ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Москва

"УТВЕРВДАЮ*

Заместитель Главного Государствен-ного санитарного врача СССР

А, И. Зайченко

*22 мая_19831г.

* 3886-86

?ЛЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИФОСА/АБАТА/ В ПРОДУКТАХ РАСТЕНИЕВОДСТВА

методом тонкослойной хроматографии

/ дополнение.к £ 1350-75 от 22*09.75г*/

I.Характеристика анализируемого пестицида*

Бис (0* О-Диметилтиофосфорил-О-фб нил-4) сульфид Структурная формула:

( ^

(с h₅g)i Р-оО-^0-о-р(осн_?\

Эмпирическая формула: С_(Ь H^Oj.

Молекулярная масса - 466 Сжяонкмы;аба:г,ябат 500 Е,абат 4 Е,0М$~786

Химически чистое вещество -белые кристаллы.Технический препарат-коричневая жидкость содержащая 90-95# действующего вещества.Препарат нерастворим в воде,хорошо растворяется в органических растворителях /апетсяв,гексане,хлороформе,эфире,ацетонгтриле/.УстоЙчив к воздействию слабых щелочей /пря pH 8 я температуре 20°С не гидролизуется в течение нескольких педель/,Выпускается в форме 30# к.э„Зарубежный аналог дяфооа - абат выпускается в виде 50# к.э* и 25 % с.п.

Откосится к малстокскчным соединениям. ЛД^ при введений препарата в желудок белых крыс составляет 1360 -2300 мг/кг, для белых мышей -460 мг/кг.Проникает через кожу.Для кроликов при накожном нанесении ЛДцп 07C--I030 мх/кг»Рээдралокщее действие выражено слабо,Коэффициент куг/улкияк -5,7,Является инсектицидом контактно-кишечного действия, Зифектйвеп в борьбе с лкчхнками к омаров, мух, вредада насекомыми до-гда-гзхт днвстгшх,при зад и те сельскохозяйственных культур от клопов, ?р?дсов г других насекомых.

- 20 -

ОДУ в сахарной свекле,овощах,цитрусовых и хлопковом масле -0,3 мг/кг, в мясе,яйце - I мг/кг,в молоке -не допускается.ЯДК в кормах для сельскохозяйственных животных па откорме -0,25 мг/кг,лактирующих животных-не допускается.

2. Методика определения дифоса в продуктах растениеводства методом тонкослойной хроматографии.

2.1.Основные наложения,

2.1.1*Пркпщш метода.

Метод основан на экстракции препарата из анализируемого объекта ацетоном,осацдснли коэкстрактлвных веществ из водно-ацетонового раствора уксуснокислым свинцом на холоду, переэкстрагирОЕШШп дифоса в гексан,дополнительной очистке экстракта на колонке с силикагелем АСК, элюировании пестицида смесью бензола с гексаном,хроматографировании на пластинках "С^глуфол" и проявлении азотнокислым серебром с бром-феноловым синям.

2.1.2. йетрслоглческая характеристика метода.

-    Диапазон определяемых концентраций пестицида в анализируемой пробе - 0,2 - 25 мкг.

-    Предел обнаружении -0,2-мкг в пробе или 0,02 мг/кг.

-    Размах варьирования -70-90?*

-    Среднее значение определения стандартных количеств - 79,8/.

-    Стандартное отклонение - 11,6.

-    Относительное стандартное отклонение - 0,27.

-    Доверительный интервал среднего при Р=0,95 и н = 10 - 79,8+1,49

2.2 • Р eaivTjtijjii.

Ацетон,чда,ГОСТ 2603-79.

Бензол,'чда,ГОСТ 5955-81*.

Бромфеноловкй синий,чда,ТУ 6-09-105^я-76₁

И-гексак,хч,ТУ 6-09-3375-78.

Кислота уксусная ,ледяная,хч,ГОСТ Т3290-72.

Кислота лпмонная,чда,ГОСТ 3652-74.

Еатрий сернокислый бвзводный,чда,ГОСТ 4166-76.

Натр    едкий, хч ,Г0СТ 4328-77.

Свинец уксуснокислый или свинец уксуснокислый основной,чда

ТУ 6-09-4140-75

Серебро азоткокдслое,ч,ГОСТ 1277-75.

Силикагель АСК, ГОСТ 3956-76

Зфир даэтгдош-й ГОСТ 626 2-79.,

Днфсс стандартный раствор в ацетоне,содержащий 100 мкг/мл препарата

- 2t -

2*3* Приборы,аппаратура ж посуда.

Аппарат для встряхивания АБУ-1 или аналогичный, ТУ 64-{ -1СЯ1 -73.

Весы технические.

Весы торсионные * тип ВТ,ТУ 64-1-990-77.

Камера хроматографическая* ГОСТ 10965-75.

Камера для опрыскивания хроматограмм* ТУ 25-Т^т-430-70

Колонки стеклянные,внутренний диаметр 7-9эди.

Опрыскивателя стеклянные. ГОСТ I93QI-74

Пластинки "Силуфол",производства ЧССР.

Посуда химическая по ГОСТ 23332-79/кодбы конические с пржтертьм пробками на 100 мл, воронки делительные на 200 мл .воронки химические диаметром 5 см,пробиркя мерные на 10 мл,цшшядры яа 10,50 и 100 ш, микропипетки,стаканы химические/.

Центрифуга лабораторная стационарная ЦЙС -3 или анадогжчяая/обьем стаканов 8o-I0G мл/*

Шкаф вытяжной.

Чашки фарфоровые для выпаривания дм 5-7 см., ГОСТ ^147-73.

2*4*Подготовка к определению.

2.4.1, Приготовление 20$ водного раствора уксуснокислого свжнца:20г уксуснокислого свинца растворяют в 80 мл дистиллированной воды.При использовании основного уксуснокислого свинца 20 г его растворяют грг подогревании в 80 мл. 5$ уксусной кислоты и PH раствора доводят едким натрием до 5,4 -5,6.Хранят в закрытой посуде.

2.4.2. Приготовление 10$ водного раствора уксусной кислоты; в каабу к 10 ш ледяной уксусной кислоты добавляют 90 мл дистиллированной всцч,

2.4.3*Приготовление проявляющих реактивов*

Реактив **25 га бромфепалевого синего растворяют в 5 мл ацетона и объем доводят до 50 мл 0,25$ раствором азотнокислого серебра/0,12Г:г азотнокислого серебра растворяют в 15 мл дистиллированной воды л добавляют 35 мл ацетона/.Храпят в закрытой посуде яз темного стекла,прк температуре + 4 -6°С в течение месяца*

Реактив # 2- 2% раствор лимонной кислоты:2 г лимонной кислоты растворяют в 98 мл дистиллированной воды,Хранят в закрытой посуде,при температуре + 4-6°0 в течение 5-6 дней*

2*4.4.Подготовка колонки для очистки экстрактов анализируемых пробг в кихний конец стеклянной колонке помещают ватный тампон.затем насыпают последовательно натрий сернокислый безводный слоем I см,сшшка-гель А.СК « ^5-6 сы и спять натрий сернокислый безводный -I см*

- 22 -

2.4.5,    Отбор проб производят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,пищевых продуктов ш объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестя-цйдоа",утверадеяншй заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21,08.79г за Jfe 2051 -79,

2.5.    Проведение определения,

2.5.1.    Экстраадяя ж очистка экстрактов,

Еавеску измельченной растительной массы,корне~клубнешюдов - по Юг помещают в колбу с притертой пробкой,заливают 30 мл ацетона,тщательно перемешивают и экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение I часа.Наьеску комбикорма В 10 г экстрагируют ацетоном дважды, яррцнямя по 30 мл, встряхивая по 30 минут.

Ацетоновый экстракт отфильтровывают в чистую колбу через воронку с ватным фильтром. Пробы промывают 10 шг ацетона и пропускают через тот же фильтр,К объединенному экстракту добавляют 20 мд дистиллированной водыД мд уксуснокислого свинца/пря исследовании комбикорма 40 мд воды/ и помещают в испаритель бытового холодильника па I час/экстрак-ты комбикорма лучше оставлять в испарителе холодильника на ночь/. Охлажденные пробы центрифугируют при 3000 оборотах в минуту в течение 3 минут.Надосадочную жидкость сливают в делительную ворснку/прк анализ комбикорма после центрифугирования надосадочную жидкость дополнительно фильтруют через воронку с фильтром/.В делительную воронку добавляют 10 мл 105? раствора уксусной кислоты и 60 мд дистиллированной воды/при анализе комбикорма 120 мл дистиллированной воды/.Затем дифос ре^Ьтра-гируют яз этой смеси гексаном трижды,используя по 15 мл экстрагента. При плохом разделении слоев,в связи с образованием эмульсии,добавляют 5 мл насыщенного раствора сернокислого натрия .Объединенный гексановый Экстракт сушат над безводным сернокислым натрием,Концентрирование гексановых экстрактов проводят в вытяжном шкафу при комнатной температуре. до 1-2 ш и пропускают для доочистки через колонку с силикагелем АСК,Вяшривательные чашки ополаскивают 2-3 раза 1-2 ш гексана ж сливают в ту же колояку.Дкфос элюируют 25-30 мл смеси бензоя-гексан в соотношении 3:1.Затем бензол -гексановые экстракты концентрируют в вытяжном шкафу spa ксмпатаоВ температуре до объема 0,1 -0,2 мд,

2.5.2,    Хроматографирование.

Конечный экстракт в а носят аа пластинку "С ял у фол", на растояяии 1,5 си от «3 анннего края.Слева ж справа наносят стандартные растворы с

нааесенаого пятна не должен пре-

0_#5 т».

- 23 -

Пластинку помещают в камеру со смесью дяэтилового эфира к н-гэксана в соотношении 1;2*После того,как фронт растворителя поднимется ка высоту 10 см,пластинку вынимают из камеры ж оставляют на воздухе до удаления растворителя*

2.5.3«Проявление,

После испарения подвижных растворителей пластинку опрыскнваэт бромфеноловым синш с азотнокислым серебром ж оставляют на воздухе для подсыхания.Затем пластинку обрабатывают 2% водным раствором лимонной кислоты.Дифос проявляется в виде сйнжх пятен на лимозяоделтск фоне,Величина    составляет 0,32.

2.8.Обработка результатов.

Количество дифоса в анализируемом, объекте определяют путем сравнения площади и интенсивности окраски пятна йробн к стандартных растворов препарата с использованием формулы:

X _s А    *    100

М    *    К

Где:

X- количество препарата в исследуемом материале мг/кг,мг/л;

А- количество препарата.обнаруженное на пластанке.мкг;

М~ масса исследуемой Пробы, г .или мл;

ТОП

“bi -поправка с учетом потерь пестицида в процессе анаяиза.где ® К - процент определения препарата - 80 3. Требования безопасности*

Соблюдаются требования безопасности,рекомендуемые при работе с химгческимя реактивами и фссфороргаяическимж пестицидами»*

ц. Разработчики:

старшие научные сотрудники -Малинин 0„А«,доктор ветеринарных наук.Шуляк В.Д. .кандидат биологических наук,Яршеяко ВЛЬ* кандидат ветеринарных наук,Зайцева Д.Д. .кандидат ветеринарных наук» старший ветврач Ярошенко С.С*

Лабораторий фармакологии с токсикологией УНИИЗВ,г.Харьков