ИНФОРМАЦИОННО-ИЗДАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР ГОСКОМСАНЭПИДНАДЗОРА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО КОНТРОЛЮ СОДЕРЖАНИЯ ВРЕДНЫХ ВЕЩЕСТВ НА КОЖНЫХ ПОКРОВАХ И СПЕЦОДЕЖДЕ

Выпуск I

МП «Рарог» Москва 1992

97

23.    Полярографическое измерение содержания свинца

24.    Атомно-абсорбционное измерение свинца

25.    Фотометрическое измерение содержания смазочных масел

26.    Спектрографическое измерение содержания сульфатов меди и никеля, хлоридов олова и палладия

27.    Фотометрическое измерение содержания танина

28.    Хроматографическое измерение содержания тестостерона и эфиров тестостерона-пропионата, феинлп ролионата, изо-кап роната, кап рината я э канта та

29.    Фотометрическое измерение содержания о- и п-толундивов; о- и п-нитроанилинов, 3,4-дихлораннлниа, анилина, о-анизиднна и п-фенил ендиа мина

30.    Фотометрическое измерение содержания толуола

31.    Гаэохроматографичесхое измерение содержания 1-Фенил-4,5-дихлорпирндазона (днхлорпнридаэока) и 1-фенил-0-амино-5-хлопиридазона-6 (феназона)

32.    Газох рома то графическое измерение содержания фенола

33.    Хроматографическое измерение содержания фосфамнда

34.    Хроматографическое измерение содержания хлорбензола, трихлорбенэола, тетра хлорбензола

35.    Фотометрическое измерение содержания цианамида натрия

36.    Гаэохроматографическое измерение содержания циклогексанона и меткл изобутил кетона

37.    Газохроматографическое измерение содержания циклогексанона и циклогексанола

38.    Фотометрическое измерение содержания днметиламиноцикло-гексака

39.    Гаэохроматографическое измерение содержания бензола, толуола, ксилола

40.    Гаэохроматографическое измерение содержания ксилола

9S

Рис. 1. Установка для извлечения ртути:

1    — микрокомпрессор;

2    — реометр;

3    — песчаная баня;

4    — десорбер;

5    — холодильник;

6    — поглотительный прибор

101

СОДЕРЖАНИЕ

Введение......................................3

Методические указания по фотометрическому измерению содержания акрилонитрила на коже...................................7

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания бензина на коже.................................,    .    9

Методические указания по фотометрическому измерению содержания беи юла на коже.........................................11

Методические указания по газохроматографнчесхому измерению содержания

гваякола и о-анизидина на коже............................13

Методические указания по хроматографическому измерению содержания гекса-

метилендмамина на коже методом тонкослойной хроматографии.............15

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания гексахлорбензола на коже ..............................17

Методические указания по хроматографическому измерению содержания гепти-лового и амилового спирта на коже ..........................19

Методические указания по фотометрическому измерению содержания диамино-толуола (толуилендиамяна), диизоциантолуола (толуилендиизоцианата) и дин-зоцианодифенилметана (дифенилметандиизоцианата) на козге и спецодежде .......21

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания ди-бутнлфталзта на коже................................24

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания ди-метнлформамида на коже ..............................26

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания диметил этанамида (дямстилацетамида) на коже .....................28

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания ди-этил-толуамида на коже.......................1.......30

Методические указания по хроматографическому измерению содержания ксили-

дина па коже ....................................32

Методические указания по спектрографическому измерению содержания хлористого лития на коже ............................ 34

Методические указания по измерению содержания лития и его соединений на коже методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии.................36

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания метанола на коже ...................................38

Методические указания по фотометрическому измерению содержания метанола и формальдегида на коже...............................40

Методические указания по хроматографическому измерению содержания мстил-тестостерона и мстандростснолонз на коже.......................43

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания 2-хлорпропановой(а—монохлорпропионовой), 2,2-дихлорпропзновой (а, а -дих-лорпропионовой) кислот и 2,2-дихлорпропаноилата натрия (Na-сольа, а -дих-лорпропионовой кислоты) на коже ..........................45

Методические указания по хроматографическому измерению содержания рицида II

на коже.......................................48

Методические указания по фотометрическому измерению содержания ртути на

коже и спецодежде..................................50

Методические указания по фотометрическому измерению содержания свинца на

коже........................................52

Методнчекие указания по полярографическому измерению содержания свинца

на коже.......................................54

102

Методические указания по измерению содержания свинца на коже методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии.........................56

Методические указания по фотометрическому измерению содержания смазочных

масел на коже....................................58

Методические указания по спектрографическому измерению содержания сульфатов меди и никеля, хлоридов олова и палладия на коже..................60

Методические указания по фотометрическому измерению содержания танина на

коже и спецодежде...................... 63

Методические указания по хроматографическому измерению содержания тестостерона и эфиров и тестостерона-пропионата, фенил пропионата, изокапрона та, каприната и энантата на коже.............................65

Методические указанна по фотометрическому измерению содержания о- и п-толу ндииов, о- и п-нитроанилинов, 3,4-дихлоранилина, анилина, о-аниэнднна и п-фенилендиамина на коже и спецодежде........................67

Методические указания по фотометрическому измерению содержания толуола на

коже ........................................70

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания

1 -фенил-4,5-дихлорпирндаэона (дихлопнридазона) и 1-фенил-6-амнно-5-хлор-

пиридазона-6 (феназона) на коже ...........................72

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания фенола на коже.....................•................74

Методические указания по хроматографическому измерению содержания фосфа-миданакоже ....................................76

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания

хлорбензола, д и хлорбензола, три хлорбензола и тетра хлорбензола на коже.........79

Методические указания по фотометрическому измерению содержания цианида

натрия на коже и спецодежде .............................82

Методические указания по газохроматографическому измерению содержани циклогексанона и метилизобутилкетона на коже . . . . ..................84

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания циклогексанона и циклогексанона в смывах на коже...................86

Методические указания по фотометрическому измерению содержания диметила-миноциклогексана (диме-гилциклогексиламина) на коже и спецодежде ..........88

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания

бензола, толуола, ксилола на коже................ 91

Методические указания по газохроматографическому измерению содержания

ксилола на коже...................................94

Приложение.....................................96

3

ВВЕДЕНИЕ

В связи с широкой химизацией народного хозяйства, интенсивным использованием новых химических веществ, увеличением масштаба производства возросла опасность контакта и проникания химических веществ через кожные покровы.

В настоящее время известно, что каждое четвертое вещество, содержание которого нормировано в воздухе рабочей зоны, имеет пометку “опасно при поступлении через кожу”.

В связи с этим специальная секция при Проблемной комиссия “Научные основы гигиены труда и профпатология^- регламентирует содержание вредных веществ на кожных покровах. В настоящее время ПДУ установлено более чем для 20 химических соединений. Первым, наиболее ихним шагом с целью предотвратить поступление ядов в организм работающих через кожу является контроль содержания их на кожных покровах и изучение степени загрязнения средств индивидуальной защиты работающих на промышленных предприятиях.

Настоящий сборник является первым руководством в нашей стране по определению химических веществ на кожных покровах я средствах индивидуальной защиты. Сборник составлен на основе обобщения многолетних работ исследователей, занимающихся данной проблемой. В сборник включены Методические указания по измерению содержания химических веществ на коже и средствах индивидуальной защиты, имеющих ПДУ, а также для веществ, которые подлежа.' гигиеническому нормированию. В методиках даны принципы определения и основные критерии: предел обнаружения, избирательность, условия отбора проб (смывов) и анализа. Описаны условия построения калибровочного графика я формулы вычисления результатов.

Наряду с этим в сборник включены рекомендации для исследователей, разрабатывающих вышеупомянутые методики для новых химических соединений.Описаны требования к методикам, приведены формулы расчета метрологических характеристик и ряд других вопросов. Эти материалы вошли в приложение.

Сборник рассчитан на широкий круг практических и научных работников и других специалистов, занимающихся вопросами аналитического контроля загрязнения кожных покровов и спецодежды.

4

I. Требования к методикам измерения химических веществ на кожных покровах и средствах индивидуальной защиты

Методики измерения содержания химических веществ на коже и других исследуемых объектах должны удовлетворять следующим требованиям.

1.1.    Предел измерения содержания химических веществ на исследуемых объектах, в частности на коже, выраженный в мг/см¹. устанавливают по величине предельно допустимого уровни (ПДУ). При отсутствии утвержденного ПДУ предел измерения устанавливают по уровню, достигнутому в условиях лабораторного эксперимента.

1.2.    Избирательность методики устанавливается по отношению к веществам, значительно отличающимся по характеру токсического действия на человека и по величине ПДУ. Допустимо применение методик суммарного измерения содержания химических веществ, принадлежащих к одному и тому же классу соединений и имеющих близкий предел измерении.

1.3.    Метрологические характеристики, в частности правильность методик, разработанных в условиях лабораторного эксперимента, оценивается доверительным интервалом (Е) по формуле:

где С — средняя арифметическая величина из п определений;

1 d— коэффициент Стьюдента (при Р — 0,95);

S — квадратичное отклонение отдельного результата; п — количество определений.

Кроме доверительного интервала рассчитывается относительное стандартное отклонение Sr, не превышающее 0,33¹

Результаты измерения содержания вредных веществ в смывах с кожи и других объектах, проведенных на промышленных предприятиях, представляются в виде М ± ш, что соответствует

—    5

формуле С ± ^

2. Рекомендации при разработке методик измерения содержании химических веществ на коже и СИЗ

2.1.    При разработке методик измерения содержания химических веществ на кожных покровах следует пользоваться Методическими рекомендациями МР ².

2.2.    Эти же МР могут быть использованы и при разработке методик измерения содержания веществ

на спецодежде.

В качестве испытуемых образцов используют новую ткань, из которой шьют верхнюю одежду и белье для работающих на обследуемом предприятии.

Испытуемую ткань (сукно, сатин, молескин, бельевую бязь) предварительно обрабатывают выбранным растворителем (возможно при повышенной температуре), промывают водой и высушивают. Для этой цели используют образцы размером от 50 до 100 см².

2.3.    При разработке методики измеряют содержание химических соединений на испытуемых объектах .следует установить их летучесть поданным скорости испарения (% ч).

На образцы взвешенной ткани размером 5x5 или 10 х 10 см наносят определенную навеску вещества. Потери вещества от испарения устанавливают повторным взвешиванием. Рекомендуется установить продолжительность полного испарения вещества. Если продолжительность испарения вещества с образца исчисляется несколькими минутами, планирование разработки методики для таких соединений нецелесообразно.

2.4.    Образцы экспонированной ткани обрабатывают соответствующим растворителем в течение 15— 20 мин. В ряде случаев обработку (экстракцию) выполняют с помощью магнитной мешалки и при нагревании. В зависимости от химической устойчивости веществ или продуктов их превращения образцы ткани могут быть обработаны в десорбере и выделившиеся вещества извлечены током чистого воздуха или водяным паром (рис. 1,2).

2.5.    Градуировочные графики при использовании газожидкостной хроматографии или эмиссионно-спектрального анализа в большинстве случаев могут быть построены без учета влияния примесей, выделяющихся кожей или содержащихся в новых чистых образцах тхани.

В фотометрическом анализе градуировочный график составляют с учетом влияния примесей, выделяемых непосредственно кожей и окрашенными тканями. Обработка цветных образцов тканей дает

5

окрашенные растворы (фон), компенсируемый измерением контрольной пробы, выполненной в присутствии смыва с образца незагрязненной ткани в тех же условиях.

2.6. Правильность разработанных методик измерения содержания химических веществ устанавливается для каждого вида ткани в соответствии сп. 1J.

В табл 1 представлены результаты оценки правильности измерения содержания некоторых химических веществ. В зависимости от агрегатного состояния загрязнителей, присутствующих на промышленных предприятиях, анализируемое вещество смывается или экстрагируется. Твердые вещества (м-нитроанжлнн, днхлоранилин, циану рхлоряд) раегшлялиъ на исследуемый образец из марлевого меяючка. Исходное со* держание устанавливалось по средней навеске при напылении на часовое стекло. Гексахлорбенэол и дих-лорпирндаэои наносились на образец в виде спиртовых растворов, растворитель испарялся, а остаток смывался или экстрагировался соответствующим растворителем.

Соли металлов наносили на образец в виде солянокислых, цианид натрия — в виде щелочных растворов.

Погрешность определения, вычисленная согласно п. 1.3, ие превышает 20%.

Таблиц» I

Правильность ооредслсииа к пест» (о—4—6, Р — 0.95)

Соединение Метод Образец Нанесено на образец Найдено С. мкг мг/см» St С. мкг ±1 S Э-Нмтроа нилии фотометрический кожа 5.0 0.12 0.05 4.0 0.07 кожа 5Э.0 1.25 0.04 51.6 3.36 Гексахлорбсюол гжх кожа 170.0 0.34 0.19 130.0 30.40 кожа 653.0 1.31 0.04 583.0 26.92 Сульфат никеле в том но- эмиссионный кожа 0.63 0.013 0.18 038 0.14 кожа 31.4 0.623 0.14 28.10 4.84 3-Нитроаиилин фотометрический ткаиь «.2 0,09 0.23 8.0 1.90 тквмь 54.0 0.60 0.06 56.0 5.40 Анилин линь 3.0 0.08 0.11 2.1 0.60 линь 20.0 0.50 0.10 19.0 1.80 Цианид на три* линь 0.9 0.01 0.09 0.9 0.10 ткань 23.0 0.23 0.05 23.6 2.10

Правильность способа определения в значительной степени зависит от продолжительности воздействия исследуемого вещества на образцы, снижающей результаты количественного определения из-за летучести, проницаемости веществ и сорбционных процессов. На этом основании обработку образцов следует проводить не позднее, чем через несколько минут после их загрязнения.

2.7. Установление значения контрольной пробы, предела определения, построения градуировочного графика, влияния соответствующих примесей изложено в Методических рекомендациях.

3. Проведение исследований на промышленных предприятиях

3.1.    Смыв с загрязненной кожи и других объектов осуществляют главным образом во время технологических процессов и операций при наибольшем контакте работающих с вредными веществами (размол и просеивание, розлив, расфасовка и затаривание веществ и тд.). Особое внимание уделяют отбору проб при выполнении ручных операций и работе с летучими жидкими веществами. В последнем случае только своевременный отбор проб (во время операции или сразу посте ее окончания) обеспечивает результаты количественного определения загрязнений (п.2.3).

3.2.    Отбор проб с кожи, резиновых СИЗ и пневмокоспомов осуществляют главным образом способом смыва с помощью ватного тампона, обильно смоченного выбранным растворителем*. Пробы отбирают в основном с тыльной стороны кисти или ладони (плошадь 50 см²) или со всей кисти (площадь 360 см²), открытых и закрытых участков тела размером 1 дм², с I дм² резиновых шлем-масок, сапог, перчаток и полимерных материалов, в том числе с обратной стороны резиновых СИЗ и пневмокостюмов.

6

3.3.    Пылевидные вещества, затратна юкцие вожу, спецодежду ■ друга* объекты, более ряцжоидльио отбирать путем отсоса через двух конусный патрон (днаметр патрубка в—9 см, в том числе с яасадвоА) со скоростью 20—25 л/мня. При атом * значительной стелет устраняется клжакме различного вида примесей, выделяемых кожей, окрашенной а бесцветной ткаяыо, резиной а другими материалами, см. ряс. 3.

3.4.    Для отбора проб твердых а жидких веществ с верхней спецодежды а белья на рабочий костюм нашивают друг на друга образцы верхней ■ бельевой ткани размером 10 к 10 см. В том случае, если костюм был загрязнен, пакет образцов увеличивают до трек, последним подшивают образец из бельевой ткани, защищающей верхние образцы от вторичного загрязнения. Образцы нашивают на рукава, брюки, полы и тд_м общим числом, указанным в п.3-5. В зависимости от планирования гигиенического исследования образцы в положенное времи снимают или вырезают аз них лоскуты размером 3x3 или 5 к 5 см и направляют в закрытой посуде на анализ. При изучении эффективности стирки (обезвреживания) верхней спецодежды и белья оставшуюся часть нашитых образцов после стирки направляют на анализ.

3.5.    Во избежание потерь летучих веществ образцы ткани тут же после отбора проб погружают в выбранный экстрагент. Пробы выдерживают, в том числе при нагревании, а течение 15—20 мин. Образцы, подвергнувшиеся длительному воздействию малолетучих веществ, выдерживают в растворителе большей частью при нагревании в течение нескольких часов.

3.6.    Приблизительное число отбираемых проб у одного работающего для получения достоверных результатов:

—    с кош, главным образом с кистей, я пределах 4—6, после душа и с закрытых участков тела — 3—4;

—    с верхней спецодежды и защитных костюмов — 12—14, после обезвреживания (стирки) — 4—5;

—    с белы — 4—5, после стирки — 3;

—    с резиновых шлем-масок или сапог и перчаток — 4—5, после обезвреживания — 3.

3.7.    Способы обработки и анализа проб, отобранных с кожных покровов, подробно описаны а методических рекомендациях . Такими же способами анализируют пробы, полученные смывом с резиновых и пленочных СИЗ. Следует отметить, что при газожидкостном хроматографировании растворов в большинстве случаев не требуется центрифугирование я фильтрование смывов с кожи я экстрактов со спецодежды вследствие незначительности влияния примесей, выделяемых незагрязненными кожей или тканью, в отбираемой на анализ пробе (1—2 мкл).

3.8.    Пылевидные пробы, отобранные на анализ путем отсоса на фильтрующий материал, экстрагируют указанным способом (п.2.5.). Часть пылевидного вещества, задержавшуюся на внутренней стенке патрона, снимают ватным, смоченным растворителем, тампоном или смывают экстрагентом. Объединенный экстракт анализируют.

3.9.    При необходимости установления количества вещества, проникшего в толщу резиновых или других полимерных материалов, на шлем-маску или другие СИЗ наклеивают соответствующие образцы, которые снимают в заданное время. Образцы сначала погружают ■ растворитель, промывают и измельчают. Полученную массу экстрагируют при длительном нагревании, экстракт анализируют. Получаемые данные не всегда отражают результаты количественного определения вследствие незначительной скорости диффузии вещества нз пленки. Если нагревание оказывает влияние на устойчивость анализируемого соединения, образец экстрагируют длительное время при обычной температуре.

3.10.    Полученные результаты группируют и зависимости от однозначности технологического процесса и производственных операций, выполняемых работающими, и оценивают по формуле М ± ш (п.1.2).

В табл.2 представлены результаты анализа загрязнения спецодежды и белья аппаратчика в производстве полинэоцяанатов.

Таблиц* 2

Загрязнения спецодежды аппараты ipommccnMi мгавпп (мг/см*) (0 — ие обнаружено)

Операция, рабочее место а Расположение нашкясж Веркмая окжм Белье Мх - Ыхи Вскрытие фильтра 4 Брюки S.U ± 1.29 0.22 ± 0.07 4 Рукам 0.21 ± 0.12 0,04 X 0 —' — Э Полы 0.30 ± 0.05 0.03 ± 0 э Стам 0.31 ± 0.13 0.03 ± 0 Отбор проб 4 Брюки 0.33 ± 0.15 0,09 X 0.06 —*— 3 Рукам 0.14 X 0.0В 0.04 X 0.02

70

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Глятяо государственного самктармого врача СССР

__В.И.Чибураеа

-и’соггабра_ 1М9г.

N5137—М

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ ФОСФАМИДА НА КОЖЕ

S

(CH30)2PSCH2C0NHCH3    М.м.    229,2

О.О-Диметнл-Б-М-метилкарбамонлметтЫдитяофосфат.

Товарное название: фосфамид, диметоат, ротор, БИ-58.

Химически чистый фосфамид — белое кристаллическое вещество с Т.пл. 49,9—50,9'С. Давление насыщенных паров при 20 *С 8,5.10-* мм рт. ст. <1,2.10^-3 Па), хорошо растворим в воде -3,9%, в ацетоне, хлороформе, метаноле, плохо в алкановых углеводородах. При нагревании нэомериэустся. Достаточно быстро гидролизуется в щелочной среде, более устойчив в кистой.

1. Характеристика методики

Методика основана на экстракции фосфамида из пробы органическим растворителем, очистке и последующем определении методами газожидкостной или тонкослойной хроматографии.

В качестве смывающей жидкости используется дистиллированная вода.

Диапазон измеряемого содержания — 0,008—0,4 мг/см².

Определению не мешают диазинон, цнклоат, эптам, меток си хлор, линдан.

Граница суммарной погрешности не превышает ±20%.

ПДУ фосфамида на коже 0,02 мг/см².

2. Реактивы и растворы

Фосфамид. х.ч.

Стандартный раствор N 1 с содержанием 1 иг/ил готовят растворением 100 мг фосфамида в мерной колбе на 100 мл. Соответствующим разведением в гексане готовят стандартный раствор N 2 с содержанием фосфамида 0,1 иг/ил. Растворы устойчивы 1 месяц.

Азот, водород в баллонах с редукторами.

Азот ОСЧ, ГОСТ 9293-74, содержание кислорода не более 0,003% (для работы на ЭЗД или ДПР).

Насадка хроматографической колонки:

Для ТИД хроматон N-AW-DMCS с 5% SE-30, для ЭЗД (или ДПР) хроматом N-AW-DMCS с 5% ХЕ-60, зернение носителей 0,16—0,2 мм.

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79.

Гексан, ч., ТУ 6-09-3375—78.

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263—76.

Лимонная кислота, х.ч., ГОСТ 3652-69, 2%-ный раствор.

Соляная кислота, х.ч., ГОСТ 3118-77,0,1 н раствор.

БромфеиоловыЙ синий, чда, ТУ 6-09-1058—76.

Гидроксид натрия, х.ч., ГОСТ 4328-77, 20%-ный раствор.

Натрий сернокислый безводный, чда, ГОСТ 4166-76.

Серебро азотнокислое, х.ч., ГОСТ 1277-75, 0,5%-кый водноацетоновый раствор (1 часть воды ♦ 3 части ацетона).

Хлористый палладий, ч., МРТУ 6-09-1964—72.

Проявляющие реагенты:

ПР N 1 — броыфеноловый синий. Взвешивают 50 мг бромфенолового синего, растворяют в 10 мл ацетона и затем разбавляют до 100 мл раствором азотнокислого серебра. Срок хранения в холодильнике до 1 месяца.

ПР N 2 — хлористый палладий. Взвешивают 0,2 г хлористого паладия, вносят в колбочку вместимостью 100 мл, приливают 2 капли концентрированной саля ной кислоты, помещают колбу в водяную баню

77

пpa 60—70°С на 10—15 юга. Периодически встряхивают до полного растворения содержимого колбы. Доводят объем раствора до 100 мл водой. Срок хранения в холодильнике до 1 месяца.

ПР N 3 — 2,6-ди6ром-М-хлорхннонимнн, х.ч., 0,5%-ный раствор в гексане.

ПР N 4 — азотнокислое серебро. Взвешивают I г азотнокислого серебра и растворяют в 99 мл воды. Опрыскивают пластинки после гид рати за 20%-ным раствором гидроксида натрия. Хранят реактив в холодильнике до 2 недель.

Подвижная фаза: хлороформ-ацетон-гексан (3:1:1), гексан-ацетон (3:2) и хлороформ.

Натрий хлористый, х.ч., ГОСТ 4233-77,10%-ный раствор.

Вата гигроскопическая, обезжиренная кипячением ■ дисстидлированной воде в течение 30 мин и высушенная.

Алюминия оксид, II степени активности для хроматографии, ТУ 6-09-3916—75.

Кальций сернокислый безводный, чда, ГОСТ 3210-74.

Хроматографические пластинки “Силуфол", 15 к 15 см.

3. Приборы и посуда

Газовый хроматограф с термоионным (ТИД) или электроннозахватным (ЭЗД) (или детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР)) детектором.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-IM с набором колб, ТУ 2811-917—74, или аналогичный аппарат для отгонки растворителей.

Аппарат для встряхивания.

Термостат.

Колбы мерные, цилиндры, ГОСТ 1770-74.

Пипетки, микропипеткя, ГОСТ 20292-74.

Склянки химические вместимостью 50—100 мл, ГОСТ 13394-72.

Воронки химические, ГОСТ 8613-75.

Воронки делительные, ГОСТ 8613-75.

Колбы грушевидные (для отгонки растворителей), ГОСТ 10394-72.

Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75.

Камера для опрыскивания пластинок, ГОСТ 10565-75.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Баня водяная, ТУ 64-12350—76.

Стеклянные капилляры для нанесения проб на хроматографические пластинки.

Стеклянные пластинки, размер 9 к 12 или 12 х 15 см.

Микрошпрнц МШ-10.

Колонки стеклянные хроматографические длиной 1 м и внутренним диаметром 3 мм.

Секундомер.

Лупа измерительная.

4. Проведение измерения.

Условия проведения смыва

Смыв с кожных покровов (5x5) см проводят способом обмыва. Для этого в фарфоровую чашку наливают 20 мл воды. Ватным тампоном 0,3 г, смоченным в воде, обмывают участок поверхности кожи (5x5) см сверху вниз. При этом тампон несколько раз опускают в чашку с водой. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с фосфамидом.

Условия анализа

Ватный тампон тщательно отжимают стеклянной палочкой, переносят на воронку с фильтром и промывают дважды по 20 мл дистиллированной водой. Растворы объединяют, фильтруют, подкисляют 0,1 н раствором HCI до pH 4—5, раствор перемешивают, приливают 30 мл 10% раствора хлористого натрия и дважды экстрагируют в делительной воронке 20 мл хлороформа в течение 30—40 мин. Хлороформ отделяют. Хлороформные экстракты объединяют, пропускают через безводный сернокислый натрий, фильтруют. Отгоняют растворитель примерно до 0,2—0.5 мл. Остаток испаряют при комнатной температуре досуха. К сухому остатку приливают 1 мл гексана.

Газохроматографический анализ

Определение фосфамида проводят с использованием термоионного детектора или детектора постоянной скорости рекомбинации. В случае применения термоионного детектора стеклянную хроматографическую колонку заполняют хрома то ном N-AW-DMCSc 5% жидкой фазы SE-30. При анализе фосфамида с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации применяют хроматон N-AW-DMCS с 5% ХЕ-60.

Кондиционирование колонки проводят в течение 12 часов при температуре термостата 200 С при отключенном детекторе.

78

Для анализа берут 1—2 мкл пробы. Для количественного определения используют метод абсолютной калибровки. Для этого готовят градуировочные распоры с содержанием 0,2 мкг/ыл, 0,4 мхг/мл, 0,8 мкг/мл, 2 мкг/ыл, 10 мкг/мл фосфамяда соответствующим разведением стандартного раствора N 2. Срок хранения градуировочных растворов 2 дня.

На основании полученных данных строят градуировочный график зависимости площади пика от заданной концентрации- Площадь пика измеряют умножением высоты на ширину, измеренную на половине высоты, полученной из пяти параллельных определений.

Условия калибровки и анализа должны быть идентичны.

	ТИД	ЗЗДмлиДПР
Температура термостата колонок	180 *С	180-С
Температура испарителя	230‘С	230'С
Температура термостата детектора	—	190-С
Скорость потока газа-носителя, мл/мин	20-25	40-60
Скорость потока водорода, мл/мин	20	—
воздуха, мл/мин	240	240
Скорость движения диаграммной ленты	240 мм/ч	240 мм/ч
Время удерживания фосфамида, мин	2,1	4.8
Р-0 аналога (метаболит)	1,6 мин	5,9 мнн
Время выхода растворителей, мин	0,3	0,3-0,5

Анализ методом тонкослойной хроматографии

Готовят хроматографические пластинки с оксидом алюминия. Взвешивают 50 г оксида алюминия, просеянного через сито 100 меш., прибавляют 5 г безводного сернокислого кальция и 75 мл воды. Встряхивают в колбе до образования однородной массы. Наливают тонким слоем на 10 стеклянных пластинок пазмером (9x12) см или 8 пластинок (12x15) см. Сушат на воздухе около 10—12 ч. Хранят в эксикаторе. 0,1 мл анализируемой пробы наносят на хроматографическую пластинку на линию старта. Из стандартного раствора N 2 готовят градуировочные растворы с содержанием фосфамида 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 20 мкг/мл, 40 мкг/мл, 80 мкг/мл, 100 мкг/мл. Слева и справа от пробы наносят 0,1 мл градуировочных растворов, что соответствует содержанию 0,5 мкг, 1 мкг, 2 мкг, 4 мкг, 8 мкг, 10 мкг фосфамида. Диаметр пятна не должен превышать 5 мм. Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда предварительно за 15—20 мнн наливают одну из подвижных фаз хлороформ-ацетон-гексаи (3:1:1), гексан-ацетон (3:2), хлороформ. После поднятия фронта растворителя на высоту 10—12 см пластинку извлекают из камеры, оставляют до улетучивания растворителей, а затем применяют один из проявляющих реагентов.

Если хроматографирование проводят на пластинках “Силуфол", то используют проявляющие реагенты NN 1 или 2; или 3. После опрыскивания пластинки ПР N 1, через 15—20 мин опрыскивают 2% раствором лимонной кислоты. Фосфамид и его метаболит Р-0 аналог окрашиваются в синий цвет на светло-желтом фоне пластинки. Если применяют ПР N 2, то сразу же после опрыскивания фосфамид окрашивается в светло-коричневый цвет (иногда с желтоватой серединой). После опрыскивания ПР N 3 пластинку следует поместить в сушильный шкаф при 110—115°С на 2—3 мин. На светлом фоне пластинки зона локализации фосфамида окрашивается в ярко-красный цвет, а Р-0 аналога — в рябиновожелтый. Величина Rf фосфамида - 0,55—0,6, Rf Р - 0 аналога - 0,2—0,25.

Если хроматографирование проводили на пластинках с оксидом алюминия в подвижной фазе-хлороформ, то используют проявляющий реагент-ПР N 4. После улетучивания следов хлороформа пластинку опрыскивают 20%-ным раствором гидроксида натрия, а после подсушивания слоя — ПР N 4. Помещают в сушильный шкаф при 105—110°С на 5 минут. Зона локализации фосфамида и некоторых его метаболитов окрашивается в серо-черный цвет. Величина Rf фосфамида - 0,4, карбметокснмстилдитнофосфата - 0,5, димстнлдитиофосфорной кислоты - 0,3, Rf Р-0 аналога - 0,15—0,2.

Для количественной оценки с помощью промасленной миллиметровой бумаги изменяют размеры и вычисляют площадь пятна фосфамида на хроматограмме пробы и стандарта, наиболее близкого по размерам к пятну пробы.

Расчет концентрации Концентрацию фосфамида в мг/см² (С) рассчитывают по формуле:

где Q — количество фосфамида во всей пробе, мг; S — площадь исследуемой части тела, см².

1

Допускается расчет погрешности определенна в % по формуле W - ^-100 (при а — 4—«; Р — 0.95). Погрешность должна быуь не более 53% ■

2

'¹ Методические рекомендации (МР) 'Разработка методов определение вредных веществ на коже’. М.. М3 СССР. 1915. 23 с. Информационное письмо. Разработка способе¹ определенна вредных веществ на спецодежде. М . 1949. 20 с.

Методические указанна Оценка воздеАстаиа аредиых химических соединений на кожные покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнений кожи. М.. М3 СССР. 1980. 23 с.