количестве, чтобы глубина погружения пластинки в растворитель составила 0,5 ем. После подьема фронта растворителя от линии старта не высоту 10 см хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают н вытяжном шкафу до испарения растворителей, обрабатывают проявляющим реагентом и подвергают УФ облучению в течение 1-5 мин. Пластинку помещают на расстояние 20 см от источника света.
При наличии имидоклоприда на хроматограмме проявляются пятна синего цвета. Величина имидоклоприда в указанных подвижных растворителях следующая:
бензол-ацетон /1:1/ - 0,6*0,02; гексан-ацетон /1:1/ - 0,5*о,Э?.
Минимально-детектируемое количество имидоклоприда С.5 мкг.
2.5.3. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят путом сравнения площади и интенсивности пятен пробы и стандартных растворов.
76
Концентрацию имидоклоприда /X/ в воде /иг/л/ почве, сахарной свекле
/иг/кг/ вычисляют по формуле:
А количество имидоклоприда, найденное путем сравнения со стандартами, мкг;
Р - навеска /обьем/ исследуемой пробы, г,л;
V - конечный обьем экстракта пробы, мл;
Vj- хроматографируемый обьем пробы, мл.
Требования безопасности Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях. При работо с ядовитыми и взрывчатыми веществами реакции следует проводить только в вытяжном шкафу, строго соблюдая правила Производственной санитарии и личной гигиены.
77