Федеральная служба и сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории

Методические указания МУ 4.2.2039—05

ББК 51.9 Т38

Т38 Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории: Методические указания. — М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2006. — 126 с.

1.    Разрабоганы: МОНИКИ им. М. Ф. Владимирского (К. И. Савицкая. Е. Е. Круглов): Главным бактериологом Министерства здравоохранения и социального раз-вития Российской Федерации (В. В. Кутырев); Центральным научно-исследовательским институтом эпидемиологии (Н. А. Семина. В. В. Галкин); ФГУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора (Е. Н. Беляев. И. В. Брашна. Н. С. к'ривоиалова): На>чно-нсследовательским циститом антимикробной XHMHoiepaiiHH Смоленской государственной медицинской академии (| Л. С. Сграчунский I Р. С. Козлов): Научно-исследовательским институтом вирусологии им. Д. И. Ивановского (Л. В. Урываев); Институтом медицинской па-разигологии и тропической медицины им. Е. И. Марцнновского ММА им. И. М. Сеченова (В. II. Сергиев, М. Н. Лебедева): Федеральной службой по надзору в сфере защиты нрав потреби гелей и благополучия человека (3. С. Середа).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-гигиеническому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека 6 октября 2005 г. (протокол №3).

3.    Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 23 декабря 2005 г.

4.    Введены в действие с I июля 2006 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.9

© Роспотребнадзор, 2006 © Федеральный нет р гигиены

и эпидемиологии Росно гребна. пора, 2006

МУ 4.2.2039—05

Содержание

1.    Область применения..............................................................................................5

2.    Общие положения.................................................................................................6

3.    Общие требования к сбору проб биологического материала

для микробиологического исследования..................................................................6

4 Общие требования к доставке проб биоматериала в микробиологическую лабораторию...........................................................................................8

5.    11робы различных видов биоматериала и среды, окружающей

больного....................................................................................................................12

6.    Правила и техника получения проб различных видов биологического материала для микробиологического исследования........................21

6.1.    Пробы крови.............................................................................................22

6.2.    Пробы при инфекционно-воспалительных процессах

центральной нервной системы (IЦ 1C)............................................................24

6.3.    11робы при инфекционно-воспалительных процессах глаз......................26

6.4.    11робы при инфекщюнно-воспатитетьных процессах уха.......................30

6.5.    Пробы при инфекционно-воспалительных процессах

дыхательных путей..........................................................................................31

6.6.    Пробы при инфекциошю-воспалительных процессах

мочеполовой системы......................................................................................38

6.7.    Пробы диализата у больных, находящихся на постоянном

амбулаторном диализе......................................................................................54

6.8.    Пробы при инфекциошю-воспалительных процессах

желудочно-кишечного тракта и желчевыводящих путей.............................55

6.9.    Пробы у пациентов, получающих в качестве медицинской помощи перитонеальный диализ...........................................................64

6.10.    11робы стерильных жидкостей тела (кроме крови, ликвора, мочи)........................................................................................................65

6.11.    11робы при инфекциях кожи и подкожной клетчатки........................66

6.12.    Пробы из инфицированных глубоких ран, абсцессов,

мягких тканей...................................................................................................71

3

6.13.    Пробы мри инфекциях в стоматологии (десны, периодонтальные, периапикальные и стоматиты Biuiceirm)................................72

6.14.    Пробы мри инфекщюнио-воспашгельных процессах

костей и суставов.............................................................................................72

6.15.    Пробы для опре;юления обсомоиенпости сосудистого катетера при подозрении па категср-ассошвцювашпто

инфекцию...........................................................................................................74

6.16.11робы магериала при аутопсии.............................................................74

7.11робы биоматериалов для определения наличия аназробов,

вирусов, простейших................................................................................................76

7.1.11робы биоматериала для определения наличия аназробов.........................76

7.2.    Пробы биоматериала для определения наличия вирусов......................79

7.3.    Пробы биоматериала для определения наличия простейших ....................................................................................................................85

8.    Пробы биоматериала и иммуносцххлогические метода определения возбудителей инфекшюнно-воепшнггельных процессов........................96

8.1.    Общие положения....................................................................................96

8.2.    Иммуносерологическое обследование...................................................97

8.3.    Методы исследования, применяемые в иммуносеро-

логии.................................................................................................................99

8.4.    Сбор и хранение образцов для III ЦЧлиагностики...............................101

8.5.    Сбор проб для диагностики сифилиса..................................................104

9.    Библиографические данные..............................................................................118

Приложение. Клинические проявления заболеваний, вызываемых некоторыми бактериями, патогенными амебами, простейшими, гельминтами................................................................................................117

4

МУ 4.2.2039—05

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты нрав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

23 декабря 2005 г.

Дата введения: 1 июля 2006 г.

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Техника сбора и транспортирования биомагериалов в микробиологические лаборатории

Методические указания МУ 4.2.2039—05

1. Область применения

1.1.    В методических указаниях изложены правила сбора и транспортирования биологических материалов в микробиологические лаборатории в целях повышения качества результатов лабораторных исследований и организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, а также профилактики внхтриболь-ничных иш|кжций у медицинского персонала и пациентов.

1.2.    Методические указания предназначены для использования органами и организациями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут использоваться органами и организациями здравоохранения.

2. Общие положения

2.1.    Получение достоверных данных о выявлении источников заражения необходимо для своевременной и эффективной организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, оценки уровня пораженности населения при проведении эпидемиологического надзора.

2.2.    Разработанная техника сбора и транспортирования биологических материалов в микробиологические лаборатории позволит снизить уровень прсаналитичсской ошибки и повысить качество работы лабораторий по объективизации результатов.

2.3.    Методические указания определяют правила предохранения медицинского персонала и пациентов от инфицирования при сборе и доставке в лаборатории проб биоматериалов, которые могут быть обсеменены бактериями, грибами, вирусами, паразитами.

2.4.    Методические указания могхт применяться при проведении эпидемиологического надзора за антимикробной резистентностью выделенных и идентифицированных в лаборатории возбудителей ин(|юкции. оптимизации применения антимикробных препаратов и мероприятий в области профилактики, контроля и сдерживания резистентности на локальном, региональном и национальном уровнях.

3. Общие требования к сбору проб биологического материала для микробиологического исследования

3.1. Для предохранения от инфицирования медицинского персонала и пациентов при сборе проб биоматериалов и доставке его в лабораторию необходимо:

♦    не загрязнять наружную поверхнослъ посуды при сборе и доставке проб;

♦    нс загрязнять сопроводительные документы (направления);

♦    свести к минимуму' непосредственный контакт пробы био-материала с ру ками медицинского работника, собирающего и доставляющего его в лабораторию;

♦    использовать стерильные одноразовые или разрешенные к применению для этих целей в установленном порядке контейнеры (емкости) для сбора, хранения и доставки проб;

6

МУ 4.2.2039—05

♦    транспортировать пробы в переносках или укладках с раздельными гнездами;

♦    соблюдать асептические условия для предотвращения инфицирования пациента в процессе выполнения инвазивных мероприятий;

♦    собирать пробы в стерильную одноразовую или стеклянную посуду (нс загрязненную биоматериалом, не испорченную трещинами. отколотыми краями и другими дефектами).

3.2.    Пробы биоматсриала необходимо собирать следующим образом;

♦    до начала антибактериальной терапии, при отс>тствии такой возможности - непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;

♦    в количестве (вес. объем), необходимом для выполнения анализа, т. к. недостаточное для исследования количество биоматс-риала приводит к получению ложных результатов;

♦    с минимальным загрязнением материала нормальной микрофлорой. т. к. ее наличие приводит к ошибочной трактовке результатов. полученных, например, при исследовании мокроты, проб из носа, глотки (зева), гениталий и др.

3.3.    При сборе пробы следят за тем. чтобы в лаборатории при вскрытии емкости с биоматсриалом нс образовывался аэрозоль: пробы крови и других жидкостей организма аккуратно без образования пены переносят из шприца в сухую и/или наполненную средой (антикоагулянтом) посуду.

3.4.    В направлении на исследование указывают: фамилию, имя. отчество больного: год рождения; отделение, в котором он находится; номер истории болезни (амбулаторной карты); диагноз; материал. посылаемый на исследование, и задачи исследования; дату и время взятия материала (часы); антибактериальные (иммунные) препараты, если проба сдастся на фоне антибиотико- и/или иммунотерапии: фамилию, имя. отчество лечащего врача (консультанта), направляющего пробу на исследование. При направлении биоматериалов. полученных при вскрытии, указывают также отделение, в котором умер больной.

3.5. Перед сбором пробы, особенно при применении инвазивных методов, учитывается вероятность риска для пациента и пользы, а также значимость именно данного вида биоматсриала для целей объективизации клинического диагноза и оценки проводимых кти планируемых лечебных мероприятий.

4. Общие требования к доставке проб бноматернала в микробиологическую лабораторию

4.1.    Все собранные пробы отправляют в микробиологическую лабораторию немедленно после получения, за исключением случаев использования емкостей с транспортировочными средами, разрешенными к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке.

Это необходимо для:

♦    сохранения жизнеспособности возбудителей и возможности выделения микроорганизмов, требующих особых условий культивирования (Haemophylus и др.);

♦    предотвращения избыточного роста быстрорасту щих и активных микроорганизмов:

♦    поддержания соотношения исходных концентраций изоля-тов при наличии в пробе микробных ассоциаций:

♦    сокращения времени контакта пробы с некоторыми антисептиками. используемыми место, которые могут обладать антибактериальной активностью;

♦    объективизации клинического диагноза ин(|>скционно-воспалительного заболевания и оценки результатов терапии.

4.2.    Допускается использование альтернативных методов для увеличения сроков доставки биоматсриала в лабораторию.

Пробы хранят в холодильнике при температуре 2—8 °С, за исключением нижеперечисленных слу чаев.

4.2.1. Когда пробу хранят в специализированной транспортировочной емкости (транспортировочная система), разрешенной к применению в установленном порядке, представляющей собой стерильную одноразовую пробирку с агаризованной или жидкой транспортировочной средой и зондом-тампоном, вмонтированным в

МУ 4.2.2039—05

пробку и стерильно упакованным вместе с пробиркой. В таких емкостях пробы хранят при комнатной температуре (18—20 °С). Транспортировочные среды, спсци&тьныс плотные с активированным углем и без него, позволяют обеспечить сохранение жизнеспособности микроорганизмов, требующих особых условий культивирования. в течение 48—72 ч.

Для проб на анаэробы и для фск&тьной флоры используют специальные емкости с транспортировочной средой, пробирки со средами для выделения кампилобактсрий и хсликобактсра. разрешенные к применению в у становленном порядке. Такие среды создают анабиотическу ю атмосферу дтя микроорганизмов, что способствует снижению их метаболизма, сдерживанию роста, препятствует их высыханию и накоплению продуктов жизнедеятельности.

Каждую пробу, собранную в жидкую среду, тщательно перемешивают со средой.

4.2.2.    Когда кровь культивируют в бульоне, тогда после получения пробу хранят в термостате при температу ре 35—37 °С.

Если пробы собирают в спсциатьныс емкости дтя последу ющего исследования с дву хфазной средой, их следу ет хранить при комнатной температуре (18—20 °С).

4.2.3.    Когда при возможном наличии температурозависимых микроорганизмов (Neisseria sp.) пробы оставляют при комнатной температу ре (18—20 °С).

4.2.4.    Когда пробу хранят в емкостях с соответствующими питательными средами, подготовленных в лаборатории или разрешенных к применению в у становленном порядке при проведении:

♦ бактериологических исследований - в пробирках с вмонтированными зондами-тампонами или без них со средой, состоящей из забуференного физиологического раствора с глицерином дтя определения энтеробактерий семейства Кишечных («на дизгруппу») и аэромонад. При работе с тампонами, вмонтированными в ватно-марлевую пробку. следят за тем. чтобы не замочить (нс загрязнить) пробку средой и/или собранным материалом. Собранную пробу тщательно перемешивают со средой. Используют также готовые пробирки со специальной азотной средой, разрешенные к применению в установленном порядке;

9

МУ 4.2.2039—05

♦    вирусологических исследований - в специальных емкостях с жидкой средой, разрешенных к применению в установленном порядке;

♦    паразитологических исследований - пробу тщательно смешивают с консервантом.

Пробы ликвора хранят при комнатной температуре (18—20 °С), а при проведении в лаборатории вирусологических исследований -в термостате при 35—37 °С.

4.3. Для транспортирования проб, исследуемых на наличие аэробов н факультативных анаэробов, используют:

♦    одноразовые стерильные сухие пробирки с вмонтированным зондом-тампоном (тубссры) или емкости с транспортировочной средой, разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке; допускается использование стерильных стеклянных пробирок, укупоренных газопроницаемой пробкой с вмонтированным зондом-тампоном, приготовленных в лаборатории;

♦    одноразовые стерильные емкости с завинчивающейся крышкой (допускаются стеклянные с газопроницаемой пробкой) -для сбора проб мочи, мокроты, фекалий, бронхо-альвеолярного лаважа. биопсийного (кусочки ткани) материала;

♦    стерильные одноразовые с завинчивающейся пробкой или стеклянные пробирки - для сбора стерильных жидкостей, бронхо-альвеолярного лаважа, отделяемого из дренажей или соскобов;

♦    стерильные чашки Петри - для сбора проб волос или для транспортирования соскобов с маркировкой дна чашки;

♦    специальные стерильные носоглоточные и урогенитальные зонды-тампоны с осью из алюминия (диаметр оси - 0,9 мм) и маленьким тампоном из хлопка или вискозы на кончике (диаметр тампона - 2.5 мм), вмонтированным в пробку, укупоривающую стерильную одноразовую стеклянную пробирку - для проб из носоглотки на В. pertusis и из уретры у мужчин.

4.4. Для транспортирования проб, исследуемых на наличие анаэробов, используют емкости со специальными транспортировочными средами и пробирки с тиогликолсвой средой; пробирки со средами для выделения кампилобактерий и хсликобактсра. разре-

10