МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 08.06.89 iN? 5026-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИФУМИНА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В ОВОЩАХ, ФРУКТАХ. ЗЕРНЕ, ПОЧВЕ И ВОДЕ методом ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ♦

Краткая характеристика препарата и его основных метаболитов. Трифумин (NF-114, трифмин), действующее начало 4-хлор-а.ос,а-три-фтор-N-l (Ш-имидазат-1-ил)-2-пропокси этил иден-О-талу идин).    Брутто

формула CtflluCIFjNjO. Молекулярная масса 345,75. Общепринятое название - трифлумизол. Кристаллический порошок без запаха, т.пл. 63,5 ®С. растворимость (г/100 мл при 25 °С): в воде (pH 5,3)-0,0015, ацетоне-261, хлороформе - 185, н-гексане - 4,4, метаноле-50; давление паров 1,9-10“* Па (25 °С). В водных растворах

Разработаны М.В. Письменной, М.А. Клисснко (ВНИИГИНТОКС).

наиболее устойчив при pH 6. С увеличением температуры гидролиз значительно ускоряется. Временные МДУ в огурцах, томатах, яблоках 0,1 мг/кг. Содержание трифумина в винограде и землянике нс допускается.

Основные метаболиты трифумина: 1 -(4-хлор- 1-трифторметилфснил)-2-пропоксиамидин, (ТМ-6-1). Белые кристаллы без запаха, растворимы в метаноле, /(-гексане, дихлормстанс. Брутто формула C_uH_wCIFjN₂0. Молекулярная масса 294,6. ^(4-хлор-2-трифтормстилфснил)-1-про-поксиацетамид, (ФД-1-1) - бесцветная маслянистая жидкость, растворима в Метаноле, «-гексане, дихлорметане. Брутто формула CuHudFjNO* Молекулярная масса 295,7.

Принцип метода. Метод основан на экстракции трифумина и его метаболитов из пробы органическим растворителем, концентрировании, очистке на слое А1₂0₃ после перераспределения веществ в смесь эта-нол-0,02 н. I1C1 (1:1), последующем подщелачивании раствора до pH 7,5 и экстракции их в //-гексан. Тонкослойнохроматографическос определение проводят в тонком слое пластинок «Алуфол» или «Силуфол», используя в качестве проявляющего реагента 1-нафтол после термического рахложения веществ на пластинке до ароматического амина и диазотирования, либо реагент на основе бромфенолового синего с AgN0₃. Первый вариант проявления позволяет обнаружить трифумин и его метаболиты, второй - только трифумин.

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел обнаружения по реакции азосочетания 0,2 мкг (на пластинках «Алуфол»), 3 мкг (на пластинках «Силуфол»); по реакции с бромфеноловым синим 1 мкг (на пластинках «Силуфол»). Метрологические характеристики определения трифумина в воде, почве, овощах, фруктах и зерне приведены в таблице 141.

Избирательность метода. Применение двух проявляющих реагентов, позволяющих обнаруживать трифумин по рахличным функциональным груп-

141. Метрологические характеристики метода

Определяемое вещество Исследуемый объект Нижний предел определения, мг/кг или мг/лф Среднее значение определения, % Трифумин Вода 0,001" 86 Овощи, фрукты 0,004 92 Зерно 0,008 91 Почва 0,004 91 ФМ-6-1 Вода 0,001" 92 Овощи, фрукты 0,004 95 Зерно 0,008 90 Почва 0.004 96 ФД-1-1 Вода 0,001" 85 Овощи, фрукты 0,004 92 Зерно 0.008 88 Почва 0,004 87

731-36 553

Продолжение

Определяемое вещество Исследуемый объект Доверительный интервал среднего при Р - 0,95. % Число параллельных определений п Трифумин Вода ±8,4 7 Овощи, фрукты ±2.9 30 Зерно ±10,4 7 Почва ±8,9 7 ФМ-6-1 Вода ±7.9 8 Овощи, фрукты ±2,1 30 Зерно ±8.7 7 Почва ±4,2 7 ФД-1-1 Вода ±9,1 8 Овощи, фрукты ±2,5 30 Зерно ±10,8 7 Почва ±9,0 7

б-к раствору 2,8 г гидроксида калия в 50 мл воды прибавляют 0,1 г 1-нафтола. Проявляющие реагенты применяют свежеприготовленными; N? 2 - а - 0,05 г бромфснолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводят объем раствора до 100 мл 1%-ным водно-ацетоновым (вода-ацетон 1:3) раствором нитрата серебра; 6-5%-ный водный раствор уксусной кислоты по объему (5 мл уксусной кислоты и 95 мл воды). Растворы устойчивы в течение 2 мсс.

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Дробилка почвенная лабораторная или ступка. Ротационный вакуумный испаритель. Колбы мерные вместимостью 25; 50 и 100 мл, конические вместимостью 50; 100 и 250 мл; грушевидные вместимостью 50 и 100 мл ОКШ 50-14/23ТС. Сита почвенные. Воронки химические, делительные на 50; 250 и 500 мл. Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 мл. Пипетки на 0,1; 0,2; 1; 5 и 10 мл.

Подготовка пластинок для хроматографии. Пластинки «Алуфол» или «Силуфол* перед нанесением пробы промывают в хроматографической камере ацетоном, давая растворителю подняться до верхнего края пластинки. Отмечают верхний край пластинки, дают растворителю испариться с пластинки и прогревают ее 20 мин при 60°С. При хроматографировании линия старта должна быть со стороны нижнего края пластинки.

Ход анализа. Экстракция. К 200 мл воды прибавляют 5 г NaCI, перемешивают, прибавляют 50 мл ацетона, а затем переносят в делительную воронку и трижды экстрагируют н-гсксаном порциями по 50 мл, встряхивая каждый раз в течение 3 мин. Верхний органический слой сливают в колбу для отгонки, фильтруя через слой безводного сульфата натрия (10-15 г), насыпанного на легкофнльтрующий фильтр «красная лента», вложенный в фильтровальную воронку. Упаривают растворитель до 0,5 мл под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани нс более 45 С (в фарфоровых чашках при комнатной температуре). Остаток упаривают до 0,2-0,3 мл при комнатной температуре и хроматографируют. Пробу количественно наносят на пластинку, ополаскивая колбу н-гсксаном (3-4 раза по -0,1 мл).

К 50 г почвы, измельченной до 0,5-1 см, овощей, фруктов, к 25 г измельченного до 2-3 мм и отсеянного от муки зерна прибавляют 60 мл (к зерну - 40 мл) смеси л-гсксан-ацстон (7:3) и экстрагируют в течение 30 мин на аппарате для встряхивания. Экстракт сливают в колбу для отгонки растворителей, фильтруя через слой безводного сульфата натрия (10 г) на фильтровальной воронке с небольшим ватным тампоном. Приливают к пробе новую порцию смеси растворителей, повторяют экстракцию. Экстракты объединяют, сливая через слой безводного сульфата натрия. Если экстракт мутный, добавляют в него безводный сульфат натрия (10-15 г), а затем фильтруют через небольшой ватный тампон. Упаривают экстракт до 0,5 мл под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани не более 45 °С. Остаток упаривают досуха при комнатной температуре и очищают от сопутствующих веществ.

Очистка от сопутствующих веществ. Оксид алюминия 2 см³ (2,5 г) насыпают на легкофильтрующий фильтр «красная лента», вложенный в небольшую фильтровальную воронку, промывают 10 мл 0,01 н. ПС!, элюат отбрасывают. К сухому остатку в

555

колбе прибавляют 4 мл смеси этанол - 0,02 н. IIC1 (1:1), ополаскивают этим раствором колбу и фильтруют его через подготовленный слой оксида алюминия. Колбу несколько раз ополаскивают 0,01 н. НС1 (общий объем 10 мл), спивая каждый раз смывы через слой оксида алюминия. Оксид алюминия промывают 5 мл воды и присоединяют к фильтрату. К полученному фильтрату прибавляют 50 мл воды, нейтрализуют раствор 0,01 н. NaOIl и доводят до pH 7,5 (контроль по индикаторной бумаге). Полученный раствор переносят в делительную воронку и 4 раза экстрагируют н-гсксаном, предварительно насыщенным водой, порциями по 20 мл. Объединенные н-гсксановыс экстракты промывают 20 мл воды, воду отбрасывают, н-гсксан сушат, сливая через спой безводного сульфата натрия на воронке. К экстракту прибавляют 20 мл ацетона и упаривают до 0,5 мл под вакуумом, как описано выше для воды.

Условия хроматографирования при метоле ТСХ. На пластинку «Алу-фол*, промытую ацетоном, с помощью капилляра или микропипетки наносят пробу, ополаскивая колбу 3—4 раза небольшими количествами (0,1 мл) н-гсксана. На эту же пластинку наносят 0,05-0,2 мл рабочего стандартного раствора смеси трифумина и его метаболитов. Пластинку хроматографируют в подвижной фазе гексан-ацетон (3:1) при температуре в помещении 20-22 °С или гексан-ацетон (4:1) при температуре выше 22 °С. Поспс того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры, отмечают линию фронта и оставляют на несколько минут на воздухе до испарения растворителя. Затем пластинку слегка опрыскивают 0,01 н. раствором ПО и прогревают в сушильном шкафу при температуре 160-170 °С в течение 1 ч. Поспс охлаждения ее помещают в камеру для опрыскивания и орошают проявляющим реагентом № 1 - сначала реактивом а и сразу же реактивом б. Трифумин и его метаболиты проявляются в виде красных пятен. Величина R_f трифумина, ФМ-6-1, ФД-1-1 в подвижной фазе гексан-ацетон (3:1) соответственно 0,23;    0,49;    0,82;    в    ПФ    гексан-ацетон

(4:1) - соответственно 0,17; 0,37; 0,78. Для этой реакции можно также использовать пластинки «Сил у фол*, но чувствительность обнаружения будет ниже.

При использовании проявляющего реагента на основе бромфеноло-вого синего (реагент N? 2) пробу наносят на пластинку «С ил у фол*, хроматографируют в ПФ гексан-ацетон (2:1). При проявлении орошают сначала реактивом № 2 а, прогревают при 100 °С в течение 5 мин и орошают реактивом N? 2 б. Трифумин проявляется в виде синего пятна на желтом фоне. Величина R_f 0,35; метаболиты ФМ-6-1 и ФД-1-1 в малых концентрациях (до 10 мкг) нс обнаруживаются, при больших концентрациях они могут проступать в виде более светлых, чем фон, пятен. Величина R, ФМ-6-1 и ФД-1-1 соответственно равна 0,61 и 0,93.

Обработка результатов анализа. Количественное определение трифумина и его метаболитов проводят путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен проб с пятнами стандартных растворов на одной пластинке. Прямо пропорциональная зависимость площади пятен от концентрации препаратов (при одинаковом диаметре пятна, нанесенного на старте) наблюдается в пределах 0,2-5 мкг (пластинки «Алу-фол*. проявляющий реагент N? 1); 1-20 мкг (пластинки «Силуфол*,

556

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9