ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

■*г. М' ₍ p.Jt

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомисси болезнями растений и сорняками

Москва — 1987 г.

537.

^ПЖЩЦАЮ*¹ Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧБНКО

^м27"нолбря 1984 г,

Jfefl63~84

шодичшад указания

по определению остаточных количеств ромуцида в воде, почве и раотительном материале (огурцах, пшенице и сахарной свекле) методом тонкослойной хроматографии

I. Краткая характеристика препарата

Синонимы и торговые названия.; ромуцид, 20-ный эмульгирующийся концентрат

Хишичеокн чивтый препарат ромуцид представляет собой кристаллическое вещество желтого цвета, имеющее температуру плавления 73-74° (технический продукт, с о дерзящий не ниже 93# ромуцида, имеет темпе" ратуру плавления не ниже 63°С).

Ромуцид плохо растворяется в вода, хорошо в этаноле, ацетоне, диокоане, бензоле, ксилоле, толуоле и хлороформе. Устойчив при 20°С Ж влажности 80# длительное время в герметично закрытой посуде.

Под действием щелочей и сильных кислот гидролизуется.

Ромуцид малотоксичен - JUgQ-44(X> (4000-4800) иг/кг на белых мышах веррорадьно.

Препарат предложен как высокоэффективный фунгицид для наземного опрыскивания посевов огурцов, сахарной свеклы и пшеницы против мучило то! росы. Проявляет заметную активность против ржавчины пшеницы. Пршншш швршргашшов х нреларату не зарегистрировано.

538

2. Методика определениярсшудада в воде,почве и растительном материале

2*1. Основные положен**

2*1.2* Принцип метода

Метод основан на икстракции ромуиидв из проб органическими растворителями, очистке экстрактов о* тттмж веществ оксидом алюминия я определении содержания ромуцкда о помощью тонкослойной хроматографии.

2.1.2, Метрологическая Характеристика метода приводится в таблице I.

Таблица I

Метрологические : Анализируемый объект параметры : вода : почва : огурцы : шпешша: свекла Предел обнаружения в пробе,мкг 3 5 5 3 3 Диапазон определяемых 0,012-800 0,20-800 конце н траций,мг/кг 0,125-1000 0,15-1500 0.I-I00C Среднее значение определения стандартных кол-в,% 99,4 78,0 82,8 84,7 89,0 Стандартное отклонение 12,40 4,8 11,3 е?го 5,04 Относительное стандартное отклонение,% 12?50 11,3 11,8 7,32 5,66 Доверительный интервал среднего,^ *2,П -5,04 i2,53 -1,78 Количество повторностей, шт. е 5 5 6 8

2.1.2. Избирательность метода

Определению не мешают препараты кодлсикной серн, применяемые, как я ромуцид, против мучнистой росы.

2.2. Реактивы, растворы и материалы Ромуцид,ч.д.а. »ТУ 88 УССР 192.030.83 (п,4.2.8 "Пркысчаша**) РоМуцид, технический,ТУ 88 УССР 192.030,83 Ацетон,ч.,ГОСТ 2803-79

539*

н-Гексан.ч* ₉W в-09-3375-78 Хлороформ ,х. ч* _# ТУ 6*09-4263-?6 Дистиллированная вода Гидроксид натрия,ч*д,а. _#П)СТ 4328-77 Петровейный &фар,х.ч. »Г0СТ 11992-66 Бензол,ч*д*а*,ГОСТ 5955-75

Оксид алюминия (для хроматографии) 6р09-?3916«35 Сульфат натр|ш,(5езвсдный_>ч.д.а,_§Г0СТ 4166-76 Пропанол-2 (иза-Проииловый спиртЧч,,ТУ 6-09—102-61 Хроматографические пластинки типа "Силуфод" ИХ-254 (ЧССР)

#шгьтры бумажные,ТУ 6-09-1706-77 Этанол,ГОСТ 5962-67

ЦрояЕЯЯЩИЙ реагент: 6$-вый раствор гидроксида натрия в этаноле, 6 г щ.роксида натрия растворяют в 5 мл дистиллированной воды и доводу! г 96% этанолом до 100 мд. Раствор хранят в холодильнике.

Стандартные растворы ромуцида: навески роыуцдда 10 и 100 мг растворяют в 100 мл ацетона* Растворы стабильны в течение 2-х недель при хранении в холодильнике в герметично закрыто! посуде,

2*3* Приборы, аппаратура ш посуда Весы технические, ГОСТ 19491-74 Весы аналитические, ВДР-200 Г, ТУ 25,06.1131^75 Делительные вороням т 1000 мл,ГОСТ 8613-75 Перше колбы на 100 и«_#Г0СТ 1770-74

Конические колем т 100 к 250 т с аршпиифз ванным и пробками Макрошприд т 10 тжм типа МШ~Ю Ишсроиипетил, ЩСТ 20292-74

Мерные цдлшодщ т 25 ш» 50 ми» ГОЛ⁶ 1770-74

Е^фшсшжа шжавдчэсжш

Цудьверк затор счвюшпшЛ, ГОСТ 19391-65

540,

Сита почвенные, IT 46-47885-73 Камера хроматографическая Эксикатор

Ротационный испаритель ИР-1 М* ТУ 25-П-9Г7-74 Водяная баня, ТУ 46-22-603-75 Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 10696-75 Компрессор мембранный Воронки Еюхнера, ГОСТ 9147-73

2.4.    Подготовка к определений

Хроматографические каморы за два часа до начала хроматографирования заполнят¹ смесыо подвижных растворителей для насыщения камеры парами подвижных растворителей. В качестве подвижных растворителей для проб воды, почвы, огурцов я свеклы используют смесь н-гексана я ацетона (4:1); для л рос тпенкш* - сначала петролейный эфир, а затем омесь н~гексаяв я ацетона (4:1). Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не вше, чем 0,7-1 см от у;*овня дна камеры.

2.5.    Отбор проб

Отбор проб проводятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения мякрокодячеств пестицидов" (Москва, 1980 г., *2061-79 от 21.06,79 г.). Отобранные пробы хранить в стеклянной ми полиэтиленовой таре в прохладном месте.

2.6.    Проведение определения

2.6.1. Зкотрвкшя и очистка

2.6ЛЛ. Вода

Пробу воды 250 мл помещают в делительную воронку на 1000 мл я экстрагируют ромудод 50 мл хлороформа, энергично встряхивая в те-

541

чение 3-5 минут. Эту операцию повторяют дважды. Объединенный экстракт фильтруют через бумажный фильтр, в воронку которого помещают 4-0 г сульфата натрия безводного и 2-3 г оксида ал ши кия. Растворитель упаривают на ротационном испарителе до сухого остатка.

2.6*1,2. Почва

25 г воздушно-судой почвы, растертой и просеянной через оито с размером отверстий I мм, помещают в коническую колбу с пришлифованной пробкой на 250 мл, прибавляют 50 ш иао-проианола и помещают на аппарат для встряхивания на I час. После отстаивания экстракт сливают в колбу чероа складчатый бумажный ({мльтр. Остаток в колбе промывают дважды поршями иэо-пропанола по 25 мл, сливая растворитель после отстаивания через окладчатый фильтр.

Для очистки фильтрат пропускают через оксид алюминия (В-Ю г) и натрий сорнокислый безводный (2-3 г), которые помещают в фильтрующую воронку со стеклянным фильтром. Содержимое воронки промывают растворителем два раза no 30 ши Объединенный экотракт упаривают на ротационном испарителе до сухого остатка.

2.6Л.З, Огуриы

40 г мелко нарезанных огурцов помещают в коническую колбу на

250 мл с пришлифованной проб ко I и пршшвают 100 мл хлороформа шлш бензола. Экстрагирование ромуцкда проводят в течение 20-30 минут, периодически перемешивая гомогенат. По истечении времени экстракт очищают, пропуская его через слой молселекта-15 или 25 (12-15) и сульфата натрия безводного (20 г), помещенных в воронку со стеклянным фильтром. Операцию повторяют трижды* Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе до сухого остатка.

2*6,1*4. Свекла

Пробу 30 г измельченных корнеплодов сахарно! свеклы помещают в коническую колбу па 250 мл с пришлифованной пробкой я добавляют

542

100 мл хлороформа* Экстрагирование проводят в течение 30 минут, периодически перемешивая* Экстракт фильтруют через складчатый фильтр, в воронке которого находится 3-6 г сульфата натрия безводного и 2-3 г оксида алюминия. Остаток свеклы промывают двумя порциями растворителя по 30 мл* Объединенный экстракт упаривают до сухого остатка на ротационном испарителе*

2*6.1*5. Пшеница

Пробу измельченного на кофемолке зерна пшеницы в количестве 20 г помещают в коническую колбу на 100 мл с пришлифованной пробкой, прибавляют 50 мл ацетона и экстрагируют 30 минут, постоянно перемешивая гомогенат* Экстракт фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 1-2 г сульфата натрия безводного и 6-8 г оксида алюминия. Остаток промывают двумя порциями ацетона по 40 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе* После удаления растворителя в колбе находится остаток вязкой консистенции*

2.6*2* Хроматографирование и проявление ромуцида*

После удаления растворителя остаток растворяют в 0,5 мл ацетона и упаривают до 0,1-0,15 мд токаы вовдуха, количественно наносят на хроматографическую пластинку при помощи микрошприца или микро-пипетки* Рядом наносят 3, б, 7, и 10 мкг ромуцида в ацетоне* После испарения растворителя пластинки помещают в хромитографические камеры с подтшшм растворителем* После подъема растворителей т 10 см пластинку вынимают из хроматографической камеры и помещают ш штнлной шкаф на 5-10 минут для удаления следов подвижной фазы* Проявление ромуцида проводят б£-ным раствором гидроксида натрия в этаноле, опрыскивая пластинки с помощью стеклянного пульверизатора рок_ь 1зд проявляется в виде ярко-желтых пятен на белом #оне&

543

Ввиду того, что пятна после испарения этанола несколько бледнеют, их контуры обводят иглой. Р для проб воды, почвы, огурцов и свеклы составляет 0,35*0,02, для проб пшеницы - 0,26*0,02*

Оценку содержания ромуцида в пробе проводят путем сравнения размера и интенсивности окраски пятен стандарта с пятнами пробы.

При большом содержании препарата в пробе экстракты хроматографируют беа упаривания.

2.7. Обработка результатов анализа

Содержание ромуцида в анализируемой пробе рассчитывают по форму;

^ле:    А    -    ,    где_:

а . С

А ~ содержание ройуцида в пробе, мг/л или мг/кг;

В - количество ромуцида в пробе,найденное сравнением со стандартом, мг;

С “ процент определения, найденный предварительно₉% а - объем или вес пробы, мл или г.

3* Требования безопасности

При работе с ромуцидом - беречь глаза от попадания порошка, руки мыть с мылом, а также соблюдать требования безопасности, необхс димые при работе с горючими, взрывоопасным!, легковосплаягеняшкмнск веществами, едкими щелочами*

4. Раз 1>аботчики

Клисенко М.А,, ЙМШПШС, г.Киев

Нескнов К.П., И0Х АП УССР,г.Киев, Мозговая Г.П., Петренко В,0^ ЮХ АН УССР.

Метод апробирован в ВНИИ химических средств защиты растений (Новикова К.*»., Алдошина )♦