МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 08.06.89 N° 4998 - 89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КАРБИНА И ХЛОР-ИФК В БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ И МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ •

Краткая характеристика препаратов. Карбин (барбан) - действующее начало 0-(4-хлорбутил-2-ил-1)-14-(3-хлорфснил)карбамат. Брутто формула C,,H₉0₂NC1₂. Молекулярная масса 258,2. Химический чистый карбин - белое кристаллическое вещество, т. пл. 75-76 °С (с разложением). Растворимость:    в    бензоле    -    370 г/кг, толуоле - 295,

дихлорэтане - 546, хлороформе - 470, пропиленгликолс - 150, н-гексане - 2 г/кг, в воде - 11 мг/л при 25 °С. Давление насыщенных паров 0,067 Па. Для белых мышей и кроликов ЛД₅₀ 600-820 мг/кг. Следует соблюдать меры предосторожности, исключающие попадание пестицида на кожу. В воздухе рабочей зоны ПДК 0,5 мг/м³, в воде 0,03 мг/л. МДУ в СССР в зерновых 1 мг/кг, овощах и фруктах 0,1 мг/кг.

Хлор-ИФК (хлорпрофам) - действующее начало 0-изопропил-М-(3-хлорфенил) карбамат. Брутто формула C|₀H₁₂O₂NCl. Молекулярная масса 213,7. Химически чистый хлор-ИФК - белое кристаллическое вещество, т. пл. 41,4 °С, т. кип. 112-113 °С при 200 Па. Хорошо растворим в большинстве органических растворителей, растворимость в воде -89 мг/л при 25 °С. Для экспериментальных животных ЛД50 1500-3300 мг/кг. Нс раздражает кожу. В воздухе рабочей зоны ПДК 2 мг/м³, в воде водоемов - 1 мг/л. В моркови МДУ 0,05 мг/кг.

Карбин и хлор-ИФК применяют в качестве гербицидов. ¹

Принцип метода. Метод основан на извлечении пестицидов из био-материала органическим растворителем и хроматографировании в тонком слое оксида алюминия или силикагеля в подвижной фазе на основе «-гексана. Зоны локализации пестицидов обнаруживают по реакции азо-сочетания продуктов их термической деструкции с а-нафтолом. Для спсктрофотометричсского определения используют характеристическое поглощение гексановых растворов карбина и хлор-ИФК в ультрафиолетовой области спектра при А_м«с ** 276-278 и 274 нм соответственно для карбина и хлор-ИФК.

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел обнаружения: методом ТСХ - карбина 1-2 мкг (0,05 - 0,1 мг/кг), хлор-ИФК 1,5-3 мкг (0,075-0,15 мг/кг); методом УФ-спсктрофотомстрии - карбина 3 мкг, хлор-ИФК 5 мкг в 3 мл раствора (0,5 и 0,85 мг/л соответственно).

Среднее значение определения и доверительный интервал среднего (р - 0,95, п - 10): методом ТСХ - карбина в тканях внутренних органов 90,6 t 10,8% и в крови 94.0 ± 11,0%, хлор-ИФК в тканях 88,0 ± 10,3%, в крови 90,0 ± 12,5%; методом УФ-спсктрофотомстрии -карбина 96,7 ¹ 3,9% и хлор-ИФК 92,4 ♦ 9,3%.

Избирательность метода. Определению карбина и хлор-ИФК нс мешает фосфор и хлорорганичсскис пестициды, применяемые на одинаковых сельскохозяйственных культурах.

Реактивы и растворы. Карбин х.ч. Хлор-ИФК х.ч. «-Гексан нормальный ч. Диэтиловый эфир х.ч., или «медицинский для наркоза¹. Хлороформ х.ч. Оксид водорода. Гидроксид натрия ч.д.а., 25%-ный раствор. Нитрит натрия х.ч. Лимоннокислый натрий х.ч., 5%-ный раствор. Сульфат натрия безводный. ч.д.а. Нитрат серебра х.ч., 2%-ный раствор. Гидроксид калия ч.д.а. Бромфсноловый синий ч.д.а. о-толидин ч. Оксид алюминия для хроматографии II степени активности ч. Сульфат кальция безводный, ч.д.а. а-Нафтол ч.д.а. Хлороводородная кислота концентрированная, х.ч. Фенол. Аммиак водный, ч.д.а. Проявляющие реагенты:    N?1 (для диазотирования) -

нитрит натрия (к 1,5 г нитрита натрия приливают раствор, состоящий из 46 мл дистиллированной воды и 4 мл концентрированной хлороводородной кислоты). Применяют свежеприготовленным; № 2 (для азосочста-ния) - гидроксид калия (2,8 г растворяют в 50 мл дистиллированной воды и прибавляют 0,2 г а-нафтола). Реактивы готовят перед употреблением; N? 3 - бромфсноловый синий реагент (к 0,5 г бромфенолового синего приливают 10 мл ацетона и разбавляют до 50 мл 2%-ным раствором нитрата серебра). Раствор можно хранить в холодильнике несколько дней, N? 4 - на основе о-толидина. Готовят раствор А: 0,5%-ный раствор о-толидина в ацетоне. Раствор Б: смешивают 3 объема 0,5%-ного раствора гидроксида натрия и 2 объема 3%-ного раствора пероксида водорода. Перед употреблением смешивают равные объемы растворов А и Б. Стандартные растворы карбина и хлор-ИФК в диэтиловом эфире с содержанием 100 мкг/мл и гексане с содержанием 100 мкг/мл. Хранят в холодильнике до 1 мсс. Пластинки «Силуфол¹ размером 15 х 15 см (УФ^). Хлорамин Б.

Приборы, аппаратура, посуда. Аппарат для встряхивания, ротационный испаритель с набором колб. Спектрофотометр, позволяющий проводить измерения в УФ-области спектра, начиная с 220 нм. Колбы

378

на 250 мл; грушевидные для отгонки растворителя; мерные; цилиндры. Воронки делительные на 250 мл. Пробирки мерные на шлифах, вместимостью 10 мл. Камера хроматографическая. Пульверизатор стеклянный. Камера для опрыскивания пластинок. Микропипстки или капилляры для нанесения проб. Источник УФ-свста. Стеклянные пластинки размером

9    х 12 или 15 х 15 см. Гомогенизатор. Адсорбционные колонки стеклянные, размером 300 х 15 мм. Фарфоровые чашки и ступки.

Подготовка к определению. Приготовление хроматографических пластинок. Навеску оксида алюминия (50 г) смешивают с 5 г сернокислого сульфата кальция (или гипса), тщательно растирают в ступке до однородной массы. Смесь переносят в колбу на 250 мл и порциями приливают 75 мл воды, осторожно встряхивая массу. Полученную смесь встряхивают до однородной консистенции, а затем ровным тонким споем наливают на 10-12 пластинок размером 9 х 12 см (или 8-10 пластинок размером 15 х 15 см). Оставляют при комнатной температуре на 10-12 ч. Хранят в эксикаторе.

Приготовление адсорбционной колонки. В канон к у помещают нсбапьшой тампон из гигроскопической обезжиренной ваты (0,5 г), насыпают спой оксида алюминия на высоту капонки 2-3 см (примерно 3-4 г). Через капонку пропускают 30 мл ацетона.

Ход анализа. Экстракция для метода ТСХ. Пробу тканей внутренних органов (20 г) тщательно измельчают (или гомогенизируют), приливают 50 мл эфира и энергично встряхивают (при охлаждении льдом) в течение 1 ч. Экстракт спивают. Оставшуюся массу промывают свежей порцией эфира 20 мл. Экстракты объединяют, фильтруют через бумажный фильтр и отгоняют растворитель досуха. К сухому остатку приливают 5 мл охлажденного ацетона и пропускают через абсорбционную колонку. Элюируют пестициды охлажденным ацетоном (50 мл). Ацетон отгоняют досуха, к сухому остатку приливают 0,5 мл эфира и наносят на хроматографическую пластинку.

Пробу крови (2 мл) вносят в прсбирку, предварительно смоченную раствором лимоннокислого натрия, и приливают 10 мл эфира. Встряхивают 20 мин. После 10-минутного отстаивания встряхивают повторно

10    мин. Экстракт сливают и отгоняют растворитель до объема 0,2-0,5 мл.

Экстракция для У Ф-с псктрофотомет-р и и. Пробу крови (2 мл) вносят в пробирку, предварительно смоченную раствором лимоннокиспого натрия. Наливают 5-6 мл гексана и встряхивают 20 мин, поместив в стакан со льдом. После 10-минутного отстаивания гексан осторожно спивают. К оставшейся массе приливают свежую порцию гексана (5 мл). Встряхивают 10 мин. Экстракты объединяют, фильтруют через бумажный фильтр, на который предварительно насыпают безводный сульфат натрия. Измеряют объем раствора. Для спсктрофотомстрирования отбирают 3 мл.

Хроматографирование. Эфирный экстракт 0,2-0,5 мл вносят на хроматографическую пластинку на стартовую линию. Параллельно слева и справа от пробы наносят смеси стандартных растворов Харбина и хлор-ИФК, содержащие 1, 2, 5, 10, 15, .... 40 мкг исследуемого вещества. Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда за 30 мин до хроматографирования наливают смесь гексана с хлороформом (1:3). После достижения фронтом растворителя высоты 10 см пластинку извлекают из хроматографической камеры и оставляют на

379

воздухе до латного испарения следов растворителей. Затем се помещают в сушильный шкаф на 10-15 мин при 150-160 °С. Охлажденную до комнатной температуры пластинку опрыскивают сначала реагентом N? 1, а через 1 мин - № 2. В местах локализации карбина и хлор-ИФК проявляются пятна, окрашенные в розово-кирпичный цвет. Кроме карбина и хлор-ИФК, на пластинке могут проявиться продукты мстабатизма: окси-карбамат (метаболит карбина. R_f 0-0,1), анилин и л-хлороанилин. Если величина R_f карбина принять равной 1, то R_mn для анилина равна 1,25; для ж-хлоранилина - 1,49, а для хлор-ИФК - 2.

При опрыскивании пластинок ПР N? 3 карбин и хлор-ИФК проявляются в виде коричневых пятен. После обработки ПР № 4 и УФ-облучения карбин, хлор-ИФК и метаболиты проявляются в виде серо-зеленых пятен.

Количественное определение пестицидов проводят путем сопоставления интенсивности окрашивания пятен и их площади на хроматограмме пробы и стандартных растворов. Площадь пятен измеряют с помощью промасленной миллиметровой бумаги или планиметром.

Обнаружение л-аминофенола. Качественным признаком интоксикации N-фен ил карбамата ми служит присутствие в моче л-аминофенола. Его обнаруживают по реакции окисления до 4-хлорамина-л-хинона и последующего сочетания с фенолом в щелочной среде. В результате получается окрашенное соединение.

Пробу мочи 20 мл вносят в делительную воронку, приливают 20 мл 1 н. раствора соляной кислоты и интенсивно встряхивают 10 мин. Затем вносят 5 мг хлорамина Б и снова встряхивают содержимое воронки 10 мин. Приливают 30 мл эфира и осторожно встряхивают 20 мин дтя экстракции 4-хлорамина-л-хинона. Эфирный экстракт отделяют, пропускают через безводный сульфат натрия, концентрируют до объема 0,2-0,5 мл и наносят полученную пробу на фильтровальную бумагу, заранее смоченную эфирным раствором фенола. Выдерживают в парах аммиака 1-2 мин. Если в пробе мочи содержался л-аминофенал, то на фильтровальной бумаге проявляется пятно, окрашенное в голубой или синий цвет в зависимости от катчсства л-аминофенола.

Спсктрофотомстрированис. Для слсктрофото-мстрирования в кварцевые кюветы I - 1 см вносят 3 мл гексанового экстракта. Измеряют оптическую плотность раствора при Л_маЕС " - 274 нм для хлор-ИФК и A***_c * 276-278 нм для карбина. Максимум при 230-231 нм принадлежит анилину, при 234 нм - оксикарбамату, при 237 нм - л-хлоранилину. Количество пестицида в спсктрофотомстрирус-мой пробе определяют по градуировочному графику, для чего измеряют оптические плотности растворов пестицидов, содержащие от 3 до 100 мкг в 3 мл гексана. Строят график зависимости «Оптическая плотность - концентрация в 3 мл*. Эталоном сравнения служит гексан.

Обработка результатов анализа. Содержание пестицида в пробе (X, мкг/г или мг/кг) вычисляют по формуле

AV

X « - ,

У,Р

где А - количество пестицида, найденное в хроматографируемой или спсктрофотомстрирусмой пробе, мкг; V - общий объем экстракта, мл;

380

V_x - хроматографируемый или спсктрофотометрирусмый объем экстракта, мл: Р ~ навеска или объем пробы, г или мл.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

381

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9

1

Разработаны Л.Г. Александровой (КНИИГГ и ПЗ).

377