ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Москва

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ЬРЬЦЦ1ТШШ_>Б0ДЕ31Ш1 РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ ДОГМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаотъ 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями,боле8нями растений и сорняками

Москва -

условии глэад умятого яэдртопауигонания шкшши

Пясти» колонки 55 УБ-Х на хро- 52 ХБ-60 на гро- метоне N-суаер гатоне W-cynep (0,125 - 0.160 »ах> (0.125 - 0,160л0( £яна колони и внутренней ICO х 3.0 100 х 3.0 ГСШ'вТр, СУ X ж* Раэочья акала электрометре, А 2 х ИГ10 2 х ГО"10 Схорост> потоки еаоте, мл/г»н 27 27 Скорость пэтою. Еояороаа. ил/юи 16 16 Скорость потока Еоэкухв, ил/иии 312 312 Теиперотурв холопка, °С 205 20в Tw я» ретуре испарттвля, °С 230 230 Врет удерпнеогыя преподала 4 мн 26 сек 3 мян 2 сек ХроматогриЭ "№ет - 106" с Ш. скорость двяхеси ленты санояисца 0,2 сн/мгн 53 ОТ-П ва ХРО-* 2% 100 х 3,0 0,4 х 10“10 27 16 312 230 230 3 чин 15 сек

ПЭГС на Хро 100 х 3.0 0.4 X Ю*10 27 16 I 312    » 210 ' 230 2 мин 22 сех

---

- 32 -

- площадь пика стандартного раствора, uu ,

$ 2 ~ площадь пика анализируемого раствора, мм^;

о

*1 - объем стандартного рвствора, введенный в хромвтогрвф, мм ;

3

У2 ” °<5ьем анализируемого раствора, введенный в хроматограф, мм ;

о

У3 - объем экстракта анализируемой пробы, см^;

Р - навеска пробы, г.

3.Технике безопасности

Соблюдаются обычные требования по технике безопасности, необходимые при работе с органическими растворителями.кислотами н щелочами.

U. Разработчики:

Петрова T.W., Хамнаева Е.И. -Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений, г. Ленинград.

5. Методические указания апробированы во ВНИИХС2Р (Новикова К.Ф.).

Хлорорганнческие пестициды

7.    Временные методические указания по определению блазера в воде, почве, сое и зеленых листьях методом хроматографии в тонкой слое

27 ноября 1984 Г* №3156-84

8.    Временные методические указания по определению

дилора в меде методом тонкослойной хроматографа    22    мая 1985 г. №3884-85

9.    Временные методические указания по хроматографическому определению Щ в воде

22 мая 1985 г. №3876-85

10.    Временные методические указания по определению

модауна в воде и почве газохидкостной хроматографией    21    ноября 1985 Г. №4030-85

11.    Методические указания по определению тиолана и продуктов его превращения в воде хроматографическими методами _{а ноября 1Э6}5 г. №4035-85

12.    Временные методические указания по определению триалдата методом газожидкостной хроматографии в воде, почве и зерне пшеницы

21 ноября 1985 г. №4032-85

13.    Временные методические указания по определению мэтодами ПОС н ТСХ аналога ювенильного гормона п-хлорфенилового вФвпа гераниола в Берне пшеницы, почве,воде в зеленых листьях

12 апреля 1985 г. №3254-85

14.    Временные методическиеиу указания по определению остаточных количеств фозилада в свекле методом газожидкостной хроматографии

22 мая 1965 г. £3675-85

15.    ременные методические указания по определению регулятора роста растений ЭБ£-5 в воде, растительном материале методом ТСХ

21 ноября 1985 г. £4031-65

16.    Методические указания по определению остаточных количеств хлорорганлческлх пестицидов и продуктов их разложения (./«-изомера ПИТ. V-изомера ГХИГ. гептахлора, альдрина. кельтана. ДДЭ. ЛЛД. ЛИТ)

в воде хроматографическими методами при совместном присутствия j _{1986 Гв} Ш20-86

Азотсодержащие пестициды

17.    Временные методические указания по определению ацетала в воде, почве, картофеле, верне и зеленой массе кукурузы и сои методами ГаХ и ТСХ

21 ноября 1985 г. £4029-85

18.    Методические указать по определению диФенамяда в в воде методом тонкослойной хроматографии

21 ноября 1985 г. £4033-85

19.    Методические указания по определению карахола и его метаболита бензоклпродкислоты в почве методом газожидкостной хроматографии

31 июля 1984 г. £3072-84

20. Временные методические указания по определению лентаграна в растительной продукции, почве и воде ТСХ

12.04.85 г. №3253-85

21.    Методические указания по определению монуро-на и дкуроиа в чае методом газожидкостной хроматография ₃ 1Шваря Is85 г> >Ш87-85

22.    Временные методические укаэания по определению набу в воде, почве, капусте, сое и зеленых листьях методом хроматографа в тонком слое _{22 мая 19й5 г>} *3860-85

23.    Временные методические указания по определению раукдапа в воде методом ТСХ (дополнение к №2434-81)

21 ноября 1985 Г. №4034-85

24.    Временные методические указания по определению сонаяена в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами

3 января 1985 г. №3200-85

25.    Временные методические укаэания по определению соналена в маслах подсолнечника, репса

и клещевины ISX 22 мая 1985 Г. №3894-85

26. Временные методические указания по определению стомпа методом ПК в табаке

12 апреля 1985 Г. №3252-85

27. Методические укаэания по определению тклта в растениях,почве, воде методом гозоаидкост-

Настоящие методпческие указания предназначены для санитарно-эпидемиологических с таили Я и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома . СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве гфшиальнкх Группой экспертов при Госкомиссяи по химическим ерсдствам борьбы с вредителей,болезнями растений и сорняками Гпоагропрома СССР

Методические указания согласовали и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИОДяТО им.Марпиновского В.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

РЩКШОНШ КОЛЛЕГИЯ

Л.Г.Александрова, Д.Б.Гйрешх, А.А.Калинина (за;4.председателя), Ц.А.Клисенко (председзтеть), Г.И.Короткова, М.В.Письменноя, Г.А.Хохолькога, В.Е.Кривейчук.

"УТВЕРЖДАЮ"

Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

А.И.ЗАЙЧЕНКО

"21" ноября 1985 г. *4028-85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРВДЫГЕНИЮ ПРИМИШДА В

РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ И В ПОЧВЕ С ПОМОЩЬЮ

тонкослойной и газожидкостной хроматографии

I. Краткая характеристика препарата

1.1.    Прямицвд, пиримифос-этил.ПП 2X1

Контактный инсектицид. Предложен для борьбы с обитаидцми в почве вредителями, в том числе с проволочниками на картофеле и кукурузеj мухами на луке, моркови и капусте; долгоносиками на сахарной свекле.

1.2,    Активное вещество: 0- (2-Диэтиламнно-в*метилпиримидил-4) ■ 0,0-днэтмтнофосфат.

1.3* Структурная формула:

'■'13^П24^АЧ3^Г М.м. 333,А

1*4. Технический продукт''. - бесцветная с желтым оттенком мас-

ллнистая живность. Растворимость в воде прь 30°С I мг/м , смешивав

етса со многим* органическими растворителями. Устойчив в нейтрал*-нов среде, сравнительно быстро разрушаете сои чагр'*вчиии с раствором* меючев я минеральных кислот.

- 25 -

Выпускается в виде 30# с.п.,50#-ного э.к., 5 и 10#- ных гранул к 20#-ного порошка для обработки семян.

ЛДдд для крыс при оральном введении 140-200 мг/кг, прфпплпкацив на кожу J000-2000 мг/кг.Токсичен для пчел и большинства других полезных насекомых.

2.МЕТОДИКА 0ПРЕДЕЛЕШ1Я ПРИМИЩЩА В РАСТИТКНЬИОМ МАТЕРИАЛЕ И В ПОЧВЕ ХШЛАТОГРАФИЕЛ В ТОНКОМ СДОЕ И ГАЗОЛЩКОСГгЮП ХРОМАТОГРАФИЕЙ.

2.1.    Основные положения

2.1.1.    Принцип метода

Метод основш! не извлечения приютила из. растительных проб 50#-пым водным ацетоном. Из почвы экстрагируют инсектицид смесью ацетона с 0,05 н раствором C_flC1% ,в соотно'зекчп 1:1.Очистка экстрактов способом перераспределения между двумя несмешлватимися растворителями. Количественное определение проводят .метода]-!:! гаэожидкостноЯ хроматографа и хроматограф;еЯ в темпом слое.

2.1.2.    Метрологическая характеристика метода.

	гас	тех
Минимально детектируемое количество	I 1СГ	0,5 мкт
Нглняй предел определения	0,001 мг/кг	0,1 мг/кг
F - размах варьирования,#
в растениях	80-05	85-90
в почве	04-08	90-95
С - среднее значение определения,#
в растен/ях	02.2	87,5
в почве	05,0	02,5
стандартное отклонение,#
2 растекиях	4,56	3
г почве	2,16	о

- as

ДоЕврателышй интервал среднего при Р =0,95 и п =5 ,%

92,2 7 ¹²*⁶    87,5 -    8,3

95,8 ± 5,9    92,5 ±    8.3

2.1.3. Избирательность метода.

Другие фосфорорганическде инсектицида определении не мешают.

2.2. Реактива .растворы и материалы

Гексан, х.ч.ЛУ 6-09-3375-78

Ацетон ,х.ч..ГОСТ 2603-79

Кальций хлористый,ч«.ГОСТ 4161-77

Натрий сернокислый,безводный .чда.ГОСТ 4166-79

Уголь активированный марки Кад-тлотай пли СУ-А

Стекловата

Хроматографические пластинки "Сялуфол -ДУ-254",ЧССР Хрома тон (/-супер, пропитанный 5%£&-30 (0,125-0,160)»«) ,ЧССР Хрома тон V-cynep,пропитанный 5% X Е-60 (0,125-0,160 ин),ЧССР Хрома тон Л^супер .пропитанный Ъ% 0Wl7 (0,125-0,160 мм) ,ЧССР Хроматон (/-оупор.пропитанный 2% ПЭГС (пояиэтиленгликольсукцинат; (0,125-0,160 мм)

Азот особой чистота .ГОСТ 9293-74 Водород электролитический Сжатей воздух

Проявлявшие реагенты :

1.    0,55? раствор 2,6-дибром -//-хлорхинонимииа в гексане (Ч.ТУ 6-09--05-63-74 ) .после опрыскивания пластинки нагревают пря П0°С в течение 5 мни.

2.    2% раствор 4-(р-нитробензил)пиридипа (ч.,ТУ 6-09-Т5-93-74) в ацетоне .после нагревания хроматограммы прз И0°С в течение 5 мин. и вновь опрыскивают 10£ раствором тетраэтяленпентамине (ч.,ТУ 6-09--C5-8CW-78) в ацетоне.

- 27

3. 0,05# раствор бромфенолового оинего(чда.ТУ 6-09-3719-74) в 0,5# растворе азотнокислого серебра (хч.ГОСТ 1277-75).приготовленного на ацетоне .После проветривания гроиатограмю и прогревания её в термостате при 35-40^ .вновь опрысгаваят 5# раствором уксусной кислота (хч .ГОСТ 18290-7 2) или лимонной кислоты (хч. ГОСТ 365 2-69).

Основной стандартный раствор прамицяда в ацетоне или в гексане -100 мкг/см³ .

Рабочие стандартные растворы готовят разбавлением основного раствора - 10 мкг/см³ ,1 мкг/сы³ ,0,1 мкг/см³ .

2.3. Приборы и аппаратуре,посуда.

Газовый хроматограф *"Цпет-106"

Хроматографические колонки стеклянае,длиной I м и внутренним диаметром 3 мм

Ротационный вакуумный испаритель.ТУ 25-II-9I7-74 Алперат для верятлнения колб.ТУ 64-I-I08I-73 Холодильник бытовой Термостат

Хроматоскоп (хелоскои)

Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75

Колбы конические со олифами и пробирками на 100 и 250 см³ ,Г0СТ 10394-72

Колсы круглодонные для отгонки растворчтелей.ГОСТ 17004-74

Делятелыше зоронк* на 250 с.'Р.ГССТ 8613-75

Ворснкд.ГОСТ 8613-75

Колсы мерные на 100 см³ .ГОСТ 1770-74

Микропипетки 0,1-0,2 см³ .ГОСТ 20292-74

Катера для опрыскивания , ТУ 25-1X^30-70

Опрыскиватель стекляный, ГОСТ 19391-74

Микро-Яриц - Ю Т/ 2.833. 106

Про Сирии с притертыми пробками,на 10 СМ³ .ГОСТ 1770-74

-2П-

2.4.    Подготовка к определению

Растительную пробу измельчают на кусочки 0,5 х 0,5 х 0,5 см³ и отбирают среднюю пробу 25 г.

Почву естественной влажности или воздупно-сугую просеивают через сито и для алачиза отбирают Юг.

Отбор проб растений и почеы проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб с/х продукции,продуктов питания и объектен-окружающей среды для определения млкроколичеств пестицидов",утвержденными Минздравом СССР 21 августа 1979 г.,£ 2051-79.

2.5.    Проведение определения

2.5.1. Экстракция и очиска экстрактов

Анализируемые навески помещают в конические колбы ёмкостью 250 см?

о

Растительные пробы экстрагируют трияды,заливая 50 см смеси ацетон-вода (1:1) и встряхивая в течение 30 мин. Экстракты отфильтровывают через бумажный фильтр.Объединённые экстракты помещают на I час в холодильник, после охлаждения фильтруют через стекловату.Далее экстракты в делительных воронках экстрагируют трижды по 20 мл гексаном. Гексановый слой сливают в конические колбы с безводным сернокислым натрием (30-50 г.), с добавлением незначительного количества активированного угля (20-50 мг) для очистки экстракта. Интенсивно помешивают содержимое колбы к отфильтровывают через бумажный фильтр в круглбдочине колбы. Отгоняют растворитель до объёма I см³ под вакуумом на ротационном испарителе при температуре не более 40°С.При необходимости экстракты подвергают дополнительной очистке. После кор-цен трироваияя под вакуумом до I см³, остаток растрорителя испаряют »м воздуха. К сухому остатку приливает 30 о?.г смеси ацетона с 0,05 н Crt^o (onofHOseme комюявнтов 1:1), пробу переносят в делительную воронку.фильтруя через бумажный фильтр, колбу споласкивают ещё 2Л-ю см³ смеса ацетенв с тц?р?стям кальпве?л. В воронку добавляют 30

- 29 -

гексана для извлечения токснканта.Гексановую фракцию отделяют, во-досолеацетоновую девяды промывают 20-ю см³ гексана. Объединённый гексановый экстракт фильтруют через слой безводного сернокислого натрия и концентрируют до 0,5-1 ,Ocri³ Дочза. 10 г. прозы экстрагируют триады, заливая 50-ю см³ смеси ацетон -0,05 н водный раствор CaCtfg (1:1) и встряхивая в течение 30 мин. Экстракта отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку и экстрагируют трижды 20-ю см** гексана. Гексановый слой сливают в

о

конические колбы на 100см° о беаводныы сернокислым натрием (30-50 г)

с добаглешем незначмтолыюго количества активированного угля (20-

-50 мг) для очистки экстракта,Интенсивно помзшивают содержимое колбы и отфильтровывают через бумажный фильтр в круглодонные колбы.Отгоняют

о

растворитель до объёма I orf под вакуумом на ротационном испарителе при температуре не более 40^.

2.5.2. Хроматография в тонком слое

Экстракт после определения ТЛ доупаривают до 0,2см³ и наносят при помоги кэпллярной пипетки на расстоянии 2 см от нижнего кроя хроматогре-фической пластинки "Силуфол"-(У1/-254".£)сли в пробе содер;;тся много инсектицида,то рекомендуется Орать часть пробы и наносить экстракт в 3-5 точек,диаметром не более 0,5 см. Стенки колб тщательно смывают несколькими каплями гексапп и также наносят в центр пятна.Справа п слева от пробы наносят стандартные раствори.содержащие 1,5,10,20 мкг действующего вещества препарата, в зависимости от количества препарата в пробе.Хроматографические пластинки ставят в камеру для хроматографирования со смесью растворителей гексан:ацетон в соотношении 4:1.Крой пластинки должен быть погружен в смесь растворителей па 0,5 см .Когда фронт растворителя поднимается на высоту 10 см,пластинку вынимают,подсушивают на воздухе и обрабатывают одним из проявляющие реагентов (3.3). Необходимо отметить,что наиболее чувствительным

- 30 -

проявителем является 2,6-дибром-^-хлорхиноюшан , а также 4-(р-нитро-бенвил)пиридин.

Пластинки "Силуфол -М^/_254" можно смотреть вод хромотоскопом беъ предварительной обработки проявителем.

U^ иримицида в системе гексан-ацетон (4:1) составляет 0,6^ 0,05 2.5.3. Оп1>еделение методом газожидкостной хроматографии.

После отгонки растворителя к сухому остатку добавляют 1-2 см³ гексана,колбу закрывают пробкой и тщательно обжвают её внутреннюю поверхность .Алвквотную часть пробы (1-5 ывл) вводят в испаритель хроматографа.

Услоеия хроматографирования приведены в таблице.

2.6. Обработка результатов анализа

Содержание лримицида в исследуемом объекте в олучае тонкослойной хроматография вычисляют по формуле:

А -.

X--

Р    .    где

X - содержание препарата в пробе, мг/кг;

А - количество препарата, обнаруженное в пробе при сравнении оо стандартом, мкг;

Р - навеска нрккжрлтях исследуемой пробы, г.

Содержание лримицида в пробе в случае газожиякоотной хроматографии определяют методом стандартов и рассчитывают по формуле:

X * V ^У1 ¹ С1* ^уз

Sj*y₂ х Р    ,    где

X - количество препарата в пробе, ыг/кг;

О

Cj- роличество препяратв в стандартном рвстворе.мкг/см